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1、專題檢測卷(十五)
(45分鐘 100分)
1.(14分)(2012·蘇中三市模擬)為了從動物組織中提取純凈的DNA,首先要快速、有效地消化裂解動物組織細(xì)胞。消化裂解動物組織常用的方法有蛋白酶(如蛋白酶K)水解、表面活性劑處理、變性劑處理等。某科研人員擬使用加酶洗衣粉消化裂解豬肌肉樣本,并提取豬的DNA。實驗步驟如下:
①取500 mg剪碎的豬肌肉組織于離心管中,加40 mg加酶洗衣粉和1.5 mL超純水混合,在一定溫度條件下水浴消化24 h。
②加入苯酚、氯仿、異丙醇(25∶24∶1)混合液抽提。
③加0.2 mg/mL的RNA水解酶于37 ℃水浴1 h。
④加醋酸鈉和無水
2、乙醇4 cc高速離心15 min。
⑤用70%乙醇洗滌沉淀兩次,風(fēng)干,得到高純度的DNA。
請回答有關(guān)問題:
(1)加酶洗衣粉可以消化裂解動物組織細(xì)胞的原理是 。
(2)步驟②的目的是 。
步驟③的目的是 。
(3)步驟④中使用無水乙醇的目的是_____________________,高速離心時溫度保持在4 ℃的原因有 、
3、 等。
(4)如果要將加酶洗衣粉法提取DNA與蛋白酶K法提取DNA的效果進(jìn)行對比,請簡要說明實驗設(shè)計思路。
。
2.(11分)如圖表示在生物體外獲取DNA(或目的基因)的兩種方式。圖一表示經(jīng)PCR技術(shù)擴(kuò)增獲取DNA的過程。圖二表示反轉(zhuǎn)錄形成DNA的過程。 請據(jù)圖分析回答:
(1
4、)圖一中的DNA聚合酶的化學(xué)本質(zhì)是 ,它與人體內(nèi)的DNA聚合酶相比具有 特性。
(2)圖一A中的DNA解旋過程在人體內(nèi)可由 催化完成。C過程復(fù)制方式的特點是 ,該過程需要 和能量等基本條件。
(3)圖二E中的堿基互補配對方式與圖一C中的不同之處是 。假設(shè)圖一中的一個模板DNA分子中有800個堿基對,其中含有腺嘌呤600個,若通過PCR技術(shù)共消耗周圍環(huán)境中游離的胞嘧啶脫氧核苷酸6 200個,則該模板DNA在PCR擴(kuò)增儀中已經(jīng)復(fù)制了____次。
3.(16分)(2012·南京
5、模擬)生物技術(shù)的廣泛應(yīng)用,給社會帶來了較大的經(jīng)濟(jì)效益,受到廣泛重視。請回答下列與生物技術(shù)實踐有關(guān)的問題:
(1)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白。這種蛋白質(zhì)具有極強的抗菌能力,受到研究者重視。分離該抗菌蛋白可用電泳法,其原理是蛋白質(zhì)分子的
、分子大小及形狀不同,其在電場中的 不同。
(2) Taq耐熱菌的發(fā)現(xiàn)和分離為基因工程的發(fā)展作出了突出貢獻(xiàn)。分離Taq耐熱菌所需要的特殊培養(yǎng)條件是 ,從Taq耐熱菌中分離出的Taq酶應(yīng)用于PCR技術(shù)中引物延伸所需的是 酶。在生物體內(nèi)進(jìn)行DNA復(fù)制所必需而PCR技術(shù)中不需要
6、的酶是 。
(3)為了節(jié)約成本可將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)。科研人員采用戊二醛使酶相互連接,該種固定方法為 ;而細(xì)胞多采用 法進(jìn)行固定。
(4)在固定化酵母細(xì)胞時,將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫,加入______,充分?jǐn)嚢枋蛊浠旌暇鶆?,再轉(zhuǎn)移到注射器中,以制取凝膠珠。
4.(15分)(2012·豫北六校模擬)馬鈴薯是一種重要的經(jīng)濟(jì)作物,傳統(tǒng)的繁殖方式感染病毒嚴(yán)重,導(dǎo)致產(chǎn)量大大降低。科研人員利用種苗脫毒技術(shù)可有效解決這個問題,基本操作流程如下
