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1、（浙江選考）2022年高考生物二輪專題復習 加試非選擇題綜合應用特訓 第32題 1 生物技術實踐（A） 1.鐵皮石斛是我國名貴中藥，生物堿是其有效成分之一，用組織培養(yǎng)技術繁殖其幼苗的流程如下： 新生營養(yǎng)芽―→叢狀苗幼苗 請回答以下問題： (1)選用新生營養(yǎng)芽為培養(yǎng)材料的原因是_______________________________，原球莖細胞的細胞壁______(填“厚”或“薄”)。 (2)某小組為研究培養(yǎng)鐵皮石斛的培養(yǎng)基中蔗糖和光各自的作用，進行了對照實驗，結果如下： 培養(yǎng)條件 加蔗糖 不加蔗糖 光 正常生長，分化 不生長，死亡 暗 只生長，不分化 不生長，

2、死亡 根據以上實驗結果，下列說法正確的是________。 A.光為生長提供能量，蔗糖促進細胞分化 B.整個組培過程中，培養(yǎng)基中都不用加入蔗糖也可發(fā)育成幼苗 C.光照只會影響到光合作用的效率 D.蔗糖為生長、分化提供能量，光促進細胞分化 (3)生物堿屬于鐵皮石斛的________代謝產物，除了從植株中提取，也可以通過將含有原球莖的試管放在搖床上，通過________懸浮培養(yǎng)分散成單細胞，然后培養(yǎng)特定細胞系實現工業(yè)化生產。 答案　(1)分裂旺盛，全能性容易表達　薄　(2)D　(3)次生　液體 解析　(1)新生的芽幼嫩，分裂能力強，全能性易表達，植物組織培養(yǎng)過程中一般選用新生營

3、養(yǎng)芽為培養(yǎng)材料。原球莖細胞類似愈傷組織，由于愈傷組織是一團未分化的薄壁細胞，因此，原球莖細胞的細胞壁薄。(2)通過對比加蔗糖條件下，有光組能夠正常分化，無光組無法發(fā)生分化，說明光能促進細胞分化；比較不加蔗糖條件下，有無光照均死亡，說明蔗糖為生長提供能量。若保證組培正常，需要加入蔗糖，故A、B、C錯誤，D正確。(3)生物堿屬于鐵皮石斛的次生代謝產物，獲取方法可以從植株中提取，也可以通過液體懸浮細胞培養(yǎng)，將愈傷組織(原球莖)分散成單細胞，然后通過培養(yǎng)特定細胞系實現工業(yè)化生產。 2.利用廢棄的秸稈生產燃料乙醇，不僅緩解了資源危機、環(huán)境污染，同時更為可持續(xù)發(fā)展提供了保證。下面是利用玉米秸稈來生產

4、乙醇的流程： (1)從纖維素豐富的土壤中獲取微生物1，進行一系列的操作后，用________________將菌種涂布在相應的固體培養(yǎng)基中。 (2)下列有關涂布分離法的敘述，錯誤的是________。 A.從土壤稀釋液中取樣時，不能只取懸液 B.接種時，涂布工具需先在酒精燈火焰上引燃 C.培養(yǎng)后菌落在整個平板表面分散均勻 D.涂布分離法比劃線分離法更易獲得單菌落 (3)為了提高生產效率，也可通過培養(yǎng)微生物1獲得____________酶，并將該酶固定在某介質上制成固定化酶。 (4)微生物2通常是________________，為了確保獲得產物乙醇，接種微生物2時要注意避免

5、________，發(fā)酵時要注意________。發(fā)酵獲得的低濃度乙醇經過蒸餾、提純等加工，才可以得到濃度大于90%的燃料乙醇。 答案　(1)玻璃刮刀　(2)A　(3)纖維素　(4)酵母菌　雜菌污染　無氧 3.(2018·金華十校期末調研)回答與“α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用檢測”有關的問題： (1)在酶的固定化時，共價偶聯法比吸附法對α-淀粉酶活性的影響更________(填“大”或“小”)。 (2)實驗室常用枯草芽孢桿菌來制備α-淀粉酶，枯草芽孢桿菌的α-淀粉酶的最適pH范圍是______________。 (3)在固定化α-淀粉酶水解淀粉作用的檢測實驗中，固相淀粉酶水解淀粉的

