(全國通用)高考生物二輪復(fù)習(xí) 專題九 現(xiàn)代生物科技專題 考點2 細胞工程課件
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1、考點2細胞工程專題九現(xiàn)代生物科技專題1.明確細胞工程技術(shù)的原理明確細胞工程技術(shù)的原理(1)植物組織培養(yǎng):細胞的全能性。(2)植物體細胞雜交:細胞的全能性、細胞膜的流動性。(3)動物細胞培養(yǎng):細胞的增殖。(4)體細胞核移植:動物細胞核的全能性。(5)單克隆抗體的制備:細胞膜的流動性、細胞的增殖。(6)動物細胞融合:細胞膜的流動性。n 要點整合2.理清植物組織培養(yǎng)的流程理清植物組織培養(yǎng)的流程提醒提醒(1)條件:無菌、離體。(2)培養(yǎng)基組成:無機營養(yǎng)、有機營養(yǎng)、激素、瓊脂。(3)植物組織培養(yǎng)中添加蔗糖的目的是提供營養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓。(4)植物組織培養(yǎng)的目的不同,培養(yǎng)階段也就不同:若生產(chǎn)人工種子,則培養(yǎng)
2、到胚狀體階段;若提取細胞產(chǎn)品,則一般培養(yǎng)到愈傷組織階段;若培育新個體,則應(yīng)培養(yǎng)到試管苗階段。3.理清植物體細胞雜交技術(shù)理清植物體細胞雜交技術(shù)(1)酶解方法:用纖維素酶和果膠酶處理。(2)促融方法:物理法:離心、振動、電激等;化學(xué)法:聚乙二醇(PEG)。(3)植物體細胞雜交即將不同種的植物體細胞,在一定條件下融合成雜種細胞,并把雜種細胞培育成新的植物體的過程,不管是染色體數(shù)、基因型還是染色體組數(shù)都采用直接相加的方法。4.理清動物細胞培養(yǎng)流程理清動物細胞培養(yǎng)流程提醒提醒(1)動物細胞培養(yǎng)中兩次使用胰蛋白酶的作用不同:第一次:處理剪碎的組織,使其分散成單個細胞;第二次:使貼壁生長的細胞從瓶壁上脫落下
3、來。(2)傳代細胞的特點傳代培養(yǎng)到10代以內(nèi)的細胞核型穩(wěn)定,1050代時部分細胞核型發(fā)生變化,50代以后遺傳物質(zhì)可能發(fā)生變化。(3)原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的關(guān)鍵是是否分瓶培養(yǎng)。貼壁生長到一定程度需要用胰蛋白酶處理,然后再分瓶培養(yǎng),讓細胞繼續(xù)增殖,這樣的培養(yǎng)過程通常稱為傳代培養(yǎng)。(4)動物細胞培養(yǎng)的條件無菌、無毒的環(huán)境;特殊營養(yǎng):血清、血漿;適宜的溫度和pH;氣體環(huán)境:含95%空氣加5%CO2的混合氣體。5.理清動物體細胞核移植理清動物體細胞核移植提醒提醒(1)選擇受體細胞為去核卵母細胞的原因營養(yǎng)豐富;體積大,易操作;含有激發(fā)細胞核全能性表達的物質(zhì)。(2)核移植獲得的克隆
4、動物與提供細胞核的親本性狀可能不同的三個原因:克隆動物遺傳物質(zhì)來自兩個親本;發(fā)育過程中可能發(fā)生基因突變或染色體變異;外界環(huán)境可能引起不遺傳的變異。6.關(guān)注制備單克隆抗體??键c關(guān)注制備單克隆抗體常考點(1)3種細胞特點不同免疫后的B淋巴細胞:能分泌抗體,不能大量增殖。骨髓瘤細胞:能大量增殖,不能分泌抗體。雜交瘤細胞:既能分泌抗體,又能大量增殖。(2)2次篩選目的不同第一次篩選:利用特定選擇培養(yǎng)基篩選,獲得雜交瘤細胞,即AB型細胞(A為B淋巴細胞,B為骨髓瘤細胞),該細胞既能分泌抗體又能大量增殖,篩選掉A、B、AA、BB型細胞。第二次篩選:利用多孔培養(yǎng)皿和抗原抗體雜交法篩選,獲得產(chǎn)生特異性抗體的雜
5、交瘤細胞。1.(2018全國,38)2018年細胞期刊報道,中國科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細胞對非人靈長類動物進行克隆,獲得兩只克隆猴“中中”和“華華”?;卮鹣铝袉栴}:(1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程,核移植是指_。通過核移植方法獲得的克隆猴,與核供體相比,克隆猴體細胞的染色體數(shù)目_(填“減半”“加倍”或“不變”)。n 考題集訓(xùn)12345將動物的一個細胞核,移入一個已去掉細胞核的卵母細胞中不變答案解析12345解析解析核移植是指將動物的一個細胞核,移入一個已去掉細胞核的卵母細胞中,形成重組細胞。重組細胞形成的早期胚胎可移植到受體子宮內(nèi)進一步發(fā)育,最終分娩得到克隆動物。因為染色體在細胞核
