(江蘇專版)2022年高考生物一輪復(fù)習(xí) 第4講 DNA的粗提取與鑒定講義(含解析)(選修1 )
《(江蘇專版)2022年高考生物一輪復(fù)習(xí) 第4講 DNA的粗提取與鑒定講義(含解析)(選修1 )》由會員分享,可在線閱讀,更多相關(guān)《(江蘇專版)2022年高考生物一輪復(fù)習(xí) 第4講 DNA的粗提取與鑒定講義(含解析)(選修1 )(11頁珍藏版)》請?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。
1、 (江蘇專版)2022年高考生物一輪復(fù)習(xí) 第4講 DNA的粗提取與鑒定講義(含解析)(選修1 ) 1.判斷下列敘述的正誤 (1)用不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì)(√) (2)提取DNA時(shí),如果沒有雞血材料,可用豬血代替(×) (3)在DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中,用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料,其實(shí)驗(yàn)操作步驟相同(×) (4)洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度(×) (5)將制備的含有DNA的濾液加入60~75 ℃的恒溫水浴箱中保溫10~15 min,可以將DNA析出(×) (6)實(shí)驗(yàn)中兩次使用蒸餾水的目的不同(√) (7)在DN
2、A的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中,將絲狀物溶解在2 mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色(×) 2.填空識記實(shí)驗(yàn)原理 (1)粗提取原理:DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同,且不溶于冷酒精。 ①DNA與蛋白質(zhì)在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同。 溶解規(guī)律 2 mol/L NaCl溶液 0.14 mol/L NaCl溶液 DNA 溶解 析出 蛋白質(zhì) NaCl溶液物質(zhì)的量濃度從2 mol/L逐漸降低的過程中,溶解度逐漸增大 部分發(fā)生鹽析沉淀 溶解 ②DNA與雜質(zhì)對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。 ③DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶
3、于酒精,利用這一原理可將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。 (2)鑒定原理: DNA+二苯胺試劑藍(lán)色。 3.填空掌握操作流程 4.據(jù)圖回答①~④操作的目的分別是什么 ①_____________________________________________________________________, ②_________________________________________________________________, ③_________________________________________________________________
4、_______, ④________________________________________________________________________。 提示:①是使雞血細(xì)胞吸水漲破釋放出核物質(zhì);②是析出DNA,去除溶于酒精的雜質(zhì);③是使DNA溶解在2 mol/L NaCl溶液中;④是稀釋NaCl溶液使其濃度接近0.14 mol/L,去除溶于低濃度NaCl溶液的雜質(zhì)。 [題組練透·過考點(diǎn)] 1.(2014·江蘇高考)下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)敘述,錯(cuò)誤的是( ) A.酵母和菜花均可作為提取DNA的材料 B.DNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸餾
5、水 C.向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?,可見玻棒上有白色絮狀? D.DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱,冷卻后變藍(lán) 解析:選C 原則上含DNA的生物材料都可用來提取DNA,只是選用DNA含量高的生物組織,成功的可能性更大;DNA在2 mol/L NaCl溶液和蒸餾水中溶解度都較大;向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?,雞血細(xì)胞會吸水破裂,但在蒸餾水中不會析出DNA;DNA溶液加入二苯胺試劑后需沸水浴加熱,待冷卻后溶液變藍(lán)。 2.(2015·江蘇高考,多選)下圖1、2分別為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中部分操作步驟示意圖,下列敘述正確的是( ) A.圖1、2中加入蒸餾水稀釋的目的相同 B.圖
6、1中完成過濾之后保留濾液 C.圖2中完成過濾之后棄去濾液 D.在圖1雞血細(xì)胞液中加入少許嫩肉粉有助于去除雜質(zhì) 解析:選BCD 圖1中加入蒸餾水的目的是使雞血細(xì)胞吸水漲破,圖2中加入蒸餾水的目的是調(diào)節(jié)鹽溶液的濃度,使DNA析出。圖1中含有DNA的核物質(zhì)位于濾液中,因此完成過濾后應(yīng)保留濾液。圖2中析出的DNA在紗布上,因此完成過濾后應(yīng)棄去濾液。嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶,能催化雜質(zhì)蛋白的分解。 [歸納拓展] 1.DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中的三個(gè)注意點(diǎn) (1)本實(shí)驗(yàn)不能用哺乳動物成熟紅細(xì)胞作實(shí)驗(yàn)材料,原因是哺乳動物成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核。 (2)因DNA容易被玻璃容器吸附,實(shí)驗(yàn)過程中最好使用塑料的燒杯
7、和試管,減少提取過程中DNA的損失。 (3)每次用玻璃棒攪拌時(shí)都要沿同一方向,防止打碎DNA分子。 2.DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中的“2、3、4” (1)加蒸餾水2次: ①加到雞血細(xì)胞液中,使血細(xì)胞吸水漲破; ②加到含DNA的2 mol/L的NaCl溶液中,使NaCl溶液的濃度下降到0.14 mol/L,使DNA析出。 (2)用紗布過濾3次: ①過濾血細(xì)胞破裂液,得到含細(xì)胞核物質(zhì)的濾液; ②濾取0.14 mol/L的NaCl溶液中析出的DNA(黏稠物); ③過濾溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液。 (3)用NaCl溶液4次: ①加2 mol/L的NaCl溶液,溶解提
8、取的細(xì)胞核物質(zhì); ②用0.14 mol/L的NaCl溶液使DNA析出; ③用2 mol/L的NaCl溶液,溶解濾取的DNA黏稠物; ④用2 mol/L的NaCl溶液,溶解絲狀物用于鑒定DNA。 [課堂鞏固練—小試身手] 1.(2013·江蘇高考)某同學(xué)用洋蔥進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn),操作錯(cuò)誤的是 ( ) A.加入洗滌劑后用力進(jìn)行快速、充分的研磨 B.用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNA C.加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌 D.加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱 解析:選A 加入洗滌劑后研磨動作要輕緩、柔和,否則會產(chǎn)生許多泡沫,不利于后續(xù)步驟的操作;蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì)
9、,因此能起到純化DNA的目的;加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí),動作要輕緩,以免引起DNA分子的斷裂,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀;DNA可與二苯胺試劑在沸水浴條件下作用顯藍(lán)色。 2.下列關(guān)于“DNA粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是( ) A.酵母菌、菜花和豬的成熟紅細(xì)胞都可作為提取DNA的材料 B.在酒精溶液中,某些蛋白質(zhì)的溶解度比DNA大 C.在研磨植物細(xì)胞時(shí)加入洗滌劑是為了溶解DNA D.在50~60 ℃的水浴中,DNA遇二苯胺試劑后即呈藍(lán)色 解析:選B 豬的成熟紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和眾多細(xì)胞器,不含DNA,不能作為提取DNA的材料;某些蛋白質(zhì)溶于酒精溶液,而DNA不溶;研磨植物細(xì)
