《2019-2020學(xué)年高中生物 專題綜合測評5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)（含解析）新人教版選修1》由會員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《2019-2020學(xué)年高中生物 專題綜合測評5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)（含解析）新人教版選修1（11頁珍藏版）》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。

1、專題綜合測評(五)　DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) (滿分：100分　時間：90分鐘) 一、選擇題(每題2分，共25題，共50分) 1．“DNA的粗提取與鑒定”實驗中，提取雞血細胞的核物質(zhì)和析出含DNA的黏稠物這兩步中都用到了蒸餾水，其作用分別是(　　) A．防止雞血細胞失水皺縮和稀釋NaCl溶液至0.14 mol/L使DNA析出 B．防止雞血細胞失水皺縮和溶解DNA C．使雞血細胞吸水漲破和稀釋NaCl溶液至0.14 mol/L使DNA析出 D．使雞血細胞吸水漲破和溶解DNA C　[第一次加蒸餾水的目的是使雞血細胞漲破，釋放出核DNA，第二次加蒸餾水的目的是將NaCl溶液濃度降低到0.1

2、4 mol/L，使DNA析出。] 2．某同學(xué)用洋蔥進行DNA粗提取和鑒定實驗，操作錯誤的是(　　) A．加入洗滌劑后用力進行快速、充分地研磨 B．用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNA C．加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌 D．加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱 A　[加入洗滌劑后，攪拌動作要輕緩、柔和，否則容易產(chǎn)生大量的泡沫，不利于后續(xù)步驟的操作；用蛋白酶分解過濾后的研磨液中的蛋白質(zhì)，可純化過濾后研磨液中的DNA；加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌的目的是保證DNA分子不斷裂，保持其完整性；加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱才能出現(xiàn)顏色反應(yīng)。] 3．對“DNA的粗提取與鑒定”實驗的敘述，正確的是 (　

3、　) A．利用DNA能溶于冷酒精溶液，而蛋白質(zhì)不溶于酒精溶液，可將DNA與蛋白質(zhì)分離 B．在用菜花作實驗材料時，研磨過程中加入食鹽的目的是瓦解細胞膜 C．在DNA濾液中加入嫩肉粉，通過木瓜蛋白酶的作用，可提高DNA純度 D．利用DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最大的特點，可將DNA與雜質(zhì)分離 C　[DNA不溶于冷酒精，蛋白質(zhì)可以；加食鹽的目的是溶解DNA；DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最小。] 4．下列關(guān)于DNA的粗提取與鑒定實驗的相關(guān)敘述，錯誤的是(　　) A．可以選擇DNA含量較高的生物組織為材料，如雞的血細胞 B．DNA不溶于酒精，且

4、在0.14 mol/L的氯化鈉溶液中析出 C．可以利用嫩肉粉把雜質(zhì)多糖和RNA去除 D．洗滌劑可以瓦解細胞膜，從而獲得含有DNA的濾液 C　[雞血細胞中含有DNA，可作為提取DNA的生物材料，不可選用哺乳動物成熟的紅細胞；DNA不溶于酒精，且NaCl溶液濃度為0.14 mol/L時DNA溶解度最小，兩者均可將DNA大量析出；嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶，可將蛋白質(zhì)水解，從而除去蛋白質(zhì)；洗滌劑可以瓦解細胞膜，從而獲得含有DNA的濾液。] 5．在“DNA的粗提取與鑒定”實驗中，如果實驗材料是植物細胞，需要進行研磨并攪拌。下列相關(guān)說法正確的是(　　) A．在切碎的植物材料中加入一定量的洗滌劑和蒸

5、餾水，充分研磨后過濾獲取濾液 B．加入洗滌劑是為了瓦解細胞膜和核膜 C．要快速攪拌產(chǎn)生泡沫以加速細胞膜的溶解 D．先加入洗滌劑，攪拌和研磨后再加入食鹽 B　[提取植物材料中的DNA時，需在切碎的組織中加入一定量的洗滌劑和食鹽。加入洗滌劑的目的是瓦解細胞膜和核膜，以利于DNA的釋放，同時要進行充分地攪拌和研磨，使DNA完全釋放。攪拌時應(yīng)輕緩、柔和，避免產(chǎn)生大量泡沫，以利于后續(xù)操作。] 6．下表是關(guān)于DNA的粗提取與鑒定實驗中所使用的材料、操作及其作用的表述，正確的是(　　) 選項 試劑 操作 作用 A 檸檬酸鈉溶液 與雞血混合 有利于血液凝固 B 蒸餾水 與雞血細