6、中,所以克隆動物體細胞的染色體數(shù)目與提供細胞核的個體的體細胞相同。12345解析解析由于動物的胚胎細胞分化程度低,恢復(fù)全能性相對容易,而動物的體細胞分化程度高,恢復(fù)全能性十分困難,因此,動物體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植。(2)哺乳動物的核移植可以分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植,胚胎細胞核移植獲得克隆動物的難度_(填“大于”或“小于”)體細胞核移植,其原因是_。小于胚胎細胞分化程度低,恢復(fù)全能性相對容易答案解析12345解析解析哺乳動物雌雄個體的體細胞中,細胞核內(nèi)常染色體的數(shù)目是相同的,性染色體組合是不同的。若分別以雌性個體和雄性個體的體細胞作為核供體,則得到的克隆動物的體細胞中常
7、染色體的數(shù)目相同,性染色體組合不同。(3)在哺乳動物核移植的過程中,若分別以雌性個體和雄性個體的體細胞作為核供體,通常,所得到的兩個克隆動物體細胞的常染色體數(shù)目_(填“相同”或“不同”),性染色體組合_(填“相同”或“不同”)。相同不同答案解析12345(1)核移植屬于無性繁殖;(2)核移植可以選擇子代克隆動物性別看提供核的親本是還是;(3)核移植過程需要動物細胞培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù);(4)該技術(shù)體現(xiàn)的是動物細胞核的全能性。方法技巧方法技巧2.(2013全國,40)甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物,甲含有效成分A,乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時含有A和B的新型藥用植物?;卮鹣铝袉?/p>
8、題:(1)為了培育該新型藥用植物,可取甲和乙的葉片,先用_酶和_酶去除細胞壁,獲得具有活力的_,再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合。形成的融合細胞進一步培養(yǎng)形成_組織,然后經(jīng)過_形成完整的雜種植株。這種培育技術(shù)稱為_。12345纖維素果膠原生質(zhì)體愈傷答案解析再分化(分化)植物體細胞雜交技術(shù)12345解析解析該新型藥用植物是通過植物體細胞雜交技術(shù)獲得的。要獲得有活力的原生質(zhì)體才能進行體細胞雜交,因此首先用纖維素酶和果膠酶去掉植物的細胞壁,然后用PEG化學(xué)誘導(dǎo)劑(物理方法:離心、振動等)誘導(dǎo)二者的原生質(zhì)體融合。然后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得雜種植株,植物組織培養(yǎng)的主要過程是:先脫分化形成愈傷組織,然后再分化
9、形成植物體,利用了植物細胞的全能性。12345解析解析如果植物甲、乙是兩個物種,二者不能通過有性雜交產(chǎn)生可育后代,原因是甲、乙有性雜交所產(chǎn)生的后代在減數(shù)分裂過程中同源染色體聯(lián)會異常,也就是存在生殖隔離。但植物甲、乙通過植物體細胞雜交技術(shù)產(chǎn)生的后代卻是可育的,因為在減數(shù)分裂過程中同源染色體能完成正常的聯(lián)會,產(chǎn)生正常的配子。由于甲、乙都是二倍體,因此,植物體細胞雜交得到的后代是異源多倍體(四倍體)。(2)上述雜種植株屬于多倍體,多倍體是指_。假設(shè)甲與乙有性雜交的后代是不育的,而上述雜種植株是可育的,造成這種差異的原因是_。體細胞中含有三個或三個以上染色體組的個體在減數(shù)分裂過程中,前者染色體聯(lián)會異常
10、,而后者染色體聯(lián)會正常答案解析12345解析解析人工種子生產(chǎn)不受氣候、季節(jié)和地域等因素限制,而且可以避免后代發(fā)生性狀分離等優(yōu)點,因此,植物細胞工程重要的應(yīng)用之一是制備人工種子,用到的核心技術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)。將植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。(3)這種雜種植株可通過制作人工種子的方法來大量繁殖。經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的_等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽答案解析12345植物體細胞雜交植物雜交:若甲、乙兩親本都含2個染色體組,染色體數(shù)分別為20和30,基因型分別為AAbb和CCDD,則經(jīng)植物體細胞雜交后子代雜種植株含
