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(江蘇專用)2019高考生物二輪復(fù)習(xí) 專題十 現(xiàn)代生物科技專題 考點29 基因工程、蛋白質(zhì)工程和細(xì)胞工程學(xué)案

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1、 考點29 基因工程、蛋白質(zhì)工程和細(xì)胞工程 [直擊考綱] 1.基因工程的誕生(A)。2.基因工程的原理及技術(shù)(含PCR技術(shù))(B)。3.基因工程的應(yīng)用(B)。4.蛋白質(zhì)工程(A)。5.植物的組織培養(yǎng)(B)。6.動物細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆(A)。7.細(xì)胞融合與單克隆抗體(B)。8.動物胚胎發(fā)育的基本過程(A)。9.胚胎工程的理論基礎(chǔ)(A)。10.胚胎干細(xì)胞的移植(A)。11.胚胎工程的應(yīng)用(B)。12.轉(zhuǎn)基因生物的安全性(A)。13.生物武器對人類的威脅(A)。14.生物技術(shù)中的倫理問題(A)。15.生態(tài)工程的原理(A)。16.生態(tài)工程的實例及應(yīng)用(B)。 1.基因工程常考的3

2、種基本工具 (1)限制性核酸內(nèi)切酶:識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,并在特定位點上切割DNA分子。 (2)DNA連接酶:①E·coli DNA連接酶只能連接黏性末端;②T4 DNA連接酶能連接黏性末端和平末端。 (3)載體:①能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制。②有一個至多個限制酶切割位點,供外源DNA片段(基因)插入其中。③具有特殊的標(biāo)記基因——以便對含目的基因的受體細(xì)胞進(jìn)行鑒定和選擇。 2.基因工程的4大操作程序 (1)目的基因的獲?。孩購幕蛭膸熘蝎@取。 ②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增:a.原理:DNA雙鏈復(fù)制。b.條件:模板DNA、引物、游離的脫氧核苷酸、熱穩(wěn)定的DNA聚合酶

3、。 ③用化學(xué)方法直接人工合成。 (2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建 ①基因表達(dá)載體模式圖 ②基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程 (3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 ①導(dǎo)入植物細(xì)胞:農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法。 ②導(dǎo)入動物細(xì)胞:顯微注射技術(shù)。 ③導(dǎo)入微生物細(xì)胞:感受態(tài)細(xì)胞法(用Ca2+處理)。 (4)目的基因的檢測與鑒定 ①插入檢測:DNA分子雜交技術(shù)。 ②轉(zhuǎn)錄檢測:DNA—RNA分子雜交技術(shù)。 ③翻譯檢測:抗原—抗體雜交。 ④個體水平檢測:抗性接種實驗。 3.圖解記憶蛋白質(zhì)工程 4.比較記憶植物組織培養(yǎng)與動物細(xì)胞培養(yǎng) 項目 植物組織培養(yǎng) 動物細(xì)胞培養(yǎng) 取材

4、 植物幼嫩部位 動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織 過程 結(jié)果 獲得植株個體,可以體現(xiàn)全能性 新的細(xì)胞,不形成個體,不體現(xiàn)全能性 條件 ①無菌;②營養(yǎng);③適宜條件 ①無菌、無毒;②營養(yǎng)、血清等;③溫度和pH;④氣體環(huán)境:O2、CO2 5.植物體細(xì)胞雜交與單克隆抗體制備過程比較 步驟 植物體細(xì)胞雜交過程 單克隆抗體制備過程 第一步 原生質(zhì)體的制備(酶解法) 正常小鼠免疫處理 第二步 原生質(zhì)體融合(物理、化學(xué)法) 動物細(xì)胞融合(物理、化學(xué)、生物方法) 第三步 雜種植株的篩選與培養(yǎng) 雜交瘤細(xì)胞的篩選與培養(yǎng) 第四步 雜種植株的誘導(dǎo)與鑒定