6、鑒定實驗結果為：①淀粉溶液加指示劑呈藍色；②____________________加指示劑呈紅色。 (4)枯草芽孢桿菌也是制備蛋白酶的良好原料，為篩選枯草芽孢桿菌的蛋白酶高產菌株，將分別浸過不同菌株(a～e)的分泌物提取液及無菌水(f)的無菌圓紙片置于含某種高濃度蛋白質的平板培養(yǎng)基表面；在37 ℃恒溫箱中放置2～3天，結果如下圖。若需要保存a菌株，可將其接種至斜面上，培養(yǎng)后置于________中保存。菌株b提取物周圍沒有形成明顯清晰區(qū)的原因： ①________________________________________________________________________

7、； ②________________________________________________________________________。 答案　(1)大　(2)5.5～7.5　(3)親和層析洗脫液　(4)4 ℃冰箱　①不能合成蛋白酶或合成的蛋白酶量不足?、诤铣傻牡鞍酌覆环置诨蚍置诹坎蛔恪、鄯置诘牡鞍酌富钚缘?任意答出兩點) 4.如圖是從土壤中篩選產脲酶細菌的過程。 (1)圖中選擇培養(yǎng)基應以______為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加______作指示劑，產脲酶細菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示劑將變____色。 (2)在5個細菌培養(yǎng)基平板上，均接種

8、稀釋倍數為105的土壤樣品溶液0.1 mL，培養(yǎng)一段時間后，平板上長出的細菌菌落數分別為13、156、462、178和191。 該過程采取的接種方法是_____________，每克土壤樣品中的細菌數量為________×108個；與血細胞計數板計數法相比，此計數方法測得的細菌數較________。 答案　(1)尿素　酚紅　紅　(2)涂布分離法　1.75　少 解析　(1)脲酶由分解尿素的細菌產生，故需用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基篩選該類微生物。分解尿素的細菌合成的脲酶可以將尿素分解成氨，故培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑后，菌落周圍將出現紅色。(2)涂布分離法常用來統計樣品中的活菌數，在計數時一般選

9、擇菌落數在30～300的平板進行計數，并取平均值。因培養(yǎng)基上兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，故統計結果往往較實際數目少；而用血細胞計數板計數時，死亡的、活的菌體都計數在內。 5.(2018·湖州、衢州、麗水教學質量檢測)獼猴桃是人們非常喜愛的一種水果，人們不僅直接食用獼猴桃，還對其進行深加工，制成獼猴桃果汁、果酒等。下圖為生產獼猴桃果汁和果酒的流程示意圖，請回答下列問題： (1)在生產獼猴桃汁的流程中，為了提高出汁率，可在壓榨前加入一定量的____________處理1小時。 (2)獼猴桃汁在保藏期的某一階段會產生酚類物質導致果汁褐變或二次渾濁，后來人們發(fā)現，漆

10、酶能有效降解酚類物質，使果汁澄清。將漆酶應用于果汁澄清的過程中，可采用交聯法固定該酶，固定化酶技術的優(yōu)點是__________________________________________。工業(yè)上固定化酶的方式較多，除上述方法外，還有吸附法、________________、共價偶聯法等。 (3)制作好的果汁也可繼續(xù)用于獼猴桃酒的生產。在進行發(fā)酵前需要在獼猴桃汁中接入的菌種是__________，同時添加適量蔗糖，主要目的是________________________________。在發(fā)酵時，當出現________________現象，即表示發(fā)酵完畢。 (4)當主體發(fā)酵結束后，需將

11、上層“酒液”轉移到另一滅菌容器中進行后續(xù)貯藏，此時為了防止醋酸菌污染，加入容器中“酒液”的量應為________(A.注滿　B.2/3　C.1/3　D.無特殊要求)，以保證果酒的品質。 答案　(1)果膠酶　(2)酶與產物易分離或酶可反復利用，提高酶的利用率(答出一點即可)　包埋法　(3)酵母菌　提高果酒的酒精度或甜度(含糖量)　停止產生氣泡　(4)A 6.利用酵母菌生產乳糖酶首先要篩選高產乳糖酶的酵母菌種。具體如下： (1)在無菌條件下，將經過處理的馬奶酒進行稀釋，然后用_____法接種于含有乳糖的固體培養(yǎng)基上。培養(yǎng)后觀察到_____；其周圍出現水解圈，水解圈的直徑大小與_____強弱相