11、有4個染色體組,50條染色體,基因組成為AAbbCCDD,是可育的;若經(jīng)植物雜交(即有性雜交),則子代個體內(nèi)含2個染色體組,染色體數(shù)為101525(條),基因組成為AbCD,后代不可育。方法技巧方法技巧123453.(2018德州高三模擬)雙特異性單克隆抗體是指可同時與癌細胞和藥物結(jié)合的特異性抗體。下圖是科研人員通過雜交雜交瘤細胞技術(shù)(免疫的B淋巴細胞和雜交瘤細胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時識別癌胚抗原和長春堿(一種抗癌藥物)的雙特異性單克隆抗體的部分過程。分析回答下列問題:12345解析解析過程表示給小鼠注射抗原,目的是刺激小鼠產(chǎn)生能分泌識別癌胚抗原抗體的B淋巴細胞;根據(jù)單克隆抗體制備流程可知,該過
12、程涉及到的技術(shù)有動物細胞融合技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)。(1)過程的目的是_,制備雙特異性單克隆抗體的過程中用到的技術(shù)有_(至少答出兩條)。使小鼠產(chǎn)生能分泌識別癌胚抗原抗體的B淋巴細胞動物細胞融合、動物細胞培養(yǎng)答案解析12345解析解析過程誘導(dǎo)細胞融合的方法有聚乙二醇、滅活病毒、電激等;HAT選擇培養(yǎng)基的作用是篩選出雜交瘤細胞,而骨髓瘤細胞不能生長。(2)過程誘導(dǎo)融合的方法是_,過程選用的骨髓瘤細胞_(填“能”或“不能”)在HAT培養(yǎng)基上生長。聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)、電激等不能答案解析12345解析解析從小鼠體內(nèi)提取的B淋巴細胞不止一種類型(篩選得到的雜交瘤細胞產(chǎn)生的抗體不是單克隆抗體),因此經(jīng)過
13、程篩選得到的細胞還需轉(zhuǎn)移至多孔培養(yǎng)板中進行過程。(3)經(jīng)過程篩選得到的細胞還需轉(zhuǎn)移至多孔培養(yǎng)板中進行過程,原因是_。答案解析 從小鼠體內(nèi)提取的B淋巴細胞不止一種類型(篩選得到的雜交瘤細胞產(chǎn)生的抗體不是單克隆抗體)12345答案答案將獲得的B淋巴細胞與單克隆雜交瘤細胞融合在選擇培養(yǎng)基上篩選出雜交雜交瘤細胞克隆化培養(yǎng)、抗體檢測篩選出單克隆雜交雜交瘤細胞(4)請根據(jù)所學(xué)知識,用箭頭和文字補全圖中方框內(nèi)獲取單克隆雜交雜交瘤細胞的生產(chǎn)過程。答案解析12345解析解析單克隆抗體制備過程為:將獲得的B淋巴細胞與單克隆雜交瘤細胞融合在選擇培養(yǎng)基上篩選出雜交雜交瘤細胞克隆化培養(yǎng)、抗體檢測篩選出單克隆的雜交雜交瘤
14、細胞。12345解析解析獲得的單克隆雜交雜交瘤細胞在體外條件下培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,均可提取出大量的雙特異性單克隆抗體。(5)獲得的單克隆雜交雜交瘤細胞在體外條件下培養(yǎng)或_,均可提取出大量的雙特異性單克隆抗體。注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖答案解析123454.科學(xué)家培育轉(zhuǎn)乳糖分解酶基因奶牛的過程如圖所示。請回答下列問題:12345解析解析在動物細胞培養(yǎng)的合成培養(yǎng)基中,通常需加入動物血清等天然成分。在進行細胞原代培養(yǎng)時會出現(xiàn)細胞貼壁生長和細胞接觸抑制現(xiàn)象。向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素,可以防止細胞培養(yǎng)過程中細菌的污染。(1)圖中細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分與植物組織培養(yǎng)基成分最主要的區(qū)別在于前者含有_。在進
15、行細胞原代培養(yǎng)時會出現(xiàn)_和細胞接觸抑制現(xiàn)象。為了防止細胞培養(yǎng)過程中細菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的_。血清細胞貼壁生長抗生素答案解析12345解析解析將目的基因?qū)雱游锛毎S蔑@微注射法。(2)圖中將乳糖分解酶基因?qū)肱咛コ衫w維細胞中,最常用的方法是_。顯微注射法答案解析12345解析解析核移植過程中,去掉卵母細胞細胞核的目的是保證克隆動物的核遺傳物質(zhì)全部來自供體細胞的細胞核。原代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細胞能保持正常的二倍體核型,因此所用的供體細胞一般都選用原代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細胞。(3)圖中的核移植操作需要將經(jīng)過細胞培養(yǎng)獲得的供體細胞的細胞核注入去核的卵母細胞中,去掉卵母細胞細胞核的目的是保證克
