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1、生物選修1（人教版）,專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 課題1微生物的實驗室培養(yǎng),要點突破,一、制備培養(yǎng)基,1配制原則 (1)目的明確：不同微生物需求不同，根據(jù)培養(yǎng)目的進(jìn)行配制。 (2)營養(yǎng)要協(xié)調(diào)：營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例要適宜。 (3)pH要適宜：為維持pH的相對恒定，可在培養(yǎng)基中加入緩沖劑，常用磷酸氫二鉀或磷酸二氫鉀。,欄目鏈接,2培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分及功能,欄目鏈接,特別提醒,對異養(yǎng)微生物來說，含C、H、O、N的化合物既是碳源又是氮源、能源。 一些天然營養(yǎng)物質(zhì)，如酵母膏、蛋白胨、動植物組織提取液等可為微生物提供生長因子。 不同微生物對營養(yǎng)的需求不同，因此，首先根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求配制針對性強的

2、培養(yǎng)基。 營養(yǎng)物質(zhì)過少不能滿足微生物的營養(yǎng)需要，過多對微生物的生長有抑制作用。,欄目鏈接,例1 下列關(guān)于微生物培養(yǎng)基的說法，正確的是 () A同一種物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源 B凡是碳源都能提供能量 C除水以外的無機物僅提供無機鹽 D無機氮源也能提供能量,欄目鏈接,解析：對異養(yǎng)微生物來說，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源。CO2是光能自養(yǎng)細(xì)菌的碳源，但不能提供能量。CO2和N2是無機物，也是微生物的碳源和氮源。硝化細(xì)菌所利用的氮源是無機氮源氨，同時氨也為硝化細(xì)菌提供用以化能合成作用的能源。 答案：D,欄目鏈接,變式訓(xùn)練 1不同培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含(C) A碳源、磷酸鹽和維

3、生素 B氮源和維生素 C水、碳源、氮源和無機鹽 D碳元素、氧元素、氫元素、氮元素,二、消毒與滅菌的比較,欄目鏈接,欄目鏈接,特別提醒,酒精消毒時，70%的酒精殺菌效果最好。原因是濃度過高，菌體表面蛋白質(zhì)變性過快從而凝固成一層保護(hù)膜，乙醇分子不能滲入其中；濃度過低，殺菌能力減弱。,欄目鏈接,例2 細(xì)菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理方法，這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌() A接種針、手、培養(yǎng)基 B高壓鍋、手、接種針 C培養(yǎng)基、手、接種針 D接種針、手、高壓鍋,欄目鏈接,解析：高壓蒸汽滅菌鍋是滅菌的一個設(shè)備，通常用于培養(yǎng)基的滅菌。用酒精擦拭雙手是消毒的一種方法。火焰

4、灼燒，可以迅速徹底地滅菌，適用于微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針。 答案：C,欄目鏈接,變式訓(xùn)練 2下列操作與消毒和滅菌無關(guān)的是( ) A接種前用火焰灼燒接種環(huán) B接種前用酒精擦拭雙手 C將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng) D接種在酒精燈的火焰旁完成,解析：A、B、D都是實驗操作過程中常用的消毒和滅菌方法。將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)與消毒、滅菌無關(guān)，是為了防止雜菌污染。 答案：C,三、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基及純化大腸桿菌,欄目鏈接,2純化大腸桿菌操作過程中的注意事項 (1)平板劃線法中幾次灼燒接種環(huán)的目的：,欄目鏈接,(2)稀釋涂布平板法操作比較復(fù)雜，且各個細(xì)節(jié)均需保證無菌操作，應(yīng)特別注意

5、： 酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要適宜。 吸管頭不要接觸其他任何物體。 吸管要在酒精燈火焰周圍使用。 涂布器末端浸在盛有70%酒精的燒杯中，取出時，要讓多余的酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃，注意防火。,欄目鏈接,特別提醒,在稀釋涂布平板法操作中，每個步驟都要注意無菌操作，以防培養(yǎng)基被污染，影響實驗效果。 每一稀釋倍數(shù)菌液都至少要涂布三個平板，作為實驗重復(fù)，求平均值，若其中有菌落數(shù)與其他實驗差距懸殊者，應(yīng)舍棄該實驗數(shù)據(jù)，不進(jìn)行統(tǒng)計、計算。 平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)成水珠。凝固后的培養(yǎng)基表面的溫度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水

6、珠落入培養(yǎng)基造成污染。,欄目鏈接,例2 關(guān)于平板劃線法操作的敘述正確的是() A使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿，在操作過程中不需要再滅菌 B打開含菌種的試管，需通過火焰滅菌，取出菌種后，需馬上塞上棉塞 C將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線即可 D最后將平板倒置，放在培養(yǎng)箱中,欄目鏈接,解析：使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿，操作過程仍要滅菌；打開含菌種的試管需要通過火焰滅菌，取出菌種后含菌種的試管需要通過火焰滅菌后再塞好棉塞；將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線后蓋上皿蓋；最后應(yīng)將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 答案：D,欄目鏈接,變式訓(xùn)練 3稀釋涂布平板法是微生物培養(yǎng)中的一

7、種常用的接種方法。下列相關(guān)敘述錯誤的是( ) A操作中需要將菌液進(jìn)行一系列的濃度梯度稀釋 B需將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面 C不同濃度的菌液均可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落 D操作過程中對培養(yǎng)基和涂布器等均需進(jìn)行嚴(yán)格滅菌處理,欄目鏈接,解析：只有在稀釋度足夠大的菌液才能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。 答案：C,本節(jié)小結(jié),欄目鏈接,欄目鏈接,核心歸納 1培養(yǎng)基的成分一般包括水、碳源、氮源、無機鹽，除此之外，還應(yīng)滿足微生物對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)及氧氣的需求。 2獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌入侵。 3消毒和滅菌的區(qū)別是后者更徹底，是將物體表面及內(nèi)部所有微生物包括芽孢、孢子全部殺死。 4微生物培養(yǎng)中常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，前者操作簡單，后者可用于微生物計數(shù)。,