6、胞混合 保持細胞形狀 C 蒸餾水 加入溶解有DNA的NaCl溶液中 析出DNA絲狀物 D 冷卻的酒精 加入過濾后的NaCl溶液中 產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng) C　[在DNA的粗提取與鑒定實驗中，檸檬酸鈉可以防止血液凝固；雞血中加入蒸餾水可以使細胞膜和核膜破裂；DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，在物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，有利于DNA析出；DNA不溶于酒精，而蛋白質(zhì)溶于冷卻的酒精可以獲得較純的DNA，DNA遇二苯胺(沸水浴加熱)呈藍色。] 7．下列關(guān)于“DNA粗提取與鑒定實驗”的敘述，正確的是(　　) A．洗滌劑能瓦解細胞膜并增大DN

7、A在NaCl溶液中的溶解度 B．將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍 C．常溫下菜花勻漿中有些酶類會影響DNA的提取 D．用玻璃棒緩慢攪拌濾液會導(dǎo)致DNA獲得量減少 C　[洗滌劑能瓦解細胞膜，但對DNA在NaCl溶液中的溶解度無影響；DNA絲狀物需先溶解在適宜濃度的NaCl溶液中，然后加入二苯胺試劑，混合均勻后沸水浴加熱，待冷卻后觀察到溶液變藍；常溫下菜花勻漿中有些水解酶可能會使DNA水解而影響DNA的提??；用玻璃棒朝一個方向緩慢攪拌可減輕對DNA分子的破壞，有利于DNA分子的提取。] 8．做DNA粗提取和鑒定實驗時，實驗材料用雞血而不用豬血的原因是(　　) A．雞血的價

8、格比豬血的價格低 B．豬的成熟的紅細胞中沒有細胞核，不易提取到DNA C．雞血不會凝固，豬血會凝固 D．用雞血提取DNA比用豬血提取操作簡便 B　[DNA是生物的遺傳物質(zhì)，主要存在于細胞核中。生物實驗材料的選擇原則：一是容易獲得；二是實驗現(xiàn)象明顯。做DNA粗提取與鑒定實驗的實驗材料不選豬血是因為哺乳動物成熟的紅細胞中無細胞核，不易提取到DNA，而鳥類、爬行類等動物成熟的紅細胞中有細胞核，實驗現(xiàn)象明顯。] 9．關(guān)于PCR的說法，不正確的是 (　　) A．PCR是體外復(fù)制DNA的技術(shù) B．PCR過程中只需要一個模板DNA、兩個引物分子、大量脫氧核苷酸原料 C．Taq DNA聚合酶是

9、一種熱穩(wěn)定的DNA聚合酶 D．PCR利用的是DNA雙鏈復(fù)制原理 B　[PCR技術(shù)是一種在體外迅速擴增DNA片段的技術(shù)；PCR過程除需要DNA分子雙鏈作為模板、兩種引物分子、大量脫氧核苷酸原料外，還需要酶等條件；Taq DNA聚合酶是一種耐熱的DNA聚合酶；PCR技術(shù)的原理和DNA的復(fù)制原理是一樣的，都是半保留復(fù)制。] 10．下列有關(guān)PCR的敘述，正確的是(　　) A．PCR所需要的引物只能是RNA B．PCR所需要的原料是核糖核苷酸 C．PCR所需要的酶在60 ℃會變性 D．PCR需要在一定的緩沖液中進行 D　[PCR所需的引物是一小段DNA或RNA。PCR所需要的原料是脫氧核