5、 單克隆抗體的提純 相同點 ①兩種技術(shù)手段的培養(yǎng)過程中都進(jìn)行有絲分裂,都是無性繁殖,都可稱為克隆,都不涉及減數(shù)分裂;②均為無菌操作,需要適宜的溫度、pH等條件 (1)誘導(dǎo)融合的方法分別有哪些?融合的細(xì)胞類型有哪幾種(僅考慮兩兩融合的細(xì)胞)? 提示?、僬T導(dǎo)植物體細(xì)胞的原生質(zhì)體融合的方法主要有離心、振動、電激或用聚乙二醇(PEG)作為誘導(dǎo)劑。 ②動物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒(誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的特有因素)、電激等。 融合的細(xì)胞類型:前者—AA、BB、AB。后者—瘤瘤、B瘤、BB。 (2)各自的原理分別有哪些? 提示 前者有細(xì)胞膜的流動性和植物細(xì)胞的全

6、能性,后者有細(xì)胞膜的流動性和細(xì)胞增殖。 6.掌握克隆動物培育的流程 7.理清單克隆抗體制備的過程 題組一 基因工程和蛋白質(zhì)工程 1.(2018·南通、泰州聯(lián)考)乙型腦炎和偽狂犬病是豬的兩種常見傳染病。如圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)能同時預(yù)防這兩種病疫苗的流程圖,其中PrM為乙型腦炎的特異性抗原基因,PK、gG、gD為偽狂犬病的主要抗原基因,TK為偽狂犬病的毒性基因,pgG為啟動子,BamHⅠ和EcoRⅠ為兩種限制酶,其識別序列及切割位點分別是G↓GATCC、G↓AATTC。請回答下列問題: (1)過程①所需的酶有____________和____________。下列四種

7、引物中適用于過程①的一對引物是________。 P1:5′TTGGATCCATGGAAGGCTCAATCATGTG 3′ P2:5′CACAAGCTTAGATGACGTATCCAAGGAG 3′ P3:5′TACGGTACCTTAGGGGTTAAGTGGG 3′ P4:5′GCGAATTCTAACTGTAAGCCGGAGCG 3′ (2)過程②所需的酶有__________________________。過程③中要用Ca2+處理大腸桿菌,其目的是________________________________________。 (3)重組偽狂犬病毒中不帶TK基因的優(yōu)點是____

8、____________________________。 (4)將獲得的病毒疫苗注射到豬體內(nèi),一方面病毒中抗原基因在豬細(xì)胞中大量表達(dá),誘導(dǎo)豬獲得______________免疫;另一方面__________________________________使得病毒疫苗具有用量小、作用更持久等優(yōu)點。 答案 (1)反(逆)轉(zhuǎn)錄酶 耐高溫的DNA聚合酶(或Taq酶) P1和P4 (2)限制酶和DNA連接酶 使大腸桿菌成為感受態(tài)細(xì)胞,有利于外源DNA的導(dǎo)入 (3)不具毒性,注射后不會引發(fā)豬患病 (4)體液免疫和細(xì)胞(或特異性) 病毒在動物體內(nèi)可增殖并長期保留 解析 (1)圖中過程①表示乙腦病毒的

9、RNA經(jīng)反(逆)轉(zhuǎn)錄形成相應(yīng)的目的基因,并通過PCR技術(shù)擴(kuò)增該目的基因的過程,該過程涉及逆轉(zhuǎn)錄和PCR技術(shù),因此需要逆轉(zhuǎn)錄酶和耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)的催化。圖中目的基因兩側(cè)是限制酶(BamHⅠ和EcoRⅠ)的識別序列,故應(yīng)該選擇的引物是P1和P4。(2)圖中過程②表示構(gòu)建基因表達(dá)載體,需要的工具酶有限制酶和DNA連接酶。過程③表示將重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞(大腸桿菌)的過程,用Ca2+處理大腸桿菌使其成為感受態(tài)細(xì)胞,有利于外源DNA的導(dǎo)入。(3)TK為偽狂犬病的毒性基因,因此重組偽狂犬病毒中不帶TK基因的優(yōu)點是不具毒性,注射后不會引發(fā)豬患病。(4)將獲得的病毒疫苗注射到豬體內(nèi),一方面病