配制培養(yǎng)基→外植體的取材和消毒→剝離和接種→培養(yǎng)和移栽→結(jié)果檢測
請回答問題:
(1)該技術(shù)
7、稱為 ,其理論基礎(chǔ)是 。
(2)配制培養(yǎng)基,應(yīng)加入一定量的瓊脂、蔗糖、無機鹽、維生素、有機添加物等營養(yǎng)物質(zhì)。蔗糖除作為碳源外,還具有 的功能;無機鹽中NH4NO3、KNO3的主要作用是 。
(3)根據(jù)添加的植物激素不同,將培養(yǎng)基分為脫分化培養(yǎng)基、生芽培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基。這三種培養(yǎng)基在激素上的差異是 。
(4)在培育過程中,選取的外植體是 ,原因是 。
(5)進(jìn)行培養(yǎng)時需將外植體置于25 ℃、無菌和
8、 條件下培養(yǎng),當(dāng)植物體長到3~4個葉時即可移栽。
5.(17分)(2012·淄博模擬)胡蘿卜營養(yǎng)價值高,被國內(nèi)外營養(yǎng)專家譽為“小人參”,其中含有豐富的天然β–胡蘿卜素。由于天然β–胡蘿卜素可防癌、抗癌、抗衰老,并可以清除體內(nèi)的氧自由基,減少突變細(xì)胞的發(fā)生,因此胡蘿卜及其制品越來越受到現(xiàn)代人們的青睞。請回答有關(guān)問題:
(1)欲大量繁殖高品質(zhì)胡蘿卜植株,應(yīng)選擇 部位進(jìn)行植物組織培養(yǎng)。
(2)為了更容易地榨取胡蘿卜汁,提高澄清度,需要加入 酶,該酶通常從真菌細(xì)胞中提取,篩選真菌細(xì)胞時常用的接種方法有 ,
從功能看,
9、所用培養(yǎng)基為 培養(yǎng)基。
(3)從真菌細(xì)胞中提取酶時,常常采用________法將不同相對分子質(zhì)量的酶進(jìn)行分離。為了節(jié)約成本,使酶反復(fù)利用,可以采用_________技術(shù)。
(4)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是 ,原因是 。
6.(14分)紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白,紅細(xì)胞的機能主要是由血紅蛋白完成的。我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進(jìn)行實驗,來提取和分離血紅蛋白,請回答下列有關(guān)問題:
(1)分離蛋白質(zhì)分子的一種常用方法是凝膠色譜法,是根據(jù) 分離蛋白質(zhì)的有效方法。
(2)血紅蛋白提取和分離的程序可分為
10、 、 、 和純度鑒定。
(3)洗滌紅細(xì)胞的目的是 ,以利于后續(xù)步驟的分離純化。采集的血樣要及時分離紅細(xì)胞,分離時采用低速短時間 ,然后用膠頭吸管吸出上層透明的 ,將下層暗紅色的紅細(xì)胞液體倒入燒杯,再加入 洗滌,如此重復(fù),直至上清液中沒有黃色。
(4)將洗滌好的紅細(xì)胞倒入燒杯中,加入 和 充分?jǐn)嚢?,紅細(xì)胞破裂,釋放出血紅蛋白。
7.(13分)檸檬油是植物芳香油中的一種,它是一種廣譜性的殺蟲劑,它可殺死蚊子、蒼蠅、蟑螂和臭蟲等傳染疾病的害蟲,以及危害
11、糧食、蔬菜的常見害蟲,包括幼蟲、蛹等,被稱為一種綠色殺蟲劑。檸檬果皮精油的提取步驟如圖。請根據(jù)實驗流程圖回答下列問題:
(1)檸檬果皮精油的提取適宜采用 法,此種方法是通過 將液相檸檬油從固液兩相混合物中分離出來。
(2)A是 ,目的是 。
(3)B過程一般加入相當(dāng)于檸檬果皮質(zhì)量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4,其目的是 。
(4)C過程為
12、 ,目的是 。