10、糖核苷酸。PCR所需要的酶是耐高溫的Taq DNA聚合酶。] 11．關(guān)于DNA聚合酶催化合成DNA子鏈的說法，正確的是(　　) A．Taq DNA聚合酶是從深海生態(tài)系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)的 B．DNA聚合酶能特異性地復(fù)制整個DNA的全部序列 C．Taq DNA聚合酶必須在每次高溫變性處理后再添加 D．DNA聚合酶是以DNA為模板，使DNA子鏈從5′端延伸到3′端的一種酶 D　[Taq DNA聚合酶是在熱泉中發(fā)現(xiàn)的。PCR擴增的是引物之間的固定長度的DNA序列。Taq DNA聚合酶能耐高溫，所以在反應(yīng)體系中可反復(fù)利用而不用另外再添加。DNA聚合酶不能從頭開始催化合成DNA，而只能從DNA單鏈的3

11、′端延伸子鏈。] 12．下列關(guān)于PCR技術(shù)的敘述，正確的是(　　) A．PCR技術(shù)建立在對擴增的目的基因序列完全已知的基礎(chǔ)上 B．該技術(shù)需要解旋酶和熱穩(wěn)定的DNA聚合酶 C．該技術(shù)需要一對特異性的引物，要求一對引物的序列是互補的 D．該技術(shù)應(yīng)用體內(nèi)DNA雙鏈復(fù)制原理，也需要模板、原料、酶等條件 D　[PCR技術(shù)不必知道目的基因的全部序列，只需知道部分序列，就可根據(jù)已知序列合成引物。PCR技術(shù)不需要解旋酶。PCR技術(shù)需要引物，但引物的序列不能是互補的，否則，在復(fù)性時，兩種引物通過堿基互補配對結(jié)合而失去作用。] 13．復(fù)性溫度是影響PCR特異性的較重要的因素。變性后溫度快速冷卻至40

12、～60 ℃，可使引物與模板發(fā)生結(jié)合。PCR的結(jié)果可不考慮原來解旋開的兩個DNA模板鏈的重新結(jié)合，原因不包括(　　) A．由于模板DNA比引物復(fù)雜得多 B．引物和模板之間的碰撞結(jié)合機會遠遠高于模板互補鏈之間的碰撞 C．加入引物的量足夠多而模板鏈數(shù)量少 D．模板鏈加熱解旋已經(jīng)變性不可能再次結(jié)合 D　[DNA雙鏈變性解旋后是可以再次結(jié)合的，只不過是在PCR中，引物量較多，與DNA模板鏈結(jié)合機會大，而原來兩條母鏈再次結(jié)合的機會小。] 14．在PCR的實驗操作中，下列說法正確的是(　　) ①在微量離心管中添加各種試劑時，只需要一個槍頭 ②離心管的蓋子一定要蓋嚴 ③用手指輕彈離心管壁

13、④離心的目的是使反應(yīng)液集中在離心管的底部 A．①②③　　　 B．①②④ C．②③④ D．①③④ C　[在微量離心管中添加反應(yīng)成分時，每吸取一種試劑后，移液器上的槍頭都必須更換，以確保實驗的準確性；蓋嚴離心管口的蓋子，防止實驗中外源DNA污染；用手指輕輕彈擊離心管的側(cè)壁，使反應(yīng)液混合均勻；離心的目的是使反應(yīng)液集中在離心管的底部，提高反應(yīng)效果。] 15．下列關(guān)于PCR技術(shù)的敘述，錯誤的是(　　) A．PCR技術(shù)和DNA體內(nèi)復(fù)制所用到的酶種類有所不同 B．PCR反應(yīng)過程要消耗四種脫氧核苷酸 C．PCR反應(yīng)用到的引物是一小段DNA或RNA D．原料是從子鏈的5′端連接上來的 D　[由

