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1、第35講　細胞工程 考點1　植物組織培養(yǎng)和植物體細胞雜交 1．細胞工程的概念 2．細胞的全能性 3．植物組織培養(yǎng)技術(shù) 4．植物體細胞雜交技術(shù) (1)概念：將不同種的植物體細胞，在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成新的植物體的技術(shù)。 (2)操作流程 5．植物細胞工程的實際應用 (1) (2)作物新品種的培育：單倍體育種、突變體的利用。 (3)細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)：培養(yǎng)到愈傷組織階段。 (選修3 P36“小知識”改編)固體培養(yǎng)基中的無機營養(yǎng)成分包括______________；有機營養(yǎng)成分包括______________等物質(zhì)。

2、答案：水分、無機鹽　小分子糖類、氨基酸 1．(2019·高考北京卷)甲、乙是嚴重危害某二倍體觀賞植物的病害。研究者先分別獲得抗甲、乙的轉(zhuǎn)基因植株，再將二者雜交后得到F1，結(jié)合單倍體育種技術(shù)，培育出同時抗甲、乙的植物新品種。以下對相關(guān)操作及結(jié)果的敘述，錯誤的是(　　) A．將含有目的基因和標記基因的載體導入受體細胞 B．通過接種病原體對轉(zhuǎn)基因的植株進行抗病性鑒定 C．調(diào)整培養(yǎng)基中植物激素比例獲得F1花粉再生植株 D．經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的若干再生植株均為二倍體 解析：選D。基因工程的核心是基因表達載體的構(gòu)建，基因表達載體包括目的基因、標記基因、啟動子、終止子等，A項正確；可通過病原

3、體接種實驗對轉(zhuǎn)基因植株進行個體水平的檢測，B項正確；花粉離體培養(yǎng)技術(shù)就是以花粉為外植體進行的組織培養(yǎng)，其培養(yǎng)基中需要添加生長素和細胞分裂素等植物激素，且在組織培養(yǎng)不同階段需要調(diào)整激素的比例，C項正確；抗甲、乙的植物新品種雜交后得到的F1仍為二倍體植物，F(xiàn)1經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的再生植株均為單倍體，D項錯誤。 2．(2019·高考江蘇卷)為探究矮牽牛原生質(zhì)體的培養(yǎng)條件和植株再生能力，某研究小組的實驗過程如圖。下列敘述正確的是(　　) A．過程①獲得的原生質(zhì)體需懸浮在30%蔗糖溶液中 B．過程②需提高生長素的比例以促進芽的分化 C．過程③需用秋水仙素處理誘導細胞壁再生 D．原生質(zhì)體雖無

4、細胞壁但仍保持細胞的全能性 解析：選D。過程①獲得的原生質(zhì)體不能懸浮在30%的蔗糖溶液中，30%的蔗糖溶液可導致原生質(zhì)體失水皺縮甚至死亡，A項錯誤；過程②為再分化過程，需提高細胞分裂素的比例以促進芽的分化，B項錯誤；過程③不需用秋水仙素處理，愈傷組織細胞就已經(jīng)有了細胞壁，C項錯誤；原生質(zhì)體雖無細胞壁，但含有細胞核等結(jié)構(gòu)，即含有全部的遺傳信息，原生質(zhì)體仍保持細胞的全能性，D項正確。 3．(2019·高考全國卷Ⅱ)植物組織培養(yǎng)技術(shù)在科學研究和生產(chǎn)實踐中得到了廣泛的應用?；卮鹣铝袉栴}。 (1)植物微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比，這種微型繁殖技術(shù)的特點有_________

5、___________________________________ (答出2點即可)。 (2)通過組織培養(yǎng)技術(shù)，可把植物組織細胞培養(yǎng)成胚狀體，再通過人工種皮(人工薄膜)包裝得到人工種子(如圖所示)，這種人工種子在適宜條件下可萌發(fā)生長。人工種皮具備透氣性的作用是__________________________。人工胚乳能夠為胚狀體生長提供所需的物質(zhì)，因此應含有植物激素、________和________等幾類物質(zhì)。 (3)用脫毒苗進行繁殖，可以減少作物感染病毒。為了獲得脫毒苗，可以選取植物的___________進行組織培養(yǎng)。 (4)植物組織培養(yǎng)技術(shù)可與基因工程技術(shù)相結(jié)合獲得轉(zhuǎn)

6、基因植株。將含有目的基因的細胞培養(yǎng)成一個完整植株的基本程序是___________________________(用流程圖表示)。 解析：(1)與常規(guī)的種子繁殖方法相比，植物微型繁殖技術(shù)具有能保持植物原有的遺傳特性、繁殖速度快等特點。(2)人工種皮具有透氣性，有利于胚狀體進行呼吸作用；人工胚乳能夠為胚狀體生長提供植物激素、礦質(zhì)元素和糖等物質(zhì)。(3)植物分生區(qū)附近的病毒極少，甚至無病毒。為獲得脫毒苗，可以選取植物的莖尖進行組織培養(yǎng)。(4)將含有目的基因的細胞培養(yǎng)成一個完整植株的基本程序是含目的基因的細胞愈傷組織小植株。 答案：(1)能保持植物原有的遺傳特性，繁殖速度快 (2)有利于胚狀體

7、進行呼吸作用　礦質(zhì)元素　糖 (3)莖尖 (4)含目的基因的細胞愈傷組織小植株 1．植物組織培養(yǎng)中生長素和細胞分裂素的比值與效果 生長素與細胞分裂素的比值 作用效果 比值高時 促進根分化、抑制芽形成 比值低時 促進芽分化、抑制根形成 比值適中 促進愈傷組織形成 2.植物組織培養(yǎng)中光照的使用 脫分化階段不需要給予光照，再分化階段需要給予光照，以利于葉綠素的形成。 3．雜種植物遺傳物質(zhì)的變化 (1)遺傳特性：雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)，故雜種植株具備兩種植物的遺傳特性。 (2)染色體組數(shù) ①染色體組數(shù)＝兩種植物體細胞內(nèi)染色體組數(shù)之和。 ②植物體細胞雜交形

8、成的雜種植株，有幾個染色體組就稱為幾倍體。 ③若一植物細胞含有2x條染色體，2個染色體組，基因型為Aabb，另一植物細胞含有2y條染色體，2個染色體組，基因型為ccDd，則新植株應為異源四倍體，其體細胞中染色體為(2x＋2y)條，4個染色體組，基因型為AabbccDd。 4．植物體細胞雜交過程中雜種細胞類型及檢測方法 (1)誘導產(chǎn)生的細胞(假設(shè)用于雜交的兩種植物細胞分別為A、B) ①未融合的細胞：A和B。 ②兩兩融合的細胞：AA、BB和AB。 ③多細胞融合體。 (2)檢測方法：對誘導產(chǎn)生的細胞進行植物組織培養(yǎng)，然后根據(jù)得到的植物性狀進行判斷。 ①若得到的是一種植物的性狀，說明是