10、胞時(shí)加入洗滌劑是為了瓦解細(xì)胞膜;沸水浴中,DNA遇二苯胺試劑呈藍(lán)色。 3.下面為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的一些重要操作示意圖,據(jù)圖回答下列有關(guān)該實(shí)驗(yàn)的問題: (1)正確的操作順序是______________________________。 (2)上圖C、E步驟都加入蒸餾水,但其目的不同,分別是____________和_________。 (3)上圖A步驟中所用酒精必須經(jīng)過____________才能使用,該步驟的目的是______________________________。 (4)為鑒定A中所得到的絲狀物的主要成分為DNA,可滴加____________試劑,沸水
11、浴,如果出現(xiàn)________,則該絲狀物的主要成分為DNA。 解析:兩次加入蒸餾水的作用:第一次是使雞血細(xì)胞吸水漲破,DNA從細(xì)胞中釋放出來進(jìn)入濾液;第二次是使溶解于物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液中的DNA析出,與雜質(zhì)分離。本題還涉及DNA的鑒定,DNA可在沸水浴條件下與二苯胺試劑作用,被染成藍(lán)色。 答案:(1)C→B→E→D→A (2)加速血細(xì)胞的破裂 降低NaCl溶液的濃度,使DNA析出 (3)充分冷卻 提取含雜質(zhì)少的DNA (4)二苯胺 藍(lán)色 [課下模擬練—自我檢測] 一、選擇題 1.鑒定DNA的試劑是( ) A.斐林試劑 B.蘇丹Ⅲ染液 C.雙縮脲
12、試劑 D.二苯胺試劑 解析:選D 鑒定DNA用的試劑是二苯胺,蘇丹Ⅲ染液用于鑒定脂肪,斐林試劑用于鑒定可溶性還原糖,雙縮脲試劑用于鑒定蛋白質(zhì)。 2.在提取DNA的過程中,最好使用塑料試管和燒杯,目的是( ) A.不易破碎 B.減少提取過程中DNA的損失 C.增加DNA的含量 D.容易刷洗 解析:選B DNA易被玻璃器皿吸附,使用塑料試管和燒杯,可以減少DNA的損失。 3.(2018·江蘇高考)關(guān)于還原糖、蛋白質(zhì)和DNA的鑒定實(shí)驗(yàn),下列敘述正確的是( ) A.在甘蔗莖的組織樣液中加入雙縮脲試劑,溫水浴后液體由藍(lán)色變成磚紅色 B.在大豆種子勻漿液中加入斐林試劑,液體由藍(lán)色
13、變成紫色 C.提取DNA時(shí),在切碎的洋蔥中加入適量洗滌劑和食鹽,充分研磨,過濾并棄去濾液 D.將DNA粗提物溶解在2 mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺試劑,沸水浴后液體由無色變成藍(lán)色 解析:選D 甘蔗莖的組織樣液中含有大量的蔗糖,蔗糖屬于非還原性糖,與斐林試劑在50~65 ℃的水浴加熱條件下不會產(chǎn)生磚紅色沉淀;大豆種子的勻漿液中含有大量的蛋白質(zhì),鑒定蛋白質(zhì)時(shí)應(yīng)使用雙縮脲試劑,雙縮脲試劑在常溫下能與蛋白質(zhì)發(fā)生反應(yīng),生成紫色的絡(luò)合物;提取DNA時(shí),植物細(xì)胞需要先用洗滌劑瓦解細(xì)胞膜,在切碎的洋蔥中加入適量的洗滌劑和食鹽,進(jìn)行充分的研磨,過濾后收集濾液;在沸水浴條件下,DNA與二苯胺試劑反
14、應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色。 4.下列有關(guān)DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是( ) A.取材:雞血細(xì)胞。原因:有細(xì)胞核,其他動物的血細(xì)胞都沒有細(xì)胞核 B.粗提?。翰煌瑵舛鹊腘aCl溶液。原因:DNA在其中的溶解度不同 C.提純:95%的冷酒精。原因:DNA溶于酒精,蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不溶于酒精 D.鑒定:二苯胺試劑。原因:DNA溶液加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色 解析:選B 除了哺乳動物成熟的紅細(xì)胞,其他動物的血細(xì)胞都有細(xì)胞核。DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同,從而粗提取DNA。DNA不溶于酒精,蛋白質(zhì)等雜質(zhì)溶于酒精,進(jìn)而提純DNA。DNA溶液加入二苯胺試劑后需沸水浴加熱才會呈藍(lán)色。 5.
