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茶籽油中苯并a芘的測定

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1、ICS67.220.20 X 09 DB52 貴州省地方標準 DBS52/ XXX—XXXX 食品安全地方標準 茶籽油中苯并(a)芘的測定 Local food safety standards—Determination of Benzo(a)pyrene in tea seed oil XXXX - XX - XX發(fā)布 XXXX - XX - XX實施 貴州省衛(wèi)生和計劃生育委員會發(fā)布 目次 前言 II 1 范圍 1 2 高效液相色譜法 1 附錄A(資料性附錄) 苯并(a)芘標準物質高效液相色譜圖(圖A.1) 4 附錄B(

2、資料性附錄) 苯并(a)芘添加濃度及其平均回收率的試驗數(shù)據(jù)(表B.1) 5 前言 本標準按照GB/T 1.1-2009《標準化工作導則 第1部分:標準的結構和編寫》給出的規(guī)則起草。 請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別這些專利的責任。 本標準附錄A、附錄B為資料性附錄。 本標準由遵義市產(chǎn)品質量檢驗檢測院提出。 本標準由貴州省衛(wèi)生和計劃生育委員會歸口。 本標準起草單位:遵義市產(chǎn)品質量監(jiān)督檢驗院、國家茶及茶制品質量監(jiān)督檢驗中心(貴州)。 本標準主要起草人:駱書娜、張季、李霞、向麗萍、馬昌洪、王蘭蘭、王奧、杜玲玲、蔡璐、黎亮亮。 食

3、品安全地方標準 茶籽油中苯并(a)芘的測定 1  范圍 本標準規(guī)定了茶籽油中苯并(a)芘的高效液相色譜測定方法。 本標準適用于茶籽油中苯并(a)芘含量的測定。 2  高效液相色譜法 2.1  原理 樣品加入氫氧化鉀-無水乙醇溶液,在水浴加熱皂化后用正己烷萃取,氮氣吹干后以液相色譜-熒光檢測器測定,外標法定量。 2.2  試劑和材料 2.2.1  正己烷(C6H14),分析純。 2.2.2  乙腈(C2H3N),色譜純。 2.2.3  氫氧化鉀(KOH),分析純。 2.2.4  無水乙醇(C2H5OH),分析純。 2.2.5  氫氧化鉀-無水乙醇溶液 稱取56 g氫氧化

4、鉀溶于1 L無水乙醇:水(95:5,V/V)的溶液中。 2.2.6  苯并(a)芘標準品,分子式C20H20,CAS號為50-32-8,純度大于99.5 %。 2.2.7  苯并(a)芘標準儲備溶液 移取0.1 mg/mL的苯并(a)芘標準物質1.0 mL,用色譜甲醇定容至100 mL,配制成1.0 μg/mL的標準儲備溶液。此溶液于0 ℃~4 ℃避光保存。 2.2.8  苯并(a)芘標準工作溶液 將標準儲備溶液用色譜甲醇逐級稀釋成濃度為0.5 ng/mL、1.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10.0 ng/mL、20.0 ng/mL、50.0 ng/mL的標準工作溶液。置于0

5、 ℃~4 ℃避光保存。 2.2.9  0.45 μm 微孔濾膜,有機系。 2.3  儀器與設備 2.3.1  高效液相色譜儀,配有熒光檢測器(FLD)。 2.3.2  數(shù)顯恒溫水浴鍋。 2.3.3  電子天平,感量分別為 0.0001 g 和 0.01 g。 2.3.4  氮吹儀。 2.3.5  旋渦混勻器。 2.4  試樣的制備與保存 將樣品充分振搖混勻,分裝置于潔凈容器內作為試樣,標明標記;低溫下保存。 2.5  測定步驟 2.5.1  提取 準確稱取試樣0.5 g(精確至0.01g)于50 mL比色管中,加入5 mL氫氧化鉀-無水乙醇溶液,渦旋混勻,在50 ℃水浴

6、中加熱皂化1 h,取出后冷卻至室溫,加入5 mL水,渦旋混勻,用20 mL正己烷分2次提取,合并正己烷提取液于氮氣中吹干,用乙腈定容至1.0 mL,過0.45 μm微孔濾膜,供高效液相色譜儀測定。 2.5.2  測定 2.5.2.1  液相色譜條件 a) 色譜柱為Eclipse PAH柱,4.6 mm(內徑)×250 mm,粒徑5 μm,或同等效能色譜柱; b) 進樣量為10 μL; c) 流速為1.0 mL/min; d) 柱溫為30 ℃ e) 流動相:乙腈:超純水=88:12。 2.5.2.2  高效液相色譜測定 根據(jù)樣品中苯并(a)芘含量情況,選定與樣液濃度相近的標準使

7、用溶液,標準使用溶液和樣液中苯并(a)芘的響應值均應在儀器檢測的線性范圍內,如果樣液中苯并(a)芘含量超出檢測的線性范圍,則稀釋后再進樣。以保留時間定性,外標法定量。 2.5.2.3  空白試驗 除不稱取試樣外,均按2.5.1中的步驟完成空白試驗。 2.6  計算結果和表述 試樣中苯并(a)芘的含量按下式進行計算: 式中: X--試樣中苯并(a)芘的含量,單位為微克每千克(μg/kg); C--從標準工作曲線得到的苯并(a)芘的濃度,單位為納克每毫升(ng/mL); V--樣品溶液最終定容體積,單位為毫升(mL); m--樣品溶液所代表的試樣質量,單位為克(g

8、); 注:計算結果在0 μg/kg~10 μg/kg之間時保留一位小數(shù),計算結果大于10 μg/kg時保留到最接近的整數(shù)。 2.7  檢出限、回收率及精密度 2.7.1  檢出限 本方法的檢出限為0.2284 μg/kg。 2.7.2  回收率 本方法在3.0 μg/kg~60.0 μg/kg添加濃度水平的回收率是79.53%~99.93%。參見附錄B。 2.7.3  精密度 在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的20%。 A A 附 錄 A (資料性附錄) 苯并(a)芘標準物質高效液相色譜圖(圖A.1)

9、 圖A.1 苯并(a)芘標準物質的液相色譜圖 B B 附 錄 B (資料性附錄) 苯并(a)芘添加濃度及其平均回收率的試驗數(shù)據(jù)(表B.1) 表B.1 茶籽油中苯并(a)芘的添加回收率(n=6) 樣品類型 化合物 添加濃度/(μg/kg) 回收率范圍/% 最大相對標準偏差/% 茶籽油 苯并(a)芘 3.0 91.27~99.93 0.11 8.0 81.98~84.80 1.11 20.0 79.53~81.05 0.64 30.0 95.41~96.07 0.24 60.0 94.37~95.07 0.28 _________________________________

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