9、未融合細胞。 ②若得到的是具有兩種親本性狀的植物，說明是雜種植株。 ③若得到的是具有兩種親本性狀的植物，且一種植物的性狀得到加強，則是多細胞融合體。 ④若得到的是一種植物的性狀且效果得到加強，則是同種細胞融合的結(jié)果。 1．下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是(　　) A．愈傷組織是一團有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細胞 B．二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株 C．用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子 D．植物耐鹽突變體可通過添加適量NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得 解析：選D。愈傷組織的細胞排列疏松而無規(guī)則，是一團沒有特定結(jié)構(gòu)和功能并處于旺盛分裂狀

10、態(tài)的薄壁細胞，故A錯誤。二倍體植株的花粉經(jīng)離體培養(yǎng)后得到單倍體植株，該單倍體高度不育，不能穩(wěn)定遺傳，故B錯誤。用人工薄膜將胚狀體等進行包裝可制成人工種子，愈傷組織不能作為制作人工種子的材料，故C錯誤。在普通培養(yǎng)基中添加適量的NaCl，制成選擇培養(yǎng)基，可用來篩選植物耐鹽突變體，故D正確。 2．(不定項)(2020·山東青島高三期末)如圖為植物組織培養(yǎng)過程示意圖，下列敘述正確的是(　　) 外植體→①→②→試管苗 A．外植體可以是植物體細胞、卵細胞或花藥 B．②→試管苗過程的基礎(chǔ)是細胞的分裂、分化 C．將①包上人造種皮即可獲得人工種子 D．赤霉素和脫落酸也可用于植物組織培養(yǎng) 解析：選A

11、BD。分析題圖可確定①表示愈傷組織，②表示胚狀體(或不定芽等)。外植體可以是植物體細胞、卵細胞或花藥，A正確；②→試管苗過程的基礎(chǔ)是細胞的分裂、分化，B正確；人工種子的基本結(jié)構(gòu)為胚狀體(或不定芽等)、人工胚乳、人造種皮，C錯誤；不同植物所需的激素種類有所不同，植物組織培養(yǎng)中主要用到生長素和細胞分裂素，有時也會用到赤霉素和脫落酸，D正確。 3．(不定項)科學家將番茄和馬鈴薯細胞利用圖示技術(shù)獲得了“番茄—馬鈴薯”植株。下列有關(guān)敘述正確的是(　　) A．圖示技術(shù)涉及的原理有細胞膜的流動性、植物細胞的全能性等 B．過程②可用電激、聚乙二醇或滅活的病毒誘導原生質(zhì)體融合 C．過程④⑤需提供無機

12、營養(yǎng)成分、有機營養(yǎng)成分和植物激素等 D．f培養(yǎng)基中生長素與細胞分裂素的配比與e培養(yǎng)基中的不同 解析：選ACD。植物體細胞雜交過程中涉及原生質(zhì)體的融合和植物組織培養(yǎng)，前者的原理是細胞膜的流動性，后者的原理是細胞的全能性，A正確；原生質(zhì)體融合的方法有物理法和化學法，不能用滅活的病毒處理，B錯誤；④脫分化、⑤再分化需要營養(yǎng)成分和植物激素等條件，C正確；e中發(fā)生脫分化，f中再分化出根、芽，脫分化和再分化過程所需生長素和細胞分裂素的比例不同，D正確。 4．(2017·高考海南卷)甲、乙兩名同學分別以某種植物的綠色葉片和白色花瓣為材料，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖該植物?；卮鹣铝袉栴}： (1)以該植物

13、的綠色葉片和白色花瓣作為外植體，在一定條件下進行組織培養(yǎng)，均能獲得試管苗，其原理是_________________________________________________________。 (2)甲、乙同學在誘導愈傷組織所用的培養(yǎng)基中，均加入一定量的蔗糖，蔗糖水解后可得到_____________________，若要用細胞作為材料進行培養(yǎng)獲得幼苗，該細胞應具備的條件是______________(填“具有完整的細胞核”“具有葉綠體”或“已轉(zhuǎn)入抗性基因”)。 (3)圖中A、B、C所示的是不同的培養(yǎng)結(jié)果，該不同結(jié)果的出現(xiàn)主要是由培養(yǎng)基中兩種激素用量的不同造成的，這兩種激素是____

14、____________，A中的愈傷組織是葉肉細胞經(jīng)________形成的。 (4)若該種植物是一種雜合體的名貴花卉，要快速獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的該種花卉，可用組織培養(yǎng)的方法繁殖，在培養(yǎng)時，________(填“能”或“不能”)采用經(jīng)減數(shù)分裂得到的花粉粒作為外植體，原因是_____________________________________。 解析：(1)綠色葉片和白色花瓣是細胞分化的結(jié)果，遺傳物質(zhì)并沒有改變，所以以該植物的綠色葉片和白色花瓣作為外植體，在一定條件下進行組織培養(yǎng)，均能獲得試管苗，其原理是綠色葉片和白色花瓣的細胞具有全能性。(2)蔗糖是由1分子的葡萄糖和1

15、分子的果糖組成，所以蔗糖水解后可得到葡萄糖、果糖。若要用細胞作為材料進行培養(yǎng)獲得幼苗，該細胞應具備的條件是具有完整的細胞核。(3)題圖中A、B、C所示的是不同的培養(yǎng)結(jié)果，該不同結(jié)果的出現(xiàn)主要是由培養(yǎng)基中兩種激素用量的不同造成的，這兩種激素是細胞分裂素、生長素。A中的愈傷組織是葉肉細胞經(jīng)脫分化形成的。(4)若該種植物是一種雜合體的名貴花卉，要快速獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的該種花卉，可用組織培養(yǎng)的方法繁殖；在培養(yǎng)時，不能采用經(jīng)減數(shù)分裂得到的花粉粒作為外植體，原因是對雜合體的植株來說，其體細胞的基因型相同，通過減數(shù)分裂形成花粉粒，可以導致等位基因分離，非同源染色體上的非等位基因自由組合等，花

16、粉粒的基因型與體細胞的基因型不同，后代會出現(xiàn)性狀分離，用花粉粒進行組織培養(yǎng)得到的花卉的基因型不同于原植株。 答案：(1)綠色葉片和白色花瓣的細胞具有全能性，在一定條件下能發(fā)育成完整的植株 (2)葡萄糖、果糖　具有完整的細胞核 (3)細胞分裂素、生長素　脫分化 (4)不能　對雜合體的植株來說，其體細胞的基因型相同，而花粉粒的基因型與體細胞的基因型不同。用花粉粒進行組織培養(yǎng)得到的花卉基因型不同于原植株 5．(2021·預測)傳統(tǒng)的人工繁殖蘭花的方法是分株繁殖和用種子播種，隨著科學技術(shù)的進步，人們開始采用“組織培養(yǎng)”繁殖蘭花。請回答下列問題： (1)植物組織培養(yǎng)是在________和人工