10、毒中抗原基因在豬細(xì)胞中大量表達(dá),誘導(dǎo)豬獲得特異性免疫(體液免疫和細(xì)胞免疫);另一方面由于病毒在動物體內(nèi)可增殖并長期保留,使得病毒疫苗具有用量小、作用更持久等優(yōu)點。 2.(2018·揚(yáng)州模擬)為研究肝癌致病機(jī)理,科研工作者利用如圖所示的差異雜交法和基因工程獲取相關(guān)癌基因以作進(jìn)一步研究。請據(jù)圖回答問題: (1)圖1中,A過程需要用________酶,D過程需要回收________(填“未雜交”或“雜交分子”)的含32P的cDNA單鏈,繼而通過人工合成,獲得____________,并用其構(gòu)建基因文庫。 (2)從圖1構(gòu)建的基因文庫中獲取的目的基因,一般還需進(jìn)行人工改造后才能用于基因

11、表達(dá)載體的構(gòu)建,改造內(nèi)容除了在基因兩端添加限制酶的識別序列外,還需添加____________________,以便其隨載體導(dǎo)入受體細(xì)胞后,能正常調(diào)控表達(dá)過程。 (3)圖2為改造后的目的基因。圖3為兩種質(zhì)粒,其中Ampr為氨芐青霉素抗性基因,Tetr為四環(huán)素抗性基因,lacZ為藍(lán)色顯色基因,其表達(dá)產(chǎn)物可使底物X-Gal呈藍(lán)色。EcoRⅠ(0.7 kb)、NotⅠ(1.2 kb)等為限制酶及其切割位點與復(fù)制原點之間的距離(1 kb=1 000個堿基對)。 ①圖3中能作為載體的最理想的質(zhì)粒是________(填“X”或“Y”),用選定的質(zhì)粒與圖2的目的基因構(gòu)建基因表達(dá)載體時,應(yīng)選用的限制酶是_

12、_____________。為篩選出成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞,培養(yǎng)基中應(yīng)適量添加________________。 ②若用EcoRⅠ完全酶切上述①中獲得的重組質(zhì)粒,并進(jìn)行電泳觀察,可出現(xiàn)四種長度不同的片段,其長度分別為1.7 kb、5.3 kb、________________。 答案 (1)逆轉(zhuǎn)錄 未雜交 雙鏈cDNA (2)啟動子和終止子 (3)①X NotⅠ 四環(huán)素和X-Gal?、?.1 kb和3.9 kb 解析 (1)圖1中,A過程是以mRNA為模板通過逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA單鏈的過程,該過程需要用到的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶。由于正常肝細(xì)胞總mRNA群中不含癌基因mRNA,不能與以癌基因mR

13、NA為模板合成的cDNA單鏈完成分子雜交,因此,要獲取癌基因應(yīng)回收未雜交的cDNA單鏈,繼而通過人工合成,獲得雙鏈cDNA(癌基因),并用其構(gòu)建基因文庫。(2)基因正常表達(dá)需要啟動子和終止子的調(diào)控,而人工合成的目的基因(癌基因)中不含啟動子和終止子,因此在對獲得的目的基因進(jìn)行人工改造時需添加啟動子和終止子。(3)①根據(jù)圖2可知,目的基因中間含有EcoRⅠ酶切割位點,兩端具有NotⅠ酶切割位點,因此只能用NotⅠ酶切割目的基因而不能用EcoRⅠ酶切割,否則會破壞目的基因。分析質(zhì)粒X和質(zhì)粒Y的結(jié)構(gòu)可知,質(zhì)粒Y的復(fù)制原點中含有NotⅠ酶切割位點,因此不能用質(zhì)粒Y作為載體。因此,圖3中能作為載體的最理

