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2022年高三生物總復(fù)習(xí) 13-3DNA的粗提取與鑒定學(xué)案

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1、2022年高三生物總復(fù)習(xí) 13-3DNA的粗提取與鑒定學(xué)案 【具體要求】 具體內(nèi)容 考綱 學(xué)習(xí)要求 嘗試對植物或動物組織中的DNA進行粗提取 A 理解實驗?zāi)康?、原理、方法和操作步驟,掌握相關(guān)的操作技能,并能將實驗涉及的方法和技能進行綜合運用。 了解DNA的物理化學(xué)性質(zhì) A 知道生物大分子的性質(zhì)及一般的提取方法,明確DNA的粗提取和鑒定方法 理解DNA粗提取以及DNA鑒定的原理 B 能對實驗現(xiàn)象和結(jié)果進行解釋、分析和處理。能對實驗方案做出恰當?shù)脑u價和修訂。 【基礎(chǔ)知識】 一、原理 提取生物大分子的基本思路是

2、 。對于DNA的粗提取而言,就是要利用 、 等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,提取DNA,去除其他成分。 1)DNA的溶解性 DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的 中溶解度不同,利用這一特點,選擇適當?shù)柠}濃度就能使 充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達到分離目的。 此外,DNA不溶于 溶液,但是細胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理,可以將DNA與蛋白質(zhì)進一步的分離?!舅伎肌浚喝绾斡米鴺吮硎綝NA隨NaCl溶液變化的溶解性曲線? 2)DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性

3、蛋白酶能水解 ,但是對 沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60—80oC的高溫,而DNA在 以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解 ,但對DNA沒有影響。 3)DNA的鑒定 在 條件下,DNA遇 會被染成 色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。 二、實驗步驟 1)實驗材料的選取 凡是含有 的生物材料都可以考慮,但是使用 的生物組織,成功的可能性更大。 【思考】在下面的生物材料中選取適合的實驗材料: 魚卵、豬肝、菜花(花椰菜)、香蕉、雞血、哺乳動物的紅

4、細胞、獼猴桃、洋蔥、豌豆、菠菜、在液體培養(yǎng)基的大腸桿菌 2)破碎細胞,獲取含DNA的濾液 動物細胞的破碎比較容易,以雞血細胞為例,在雞血細胞液中加入一定量的 ,同時用 攪拌,過濾后收集濾液即可。 【思考】:如果實驗材料是植物細胞,需要先用 溶解細胞膜。例如,提取洋蔥的DNA時,在切碎的洋蔥中加入一定的 和 ,進行充分的攪拌和研磨,過濾后收集研磨液。 3)去除濾液中的雜質(zhì) 【思考】用高鹽濃度的溶液和用低鹽濃度的NaC溶液為什么能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)? 4)DNA的析出與鑒定 將處理后的溶液過濾

5、,加入與濾液體積 、冷卻的 ,靜置 ,溶液中會出現(xiàn) ,這就是粗提取的DNA。用玻璃棒 攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取上面的水分。 DNA溶解在2 mol/l的NaCl溶液中 + 二苯胺試劑 溶液顏色變 。 【思考】鑒定粗提取的DNA為什么要進行對照實驗? 三.【典型例題】 1.(09通州)“DNA的粗提取和鑒定”實驗的敘述,正確的是 A.利用DNA能溶于酒精溶液,而蛋白質(zhì)不溶于酒精溶液,可將DNA與蛋白質(zhì)分離 B.利用高溫能使蛋白質(zhì)變性,卻對DNA沒有影響的特性,可將DNA與蛋白質(zhì)分離