17、控制條件下，將________的植物組織、器官、細胞，培養(yǎng)在人工配制的________上，誘導其產(chǎn)生________、叢芽，最終形成完整植株的過程。 (2)蘭花的葉肉細胞之所以能培養(yǎng)為新個體，是因為細胞中含有________________，具有發(fā)育成完整個體的潛能，這種潛能叫做____________。 (3)有人想到利用植物體細胞雜交技術(shù)解決蘭花生根速度慢、幼苗生存能力弱的好辦法，但操作后得到的“韭菜—蘭花”，并沒有預想中的“繁殖容易，香氣濃郁”，可能的原因是________________________。 解析：(1)植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制的條件下，將離體的植物器官、組

18、織、細胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。(2)蘭花葉肉細胞中含有本物種的全部遺傳信息，具有發(fā)育成完整個體的潛能，即細胞具有全能性，所以蘭花葉肉細胞能夠培養(yǎng)為新個體。(3)植物體細胞雜交技術(shù)獲得的“韭菜—蘭花”并沒有預想中的“繁殖容易，香氣濃郁”，可能是因為兩個物種之間的基因相互影響，使某些基因無法正常表達。 答案：(1)無菌　離體　培養(yǎng)基　愈傷組織　(2)本物種的全部遺傳信息　細胞的全能性　(3)兩個物種之間的基因相互影響，導致某些基因無法正常表達 考點2　動物細胞的培養(yǎng)和核移植技術(shù) 1．動物細胞培養(yǎng)——動物細胞工程技術(shù)的

19、基礎(chǔ) (1)原理：細胞增殖。 (2)過程 (3)培養(yǎng)條件 (4)應用：生物制品的生產(chǎn)、檢測有毒物質(zhì)、醫(yī)學研究。 2．動物體細胞核移植技術(shù)和克隆動物 (1)原理：動物體細胞的細胞核具有全能性。 (2)動物體細胞核移植技術(shù)的過程 (3)應用 ①加速家畜遺傳改良進程，促進優(yōu)良畜群繁育。 ②保護瀕危物種。 ③生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。 ④作為異種移植的供體。 ⑤用于組織器官的移植。 (4)存在問題：成功率低、克隆動物存在健康問題、動物食品的安全性問題等。 1．(選修3 P44“尋根問底”改編)胰蛋白酶處理動物組織，對細胞的消化有兩種情況： (1)短時間內(nèi)細胞____

20、_____(填“會”或“不會”)被消化，原因是_______________。 (2)長時間后細胞________(填“會”或“不會”)被消化，原因是________________。 答案：(1)不會　細胞表面具有糖蛋白，對細胞具有一定的保護作用 (2)會　細胞表面糖蛋白的保護作用是有限的；細胞膜的主要成分包括磷脂和蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)可被胰蛋白酶水解 2．(選修3 P49“討論”T2)用于核移植的供體細胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細胞，想一想，這是為什么？ 答案：動物細胞傳代培養(yǎng)至10～50代左右時，部分細胞的核型可能會發(fā)生變化，其細胞遺傳物質(zhì)可能會發(fā)生突變，而10代以內(nèi)的細胞一般能保

21、持正常的二倍體核型。因此，在體細胞核移植中，為了保證供體細胞正常的遺傳基礎(chǔ)，通常采用傳代10代以內(nèi)的細胞。 1．(高考天津卷)將攜帶抗M基因、不帶抗N基因的鼠細胞去除細胞核后，與攜帶抗N基因、不帶抗M基因的鼠細胞融合，獲得的胞質(zhì)雜種細胞具有M、N兩種抗性。該實驗證明了(　　) A．該胞質(zhì)雜種細胞具有全能性 B．該胞質(zhì)雜種細胞具有無限增殖能力 C．抗M基因位于細胞質(zhì)中 D．抗N基因位于細胞核中 解析：選C。只有將該胞質(zhì)雜種細胞培育成小鼠，才可證明該胞質(zhì)雜種細胞具有全能性，A項錯誤；該實驗沒有證據(jù)表明該胞質(zhì)雜種細胞能無限增殖，B項錯誤；攜帶抗M基因、不帶抗N基因的鼠細胞去除細胞核后

22、，與不帶抗M基因、攜帶抗N基因的細胞融合，雜種細胞具有M、N兩種抗性，說明細胞質(zhì)中含有抗M基因，但不能確定抗N基因的位置，C項正確，D項錯誤。 2．(2018·高考全國卷Ⅲ)2018年《細胞》期刊報道，中國科學家率先成功地應用體細胞對非人靈長類動物進行克隆，獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”?；卮鹣铝袉栴}： (1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程，核移植是指________。通過核移植方法獲得的克隆猴，與核供體相比，克隆猴體細胞的染色體數(shù)目________(填“減半”“加倍”或“不變”)。 (2)哺乳動物的核移植可以分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植，胚胎細胞核移植獲得克隆動物的難

23、度______(填“大于”或“小于”)體細胞核移植，其原因是____________。 (3)在哺乳動物核移植的過程中，若分別以雌性個體和雄性個體的體細胞作為核供體，通常，所得到的兩個克隆動物體細胞的常染色體數(shù)目________(填“相同”或“不同”)，性染色體組合________(填“相同”或“不同”)。 解析：(1)動物核移植是將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物，與核供體相比，其細胞的染色體數(shù)目不變。(2)由于動物胚胎細胞分化程度低，恢復其全能性相對容易，而動物

24、體細胞分化程度高，恢復其全能性十分困難，所以，胚胎細胞核移植獲得克隆動物的難度明顯低于體細胞核移植。(3)哺乳動物雌性和雄性個體的體細胞中常染色體數(shù)目相同，所以分別以雌性和雄性個體的體細胞為供體，克隆動物體細胞的常染色體數(shù)目相同，但其性染色體組合不同。 答案：(1)將動物的一個細胞核，移入一個已去掉細胞核的卵母細胞中　不變 (2)小于　胚胎細胞分化程度低，恢復全能性相對容易 (3)相同　不同 1．關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的兩組概念辨析 (1)細胞貼壁與接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁。當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時， 細胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為接觸抑

25、制。 (2)原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng) ①原代培養(yǎng)：細胞懸液第一次在瓶中培養(yǎng)，沒有分瓶培養(yǎng)之前的細胞培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細胞核型正常。 ②傳代培養(yǎng)：進行分瓶后的擴大培養(yǎng)，即傳代培養(yǎng)。一般情況下，細胞傳至10～50代后，增殖會明顯減緩，甚至完全停止，部分細胞出現(xiàn)核型異常。 2．克隆 1．(2020·江蘇蘇、錫、常、鎮(zhèn)模擬)下列關(guān)于動物細胞工程的敘述，正確的是(　　) A．接觸抑制的細胞經(jīng)分散后繼續(xù)培養(yǎng)，細胞將不再增殖 B．動物細胞培養(yǎng)選用的培養(yǎng)材料大多是胚胎或幼齡動物的組織 C．經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細胞即可直接生產(chǎn)特定的單克隆抗體 D．常在培養(yǎng)基中添加一定種類和數(shù)量的抗生

