2017-2018年高中生物 第1部分 微生物的利用 實驗4 果汁中的果膠和果膠酶學(xué)案 浙科版選修1
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1、 實驗4 果汁中的果膠和果膠酶 課 標(biāo) 解 讀 重 點 難 點 1.探究制作果汁的最佳條件。 2.檢測果膠酶的活性,觀察果膠酶對果汁形成的作用。 1.設(shè)計實驗探究溫度或pH對果膠酶活性的影響。 2.設(shè)計實驗探究果膠酶的最適用量。 一、果膠 1.果膠是植物細(xì)胞壁的主要成分。 2.果膠的組成:它由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯組成。 3.在山楂的果實中果膠含量最多。 4.果膠的作用:能將植物細(xì)胞粘合在一起,去掉果膠,就會使植物組織變得松散。由于果膠的作用,煮沸的山楂泥可以制成山楂糕。 5.果膠的特性:不溶于乙醇,這是鑒別果膠的一種簡易方法。 二、果膠酶 1.果膠酶的化
2、學(xué)本質(zhì)是:蛋白質(zhì)。 2.作用:果膠酶和果膠甲酯酶可水解果膠。 3.可用于生產(chǎn)果膠酶的微生物有:黑曲霉、蘋果青霉等。 在不殺死細(xì)胞的情況下,如何使植物細(xì)胞分離和去除細(xì)胞壁? 【提示】 植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠,胞間層的主要成分也是果膠,因此,可用果膠酶使細(xì)胞分離,用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。 三、檢測果膠酶活性的實驗 1.實驗設(shè)備 勻漿機、小刀、100 mL的燒杯、沸水浴或酒精燈、試管、移液管、量筒。 2.實驗材料 山楂或蘋果,每組10 g。黑曲霉提取液或果膠酶溶液、95%的乙醇。 3.實驗?zāi)康? (1)探究利用蘋果或山楂勻漿制作果汁的最佳條件,也是檢測果膠酶
3、的活性。 (2)了解果膠酶對果汁形成的作用和收集果膠酶的應(yīng)用材料。 4.實驗步驟 (1)用小刀除去蘋果或山楂果實中帶種子的部分,切成塊后,放入勻漿機中,再加入少量水制成勻漿。 (2)取兩個100 mL的燒杯,編號為A、B,各加入5 g勻漿液,再向A號燒杯中加入10 mL黑曲霉提取液或果膠酶溶液,B號燒杯中加入10 mL水,間歇攪拌20~30 min。 (3)取4支試管,編號1~4,將A燒杯中的混合物放入1號和2號試管中,每管放入4 mL,將B燒杯中的混合物放入3號和4號試管中,每管放入4 mL,將1、3號試管放在沸水浴中或酒精燈上加熱,觀察。2,4號試管不加熱。 (4)向上述4支試
4、管中各加入95%的乙醇4 mL,觀察。 5.實驗結(jié)果 燒杯號 試管號 處理 加酒精前現(xiàn)象 加酒精后現(xiàn)象 A 1 加熱 果汁混濁 有沉淀 2 不加熱 果汁澄清 無沉淀 B 3 加熱 果汁渾濁 有沉淀 4 不加熱 果汁渾濁 有沉淀 6.實驗結(jié)論 果膠酶能水解果膠,提高果汁的澄清度,高溫能破壞果膠酶的活性,不利于制作果汁。 上面的四支試管哪一個是實驗組?哪些試管之間存在對照? 【提示】 2號試管為實驗組。2和1,2和 4之間存在對照。 果膠與果膠酶 1.果膠 果膠是植物細(xì)胞壁以及胞間層的主要組成物質(zhì)之一,由半乳糖醛酸和半乳糖醛
5、酸甲酯組成。 新鮮水果、植物的根、葉和莖中果膠特別豐富。果膠不溶于乙醇——這是鑒別果膠的一種簡易方法,果膠本身不溶于水,但由于含有親水基團,果膠與水有強大結(jié)合力,是有力的凝膠化劑,在食品、制藥和化妝品工業(yè)中有廣泛用途。 2.果膠酶 (1)果膠酶及其來源 果膠酶是指水解果膠的多種酶的總稱,此外水解果膠還需果膠甲酯酶。植物、霉菌、酵母菌和細(xì)菌均能產(chǎn)生果膠酶——由霉菌發(fā)酵生產(chǎn)的果膠酶是食品加工業(yè)中使用量最大的酶制劑之一,被廣泛地應(yīng)用于果汁加工業(yè)。 (2)果膠酶的作用 果膠酶能夠分解果膠,瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層,使榨取果汁變得更容易,而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸也使得渾濁的果汁變得澄清