14、想的質(zhì)粒是X,應(yīng)選用的限制酶是NotⅠ。由于質(zhì)粒X中含有四環(huán)素抗性基因Tetr,因此,用含有四環(huán)素的培養(yǎng)基可篩選出導(dǎo)入了普通質(zhì)粒(不含目的基因)和重組質(zhì)粒(含目的基因)的受體細(xì)胞;由于NotⅠ酶切會破壞質(zhì)粒X中的藍(lán)色顯色基因lacZ,因此,用含有X-Gal的培養(yǎng)基可鑒別導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒還是重組質(zhì)粒:培養(yǎng)結(jié)果呈藍(lán)色說明導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒,培養(yǎng)結(jié)果不呈藍(lán)色說明導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒。綜上所述,為篩選出成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞,培養(yǎng)基中應(yīng)適量添加四環(huán)素和X-Gal。②構(gòu)建重組質(zhì)粒時,只使用一種限制酶,則目的基因可以以兩種不同方向連接到質(zhì)粒X被切開的切口中。由于目的基因和質(zhì)粒中均含有1個EcoRⅠ酶切割位點

15、,因此每種重組質(zhì)粒中含有2個EcoRⅠ酶切割位點,若用EcoRⅠ完全酶切獲得的每個重組質(zhì)粒,都將得到2種不同長度的DNA片段,最終可出現(xiàn)四種長度的DNA片段,長度分別為1.7 kb、5.3 kb、3.1 kb和3.9 kb。 3.干擾素是用于治療病毒感染和癌癥的免疫活性蛋白質(zhì),若人的干擾素基因在大腸桿菌內(nèi)表達(dá),產(chǎn)生的抗病毒性較低且保存困難,若將第17位的半胱氨酸改造為絲氨酸,則生產(chǎn)出的干擾素的抗病毒性是原來的100倍,且可在-70 ℃條件下保存半年,下圖是構(gòu)建干擾素工程菌的過程示意圖?;卮鹣铝袉栴}: (1)要改變干擾素的功能,可以考慮對干擾素的________進(jìn)行改造。對干擾素進(jìn)行改造

16、,也可直接對干擾素基因進(jìn)行改造,其原因是_________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)③過程將B導(dǎo)入大腸桿菌,需用________對大腸桿菌進(jìn)行處理,使其處于能________________________的生理狀態(tài)。 (3)要檢測B是否導(dǎo)入大腸桿菌,將③過程后的大腸桿菌先接種于含________________的培養(yǎng)基上,然后將在該培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌接種在含______________的培養(yǎng)

17、基上,在前者培養(yǎng)基上能生長而在后者培養(yǎng)基上不能生長的是導(dǎo)入B的工程菌。 (4)利用圖中工程菌不能生產(chǎn)有活性的干擾素,這是因為 ________________________________________________________________________。 答案 (1)氨基酸序列 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)由基因決定,基因可以直接遺傳;對基因進(jìn)行改造比對蛋白質(zhì)改造容易 (2)Ca2+ 吸收周圍環(huán)境中的DNA分子 (3)氨芐青霉素 四環(huán)素 (4)大腸桿菌為原核生物,無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,不具備加工干擾素的能力 解析 (1)根據(jù)題干信息,若將第17位的半胱氨酸改造為絲氨酸,則生產(chǎn)出的干擾素

18、的抗病毒性是原來的100倍,且可在-70 ℃條件下保存半年,因此可以對干擾素的氨基酸序列進(jìn)行改造。對干擾素進(jìn)行改造,也可直接對干擾素基因進(jìn)行改造,原因是:蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)由基因決定,基因可以直接遺傳;對基因進(jìn)行改造比對蛋白質(zhì)改造容易。 (2)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌,需用Ca2+處理,使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中的DNA分子的生理狀態(tài),成為感受態(tài)細(xì)胞。 (3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時,大腸桿菌有三種狀態(tài),一是沒有導(dǎo)入任何質(zhì)粒,二是導(dǎo)入普通質(zhì)粒,三是導(dǎo)入重組質(zhì)粒。分析圖示可知:在構(gòu)建基因表達(dá)載體時,抗四環(huán)素基因的結(jié)構(gòu)遭到破壞,而抗氨芐青霉素基因結(jié)構(gòu)完好,因此沒有導(dǎo)入任何質(zhì)粒的大腸桿菌,不含上