26、素以防止培養(yǎng)的細胞被病毒感染 解析：選B。接觸抑制的細胞經(jīng)分散后繼續(xù)培養(yǎng)，細胞仍能增殖，A錯誤，動物細胞培養(yǎng)通常選擇胚胎或幼齡動物的組織作為培養(yǎng)材料，B正確；經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細胞需要檢測其是否能產(chǎn)生特定的抗體，C錯誤；加抗生素的目的是消滅雜菌，防止污染，D錯誤。 2．培育肉是利用動物體內(nèi)分離的成肌細胞或全能干細胞，采用動物細胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)出類似于動物肌肉的肉絲，同時添加了人體所需的元素如鐵、鈣等，使之營養(yǎng)更加豐富。下列相關(guān)敘述不正確的是(　　) A．用胃蛋白酶處理肌肉組織，可以獲得分裂能力強的肌肉母細胞 B．生物反應器內(nèi)應控制溫度適宜，并充入一定量的CO2保證細胞呼吸

27、 C．培養(yǎng)液中的支架提供了更多的細胞附著面積，有利于細胞貼壁生長 D．“人造牛肉”的培養(yǎng)有利于工廠化生產(chǎn)，產(chǎn)品是真肉 解析：選A。用胰蛋白酶處理動物組織，可以使組織分散成單個細胞，有利于動物細胞培養(yǎng)，A項錯誤；生物反應器內(nèi)應控制溫度適宜，并充入一定量的CO2保證細胞呼吸，B項正確；動物細胞培養(yǎng)過程中培養(yǎng)液中的細胞會附著在瓶壁上，如果想得到大量的產(chǎn)物，可以增大細胞附著面積，有利于細胞貼壁生長，C項正確；理論上來說，題圖所示的培養(yǎng)過程有利于牛肉的工廠化生產(chǎn)，產(chǎn)品是細胞增殖的產(chǎn)物，屬于真肉，D項正確。 3．(不定項)下列有關(guān)哺乳動物核移植技術(shù)的敘述，正確的是(　　) A．受體細胞常用處于減

28、數(shù)第二次分裂中期的卵母細胞 B．注入受體細胞的既可以是細胞核，也可以是細胞 C．用物理或化學方法激活移植后的細胞，使其完成減數(shù)分裂過程 D．核移植技術(shù)的成功率很低，仍有很多問題需要研究 解析：選ABD。處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細胞體積大、易操作，含有核基因全能性表達的物質(zhì)和環(huán)境條件，所以受體細胞常用處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細胞，A正確；注入受體細胞的可以是細胞核，為了保證供體的細胞核不被破壞，使所得個體的性狀更接近供體，注入受體細胞的也可以是供體細胞，B正確；用物理或化學方法激活移植后的細胞，使其完成有絲分裂過程，C錯誤；許多克隆動物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷、核移植技術(shù)的成功率很低

29、等，仍有很多問題需要研究，D正確。 4．下圖為動物細胞培養(yǎng)過程中細胞增殖曲線(甲)及細胞變化圖(乙)，請回答下列問題： (1)圖甲中________點以后表示細胞的傳代培養(yǎng)，AB段可能發(fā)生了如圖乙________(填序號)所示的____________現(xiàn)象，在進行B至C過程培養(yǎng)前，需要用____________處理細胞。 (2)動物細胞培養(yǎng)，一般傳至________代以內(nèi)細胞能保持正常的二倍體核型。 (3)為制備單克隆抗體，需將________注射到小鼠體內(nèi)，以此獲取_______________，同時將該細胞與圖乙________(填序號)所示的細胞融合形成雜交瘤細胞。該雜交瘤細

30、胞的特點是________________________。為篩選能夠產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞，可用________培養(yǎng)基來培養(yǎng)。 解析：(1)B點之前是初次培養(yǎng)，稱為原代培養(yǎng)。AB段增殖速度緩慢，是因為發(fā)生了題圖乙中②所示的接觸抑制現(xiàn)象。若要繼續(xù)進行傳代培養(yǎng)，需要用胰蛋白酶(膠原蛋白酶)處理使組織細胞分散開來。(2)傳代培養(yǎng)10代以上，細胞的二倍體核型可能會發(fā)生改變，10代以內(nèi)的細胞仍然保持二倍體核型。(3)制備單克隆抗體時，需要將已免疫的B淋巴(漿)細胞和能無限增殖的細胞(如題圖乙中③發(fā)生癌變的瘤細胞)融合，二者融合后形成的雜交瘤細胞，既能像瘤細胞那樣無限增殖，又能像已免疫的B淋巴(漿

31、)細胞那樣產(chǎn)生專一抗體。需要利用特定的選擇培養(yǎng)基將產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞篩選出來。 答案：(1)B?、凇〗佑|抑制　胰蛋白酶(膠原蛋白酶)　(2)10　(3)抗原　已免疫的B淋巴(漿)細胞　③　既能無限增殖，又能產(chǎn)生專一抗體　選擇 5．(2021·預測)我國科學家解決了體細胞克隆猴的世界難題，成功培育出世界上首個體細胞克隆猴——“中中”和“華華”。這標志著我國將率先開啟以獼猴作為實驗動物模型的時代。下圖為克隆猴的流程示意圖。請回答下列問題： (1)我國克隆猴利用的是猴胎兒成纖維細胞，該細胞是一種已分化的體細胞，從理論上分析，它具有細胞的全能性，這是因為________________

32、___________________。 (2)克隆猴時需要進行“去核”操作，即去掉卵母細胞的細胞核。先在體外培養(yǎng)卵母細胞讓其分裂，一般選擇_______________的細胞進行去核操作；然后進行“核移植”，即將體細胞的細胞核移到去核卵母細胞中形成重組細胞，此時采用的技術(shù)是______________；得到的重組細胞再進行人工激活使其分裂形成胚胎。 (3)科學家將79枚克隆胚胎移植入21只代孕母猴體中，最終只有兩只母猴正常懷孕產(chǎn)下“中中”和“華華”，它倆的性別是否一致？__________；原因是__________________。 (4)克隆動物有很多優(yōu)點：①可以加速家畜遺傳改良進

33、程，促進優(yōu)良畜群繁育； ②__________________________________________________________________。 (5)靈長類生物克隆成功是克隆技術(shù)的重大突破，在該技術(shù)應用方面，應注意哪些潛在的風險？__________________________________________________________。 解析：(1)由于成纖維細胞的細胞核中含有猴的全部核基因，因此成纖維細胞具有全能性。(2)去核操作一般選擇減數(shù)第二次分裂中期的卵母細胞。將體細胞的細胞核移到去核卵母細胞中形成重組細胞采用的方法是顯微注射技術(shù)。(3)79枚克隆胚胎