14、于DNA聚合酶只能從引物的3′端開始延伸DNA鏈，因此原料也只能從3′端連接。] 16．在PCR擴增DNA的實驗中，預(yù)計一個DNA分子經(jīng)過30次循環(huán)后，應(yīng)該得到230個DNA分子，但是結(jié)果只有約210個DNA分子，那么出現(xiàn)該現(xiàn)象的原因不可能是(　　) A．TaqDNA聚合酶的活力不夠，或活性受到抑制 B．系統(tǒng)設(shè)計欠妥 C．循環(huán)次數(shù)不夠 D．引物不能與母鏈結(jié)合 D　[如果TaqDNA聚合酶活力不夠，或活性受到抑制，則導(dǎo)致催化效率降低，得到的產(chǎn)物比預(yù)期的少，A項正確。如果PCR系統(tǒng)設(shè)計欠妥，達不到預(yù)期的結(jié)果，則B項正確。如果循環(huán)次數(shù)過少，產(chǎn)物的量比預(yù)期的少，則C項正確。如果引物設(shè)計不合

15、理，也許不能與模板DNA結(jié)合，造成無法進行DNA的擴增，而結(jié)果得到了210個DNA分子，則D項錯誤。] 17．如圖表示PCR技術(shù)擴增DNA分子的過程中，DNA聚合酶作用的底物，據(jù)圖分析正確的是(　　) A．圖中A為引物，是一種單鏈RNA分子 B．圖中B為DNA模板鏈，F(xiàn)端為3′末端 C．PCR技術(shù)中通過控制溫度來實現(xiàn)DNA雙鏈的解旋和結(jié)合 D．DNA聚合酶無需引物也能將單個脫氧核苷酸連接成DNA片段 C　[PCR技術(shù)中，DNA聚合酶需要引物，才能夠?qū)蝹€脫氧核苷酸連接成DNA片段，該技術(shù)中引物通常為單鏈DNA，即題圖中的A；圖中B為DNA模板鏈，F(xiàn)端為5′末端；PCR技術(shù)中通過

16、高溫和降溫來實現(xiàn)DNA雙鏈的解旋和結(jié)合。] 18．SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳法中加入SDS的作用是(　　) A．增大蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量 B．改變蛋白質(zhì)分子的形狀 C．掩蓋不同蛋白質(zhì)分子間的電荷差別 D．減小蛋白質(zhì)分子的相對分子質(zhì)量 C　[SDS是陰離子去污劑，作為變性劑和助溶試劑，它能斷裂分子內(nèi)和分子間的氫鍵，使分子去折疊，破壞蛋白質(zhì)分子的二、三級結(jié)構(gòu)。在樣品和凝膠中加入還原劑和SDS后，分子被解聚成多肽鏈，解聚后的氨基酸側(cè)鏈和SDS結(jié)合成蛋白質(zhì)—SDS膠束，所帶的負電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，這樣就消除了不同分子間的電荷差異和結(jié)構(gòu)差異，從而僅根據(jù)蛋白質(zhì)分子亞基的不

17、同就能分離蛋白質(zhì)。] 19．在裝填色譜柱時，不得有氣泡存在的原因是(　　) A．氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果 B．氣泡會阻礙蛋白質(zhì)的運動 C．氣泡能與蛋白質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng) D．氣泡會在裝填凝膠的時候，使凝膠不緊密 A　[色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，如有氣泡存在，應(yīng)輕輕敲打柱體以消除氣泡，消除不了時要重新裝柱。氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果。] 20．在血紅蛋白的整個提取過程中，不斷用磷酸緩沖液處理的目的是(　　) A．防止血紅蛋白被氧化 B．血紅蛋白是一種兩性物質(zhì)，需要酸中和 C．磷酸緩沖液會加速血紅蛋白的提取過程 D．讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的

18、pH范圍內(nèi)，維持其結(jié)構(gòu)和功能 D　[利用磷酸緩沖液模擬細胞內(nèi)的pH環(huán)境，保證血紅蛋白的正常結(jié)構(gòu)和功能，便于分離觀察(紅色)和研究(活性)。] 21．使用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時，洗滌紅細胞、釋放血紅蛋白和透析過程中，分別使用下列哪些試劑(　　) ①蒸餾水?、谏睇}水?、?0 mmol/L的磷酸緩沖液?、芮逅、輽幟仕徕c A．①③⑤　　 B．①②③ C．②①③ D．④①③ C　[洗滌紅細胞時，為防止紅細胞吸水漲破或受到其他傷害，應(yīng)選用生理鹽水進行洗滌；在釋放血紅蛋白時，應(yīng)使紅細胞漲破，則選用蒸餾水處理；在透析過程中，要去除小分子物質(zhì)，因此應(yīng)選用一定的緩沖液(20 mmol/L的磷酸緩沖