12、關。 (2)篩選獲得的菌株經鑒定后，將優(yōu)良菌株進行擴大培養(yǎng)。擴大培養(yǎng)通常用________培養(yǎng)基，培養(yǎng)時需要________，其主要目的是供氧。 (3)若要保存菌種，可以采用的保存條件是________。 A.平面培養(yǎng)基、37 ℃ B.平面培養(yǎng)基、4 ℃ C.斜面培養(yǎng)基、37 ℃ D.斜面培養(yǎng)基、4 ℃ 答案　(1)涂布分離　單菌落　乳糖酶的活性　(2)液體　振蕩　(3)D 7.(2018·全能生B卷)焚燒農作物秸稈給農村帶來了極大污染，為了實現可持續(xù)發(fā)展的目標，我國科學家想到利用特定的微生物將秸稈中的纖維素分解成葡萄糖，再發(fā)酵產生清潔能源乙醇。 (1)欲從土壤中分離獲取上述分解

13、秸稈的特定微生物，所用培養(yǎng)基以________為唯一碳源。在培養(yǎng)基上完成接種后，需將培養(yǎng)皿________，然后置于恒溫箱中培養(yǎng)。 (2)將上述菌株進行培養(yǎng)，從中分離得到纖維素酶并制成酶液，將該酶液和秸稈粉碎物混合，從發(fā)酵物中分離得到葡萄糖，但是酶不可重復利用，因此需要采用______________技術。在合適條件下，將提純的該酶與石英砂混合后，不時攪拌，該方法是________。(A.吸附法　B.包埋法　C.交聯法　D.共價偶聯法)。 (3)酵母菌將葡萄糖轉化成乙醇，這一發(fā)酵過程中，發(fā)酵瓶需要定期排氣的主要原因是_____________________________________

14、_________________________________________。發(fā)酵一定時間后，觀察到發(fā)酵瓶內液面______________，說明發(fā)酵基本完畢。影響乙醇發(fā)酵的因素很多，下圖是某研究小組的研究成果，請寫出該圖的名稱：________________。 答案　(1)纖維素　倒置　(2)固定化酶　A　(3)發(fā)酵過程中會產生大量CO2，使瓶內壓力升高而可能引起爆裂　停止出現氣泡　發(fā)酵天數和pH對發(fā)酵產生的乙醇濃度的影響 8.(2018·浙江11月選考，32(一))回答與微生物培養(yǎng)及應用有關的問題： (1)對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌時，滅菌時間應從_____________

15、_____時開始計時。對于不耐熱的液體培養(yǎng)基，一般可將其轉入G6玻璃砂漏斗中，采用________方式可較快地進行過濾滅菌。 (2)與釀造果醋相比，利用大米、高粱等富含淀粉的原料制醋，需增加________________的過程。某醋化醋桿菌培養(yǎng)基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇組成，其中甘露醇的主要作用是____________。 (3)為篩選胞外α-淀粉酶分泌型菌種，一般從____________(A.果園樹下　B.肉類加工廠周圍　C.米酒廠周圍　D.枯樹周圍)獲得土樣，用無菌水稀釋，涂布到含有淀粉的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，一段時間后在培養(yǎng)基表面滴加碘液，可在菌落周圍觀察到透明的水解圈。若要篩選

16、酶活性較高的菌種，需挑選若干個______________________比值大的菌落，分別利用液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)進行擴增。然后將培養(yǎng)液離心，取__________用于檢測酶活性。 答案　(1)達到設定的溫度或壓力值　抽濾 (2)將淀粉分解成糖　作為碳源 (3)C　水解圈直徑與菌落直徑　上清液 解析　(1)高壓蒸汽滅菌的計時時間從達到設定的溫度或壓力值開始，采用抽濾方式用G6玻璃砂漏斗進行過濾滅菌。 (2)將淀粉分解成糖，便于微生物的利用，醋化醋桿菌培養(yǎng)基中的甘露醇的主要作用是作為碳源。 (3)篩選富含α-淀粉酶的菌種要在富含淀粉的環(huán)境中篩選，故選C。水解圈直徑與菌落直徑比值越大說明菌種分泌的酶活性越高。