34、是經(jīng)過有絲分裂形成的，其細胞核遺傳物質(zhì)一致，即“中中”“華華”的細胞核中遺傳物質(zhì)一樣，因此“中中”和“華華”的性別一致。(4)克隆動物的優(yōu)點：①可以加速家畜遺傳改良進程，促進優(yōu)良畜群繁育；②可以增加瀕危物種的存活數(shù)量(或可以建立實驗動物模型研究人類疾病)。(5)克隆技術(shù)應用方面應避免進一步擴大到對靈長類或者人的體細胞克隆，引發(fā)倫理問題。 答案：(1)成纖維細胞的細胞核中含有猴的全部核基因 (2)減數(shù)第二次分裂中期(或MⅡ期)　顯微注射技術(shù) (3)是　“中中”“華華”的細胞核中遺傳物質(zhì)一樣，是經(jīng)過有絲分裂形成的 (4)可以增加瀕危物種的存活數(shù)量(或可以建立實驗動物模型研究人類疾病) (

35、5)避免進一步擴大到對靈長類或者人的體細胞克隆，引發(fā)倫理問題 考點3　動物細胞的融合與單克隆抗體的制備 1．動物細胞的融合 2．單克隆抗體 (1)制備原理：一種漿細胞產(chǎn)生一種抗體，漿細胞在體外不能無限增殖；骨髓瘤細胞能無限增殖；漿細胞與骨髓瘤細胞融合得到雜交瘤細胞，既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。 (2)制備過程 1．(不定項)(2018·高考江蘇卷)如圖為細胞融合的示意圖，下列敘述正確的是(　　) A．若a細胞和b細胞是植物細胞，需先去分化再誘導融合 B．a(chǎn)細胞和b細胞之間的融合需要促融處理后才能實現(xiàn) C．c細胞的形成與a、b細胞膜的流動性都有關(guān)

36、 D．c細胞將同時表達a細胞和b細胞中的所有基因 解析：選BC。若a細胞和b細胞是植物細胞，需要用酶解法去掉細胞壁后再誘導融合，融合完成后的細胞再經(jīng)脫分化和再分化培養(yǎng)，A錯誤；a細胞和b細胞之間的融合需要借助物理、化學等方法處理后才能實現(xiàn)，B正確；c細胞的形成要經(jīng)過細胞膜的融合，與a、b細胞膜的流動性都有關(guān)，C正確；c細胞內(nèi)有a、b兩細胞的遺傳物質(zhì)，但不能同時表達a、b細胞中的所有基因，D錯誤。 2．(不定項)(2019·高考江蘇卷)下圖為雜交瘤細胞制備示意圖。骨髓瘤細胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT－)，在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無法生長。下列敘述正確的是(　　

37、) A．可用滅活的仙臺病毒誘導細胞融合 B．兩兩融合的細胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長 C．雜交瘤細胞需進一步篩選才能用于生產(chǎn) D．細胞膜的流動性是細胞融合的基礎(chǔ) 解析：選ACD。動物細胞融合可以用滅活的仙臺病毒進行誘導，或用PEG、電激等進行誘導，A正確；免疫B細胞與骨髓瘤細胞進行融合產(chǎn)生的融合細胞有：免疫B細胞自身融合細胞、骨髓瘤細胞自身融合細胞、雜交瘤細胞，據(jù)題干信息可知，骨髓瘤細胞在HAT培養(yǎng)基上無法生長，因此骨髓瘤細胞自身融合細胞在HAT培養(yǎng)基上無法生長，而免疫B細胞自身融合細胞和雜交瘤細胞可以在HAT培養(yǎng)基上生長，B錯誤；融合后產(chǎn)生的雜交瘤細胞并不是都能表達并產(chǎn)生所需的單

38、克隆抗體，需要進一步篩選，C正確；動物細胞融合依據(jù)的原理是細胞膜的流動性，D正確。 1．植物體細胞雜交與動物細胞融合的“同”與“不同” (1)植物體細胞雜交與動物細胞融合中酶的作用對象不同，纖維素酶和果膠酶作用于細胞壁，而胰蛋白酶等作用于動物細胞間的蛋白質(zhì)。 (2)相比植物體細胞雜交，動物細胞融合特有的誘導方式是用滅活的病毒處理，其他物理、化學誘導融合的手段與植物體細胞雜交過程中誘導原生質(zhì)體融合的方法相同。 2．制備單克隆抗體過程中的兩次篩選 項目 第一次篩選 第二次篩選 篩選原因 誘導融合后得到多種雜交細胞，另外還有未融合的細胞 由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，

39、所以經(jīng)選擇性培養(yǎng)獲得的雜交瘤細胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細胞 篩選方法 用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細胞和同種細胞融合后形成的細胞(“B—B”細胞、“瘤—瘤”細胞)都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞(“B—瘤”細胞)才能生長 用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群 篩選目的 得到雜交瘤細胞 得到能分泌所需抗體的雜交瘤細胞 1．(2020·江蘇南通、徐州等六市模擬)在利用細胞融合技術(shù)生產(chǎn)單克隆抗體的過程中，不需要考慮(　　) A．多次注射特定抗原蛋白，對實驗小鼠進行免疫 B．淋巴B細胞和骨髓瘤細胞之間

40、的免疫排斥 C．向細胞培養(yǎng)液中加入促融劑的種類和處理時間 D．選擇特定試劑篩選能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞 解析：選B。制備單克隆抗體過程中，要對實驗小鼠注射特定的抗原，抗原進入機體后刺激機體產(chǎn)生特異性免疫反應從而產(chǎn)生相應的漿細胞，A不符合題意；免疫排斥是機體對移植物(異體細胞、組織或器官)通過特異性免疫應答使其破壞的過程，細胞之間不存在免疫排斥，B符合題意；向細胞培養(yǎng)液中加入促融劑的種類和處理時間會影響細胞的融合，C不符合題意；需要選擇特定試劑篩選能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞，否則會影響單克隆抗體的產(chǎn)量或得到的單克隆抗體特異性差，D不符合題意。 2．(2020·山東省高三等級考模擬)下列

41、關(guān)于單克隆抗體制備的說法，正確的是(　　) A．將特定抗原注射到小鼠體內(nèi)，可以從小鼠血清中獲得單克隆抗體 B．經(jīng)特定抗原免疫過的B淋巴細胞在體外培養(yǎng)時可分泌單克隆抗體 C．誘導B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后，發(fā)生融合的細胞均為雜交細胞 D．篩選出雜交瘤細胞后，需利用特定抗原再次篩選分泌單克隆抗體的細胞 解析：選D。血清中提取的抗體不止一種，A錯誤；免疫過的B淋巴細胞在體外培養(yǎng)不能維持增殖，B錯誤；誘導B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合時，也可能發(fā)生B淋巴細胞互相融合、骨髓瘤細胞互相融合，這兩種均不是雜交瘤細胞，C錯誤；篩選出雜交瘤細胞后，需利用特定抗原再次篩選分泌單克隆抗體的細胞，D正確。