19、液)，因此選C。] 22．下列關(guān)于血紅蛋白提取和分離實驗中樣品處理步驟的描述，正確的是(　　) A．紅細胞的洗滌：加入蒸餾水，緩慢攪拌，低速短時間離心 B．血紅蛋白的釋放：加入生理鹽水和甲苯，置于磁力攪拌器上充分攪拌 C．分離血紅蛋白：將攪拌好的混合液離心、過濾后，用分液漏斗分離 D．透析：將血紅蛋白溶液裝入透析袋，然后置于pH為4.0的磷酸緩沖液中透析12 h C　[紅細胞洗滌過程中應(yīng)該用生理鹽水，不能用蒸餾水；血紅蛋白的釋放應(yīng)該加入蒸餾水和甲苯，使紅細胞吸水漲破，釋放其中的血紅蛋白；將攪拌好的混合液通過離心、過濾后，用分液漏斗分離出血紅蛋白溶液；透析所用的磷酸緩沖液的pH為7.

20、0。] 23．以下關(guān)于豬血紅蛋白的分離與提取的描述，正確的是(　　) A．透析的目的是去除樣品中分子量較大的雜質(zhì) B．血紅蛋白釋放后應(yīng)進行低速短時間離心 C．蛋白質(zhì)通過凝膠時，相對分子質(zhì)量較大的移動速度慢 D．血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過程的監(jiān)測 D　[透析可以除去分子量較小的雜質(zhì)；血紅蛋白釋放后，以2 000 r/min的高速離心10 min，從而分離血紅蛋白溶液；凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時，相對分子質(zhì)量較大的在凝膠外部移動，移動速度快；血紅蛋白的顏色可用于觀察紅色區(qū)帶的移動情況。] 24．某同學(xué)在做血清蛋白的分離電泳實驗時，等待電泳結(jié)果期間，因為有事未能及時趕回，當他回來

21、時，發(fā)現(xiàn)凝膠上面只剩下一條帶(比原來窄且顏色淺)，下列分析正確的是(　　) A．電泳時間過長，多數(shù)蛋白質(zhì)已經(jīng)移出凝膠塊 B．血清蛋白中只含一種蛋白質(zhì) C．血清蛋白中所含蛋白質(zhì)的電荷都相同 D．他把電極接反了，未能進行電泳 A　[由題干可知電泳后的帶比原來窄了而且顏色變淺，說明電泳已經(jīng)進行了，凝膠上沒有其他帶，說明一些蛋白質(zhì)移出了凝膠。] 25．SRY基因為Y染色體上的性別決定基因，可用SRY-PCR法鑒定胚胎性別，其基本程序如圖，相關(guān)說法正確的是 (　　) →→ A．PCR擴增的操作步驟依次是：高溫變性、中溫復(fù)性、低溫延伸 B．上述過程需要使用的工具酶之一是RNA聚合酶

22、 C．PCR技術(shù)中以核糖核苷酸為原料，以指數(shù)方式擴增 D．SRY探針能與雄性胚胎樣品中DNA配對 D　[PCR擴增的操作步驟依次是：高溫變性、低溫復(fù)性、中溫延伸；上述過程需要使用的工具酶之一是熱穩(wěn)定DNA聚合酶；PCR技術(shù)中以脫氧核糖核苷酸為原料，以指數(shù)方式擴增；SRY探針是用位于Y染色體上的性別決定基因(SRY基因)制成的，因此SRY探針能與雄性胚胎樣品中DNA配對。] 二、非選擇題(共4個小題，共50分) 26．(15分)如圖是“DNA粗提取與鑒定”相關(guān)實驗步驟。請據(jù)圖分析回答： A　　　　B　　　　C　　　　D (1)雞血細胞是進行該實驗較好的實驗材料，這是因為____