15、在DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中,將獲得的含有DNA的黏稠物分別按下表處理3次,則DNA主要集中在標(biāo)號( ) 操作 黏稠物 濾液 2 mol·L-1的NaCl溶液攪拌過濾 ① ② 0.14 mol·L-1的NaCl溶液攪拌過濾 ③ ④ 95%的冷酒精攪拌過濾 ⑤ ⑥ A.①③⑤ B.②③⑤ C.①④⑥ D.②④⑥ 解析:選B DNA在2 mol·L-1的NaCl溶液中溶解度大,過濾后DNA存在于濾液中;DNA在0.14 mol·L-1的NaCl溶液中溶解度低,攪拌過濾后存在于黏稠物中;DNA不溶于95%的冷酒精,攪拌過濾后存在于黏稠物中。 6.如圖是“DNA粗提
16、取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中的兩個(gè)操作步驟示意圖,下列相關(guān)敘述正確的是( ) A.圖1中溶液a是0.14 mol·L-1的NaCl溶液 B.圖1所示操作的原理是DNA能溶于酒精,而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不溶 C.圖2所示實(shí)驗(yàn)操作中有一處明顯錯(cuò)誤,可能導(dǎo)致試管2中藍(lán)色變化不明顯 D.圖2試管1的作用是證明2 mol·L-1 NaCl溶液遇二苯胺出現(xiàn)藍(lán)色 解析:選C 圖1中是將絲狀物溶解,溶液a是2 mol·L-1的NaCl溶液;加入冷卻的酒精的目的是除雜,原理是DNA不溶于冷酒精,而雜質(zhì)蛋白能溶于酒精;圖2操作中的錯(cuò)誤是試管2中未將DNA溶于2 mol·L-1的NaCl溶液中,可能導(dǎo)致試管2藍(lán)色變化不
17、明顯;圖2試管1的作用是證明2 mol·L-1NaCl溶液遇二苯胺不會出現(xiàn)藍(lán)色。 7.(2019·南通二模)下列是“肝臟細(xì)胞DNA粗提取”實(shí)驗(yàn)的兩個(gè)關(guān)鍵操作步驟,相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( ) A.步驟1中,加入檸檬酸鈉緩沖液的目的是維持pH的穩(wěn)定 B.步驟1中,冰浴處理的主要原理是低溫下DNA水解酶容易變性 C.步驟2中,異戊醇的作用可能是使與DNA結(jié)合的蛋白質(zhì)因變性而沉淀 D.步驟2中,離心后應(yīng)取上清液,因?yàn)镈NA在2mol·L-1NaCl溶液中溶解度比較大 解析:選B 步驟1中,加入檸檬酸鈉緩沖液的目的是維持pH的穩(wěn)定;步驟1中,冰浴處理的主要原理是降低DNA的溶解度,使DNA
18、析出;步驟2中,異戊醇的作用可能是使與DNA結(jié)合的蛋白質(zhì)因變性而沉淀;DNA在2 mol·L-1的NaCl溶液中溶解度最大,因此加固體NaCl使溶液濃度達(dá)到2 mol·L-1后再離心過濾取上清液。 8.(2019·淮陰、海門四校聯(lián)考)關(guān)于DNA的實(shí)驗(yàn),敘述正確的是( ) A.DNA溶液與二苯胺試劑混合,沸水浴后生成藍(lán)色產(chǎn)物 B.PCR的每個(gè)循環(huán)一般依次經(jīng)過變性→延伸→復(fù)性三步 C.用兔的成熟紅細(xì)胞可提取DNA D.用甲基綠吡羅紅將細(xì)胞染色,細(xì)胞質(zhì)呈綠色,細(xì)胞核呈紅色 解析:選A DNA溶液與二苯胺試劑混合,沸水浴后生成藍(lán)色產(chǎn)物;PCR的每個(gè)循環(huán)一般依次經(jīng)過變性→復(fù)性→延伸三步;兔
19、的成熟紅細(xì)胞中沒有DNA;用甲基綠吡羅紅試劑對人的口腔上皮細(xì)胞染色,細(xì)胞核呈綠色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色。 9.如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中部分操作步驟示意圖,下列有關(guān)敘述正確的是( ) A.DNA在常溫下遇到二苯胺會被染成藍(lán)色 B.圖中加入蒸餾水的目的是稀釋鹽溶液使DNA析出 C.DNA在2 mol/L的鹽溶液中溶解度比較小 D.加入酒精后需用玻璃棒快速來回?cái)嚢? 解析:選B DNA溶液加入二苯胺試劑,在沸水浴加熱的條件下會變藍(lán);在DNA濃鹽溶液中加入蒸餾水的目的是稀釋鹽溶液,降低DNA的溶解度,使DNA析出;DNA在2 mol/L的鹽溶液中溶解度比較大;加入酒精后需用玻璃棒攪