42、3．(不定項)(2020·江蘇金湖中學考前模擬)人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷，下圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，下列相關(guān)敘述正確的是(　　) A．①過程的促融劑常用聚乙二醇(PEG)，也可用滅活的病毒誘導 B．③過程利用抗原—抗體雜交的原理進行檢測 C．給小鼠多次注射HCG的目的是獲得較多的記憶細胞 D．③過程需要添加抗生素等物質(zhì) 解析：選ABD。與植物細胞融合相比，動物細胞融合還可以用滅活的病毒誘導處理，A正確；③過程利用抗原—抗體雜交的原理進行檢測，B正確；給小鼠多次注射HCG的目的是獲得

43、較多免疫過的B細胞，C錯誤；④過程需要添加抗生素等物質(zhì)，目的是防止雜菌污染，D正確。 4．(2020·甘肅西北師大附中高三診斷)下圖表示細胞工程的流程圖(a、b表示過程)，請據(jù)圖回答下列問題： (1)若圖示為動物細胞融合的過程，則a過程特有的誘導劑是______________________。以動物細胞融合為基礎(chǔ)發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)為制造單克隆抗體開辟了新途徑，通過把能產(chǎn)生抗體的____________細胞與能在體外大量增殖的________________細胞進行融合，得到既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細胞。 (2)若圖示為植物體細胞雜交過程，則在甲、乙融合之前，需要

44、用________________(填酶)制備________。這項工程的意義是___________________。 (3)由甲、乙融合得到丙細胞的基本原理是______________________。 解析：(1)若a過程表示誘導動物細胞融合，則特有的誘導劑是滅活的病毒。在單克隆抗體的制備過程中，利用已免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，形成雜交瘤細胞，該細胞既可以迅速大量增殖，又可以產(chǎn)生專一的抗體。(2)在植物體細胞雜交過程中，需要對甲、乙細胞用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁，然后再誘導甲、乙的原生質(zhì)體融合。該技術(shù)可以克服遠緣雜交不親和的障礙，擴大親本組合的范圍。(3)甲、乙細胞融合形

45、成丙細胞，利用了細胞膜的流動性。 答案：(1)滅活的病毒　B淋巴(漿)　骨髓瘤　(2)纖維素酶和果膠酶　原生質(zhì)體　克服遠緣雜交不親和的障礙，擴大親本組合的范圍　(3)細胞膜的流動性 5．(2020·濮陽模擬)下圖是制備乙肝病毒表面抗體的流程圖。請回答下列問題： (1)圖中細胞Ⅰ的名稱為________，其與骨髓瘤細胞融合所依據(jù)的基本原理是_______。 (2)在圖示流程中至少需要進行兩次篩選，其中第一次篩選的目的是______________；第二次篩選的目的是________________________。 (3)制備得到的單克隆抗體可用于乙肝的免疫治療，其所利用的免疫學原

46、理是____________________________。 解析：(1)用抗原刺激小鼠，使之產(chǎn)生特異性免疫反應，從小鼠體內(nèi)提取B淋巴細胞，B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞。細胞融合的原理是細胞膜具有一定的流動性。(2)兩次篩選中第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細胞，第二次篩選的目的是從雜交瘤細胞中獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞。(3)單克隆抗體具有與抗原結(jié)合的特異性強、靈敏度高的特點，可用于乙肝的免疫治療。 答案：(1)B淋巴細胞(或漿細胞)　細胞膜(具有一定)的流動性　(2)獲得雜交瘤細胞　獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞　(3)抗原和抗體的特異性結(jié)合(或單克隆抗體與抗原結(jié)合的特異性

47、強) [易誤警示] 易錯點1　不清楚植物脫毒苗培養(yǎng)時選擇的要求及原理 [點撥]　 由于植物分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少，所以常采用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗。 易錯點2　誤認為植物組織培養(yǎng)均需“再分化至幼苗”，“人工種子”即平常所說的“種子” [點撥]　 (1)組織培養(yǎng)的目的不同，培養(yǎng)的階段不同。如：生產(chǎn)細胞代謝產(chǎn)物，只需培養(yǎng)至愈傷組織時期；生產(chǎn)人工種子，則需要培養(yǎng)至胚狀體時期；獲得植株就需培養(yǎng)至幼苗時期。 (2)人工種子是通過無性生殖(植物體細胞的組織培養(yǎng)技術(shù))形成的，只有一個親本的性狀；自然種子是有性生殖的產(chǎn)物，具有兩個親本的性狀。 易錯點3　誤認為動物細胞培養(yǎng)時加入5

48、%CO2的目的是維持氣體平衡或用于呼吸 [點撥]　 動物細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，加入CO2的目的是維持培養(yǎng)液的pH。 易錯點4　不清楚動物細胞克隆化培養(yǎng)時為何常選10代以內(nèi)的細胞，而瘤細胞卻為50代以后 [點撥]　取供體動物的體細胞培養(yǎng)，一般選用傳至10代以內(nèi)的細胞，因為10代以內(nèi)的細胞一般能保持正常的二倍體核型，保證了供體細胞正常的遺傳基礎(chǔ)。欲獲得無限增殖的瘤細胞則往往在50代以后，其遺傳物質(zhì)已發(fā)生變化，具癌變特性。 [糾錯體驗] 1．(2020·濟寧模擬)在下列過程中，需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)的有幾種(

49、　　) ①用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗，獲得多倍體植株 ②利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株 ③利用基因工程培養(yǎng)抗病轉(zhuǎn)基因植株 ④利用細胞工程培育“番茄—馬鈴薯”雜種植株 ⑤無子西瓜的大量繁殖 A．一種　　　　　　　 B．兩種 C．三種 D．四種 答案：D 2．(2020·天津模擬)下列關(guān)于細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)的敘述，錯誤的是(　　) A．細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)是植物細胞工程的重要用途之一 B．培養(yǎng)過程中需要脫分化形成愈傷組織，然后懸浮培養(yǎng)愈傷組織細胞 C．培養(yǎng)的愈傷組織需要經(jīng)過再分化產(chǎn)生特定的組織細胞后才能產(chǎn)生特定的細胞產(chǎn)物 D．培養(yǎng)的細胞收集后一般要破碎提取有效成分

50、 答案：C 3．某研究小組為測定某種藥物對體外培養(yǎng)細胞的毒性，準備對某種動物的肝腫瘤細胞(甲)和正常肝細胞(乙)進行動物細胞培養(yǎng)。下列敘述正確的是(　　) A．制備肝細胞懸液時，可用胃蛋白酶處理肝組織塊 B．恒溫培養(yǎng)箱中的CO2濃度維持在5%左右，以促進細胞呼吸 C．為了保證細胞培養(yǎng)所需的無病毒環(huán)境，需大量添加各種抗生素 D．本實驗應設(shè)置對照實驗，以檢測藥物對甲、乙細胞的毒性大小 解析：選D。在利用肝組織塊制備肝細胞懸液時，常用胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，因為胃蛋白酶需要在強酸環(huán)境下才能起作用，但這樣的環(huán)境不適于細胞生存，A項錯誤；細胞培養(yǎng)應在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行，CO