23、_____________。從雞血細胞中釋放出核物質(zhì)的處理方法是_____________。 (2)圖A表示釋放核物質(zhì)后進行過濾的過程，過濾后取________(填“濾液”或“析出物”)進行下一步實驗；圖B表示的相關(guān)操作過程中，加入2 mol/L NaCl溶液的作用是____________；圖C表示在濾液中加入冷卻的95%的酒精，其目的是_____________________________________________________。 (3)為鑒定實驗所得絲狀物的主要成分是DNA，可滴加________溶液，結(jié)果絲狀物被染成綠色。 (4)圖D中a試管為對照組，b試管為實驗組。

24、 ①a試管現(xiàn)象____________________；b試管現(xiàn)象____________________。 ②在沸水中加熱的目的是______________，同時說明DNA對高溫有較強的________。 ③a試管在實驗中的作用是________。 ④b試管中溶液顏色的變化程度主要與__________________有關(guān)。 [解析]　圖A表示釋放核物質(zhì)后進行過濾的過程，紗布上的過濾物主要是細胞膜、核膜的碎片等雜質(zhì)，而DNA主要存在于下面的濾液中，所以過濾后應(yīng)取濾液進行下一步實驗。DNA不溶于冷酒精，而其他一些物質(zhì)可以溶于冷酒精，從而可進一步提純DNA。甲基綠為比較常用的細胞核染

25、色劑，染色后細胞核中染色體呈綠色，可以用來鑒定DNA。 [答案]　(1)雞血細胞核中DNA含量豐富，材料易得　向雞血細胞溶液中加入蒸餾水，并攪拌　(2)濾液　溶解DNA分子　提取雜質(zhì)更少的DNA(或去除脂溶性雜質(zhì))　(3)甲基綠　(4)①溶液不變藍　溶液變藍?、诩涌祛伾磻?yīng)速度　耐受性?、蹖φ铡、芗尤隓NA(絲狀物)的多少 27．(10分)凝膠色譜技術(shù)是一種快速而又簡單的分離技術(shù)，設(shè)備簡單、操作方便，不需要有機溶劑，對高分子物質(zhì)有很高的分離效果，目前該技術(shù)不但應(yīng)用于科學(xué)實驗研究，而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。據(jù)圖回答問題： (1)a、b均為蛋白質(zhì)分子，其中先從層析柱中洗脫出來的是

26、________，原因是_____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________。 (2)自己制作凝膠色譜柱時，在色譜柱底部d位置相當于多孔板的結(jié)構(gòu)可由________________替代。 (3)裝填凝膠色譜柱時，色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，原因是________________________________________

27、_____________。 (4)洗脫用的液體應(yīng)盡量與浸泡凝膠所用的液體__________(填“相同”或“不同”)，洗脫時，對洗脫液的流速要求是_________________。 (5)若選用SephadexG-75，則“G”表示_________________________ _____________________________________________________， “75”表示_____________________________________________________。 [解析]　(1)原理：不同蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量不同，相對分子質(zhì)量較大的

28、蛋白質(zhì)不能進入凝膠內(nèi)部通道，只能在凝膠外部移動，路程短，速度快，易洗脫；相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)則進入凝膠內(nèi)部通道，路程長，速度慢。(2)凝膠色譜柱的制作：底部橡皮塞的凹穴上覆蓋尼龍網(wǎng)和100目的尼龍紗，相當于多孔板。(3)凝膠色譜柱的裝填：裝填時盡量緊密，不得有氣泡存在，因為氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果。(4)樣品的加入和洗脫：洗脫時和浸泡凝膠時所用液體均是物質(zhì)的量濃度為20 mmol/L的磷酸緩沖液，洗脫時，對洗脫液的流速要求保持穩(wěn)定。 [答案]　(1)a　a相對分子質(zhì)量較大，無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快 (2)尼龍網(wǎng)和尼龍紗

29、 (3)氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果 (4)相同　保持穩(wěn)定 (5)凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分離范圍　凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時吸水7.5 g 28．(10分)如圖表示血紅蛋白提取和分離實驗的部分裝置或操作方法，請回答下列問題： (1)為了提取和分離血紅蛋白，首先對紅細胞進行洗滌以去除雜質(zhì)蛋白，洗滌時應(yīng)使用生理鹽水而不使用蒸餾水的原因是_______________________。 (2)圖甲表示______________過程，該操作目的是去除樣品中__________________的雜質(zhì)?，F(xiàn)有一定量的血紅蛋白溶液，進行上述操作時若要盡快達到理想的實驗