(5)采用檸檬油作為殺蟲劑,可以解決其他殺蟲劑給人類帶來的隱患,其突出的優(yōu)點 。
(6)檸檬油是食品、化妝品和香水配料的優(yōu)質(zhì)原料,具有很高的經(jīng)濟(jì)價值,提取檸檬油不采取水蒸氣蒸餾法的原因是: 。
答案解析
1.【解析】(1)細(xì)胞膜被破壞可導(dǎo)致細(xì)胞裂解,由于細(xì)胞膜中含有蛋白質(zhì),所以蛋白酶可以促進(jìn)細(xì)胞裂解,另外,表面活性劑也可以破壞細(xì)胞膜。
(2)苯酚、氯仿、異丙醇混合液可以促進(jìn)蛋白質(zhì)變性,便于抽
13、提。RNA水解酶可以水解RNA。
(3)無水乙醇可以析出純度更高的DNA。高速離心時要保持低溫,原因是:可以降低水解酶的活性,防止DNA被水解;還可以降低分子運動,易于形成沉淀析出。
(4)實驗?zāi)康氖球炞C蛋白酶K提取DNA的效果,因此應(yīng)將上述實驗中的加酶洗衣粉換成蛋白酶K,然后觀察實驗結(jié)果。
答案:(1)洗衣粉中蛋白酶和表面活性劑等可以破壞細(xì)胞膜
(2)使蛋白質(zhì)變性,抽提蛋白質(zhì) 水解RNA
(3)析出DNA,提取含雜質(zhì)較少的DNA
降低核酸水解酶活性,防止DNA被水解
降低分子運動,易于形成沉淀析出(增加DNA分子柔韌性,減少斷裂)
(4)將上述實驗步驟中的加酶洗衣粉換成蛋
14、白酶K,其他實驗步驟相同,得到DNA后,測定DNA的量、純度
2.【解析】(1)DNA聚合酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),人體內(nèi)的DNA聚合酶的最適催化溫度是37 ℃,而由圖可知PCR技術(shù)擴(kuò)增過程中DNA聚合酶所需要的溫度較高,因此,PCR技術(shù)擴(kuò)增過程中DNA聚合酶具有熱穩(wěn)定性。(2)人體內(nèi)DNA解旋過程是在解旋酶的作用下完成的。DNA復(fù)制的特點是半保留復(fù)制,過程中需要模板、原料、酶等條件。(3)圖二中E過程為反轉(zhuǎn)錄過程,堿基互補配對方式為U-A,而圖一中C過程為DNA分子復(fù)制過程,堿基互補配對方式為T-A。DNA分子中有800個堿基對,其中腺嘌呤600個,則胞嘧啶脫氧核苷酸200個,因此有(2n-1
15、)×200=6 200,則n=5,即DNA在PCR擴(kuò)增儀中已經(jīng)復(fù)制了5次。
答案:(1)蛋白質(zhì) 熱穩(wěn)定(或耐高溫)
(2)解旋酶 半保留復(fù)制 模板、原料、酶
(3)E中是U-A,C中是T-A 5
3.【解析】(1)電泳法分離蛋白質(zhì)的原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子所帶電荷的性質(zhì)和電量、分子的大小和形狀,導(dǎo)致在電場中的運動速度不同 (2)Taq耐熱菌可以為基因工程提供耐高溫的DNA聚合酶,所以分離耐高溫的Taq耐熱菌需要在高溫環(huán)境下進(jìn)行。在體內(nèi)DNA復(fù)制需要解旋酶,而PCR技術(shù)無需該酶,因為DNA的解旋是通過調(diào)控溫度實現(xiàn)的。
(3)戊二醛是進(jìn)行交聯(lián)法固定酶的化學(xué)物質(zhì)。由于細(xì)胞體積較大,所
16、以可以采用包埋法進(jìn)行固定。
(4)海藻酸鈉溶液需要冷卻后才能加入酵母細(xì)胞,否則會殺死酵母細(xì)胞。
答案:(1)所帶電荷性質(zhì)和凈電量的差異
運動(遷移)速度
(2)高溫 DNA聚合 解旋酶
(3)交聯(lián)法(化學(xué)結(jié)合法) 包埋
(4)已活化的酵母細(xì)胞
4.【解析】(1)流程圖所示過程需要植物組織培養(yǎng)技術(shù),其理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞的全能性。