20、拌,動作要輕緩,以免加劇DNA分子斷裂,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。 10.若從植物細(xì)胞中提取DNA,發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)效果不好,如看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定時(shí)不顯示顏色反應(yīng)等,其不可能的原因是( ) A.植物細(xì)胞中DNA含量低 B.研磨不充分 C.過濾不充分 D.95%冷酒精的量過少 解析:選A 研磨不充分、過濾不充分均會使細(xì)胞核內(nèi)的DNA釋放不完全,提取的DNA量變少;若用于沉淀DNA的酒精量過少,也會導(dǎo)致DNA的沉淀量變少。 11.“DNA粗提取”實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)盡可能避免DNA斷裂和降解。下列相關(guān)操作正確的是( ) A.以菜花為材料進(jìn)行研磨時(shí),可以適當(dāng)加熱以促進(jìn)DNA溶解
21、 B.向DNA溶液中迅速加入蒸餾水,使DNA快速析出 C.將絲狀物溶解到2 mol·L-1NaCl溶液中后,加水析出 D.向DNA溶液中加入冷卻的酒精并沿同一方向緩慢攪拌 解析:選D 以菜花為材料進(jìn)行研磨時(shí)要加洗滌劑和食鹽,不能加熱,否則DNA水解酶活性會上升,會加速分解DNA;向DNA溶液中加蒸餾水要緩慢,使DNA充分析出;將絲狀物溶解到2 mol·L-1 NaCl溶液中的目的是為了進(jìn)行鑒定,應(yīng)該加入二苯胺試劑,不是加水;向DNA溶液中加入冷酒精并沿同一方向緩慢攪拌析出DNA,防止DNA斷裂。 12.(2019·鹽城模擬)下列有關(guān)利用新鮮的菜花進(jìn)行DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的
22、是( ) A.向菜花組織中加入蒸餾水并攪拌可釋放核DNA B.加入洗滌劑和食鹽的作用分別是瓦解細(xì)胞膜和溶解DNA C.利用DNA不溶于冷酒精的原理可進(jìn)一步提純DNA D.含DNA的氯化鈉溶液與二苯胺在常溫下混合呈藍(lán)色 解析:選BC 菜花細(xì)胞為植物細(xì)胞,有細(xì)胞壁保護(hù),因此加蒸餾水不會吸水漲破。加入洗滌劑的作用是瓦解細(xì)胞膜,加入食鹽的作用是溶解DNA。DNA在冷酒精中的溶解度很低,蛋白質(zhì)在冷酒精中的溶解度較高,因此可以利用DNA不溶于冷酒精的原理進(jìn)一步提純DNA。含DNA的氯化鈉溶液與二苯胺在沸水浴下混合呈藍(lán)色。 13.(多選)如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中的一些操作過程。相關(guān)
23、敘述正確的是( ) A.實(shí)驗(yàn)過程中正確的操作順序是③→②→⑤→④→① B.實(shí)驗(yàn)⑤步驟中加入蒸餾水直到溶液中有絲狀物析出為止 C.若改用植物材料需先用洗滌劑破壞細(xì)胞壁再吸水漲破 D.將粗提取的DNA溶解在2 mol/L的NaCl中加入二苯胺試劑加熱鑒定 解析:選AD 分析題圖,①表示用95%的酒精對DNA進(jìn)行進(jìn)一步純化;③②表示破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液;④⑤表示去除濾液中的雜質(zhì),所以實(shí)驗(yàn)過程中正確的操作順序是③→②→⑤→④→①;實(shí)驗(yàn)⑤步驟中加入蒸餾水直到析出的絲狀物不再增加為止;若改用植物材料需研磨破壞細(xì)胞壁,同時(shí)加入洗滌劑瓦解細(xì)胞膜;可以將粗提取的DNA溶解在2 mol/L
24、的NaCl溶液中,然后加入二苯胺試劑進(jìn)行加熱鑒定。 14.(多選)研究人員比較了不同貯藏條件對棉葉DNA純度及提取率(提取率越高,獲得的DNA越多)的影響,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見下圖。下列有關(guān)敘述正確是( ) A.提純DNA時(shí)可加入酒精去除不溶的蛋白質(zhì)、酚類等物質(zhì) B.新鮮棉葉提取的DNA純度最高,提取DNA的量也最多 C.木瓜蛋白酶和不同濃度的NaCl溶液均可用于提純DNA D.用二苯胺試劑鑒定,顏色最深的是冷凍3 d處理后提取的DNA 解析:選CD 提純DNA時(shí)可加入酒精去除可溶的蛋白質(zhì)、酚類等物質(zhì);新鮮棉葉提取的DNA純度最高,冷凍3 d時(shí)提取DNA的量最多,二苯胺試劑鑒定顏色最深