30、效果，可以________(寫出一種方法)。一段時間后，若向燒杯中加入雙縮脲試劑，透析袋內(nèi)溶液是否出現(xiàn)紫色，并說明判斷的依據(jù)： _____________________________________________________ _____________________________________________________。 (3)圖乙是凝膠色譜法分離血紅蛋白時樣品的加入示意圖，正確的加樣順序是____________。在進行④操作時要________(填“打開”或“關(guān)閉”)下端出口。 (4)圖丙為用SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血漿某白蛋白的結(jié)果。根據(jù)電泳結(jié)果，某同

31、學(xué)得出“提取的血漿某白蛋白有兩條肽鏈”的結(jié)論，這種說法可靠嗎？理由是_____________________________________________________ _____________________________________________________。 [解析]　(1)生理鹽水與紅細胞內(nèi)液為等滲溶液，故用其洗滌紅細胞主要是防止紅細胞吸水破裂。(2)圖甲表示血紅蛋白粗提取過程，也稱為透析過程。透析可以去除樣品中分子量較小的雜質(zhì)；若要盡快達到理想的透析效果，可采用增加緩沖液的量或及時更換緩沖液等方法。透析袋是一種半透膜，雙縮脲試劑可以透過半透膜，進入袋內(nèi)與血紅蛋

32、白反應(yīng)，生成紫色物質(zhì)。(3)根據(jù)教材中往色譜柱中加樣的順序可知，正確的排序為②③④①；圖中進行④操作是在樣品上部添加緩沖液，此時要關(guān)閉下端出口。(4)電泳的原理是利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子的大小、形狀等的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，本實驗只能判斷肽鏈的大小，而不能判斷其條數(shù)。 [答案]　(1)防止紅細胞吸水破裂 (2)透析(粗分離)　分子量較小　增加緩沖液的量(或及時更換緩沖液)　出現(xiàn)紫色，因為雙縮脲試劑可以透過半透膜，與袋內(nèi)血紅蛋白反應(yīng)，生成紫色物質(zhì) (3)②③④①　關(guān)閉 (4)不可靠。只能得出提取的血漿某白蛋白含有兩種大小不同的肽鏈，不一定是兩條 29

33、．(15分)PCR技術(shù)是把DNA片段在體外酶的作用下，合成許許多多相同片段的一種方法，利用它能快速而特異地擴增任何要求的目的基因或DNA分子片段，它的基本過程如圖所示： 注：圖中短線表示每次擴增過程中需要的引物。每個引物含20～30個脫氧核苷酸，并分別與兩條單鏈DNA結(jié)合，其作用是引導(dǎo)合成DNA子鏈。 (1)PCR技術(shù)的原理是模擬生物體內(nèi)________的過程。 (2)PCR擴增過程中需要對DNA片段進行高溫處理，其目的是__________________，此過程在生物體內(nèi)稱為______，需________酶的參與。 (3)假如引物都用3H標記，從理論上計算，所得DNA分子中含

34、有3H標記的占________。 (4)假定DNA片段含200對脫氧核苷酸，經(jīng)3次擴增，從理論上計算需要____________個游離的脫氧核苷酸。 [解析]　(1)(2)由圖可知高溫變性的過程就是DNA在高溫條件下解旋的過程，在生物體內(nèi)則需要酶的催化才能進行。低溫復(fù)性時兩條DNA分子都需要引物。 (3)每次低溫復(fù)性時，引物都與兩條單鏈DNA結(jié)合，進而形成雙鏈DNA，所以所得DNA中均含3H。擴增3次一共形成了8個子代DNA片段，需游離的脫氧核苷酸數(shù)為(8－1)×400＝2 800個。 [答案]　(1)DNA復(fù)制 (2)使DNA兩條鏈彼此分開　解旋　解旋 (3)100% (4)2 800 - 11 -