6、。 (3)果膠酶在果汁生產(chǎn)上的應(yīng)用 ①水果中的果膠經(jīng)果膠酶水解后,可降低果汁的黏度,有助于壓榨并提高出汁率。 ②在進(jìn)行果汁沉降和離心時,能破壞果汁中懸浮物的穩(wěn)定性,使其凝聚沉淀,果汁得到澄清。 ③經(jīng)果膠酶處理的果汁比較穩(wěn)定,不再發(fā)生渾濁,在制備濃縮果汁時,果膠酶的作用顯得尤為重要。 ④在葡萄酒釀造中加入果膠酶能起到澄清作用,還可促使葡萄汁中的酒石酸發(fā)生沉淀。 ⑤果膠酶可用于橘子脫囊衣,制造果粉和低糖果凍。 果膠酶并非特指某一種酶,而是分解果膠的一類酶的總稱。包括半乳糖醛酸酶、果膠分解酶及果膠酯酶等。 下列與果膠酶相關(guān)的敘述不正確的是( ) A.果膠酶不僅存在于植物細(xì)胞
7、中,也存在于許多微生物細(xì)胞中 B.果膠酶能夠分解果膠,瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層 C.在果汁中加入果膠酶后可使果汁變得澄清 D.果膠酶由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯組成 【思路點撥】 果膠酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì),果膠是由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯組成的;果膠酶廣泛存在于植物細(xì)胞及霉菌、酵母菌和細(xì)菌等微生物細(xì)胞中。果膠酶能夠分解果膠、瓦解植物細(xì)胞壁及胞間層。在果汁中加入果膠酶,可使果膠水解為可溶性半乳糖醛酸,從而使果汁變得澄清。 【答案】 D 1.下列與果膠及果膠酶相關(guān)的敘述不正確的是( ) A.果膠和纖維素是植物細(xì)胞壁的主要成分,故用纖維素酶和果膠酶可將植物細(xì)胞壁水解 B.煮沸
8、的山楂泥可制成山楂糕,就是由于果膠的作用 C.果膠酶不溶于乙醇,這是鑒別果膠酶的一種簡易方法 D.許多微生物也可用于生產(chǎn)果膠酶 【解析】 果膠酶屬蛋白質(zhì),在乙醇中有較高的溶解度,果膠不溶于乙醇,這是鑒別果膠的一種簡易方法。 【答案】 C 果膠酶活性制約因素的相關(guān)實驗 1.探究溫度對果膠酶活性的影響 (1)實驗原理 果膠酶活性受溫度影響。處于最適溫度時,活性最高。果肉的出汁率、果汁的澄清度與果膠酶的活性大小成正比。 (2)操作步驟 實驗溫度 30 ℃ 35 ℃ 40 ℃ 45 ℃ 50 ℃ 55 ℃ 60 ℃ 65 ℃ 70 ℃ 果汁量(mL)
9、 (3)注意事項 ①在混合蘋果泥和果膠酶之前進(jìn)行恒溫處理的目的是保證底物和酶在混合時的溫度是相同的,避免混合后的溫度變化,確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。 ②通過測定濾出的蘋果汁的體積大小來判斷果膠酶的活性的原理是:果膠酶將果膠分解為小分子物質(zhì),可通過濾紙,因此蘋果汁的體積大小反映了果膠酶催化分解果膠能力的大小。 ③本實驗的實驗對象是酶的活性,溫度作為自變量,屬于探究性的定量實驗。自變量溫度可設(shè)置梯度來確定最適值。溫度梯度越小,實驗結(jié)果越精確。 ①本實驗仍是對照實驗(相互對照),每支試管中蘋果泥和果膠酶的用量要嚴(yán)格控制相等。 ②嚴(yán)格控制各實驗組的pH、操作
10、的程序等。 2.探究pH對果膠酶活性的影響 (1)實驗原理 果膠酶的活性受環(huán)境pH的影響。在一定pH下,酶反應(yīng)具有最大速度,高于或低于此值,反應(yīng)速度下降,稱此pH為酶活性的最適pH。 (2)實驗流程及注意問題 ①用攪拌器攪拌制蘋果泥,蘋果泥來源要相同(最好是同一種蘋果)。 ②將分別裝有蘋果泥和果膠酶的試管在恒溫水浴中保溫。 ③將蘋果泥和果膠酶分別加入9組實驗用的試管中(pH梯度可設(shè)置為5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0),并快速混合調(diào)節(jié)pH。 ④混合后放進(jìn)恒溫水浴中反應(yīng)一段時間。 ⑤將試管中混合物過濾,并用量筒量取果汁體積,比較果汁多少,確
11、定最適pH。 ⑥記錄實驗結(jié)果。 pH 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 8.5 9.0 果汁量 (mL) 某實驗小組為探究果膠酶的最適溫度,設(shè)計了以下實驗: ①用攪拌器攪拌制取一定量果泥備用, ②配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的果膠酶溶液備用, ③按以下操作步驟進(jìn)行: 試管號 操作 1 2 3 4 5 6 加入果泥(mL) 8 A B C D E 水浴恒溫(℃) 10 20 30 40 50 60 加入果膠酶(mL) 2 F G H I J 反應(yīng)時間 m