16、隆動物的核遺傳物質(zhì)全部來自_,而所用的供體細胞一般都選用傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細胞,原因是傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細胞能保持正常的_。供體細胞的細胞核二倍體核型答案解析12345(4)重組細胞2在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛體內(nèi)會生出與圖中的黑白花奶牛性狀并不完全相同的犢牛,原因可能有_(至少答出兩點)。答案解析 生物的性狀受細胞核和細胞質(zhì)中遺傳物質(zhì)共同控制,還受環(huán)境因素的影響、胚胎成纖維細胞的遺傳物質(zhì)有近一半來自配種的公牛等12345解析解析由于生物的性狀受細胞核和細胞質(zhì)中遺傳物質(zhì)共同控制,生物的性狀還受環(huán)境因素的影響,胚胎成纖維細胞的遺傳物質(zhì)有近一半來自配種的公牛等,因此重組細胞2在培養(yǎng)
17、液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛體內(nèi)會生出與圖中的黑白花奶牛性狀并不完全相同的犢牛。12345解析解析單克隆抗體的制備過程中,將骨髓瘤細胞和免疫過的B淋巴細胞融合構(gòu)建重組細胞(雜交瘤細胞)。(5)單克隆抗體的制備也需要構(gòu)建重組細胞,該重組細胞是將_融合而成的。骨髓瘤細胞和免疫過的B淋巴細胞答案解析5.(2018福州高三下學(xué)期質(zhì)檢)萵苣易受軟腐病菌的感染,野生甘藍具有軟腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理窩苣原生質(zhì)體可使其染色體片段化,并喪失增殖能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的野生甘藍原生質(zhì)體融合,以獲得抗軟腐病雜種植株。流程如下圖所示:12345解析解析過程表示原生質(zhì)體的
18、制備,要用纖維素酶和果膠酶去掉植物細胞的細胞壁。據(jù)圖回答下列問題:(1)過程所需的酶是_。纖維素酶和果膠酶答案解析12345(2)過程后,在顯微鏡下觀察融合的活細胞中有供體的_存在,這一特征可作為初步篩選雜種細胞的標志。進一步對雜種植株進行_接種實驗,可篩選出具有高抗性的雜種植株。葉綠體軟腐病菌答案解析12345解析解析用于融合的兩個細胞,一個是萵苣的葉肉細胞,一個是抗性甘藍的根部細胞,其中供體細胞特有的結(jié)構(gòu)是葉綠體,可通過觀察葉綠體的有無作為初步篩選雜種細胞的標志。進一步對雜種植株進行軟腐病菌接種實驗,可篩選出具有高抗性的雜種植株。12345為達到上述目的,用限制酶處理后,在A1片段與N基因
19、、N基因與A3片段間要有_。要使改造后的A基因能表達出N基因所編碼的蛋白質(zhì),插入的N基因前端應(yīng)包含_。PCR擴增改造后的A基因,轉(zhuǎn)入野生甘藍細胞中,并用加入_的培養(yǎng)基篩選,獲得的甘藍細胞,其愈傷組織培育后發(fā)現(xiàn)也非常容易感染軟腐病,表明A基因是_。(3)為研究甘藍的A基因與抗性是否有關(guān),科研人員提取野生甘藍的DNA,將氨芐青霉素的抗性基因(N基因)插入A基因中,替換A基因的中間片段,如圖所示?;パa的黏性末端啟動子氨芐青霉素答案解析12345抗性基因解析解析將氨芐青霉素的抗性基因(N基因)插入A基因中,需要用限制酶分別處理獲得氨芐青霉素的抗性基因和A1、A3片段,且A1片段與N基因、N基因與A3片段間要有互補的黏性末端,才能達到目的。要使改造后的A基因能表達出N基因所編碼的蛋白質(zhì),插入的N基因前端應(yīng)包含啟動子。PCR擴增改造后的A基因,轉(zhuǎn)入野生甘藍細胞中,并用加入氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選,獲得的甘藍細胞,其愈傷組織培育后發(fā)現(xiàn)也非常容易感染軟腐病,表明A基因是抗性基因。12345
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