25、;木瓜蛋白酶可以去除蛋白質(zhì),不同濃度的NaCl溶液可去除與DNA溶解度不同的雜質(zhì)。 二、非選擇題 15.(2019·無錫檢測)血液作為一種常見的臨床檢測材料,如何從血液中快速、高效地分離和提取基因組DNA,對于臨床血液檢驗(yàn)與分析非常重要,科研人員對比分析了超聲波處理法(方法A)、高鹽法(方法B)、改良高鹽法(方法C)等三種快速提取大鼠全血基因組DNA的方法,實(shí)驗(yàn)過程如圖,請分析回答: (1)多組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn),用大鼠全血為實(shí)驗(yàn)材料提取的DNA含量總是很少,原因是_______________________________________________________________
26、_________。 (2)常規(guī)細(xì)胞破碎方法是_______________________________________________。 三種實(shí)驗(yàn)方法所需時(shí)間均較短,主要在樣品處理和細(xì)胞破碎環(huán)節(jié)進(jìn)行了優(yōu)化,就三種方法而言,細(xì)胞破碎較理想的為______________。 (3)方法B得到的溶液中RNA含量高于DNA,分析原因是蛋白酶K的加入可能抑制了________的活性。 (4)步驟②中加入NaCl的目的是__________________________________________, 步驟③中加入異丙醇的作用是__________。 (5)得到含DNA的溶液后進(jìn)行鑒
27、定,需向其中加入____________,沸水浴加熱,________后變藍(lán)。 解析:(1)因哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中無細(xì)胞核和線粒體,也就沒有DNA,因此用大鼠全血為實(shí)驗(yàn)材料提取的DNA含量總是很少。(2)常規(guī)細(xì)胞破碎方法是加入蒸餾水,使細(xì)胞吸水漲破。與方法A、B相比,方法C破碎細(xì)胞的效率高、成本低,是細(xì)胞破碎較理想的方法。(3)方法B得到的溶液中RNA含量高于DNA,其原因可能是蛋白酶K的加入抑制了RNA酶的活性。(4)步驟②中加入NaCl的目的是溶解DNA,步驟③中加入異丙醇的作用是使DNA析出。(5)得到含DNA的溶液后進(jìn)行鑒定,需向其中加入二苯胺,沸水浴加熱,冷卻后變藍(lán)。 答案:(
28、1)哺乳動物紅細(xì)胞中無細(xì)胞核和線粒體 (2)加入蒸餾水,使細(xì)胞吸水漲破 方法C (3)RNA酶 (4)溶解DNA 使DNA析出 (5)二苯胺 冷卻 16.(2019·南通考前卷)CTAB法和SDS法是提取DNA的常用方法,CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分,SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB能破壞膜結(jié)構(gòu),使蛋白質(zhì)變性,提高DNA在提取液中的溶解度;SDS能破壞膜結(jié)構(gòu),使蛋白質(zhì)變性;EDTA能螯合Mg2+、Mn2+,抑制DNA酶的活性。某科研小組為了尋找提取臘梅DNA的優(yōu)良方法,比較了兩種提取DNA的方法,主要操作如下: 實(shí)驗(yàn)測定結(jié)果如下(表中OD260反映溶液中核酸
29、的濃度,OD280反映溶液中蛋白質(zhì)的濃度。理論上,純DNA溶液的OD260/OD280為1.800,純RNA溶液的OD260/OD280為2.000)。 CTAB SDS OD260 OD280 OD260/ OD280 OD260 OD280 OD260 /OD280 0.033 0.018 1.833 0.006 0.005 1.200 請回答下列問題: (1)與常溫下研磨相比,液氮中研磨的優(yōu)點(diǎn)是________________________________;CTAB法和SDS法提取液中都加入EDTA的目的是______________________