6、 C.在DNA濾液中加入一定量蛋白酶,可將DNA與蛋白質(zhì)分離 D.在溶有DNA的2mol/L氯化鈉溶液中緩緩加入蒸餾水,攪拌后取濾液進行以后實驗 2.(09南通)下列對“DNA的粗提取和鑒定”實驗的敘述,正確的是 A.利用DNA能溶于酒精溶液,而蛋白質(zhì)不溶于酒精溶液,可將DNA與蛋白質(zhì)分離 B.利用85℃的高溫能使蛋白質(zhì)變性,卻對DNA沒有影響的特性,可將DNA與蛋白質(zhì)分離 C.利用DNA在0.14 mol·L-1NaCl溶液中溶解度最大的特點,可將DNA與雜質(zhì)分離 D.在DNA濾液中加入嫩肉粉,通過木瓜蛋白酶的作用,可將DNA與蛋白質(zhì)分離 3.(09揚州)下列關(guān)于 D

7、NA粗提取和鑒定實驗的敘述中,正確的是 A.選材:雞血,因為雞血紅細胞有細胞核,其它動物紅細胞沒有細胞核 B.DNA粗提?。翰煌瑵舛鹊腘aCl溶液,因為DNA在其中溶解度不同 C.提純:酒精,因為DNA溶于酒精,蛋白質(zhì)不溶于酒精 D.鑒定:二苯胺試劑,因為DNA溶液加入二苯胺試劑即呈藍色 4.下列操作可以達到目的的選項是 選項 操作 目的 A 溶解海藻酸鈉時用大火加熱 海藻酸鈉可以快速溶解 B 將裝有蛋白質(zhì)粗制品的透析袋(玻璃紙制成)放入透析液中 蛋白質(zhì)與其他小分子化合物分離 C 在DNA粗提取實驗中,雞血中加入蒸餾水 稀釋血液,防止凝固 D 洋

8、蔥根尖解離后漂洗 使細胞分散,有利觀察 5.(多選 09蘇北四市)“DNA的粗提取和鑒定”實驗的敘述,不正確的是 A.利用DNA能溶于酒精溶液,而蛋白質(zhì)不溶于酒精溶液,可將DNA與蛋白質(zhì)分離 B.利用高溫能使蛋白質(zhì)變性,卻對DNA沒有影響的特性,可將DNA與蛋白質(zhì)分離 C.在DNA濾液中加入一定量蛋白酶,可將DNA與蛋白質(zhì)分離 D.在溶有DNA的2mol/L氯化鈉溶液中緩緩加入蒸餾水,攪拌后取濾液進行以后實驗 6.(09興化)某同學(xué)以菜花為實驗材料,進行“DNA的粗提取與鑒定”實驗,步驟如下: 步驟一:稱取30g菜花,去梗取花,切碎。 步驟二:將碎菜花放入研缽中,倒入10m

9、L研磨液,充分研磨10min。 步驟三:在漏斗中墊上濾紙,將菜花研磨液過濾到燒杯中。在冰箱中放置幾分鐘,取上清液。 步驟四:將一倍體積的上清液倒入兩倍體積的某溶液中,并用玻璃棒緩緩、輕輕地攪拌溶液。將絮狀物纏繞在玻璃棒上。 請回答下列問題: (1)請指出并改正該同學(xué)實驗操作中的錯誤:___________________。 (2)步驟二的目的是使菜花細胞破碎,釋放DNA,加入研磨液的主要成分有____和___等。 (3)如要使步驟三所得上清液中雜質(zhì)減少,可進行______操作后再置于冰箱。 (4)步驟四中所用兩倍體積的某溶液為_________________,需“緩緩、輕輕地”攪拌溶液的原因是 _______ _______。 (5)簡要說明鑒定步驟四所得絮狀物是DNA的基本實驗設(shè)計思路:____________________ (1)濾紙應(yīng)改為紗布(或尼龍布) (2)洗滌劑 NaCl (3)離心 (4)體積分數(shù)為95%的冷酒精 防止DNA斷裂 (5)將絮狀物溶于0.015mol/L(或2mol/L)的NaCl溶液中,加入二苯胺試劑,沸水浴加熱,觀察顏色變化,同時用相應(yīng)濃度的NaCl做對照實驗。(2分)

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