(2)蔗糖除了作為碳源構(gòu)建細(xì)胞外,還可以為細(xì)胞的生命活動提供能量,另外,蔗糖作為細(xì)胞外液中溶質(zhì)成分,可以維持培養(yǎng)基的滲透壓。NH4NO3、KNO3含有氮元素,所以可以作為氮源。
(3)生長素和細(xì)胞分裂素的使用比例會影響細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果,所以題中的
17、三種培養(yǎng)基中兩種植物激素的使用比例不同。
(4)由于本操作的目的是培養(yǎng)脫毒植物,而莖(芽)尖中無病毒或者病毒較少,所以可以作為培養(yǎng)的選擇材料。
(5)外植體應(yīng)該置于適宜的溫度、無菌和有光照條件下進(jìn)行。
答案:(1)植物組織培養(yǎng) (植物)細(xì)胞的全能性
(2)提供能量、維持滲透壓 提供氮源
(3)生長素和細(xì)胞分裂素的比例(不同)
(4)莖(芽)尖 莖(芽)尖分生組織無病毒或低毒
(5)光照
5.【解析】(1)選擇分裂能力強的植物組織,可以更容易地培養(yǎng)成植株,因為形成層部位的組織細(xì)胞分裂能力強。
(2)由于果膠酶可以破壞細(xì)胞壁中的果膠,所以加入果膠酶后,可以提高出汁率及澄清度
18、。分離微生物的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法,所用的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。
(3)果膠酶屬于蛋白質(zhì),分離蛋白質(zhì)常用凝膠色譜法。將酶固定成固定化酶后可以重復(fù)利用。
(4)由于胡蘿卜素易溶于有機溶劑,所以可以采用萃取法進(jìn)行提取。
答案:(1)形成層(或韌皮部細(xì)胞等,分生能力強的細(xì)胞即可)
(2)果膠 平板劃線法或稀釋涂布平板法 選擇
(3)凝膠色譜 固定化酶
(4)萃取法 胡蘿卜素易溶于有機溶劑
6.【解析】(1)凝膠色譜法依據(jù)的是相對分子質(zhì)量的大小。
(2)血紅蛋白提取和分離的步驟為:樣品處理、粗分離(透析)、純化和純度鑒定。(3)紅細(xì)胞洗滌的目的是去除雜蛋白,以利于
19、后續(xù)步驟的分離純化;洗滌紅細(xì)胞是采用低速短時間離心。(4)血紅蛋白的釋放要加入蒸餾水和甲苯,分離血紅蛋白是采用高速長時間離心的方法。
答案:(1)相對分子質(zhì)量
(2)樣品處理 粗分離 純化
(3)去除雜蛋白 離心 黃色血漿 五倍體積的生理鹽水
(4)蒸餾水 40%體積的甲苯
7.【解析】本題考查壓榨法的有關(guān)實驗操作和原理分析。(1)從實驗流程可以看出,提取檸檬果皮精油的方法為壓榨法,此方法是通過機械壓力將油分?jǐn)D壓出來。(2)在壓榨法中,用石灰水浸泡果皮,其目的是破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),分解果膠,防止壓榨時果皮滑脫,提高出油率。(3)在壓榨過程中,為了使精油易于與水分離,還要分別加入相當(dāng)于檸檬果皮質(zhì)量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4,并調(diào)節(jié)pH至7~8。(4)C過程是過濾,用普通布袋,目的是除去固體物和殘渣。(5)檸檬油對人體無毒性,并且易被分解,減少對環(huán)境的污染。(6)水蒸氣蒸餾時其有效成分會發(fā)生部分水解,又會產(chǎn)生原料焦糊等問題。
答案:(1)壓榨 機械壓力
(2)石灰水 破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),分解果膠,防止壓榨時果皮滑脫,提高出油率
(3)使精油易于與水分離
(4)過濾 除去固體物和殘渣
(5)對人、動物、植物均無毒性,減少對環(huán)境的污染
(6)水蒸氣蒸餾會導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問題