19、述兩種抗性基因,在含有氨芐青霉素或四環(huán)素的培養(yǎng)基中都不能生長;導(dǎo)入普通質(zhì)粒的大腸桿菌含有的上述兩種抗性基因的結(jié)構(gòu)均完好,在含有氨芐青霉素或四環(huán)素的培養(yǎng)基中都能生長;導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌含有的抗四環(huán)素基因的結(jié)構(gòu)遭到破壞,而含有的抗氨芐青霉素基因結(jié)構(gòu)完好,因此在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中能生長,但在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生長??梢姡瑢ⅱ圻^程后的大腸桿菌進(jìn)行篩選時,先用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),淘汰沒有導(dǎo)入任何質(zhì)粒的大腸桿菌,能生長的則是含有普通質(zhì)粒和重組質(zhì)粒(二者都含抗氨芐青霉素基因)的大腸桿菌;然后將該培養(yǎng)基上生長的菌落用“蓋章”的方法接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上,在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上能生長的

20、是含普通質(zhì)粒的大腸桿菌,將兩個培養(yǎng)基進(jìn)行位置對照,在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長,而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上該位置沒有菌落出現(xiàn),則屬于導(dǎo)入重組質(zhì)粒的工程菌。 (4)干擾素是分泌蛋白,在核糖體中合成后需要經(jīng)過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體加工才具有生物活性,而大腸桿菌是原核生物,無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,不具備加工干擾素的能力,所以利用圖中工程菌不能生產(chǎn)有活性的干擾素。 題組二 細(xì)胞工程 4.(2018·無錫期末)多年生禾本科堿茅屬草本植物小花堿茅種子細(xì)小,外包被穎殼,研究人員以小花堿茅成熟種子為外植體,對種子脫穎處理,用不同濃度激素配比誘導(dǎo)愈傷組織形成及分化,成功建立了完整的小花堿茅組織培養(yǎng)植株再生體系。以下是

21、部分研究數(shù)據(jù),請分析回答: 處理 激素濃度(mg/L) 愈傷組織誘導(dǎo)率(%) 2,4-D 6-BA 1 3 0 52.1±2.2 2 5 0 55.2±2.1 3 3 0.1 42.4±1.9 4 5 0.1 46.9±2.0 5 7 0.1 38.6+1.4 6 3 0.3 43.7±2.8 (1)誘導(dǎo)小花堿茅愈傷組織最佳的激素配比濃度為________________________________。 (2)誘導(dǎo)形成愈傷組織的過程稱為____________,該過程在以MS+3%蔗糖+0.7%瓊脂(pH 7~8)為基本培養(yǎng)基

22、、25 ℃左右的________條件下無菌培養(yǎng),基本培養(yǎng)基中加入蔗糖的目的是____________________________。 (3)從下圖分析可知,種子脫穎后,發(fā)芽率、污染率的變化是_____________________,種子穎殼影響發(fā)芽率可能的原因有很多,其中之一是因為穎殼妨礙了種子和____________的接觸,從而影響了種子細(xì)胞的有氧呼吸。 (4)對脫穎種子無菌處理的方法有(多選)________。 ①用70%的酒精處理?、?0%的次氯酸鈉處理?、蹮o菌水沖洗 ④高壓蒸汽滅菌 答案 (1)5.0 mg/L 2,4-D、不添加6-BA (2)脫分化 避光 提供營養(yǎng)

23、物質(zhì),調(diào)節(jié)滲透壓 (3)種子發(fā)芽率顯著提高,污染率降低 培養(yǎng)基、O2 (4)①②③ 解析 (1)分析題表可知,處理2的愈傷組織誘導(dǎo)率最高,因此誘導(dǎo)小花堿茅愈傷組織最佳的激素配比濃度為5.0 mg/L的2,4-D和不添加6-BA。(2)誘導(dǎo)形成愈傷組織的過程稱為脫分化,該過程在以MS+3%蔗糖+0.7%瓊脂(pH 7~8)為基本培養(yǎng)基、25 ℃左右的避光條件下無菌培養(yǎng),基本培養(yǎng)基中加入蔗糖的目的是提供營養(yǎng)物質(zhì)并調(diào)節(jié)滲透壓。(3)分析柱狀圖可知,種子脫穎后,發(fā)芽率顯著提高、污染率降低。種子穎殼影響發(fā)芽率可能的原因之一是穎殼妨礙了種子和培養(yǎng)基、O2的接觸,從而影響了種子細(xì)胞的有氧呼吸。(4)用70