12、in 30 30 30 30 30 30 比較果汁澄清度 過濾比較出汁量 (1)該實驗的自變量是________,因變量是____________。 (2)請?zhí)顚懕砀裰凶帜杆淼臄?shù)值,并解釋原因。 ______________________________________________________________ ____________________________________________________________。 (3)為使效果更明顯,本實驗還要考慮其他因素對酶的影響,請列舉三點:____
13、________________、____________________、____________________。 (4)本實驗檢測因變量的方法有兩種,分別是____________、________。 【思路點撥】 (1)本實驗的6支試管水浴溫度設(shè)置不同,因此實驗的自變量是溫度,因變量是酶的活性,通過果汁的澄清度和出汁量來檢測。 (2)實驗研究的自變量是溫度,因此果泥的量和果膠酶的量為無關(guān)變量,無關(guān)變量要相同。 (3)影響各試管反應(yīng)的因素還有pH、水果的粉碎程度、果泥與果膠酶的混合程度、反應(yīng)時間等。 (4)果膠酶的活性高,果膠分解徹底,果汁的澄清度高,果汁出汁量大;果膠酶的活性
14、低,果膠分解不徹底,果汁的澄清度低,果汁出汁量小。 【答案】 (1)溫度 果膠酶的活性 (2)A、B、C、D、E均為8,F(xiàn)、G、H、I、J均為2。這樣可保證除自變量不同以外,其他無關(guān)變量都相同 (3)本實驗應(yīng)將反應(yīng)混合物調(diào)到果膠酶的最適pH 為了使果膠酶與果泥能充分接觸,應(yīng)盡量將果泥與酶液混勻 在反應(yīng)中適當(dāng)攪拌(其余合理也給分) (4)測果汁澄清度 比較出汁量 2.工業(yè)生產(chǎn)果汁時,常常利用果膠酶破除果肉細(xì)胞壁以提高出汁率,為研究溫度對果膠酶活性的影響某同學(xué)設(shè)計了如下實驗: ①將果膠酶與蘋果泥分裝于不同試管,在10 ℃水浴中恒溫處理10分鐘(如圖A)。 ②將果膠酶與蘋果泥混
15、合,再次在10 ℃水浴中恒溫處理10分鐘(如圖B)。 ③將步驟②處理后的混合物過濾,收集濾液,測量果汁(如圖C)。 ④在不同溫度條件下重復(fù)以上實驗步驟,并記錄果汁量如下: 溫度/℃ 10 20 30 40 50 60 70 80 果汁量/mL 8 13 15 25 15 12 11 10 根據(jù)上述實驗,請分析回答下列問題: (1)果膠酶能破除細(xì)胞壁,是因為果膠酶可以促進(jìn)細(xì)胞壁中________的水解。 (2)實驗結(jié)果表明,當(dāng)溫度為________時果汁量最多,此時果膠酶的活性________。當(dāng)溫度再升高時,果汁量降低,說明____________
16、____________。 (3)實驗步驟①的目的是________________。 (4)為什么該實驗?zāi)軌蛲ㄟ^測定濾出的蘋果汁的體積大小來判斷果膠酶活性的高低? ______________________________________________________________ ____________________________________________________________。 【答案】 (1)果膠 (2)40 ℃ 最高 酶活性降低 (3)使酶和蘋果泥處于同一溫度條件下 (4)果膠酶將果膠分解為小分子物質(zhì),小分子物質(zhì)可以通過濾紙,因此蘋果汁的體積大小
17、反映了果膠酶催化分解果膠的能力 1.果膠是植物組織的組成成分之一,它主要存在于植物組織的哪一部分?( ) A.細(xì)胞核 B.細(xì)胞質(zhì) C.細(xì)胞間隙 D.細(xì)胞壁及胞間層 【解析】 果膠是植物細(xì)胞壁及胞間層的主要成分。 【答案】 D 2.探究溫度對果膠酶活性的影響、pH對果膠酶活性的影響、果膠酶的用量三個實驗中,自變量依次為( ) A.溫度、酶活性、酶用量 B.蘋果泥用量、pH、果汁量 C.反應(yīng)時間、酶活性、酶用量 D.溫度、pH、果膠酶用量 【解析】 首先要明確自變量、反應(yīng)變量等基本概念,在此基礎(chǔ)上,針對三個探究實驗進(jìn)行分析。 【答案】 D 3.在用果膠酶處理果泥時