51、2的作用是維持培養(yǎng)液的pH，B項錯誤；抗生素是用來殺菌的，不是殺病毒的，C項錯誤；本實驗應設(shè)置對照實驗，用添加藥物的培養(yǎng)液分別培養(yǎng)甲、乙細胞，根據(jù)變異細胞占培養(yǎng)細胞的比例，以檢測藥物對甲、乙的毒性大小，D項正確。 1．(2020·江蘇南京、鹽城模擬)下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，錯誤的是(　　) A．動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基中的成分不同 B．動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶 C．動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)，莖尖組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株 D．煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個體，小鼠雜交瘤細胞培養(yǎng)能得到細胞代謝產(chǎn)物 解析：選B。動物細胞培養(yǎng)中要用

52、到胰蛋白酶，而植物組織培養(yǎng)不需要。 2．花藥離體培養(yǎng)是重要的育種手段。下圖是某二倍體植物花藥育種過程的示意圖，下列敘述正確的是(　　) A．為了防止微生物污染，過程①所用的花藥需在70%乙醇中浸泡30 min B．過程②的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細胞分裂素以利于根的分化 C．過程③逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體 D．過程④應將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上 解析：選C。本題主要考查花藥離體培養(yǎng)的相關(guān)知識。為了防止微生物污染，過程①所用的花蕾需在70%乙醇中浸泡30 s，A錯誤；過程②的培養(yǎng)基中，生長素與細胞分裂素的比值適中，且生長素含量高于細胞分裂素時

53、，有利于根的分化，B錯誤；進行過程③的愈傷組織經(jīng)過了秋水仙素的處理，故其分化后的植株中可篩選獲得純合的二倍體，C正確；經(jīng)煉苗后的幼苗是能進行光合作用且能獨立進行代謝的植株，故幼苗的生長基質(zhì)中不用添加蔗糖和多種植物激素，D錯誤。 3．如圖表示核移植與克隆動物的相關(guān)圖解，下列有關(guān)敘述中錯誤的是(　　) A．圖示過程說明高度分化的動物細胞核仍具有發(fā)育的全能性 B．用于核移植的供體細胞①一般都選用傳代10代以內(nèi)的細胞 C．采集的卵母細胞培養(yǎng)到的②時期表示減數(shù)第二次分裂后期 D．選用去核卵母細胞的主要原因是其細胞質(zhì)可使體細胞核的全能性表達 解析：選C。分析題圖，動物細胞通過核移植技術(shù)，讓

54、核基因得以表達，即由細胞核→克隆動物，體現(xiàn)了動物細胞核的全能性，A正確；作為供體，細胞核型應正常，通常傳代10代以內(nèi)的細胞核型都正常，而10代到50代以后的細胞的核型有可能發(fā)生變化，B正確；采集的卵母細胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，C錯誤；選用去核卵母細胞的主要原因是卵母細胞體積大，營養(yǎng)物質(zhì)較豐富，細胞質(zhì)可使體細胞核的全能性得以表達，D正確。 4．(2020·江蘇南通、徐州等六市模擬)2018年1月國際頂尖學術(shù)期刊《Cell》雜志報道，我國科學家以一只雌性獼猴胎兒成纖維細胞為核供體成功克隆兩只獼猴，成為全球首例體細胞克隆靈長類動物。下列相關(guān)敘述錯誤的是(　　) A．這項技術(shù)證明高度分化的

55、動物體細胞具有全能性 B．研究中需要使用成熟卵母細胞作為核移植的受體 C．培育出的兩只雌性獼猴的基因組成幾乎完全相同 D．克隆獼猴的成功為大量培育靈長類遺傳病模型動物提供了可能 解析：選A?？寺〉膬芍猾J猴是以一只雌性獼猴胎兒成纖維細胞為核供體發(fā)育而來的，該過程經(jīng)過了細胞核移植，只能說明分化的動物體細胞的細胞核具有全能性，A錯誤；卵母細胞含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，且體積比較大，容易操作，同時卵細胞的細胞質(zhì)中存在促進核基因表達的物質(zhì)，因此研究中需要使用成熟卵母細胞作為核移植的受體，B正確；克隆的兩只獼猴是以一只雌性獼猴胎兒成纖維細胞為核供體，因此培育出的兩只雌性獼猴的基因組成幾乎完全相同，C正確

56、；克隆獼猴的成功為大量培育靈長類遺傳病模型動物提供了可能，D正確。 5．(不定項)(2020·江蘇南京、鹽城模擬)下列關(guān)于動物細胞工程的敘述，不正確的是(　　) A．用胰蛋白酶處理動物組織后，可用培養(yǎng)液將分散的細胞稀釋制成細胞懸液 B．少數(shù)細胞在連續(xù)培養(yǎng)50代后可獲得不死性，是某些基因選擇性表達的結(jié)果 C．根據(jù)在高倍鏡下觀察到基因突變的比例可推知某化學藥品的毒性 D．PEG誘導動物細胞融合形成的雜交細胞，經(jīng)動物細胞培養(yǎng)能得到優(yōu)良動物個體 解析：選BCD。用胰蛋白酶處理動物組織后，可用培養(yǎng)液將分散的細胞稀釋制成細胞懸液，A正確；少數(shù)細胞在連續(xù)培養(yǎng)50代后可獲得不死性，是某些基因突變的

57、結(jié)果，B錯誤；基因突變在高倍鏡下是觀察不到的，C錯誤；由于動物細胞的全能性受到限制，動物細胞融合形成的雜交細胞不能培育成動物個體，D錯誤。 6．(不定項)(2020·山東威海質(zhì)檢)通過體細胞核移植技術(shù)培育克隆牛的過程中，涉及的操作是(　　) A．用顯微操作技術(shù)處理次級卵母細胞，去除細胞核 B．將精子放入適宜的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，使其獲能 C．用物理或化學方法激活重組細胞，使其完成發(fā)育進程 D．選擇合適時期的胚胎進行移植，使其發(fā)育成完整個體 解析：選ACD。對于受體卵母細胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，然后利用顯微操作技術(shù)去除其細胞核，A符合題意；該技術(shù)需要的是供體細胞核和受體卵母細胞，不

58、需要精子的參與，B不符合題意；需要用物理或化學方法激活核移植產(chǎn)生的重組細胞，使其完成發(fā)育進程，C符合題意；選擇合適時期的胚胎進行移植，使其發(fā)育成完整個體，D符合題意。 7．(不定項)下圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程。下列有關(guān)敘述正確的是(　　) A．實驗小鼠注射的甲能與抗胃癌單克隆抗體特異結(jié)合 B．與骨髓瘤細胞相比，B淋巴細胞中代謝表達更弱 C．利用滅活的病毒、PEG等可誘導細胞融合以獲得乙 D．兩次篩選應用的主要原理相同，但丙中含有不能分泌抗體的細胞 解析：選ABC。實驗小鼠注射的甲為抗原，能與抗胃癌單克隆抗體特異結(jié)合，A正確；骨髓瘤細胞具有無限增殖的特性，B淋巴細胞