24、%的酒精或20%的次氯酸鈉處理脫穎種子以及用無菌水沖洗脫穎種子,都能達(dá)到對脫穎種子進(jìn)行消毒的目的,①②③正確;高壓蒸汽滅菌會導(dǎo)致脫穎種子死亡,④錯誤。 5.美國威斯康星州的一個奶牛場有一頭奶牛,年產(chǎn)奶量達(dá)30.8 t,我國奶牛產(chǎn)奶量年平均水平僅為3~4 t。某人用該高產(chǎn)奶牛的耳朵細(xì)胞,采用核移植技術(shù)獲得高產(chǎn)奶牛(如圖),請據(jù)圖回答下列問題: (1)目前完成①的方法有__________________________、梯度離心、紫外光短時間照射及化學(xué)物質(zhì)處理等。 (2)③過程中選擇去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因是______________________。 (3)④過程所利用的技

25、術(shù)是________________________,其原理是____________。 (4)該實驗的成功說明已分化的耳朵細(xì)胞的細(xì)胞核中含有與____________一樣的全套基因,這種繁殖方式屬于__________。 (5)若研究發(fā)現(xiàn)該高產(chǎn)奶牛線粒體發(fā)達(dá),故它的產(chǎn)奶量高,則小牛d成年后具有這一優(yōu)良性狀嗎?________。 你的依據(jù)是_________________________________________________________。 答案 (1)顯微操作去核法 (2)卵母細(xì)胞體積大,易操作,營養(yǎng)物質(zhì)豐富,且細(xì)胞質(zhì)中含有激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì) (3)動物細(xì)胞培養(yǎng)

26、(早期胚胎培養(yǎng)) 細(xì)胞增殖 (4)受精卵 無性繁殖 (5)不具有 線粒體中的基因一般通過細(xì)胞質(zhì)傳遞給后代,而小牛d的細(xì)胞質(zhì)主要來自于奶牛a 解析 (1)去核的方法有顯微操作去核法、梯度離心、紫外光短時間照射及化學(xué)物質(zhì)處理等方法。(2)在核移植中常用去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞,是因為卵母細(xì)胞內(nèi)含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì);體積比較大,容易操作。(3)④過程屬于動物細(xì)胞培養(yǎng),其原理是細(xì)胞增殖。(4)該實驗的成功證明了動物細(xì)胞核具有全能性,因為細(xì)胞核中含有和受精卵一樣的全套基因。(5)線粒體位于細(xì)胞質(zhì)中,主要來源于受體細(xì)胞,因此小牛d沒有產(chǎn)奶量高的優(yōu)良性狀。 6.人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕后胎盤

27、滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白,制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷。下圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖,請分析回答下列問題: (1)制備單克隆抗體過程中要用到________________和________________技術(shù)。 (2)制備單克隆抗體過程中,給小鼠注射的HCG相當(dāng)于________,使小鼠產(chǎn)生分泌相應(yīng)________的淋巴細(xì)胞,此過程屬于特異性免疫中的________免疫。 (3)在細(xì)胞內(nèi)DNA的合成一般有兩條途徑,主途徑是在細(xì)胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸,進(jìn)而合成DNA,而氨基喋呤可以阻斷此途徑。另一輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下,經(jīng)酶的催化作用合成DNA,而骨髓瘤細(xì)胞的DNA合成沒有此輔助途徑。①利用DNA合成途徑不同的特點配制的HAT培養(yǎng)基含有多種成分,其中添加的______________成分具有篩選雜交瘤細(xì)胞的作用。 ②最終篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點是____________________________________________。 (4)此過程生產(chǎn)的單克隆抗體可以與________________特異性結(jié)合,從而診斷早孕。 答案 (1)動物細(xì)胞培養(yǎng) 動物細(xì)胞融合 (2)抗原 抗體 體液 (3)①氨基喋呤?、谀軣o限增殖并分泌特異性抗體 (4)人絨毛膜促性腺激素(或HCG) 11

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