18、,為了使果膠酶能夠充分地催化反應(yīng),應(yīng)采取的措施是( ) A.加大蘋果泥用量 B.加大果膠酶用量 C.進(jìn)一步提高溫度 D.用玻璃棒不時地攪拌反應(yīng)混合物 【解析】 用果膠酶處理果泥,可用玻璃棒不時地攪拌反應(yīng)混合物以加大酶與底物的接觸面積,使果膠酶能夠更充分地催化反應(yīng)。 【答案】 D 4.下列關(guān)于果膠酶的敘述,正確的是( ) ①具有分泌功能的細(xì)胞產(chǎn)生的?、诜彩腔罴?xì)胞都能產(chǎn)生果膠酶?、酃z酶能將果膠分解成半乳糖醛酸 ④植物、霉菌、酵母菌和細(xì)菌均能產(chǎn)生果膠酶 ⑤果膠酶特指分解果膠的一種酶?、蘩w維素酶和果膠酶可用于去除植物細(xì)胞壁 ⑦組成果膠酶的基本單位是氨基酸或核苷酸 A.①②⑤
19、B.②③⑦ C.③④⑥ D.③④⑤ 【解析】 酶是活細(xì)胞產(chǎn)生的一類具有催化能力的有機物;酶具有專一性和高效性;絕大多數(shù)酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì);果膠酶是一類酶的統(tǒng)稱。 【答案】 C 5.現(xiàn)有磨漿機、燒杯、滴管、量筒、玻璃棒、漏斗、紗布、蘋果、試管、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的果膠酶溶液、蒸餾水、一定濃度的鹽酸和氫氧化鈉溶液,下表是某小組利用上述材料進(jìn)行的有關(guān)實驗:(“/”表示不加) 操作順序 項目 燒杯 甲 乙 丙 丁 1 在燒杯中加入蘋果泥 20 mL 20 mL 20 mL 20 mL 2 加入不同的液體 2 mL蒸餾水 4 mL蒸餾水 2 mL鹽酸 2 mL氫
20、氧化鈉 3 ① 2 mL / 2 mL 2 mL 4 水浴恒溫,玻璃棒攪拌 15分鐘 15分鐘 15分鐘 15分鐘 請回答下列問題: (1)磨漿機的作用是__________________。 (2)若要驗證果膠酶的作用,應(yīng)把________兩個燒杯同時取出并______________,觀察并比較________________。預(yù)期的實驗現(xiàn)象與結(jié)果是:______________________________________________________________ __________________________________________
21、__________________。 (3)比較燒杯甲、丙、丁可知:________能影響酶的活性。 (4)表中①處的內(nèi)容是_____________________________________。 (5)請你設(shè)計一張表格,用來記錄利用上述材料“探究果膠酶最適用量”的實驗結(jié)果。 【解析】 通過表格可看出實驗研究的是果膠酶的作用和pH(酸堿度)對果膠酶活性的影響。果膠酶的活性可通過果汁的澄清度和出汁量來檢測。探究果膠酶最適用量的實驗,自變量是果膠酶的量,應(yīng)設(shè)置一系列試管,加不相同量的果泥,分別加入不同量的果膠酶,過濾果汁相同的時間,比較果汁的澄清度和出汁量。 【答案】 (1)制取蘋
22、果泥 (2)甲與乙 過濾 相同時間果汁的體積與澄清度 甲果汁的體積多于乙且比乙澄清 (3)pH值(酸堿度) (4)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的果膠酶溶液 (5)如下表: 組號 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 … 加入蘋果泥的量(mL) 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的果膠酶溶液量(mL) 所得果汁的體積(mL) 組號、加入蘋果泥的量(mL)、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的果膠酶溶液量(mL)、所得果汁的體積(mL)四欄目必須有。(單位可以不用mL,如用滴等,組數(shù)也不定。) 8
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