59、沒有增殖能力，因此與骨髓瘤細胞相比，B淋巴細胞中代謝較弱，B正確；利用滅活的病毒、PEG等可誘導動物細胞融合，進而獲得乙，C正確；兩次篩選應用的主要原理不同，首次篩選是用特定的選擇培養(yǎng)基，將融合的雜交瘤細胞篩選出來，二次篩選是通過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，將分泌所需抗體的雜交瘤細胞篩選出來，丙中的細胞都能分泌抗體，D錯誤。 8．(2020·安徽安慶五校期初模底)下圖是植物組織培養(yǎng)的簡略示意圖。據(jù)圖回答下列問題： ABC―→D (1)A表示離體的植物組織、器官或細胞，它能被培養(yǎng)成D的根本原因是___________。 (2)在A脫分化形成B的過程中，除需要提供營養(yǎng)外，還需要________的

60、誘導。B表示________組織。構(gòu)成B的是具有分生(分裂)能力的薄壁細胞。 (3)要制造人工種子，應該選用________(填編號)作材料。 (4)從A到B的整個過程，細胞進行分裂的方式是________。 解析：(1)題圖中的A表示外植體(離體的植物組織、器官或細胞)，B表示愈傷組織，C可表示胚狀體(或不定芽、頂芽和腋芽等)，D表示完整植株。外植體經(jīng)植物組織培養(yǎng)形成完整的植株，其根本原因是植物細胞具有全能性。 (2)外植體通過脫分化形成愈傷組織過程中，除需要提供營養(yǎng)外，還需要激素的誘導。(3)人工種子是指以通過植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，通過人工薄膜包裝得

61、到的種子。(4)植物組織培養(yǎng)屬于無性生殖范疇，因此從A到B的整個過程，細胞是通過有絲分裂的方式進行增殖的。 答案：(1)植物細胞具有全能性　(2)激素　愈傷　(3)C (4)有絲分裂 9．(2020·寧夏長慶高級中學高三月考)回答下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的問題： (1)在動物細胞培養(yǎng)過程中，當貼壁細胞分裂生長到細胞表面________時，細胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的________。此時，瓶壁上形成的細胞是________層。要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是____________。 (2)隨著細胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細胞分裂停止，進而出現(xiàn)_____

62、_______的現(xiàn)象；但極少數(shù)細胞可以連續(xù)增殖，其中有些細胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成________細胞，該種細胞的黏著性________，細胞膜表面蛋白質(zhì)(糖蛋白)的量________。 (3)現(xiàn)用某種大分子染料對細胞進行染色時，觀察到死細胞被染色，而活細胞不被染色，原因是________________________________________________________________。 (4)檢查某種有毒物質(zhì)是否能改變細胞染色體的數(shù)目，最好選用分裂____________期的細胞在顯微鏡下進行觀察。 (5)在細胞培養(yǎng)過程中，通常在________條件下保存細胞。因為在

63、這種條件下，細胞中________的活性降低，細胞________速率降低。 (6)給患者移植經(jīng)細胞培養(yǎng)形成的皮膚后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是因為機體把移植的皮膚當作________進行攻擊。 解析：(1)細胞接觸抑制是指細胞表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖?；谏鲜鎏匦裕勘谏闲纬傻募毎菃螌优帕械?。需要時可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶將貼壁的細胞從瓶壁上分離下來。(2)隨著細胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細胞停止分裂，出現(xiàn)衰老甚至死亡現(xiàn)象，極少數(shù)細胞可以連續(xù)增殖，其中有些細胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成不死性細胞。該種細胞由于細胞膜表面的糖蛋白減少，其黏著性降低。(3)活細胞的細胞膜具有選擇透過性

64、，大分子染料不能通過，故死細胞被染色，而活細胞不被染色。(4)有絲分裂中期時染色體的著絲點排列在赤道板上，染色體形態(tài)固定、數(shù)目清晰，是觀察染色體數(shù)目的最佳時期。(5)在細胞培養(yǎng)過程中，通常在冷凍(或超低溫、液氮)條件下保存細胞。因為在這種條件下，細胞中酶的活性降低，細胞新陳代謝的速率降低。(6)機體把移植的皮膚當作抗原攻擊，會發(fā)生排斥現(xiàn)象。 答案：(1)相互接觸　接觸抑制　單(或一)　胰蛋白酶(或膠原蛋白酶) (2)衰老甚至死亡　不死性　降低　減少 (3)活細胞的細胞膜具有選擇透過性，大分子染料不能進入活細胞內(nèi)(或死細胞的細胞膜喪失了選擇透過性，大分子染料能夠進入死細胞內(nèi)而著色) (4

65、)中 (5)冷凍(或超低溫、液氮)　酶　新陳代謝 (6)抗原 10．(2020·江蘇泰州中學月考)為培育出含β-胡蘿卜素的“黃金大米”，科研人員提出以下兩套培育方案。請分析回答下列問題： 甲方案： 乙方案： (1)甲方案中，β-胡蘿卜素基因能在玉米和水稻體內(nèi)出現(xiàn)相同表達結(jié)果的原因是________________________________________________________________________。 若研究人員已知β-胡蘿卜素基因序列，可采用________法獲得β-胡蘿卜素基因。②過程中可用____________技術(shù)檢測水稻體細胞DNA上是否

66、插入了β-胡蘿卜素基因。 (2)乙方案中，在體細胞雜交前需要用酶除去細胞壁獲得原生質(zhì)體，誘導體細胞融合的化學試劑常用________。通過⑤獲得“黃金大米”幼苗需要經(jīng)過________________兩個過程，依據(jù)的原理是_____________________________________________________。 在培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基中除了添加營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加____________。 (3)與傳統(tǒng)育種方法相比，甲、乙兩套方案共同的優(yōu)點是______________________。 解析：(1)自然界中所有生物共用一套遺傳密碼，因此一種生物的基因能在另一種生物體內(nèi)表達；在目的基因序列已知的情況下，可采用人工合成的方法獲得目的基因。檢測目的基因是否插入受體細胞可用DNA分子雜交技術(shù)。(2)誘導植物原生質(zhì)體融合常用的化學試劑是聚乙二醇。植物組織培養(yǎng)過程中將雜交細胞培育成雜交植株需要使用植物激素，該技術(shù)包括脫分化和再分化兩個過程，依據(jù)的原理是植物細胞的全能性。在此過程中，除了在培養(yǎng)基中添加營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加植物激素(生長素和細胞分裂素)。(3)與傳統(tǒng)育種方