30、________。 (2)氯仿-異戊醇密度均大于水且不溶于水,DNA不溶于氯仿-異戊醇,蛋白質(zhì)等雜質(zhì)可溶于氯仿-異戊醇,實(shí)驗(yàn)過程中加入氯仿-異戊醇離心后,應(yīng)取①________加異丙醇(異丙醇與水互溶)并離心進(jìn)行純化,利用異丙醇溶液純化DNA的原理是_____________。 (3)兩種方法中,________法提取的DNA較多,其可能原因是_____________________。 (4)兩種方法中,________法提取的DNA純度較低,其含有的主要雜質(zhì)是________。 解析:(1)液氮溫度低,在液氮中研磨,DNA酶活性低,可以降低DNA的分解,使研磨更充分;EDTA能螯合
31、Mg2+、Mn2+,抑制DNA酶的活性,減少DNA水解,提高DNA的完整性和總量。(2)氯仿—異戊醇密度均大于水且不溶于水,DNA不溶于氯仿—異戊醇,離心后,氯仿—異戊醇位于試管的底部,DNA溶于上清液中,所以離心后應(yīng)取上清液;含DNA的上清液中加異丙醇離心后取的是沉淀物,說明DNA不溶于異丙醇,而雜質(zhì)能溶于異丙醇。(3)從表中數(shù)據(jù)可知,CTAB法提取的DNA的OD260是0.033,而SDS法提取的DNA的OD260是0.006,0.033>0.006,所以CTAB法提取的DNA較多,根據(jù)CTAB和SDS兩種試劑作用的區(qū)別,可知CTAB提高了DNA在提取液中的溶解度,從而可提取出更多的DNA
32、。(4)從表中數(shù)據(jù)可知,CTAB法提取的DNA的OD260/OD280是1.833,而SDS法提取的DNA的OD260/OD280是1.200,與1.833相比,1.200偏離1.800更多,所以SDS法提取的DNA純度較低,純RNA溶液的OD260/OD280為2.000,比純DNA溶液的OD260/OD280大,而1.200比1.800小,所以主要雜質(zhì)不是RNA,而是蛋白質(zhì)。 答案:(1)研磨充分,低溫抑制酶活性,降低DNA的分解 減少DNA水解,提高DNA的完整性和總量 (2)上清液 DNA不溶于異丙醇,而雜質(zhì)能溶于異丙醇 (3)CTAB CTAB提高了DNA在提取液中的溶解度,從而能提取出更多的DNA (4)SDS 蛋白質(zhì)
- 溫馨提示:
1: 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
2: 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
3.本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
5. 裝配圖網(wǎng)僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 110中國人民警察節(jié)(筑牢忠誠警魂感受別樣警彩)
- 2025正字當(dāng)頭廉字入心爭當(dāng)公安隊(duì)伍鐵軍
- XX國企干部警示教育片觀后感筑牢信仰之基堅(jiān)守廉潔底線
- 2025做擔(dān)當(dāng)時(shí)代大任的中國青年P(guān)PT青年思想教育微黨課
- 2025新年工作部署會圍繞六個(gè)干字提要求
- XX地區(qū)中小學(xué)期末考試經(jīng)驗(yàn)總結(jié)(認(rèn)真復(fù)習(xí)輕松應(yīng)考)
- 支部書記上黨課筑牢清廉信念為高質(zhì)量發(fā)展?fàn)I造風(fēng)清氣正的環(huán)境
- 冬季消防安全知識培訓(xùn)冬季用電防火安全
- 2025加強(qiáng)政治引領(lǐng)(政治引領(lǐng)是現(xiàn)代政黨的重要功能)
- 主播直播培訓(xùn)直播技巧與方法
- 2025六廉六進(jìn)持續(xù)涵養(yǎng)良好政治生態(tài)
- 員工職業(yè)生涯規(guī)劃方案制定個(gè)人職業(yè)生涯規(guī)劃
- 2024年XX地區(qū)黨建引領(lǐng)鄉(xiāng)村振興工作總結(jié)
- XX中小學(xué)期末考試經(jīng)驗(yàn)總結(jié)(認(rèn)真復(fù)習(xí)輕松應(yīng)考)
- 幼兒園期末家長會長長的路慢慢地走