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1、OOPOHO堿基堿基OOHOOPOHOOH堿基堿基533553A、解旋解旋 B、合成子鏈合成子鏈 C、合成子代合成子代DNA1. 2. 原理比較比較ATP提供提供高溫變性解旋高溫變性解旋解旋方式解旋方式解旋酶催化解旋酶催化能量能量場所場所活細胞活細胞 細胞核細胞核耐熱性低耐熱性低四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸引物酶引物酶 RNA生物體外生物體外 加入穩(wěn)定的緩沖液加入穩(wěn)定的緩沖液耐熱性高耐熱性高 TapDNA聚合酶聚合酶需加入人工合成的引物需加入人工合成的引物 DNA不需不需ATP提供提供PCR擴增DNA復制DNA聚合酶聚合酶原料原料引物引物設備設備不需不需 常溫進行常溫進行嚴格控制溫度的溫控設備
2、嚴格控制溫度的溫控設備四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸5/3/G GG GT TC C3/5/G GA AC CC C5/3/AG引物引物5/3/GG引物引物變性變性95復性復性55延伸延伸725/3/G GG GT TC C5/3/G GG GT TC C5/3/GA引物引物5/3/GA引物引物5/3/GG引物引物5/3/GA引物引物3/3/5/G GA AC CC C3/5/G GA AC CC C5/3/GG引物引物5/3/GG引物引物5/3/GG引物引物3/5/3/GA引物引物1、關于DNA的復制,下列敘述正確的是( )ADNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從5端延伸DNA鏈BDNA復
3、制不需要引物C引物與DNA母鏈通過堿基互補配對進行結合DDNA的合成方向總是從子鏈的3端向5端延伸2.DNA的復制需要引物,主要原因是的復制需要引物,主要原因是( )A可加快可加快DNA復制速度復制速度B引物可與引物可與DNA母鏈通過堿基互補配母鏈通過堿基互補配對結合對結合C引物的引物的5端有助于端有助于DNA聚合酶的延聚合酶的延伸伸DNA鏈鏈DDNA聚合酶只能從聚合酶只能從3端延伸端延伸DNA鏈鏈3.引物的作用是( )A打開DNA雙鏈B催化合成DNA子鏈C使DNA聚合酶能夠從引物的3端開始復制D提供模板4、PCR技術控制DNA的解聚與結合是利用DNA的( )A、特異性B、穩(wěn)定性C、熱變性D、
4、多樣性5、標準的、標準的PCR技術過程一般分為技術過程一般分為變性、復性、延伸三大步,這三變性、復性、延伸三大步,這三大步需要的溫度依次是(大步需要的溫度依次是( )A.92、50、72B.72、50、92C.50、92、72D.80、50、72引物引物引物引物6、上圖是哪次循環(huán)的產(chǎn)物(、上圖是哪次循環(huán)的產(chǎn)物( )A、第一次循環(huán)的產(chǎn)物、第一次循環(huán)的產(chǎn)物B、第二次循環(huán)的產(chǎn)物、第二次循環(huán)的產(chǎn)物C、第三次循環(huán)的產(chǎn)物、第三次循環(huán)的產(chǎn)物D、第四次循環(huán)的產(chǎn)物、第四次循環(huán)的產(chǎn)物7、Taq DNA聚合酶的特點( )A、耐強酸B、耐強堿C、耐高溫D、最適溫度378、PCR技術能快速擴增技術能快速擴增DNA片段,
5、在幾個小時內(nèi)復制出上百片段,在幾個小時內(nèi)復制出上百萬份的萬份的DNA拷貝,有效地解決了因為樣品拷貝,有效地解決了因為樣品DNA含量太低而難含量太低而難以對樣品進行分析研究的問題。據(jù)圖回答相關問題:以對樣品進行分析研究的問題。據(jù)圖回答相關問題:5-G-GT-C-3 5-G-G-OH(引物引物)3-C-CA-G-5 (引物(引物) 955-G-GT-C-3 3-C-CA-G-5 55 5-G-G-OH5-G-GT-C-3 3-C-CA-G-5 72 (1)在相應的橫線上寫出引物)在相應的橫線上寫出引物,并在復性這一步驟中將引物,并在復性這一步驟中將引物指置于合適的位置。指置于合適的位置。(2)在相
6、應的橫線上寫出循環(huán)一次后生成的)在相應的橫線上寫出循環(huán)一次后生成的DNA分子。分子。(3)若將作為原料的四種脫氧核苷酸用)若將作為原料的四種脫氧核苷酸用32P標標記,請分析循環(huán)一次后生成的記,請分析循環(huán)一次后生成的DNA分子的特點:分子的特點: (4) PCR技術一經(jīng)問世就被迅速而廣泛地用技術一經(jīng)問世就被迅速而廣泛地用于分子生物學的各個領域。例如它不僅可以用于分子生物學的各個領域。例如它不僅可以用于基因的分離、克隆和序列分析,還可于基因的分離、克隆和序列分析,還可以用于突變體和重組體的構建,基因表達調(diào)控以用于突變體和重組體的構建,基因表達調(diào)控的研究,基因多態(tài)性的分析,的研究,基因多態(tài)性的分析,_的的診斷,腫瘤機制的探索,診斷,腫瘤機制的探索,_鑒定等諸鑒定等諸多方面。多方面。核苷酸核苷酸遺傳病和傳染病遺傳病和傳染病刑事和醫(yī)學刑事和醫(yī)學思考:DNA聚合酶和DNA連接酶都能催化兩個核苷酸之間形成磷酸二脂鍵,兩者有什么異同練習:課后題及練習冊內(nèi)容