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《中國(guó)藥典》2015版微生物新增三個(gè)指導(dǎo)原則.ppt

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1、 中國(guó)藥典 2015版 微生物新增指導(dǎo)原則 主要內(nèi)容 一、概述 二、微生物新增三個(gè)指導(dǎo)原則 三、小結(jié) 一、概述 樣品 檢驗(yàn) 結(jié)果判斷 一、概述 檢查 標(biāo)準(zhǔn) 檢測(cè) 方法 結(jié)果 判斷 1、新版變化 2、標(biāo)準(zhǔn)比較 1、方法變化 2、方法驗(yàn)證 1、計(jì)數(shù)結(jié)果 2、控制菌檢 查結(jié)果 相互關(guān)聯(lián),相互影響,不可分割 一、概述 1000以下 藥典各論中各種檢查法的說(shuō)明 -制劑通則、鑒別試驗(yàn)、色譜光譜法 10 xx -1101 無(wú)菌檢查法(二部 H ) -1105/6/7 計(jì)數(shù)法 /控制菌 /限度標(biāo)準(zhǔn)(二部 J ) -1121

2、抑菌效力檢查法(二部 N) -其它:異常毒性、熱原、抗生素效價(jià)測(cè)定 20 xx 中藥 30 xx 生物制品相關(guān)測(cè)定 /實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 一、概述 80 xx 試劑和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 90 xx 指導(dǎo)原則(二部附錄 ) -9201 藥品微生物檢驗(yàn)替代方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則 -9202 非無(wú)菌藥品微生物限度檢查法指導(dǎo)原則 -9203 藥品微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理指導(dǎo)原則 -9204 微生物鑒定指導(dǎo)原則( new) -9205 藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室微生物監(jiān)測(cè)和控制指導(dǎo)原則( new) -9206 無(wú)菌檢查用隔離系統(tǒng)驗(yàn)證指導(dǎo)原則( new) 二、 920

3、4微生物鑒定指導(dǎo)原則 本指導(dǎo)原則為非無(wú)菌產(chǎn)品微生物限度控制菌檢查中 疑似菌的鑒定, 以及藥物原料、輔料、制藥用水、 中間體、終產(chǎn)品和環(huán)境中檢出微生物的鑒定提供指 導(dǎo)。當(dāng)微生物的鑒定結(jié)果有爭(zhēng)議時(shí), 以 伯杰氏 系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè) ( Bergey s Manual of Systematic Bacteriology )現(xiàn)行版的鑒定結(jié)果為 準(zhǔn)。 微生物的鑒定程序 微生物鑒定的基本程序包括分離純化和鑒定,鑒定 時(shí),一般先將待檢菌進(jìn)行初步的分類(lèi)。 1、待檢菌的分離純化 微生物鑒定的第一步是待檢培養(yǎng)物的分離純化。 2、初篩試驗(yàn) 3、表型微生物鑒定 4、基因型微生物鑒定

4、 微生物鑒定方法的確認(rèn) 系統(tǒng)發(fā)育的相關(guān)內(nèi)容 溯源分析 三、 9205 藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室微生物監(jiān)測(cè)和控 制指導(dǎo)原則 本指導(dǎo)原則是用于指導(dǎo)藥品微生物檢驗(yàn)用的潔凈室 等受控環(huán)境微生物污染情況的監(jiān)測(cè)和控制。 藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室的潔凈級(jí)別按空氣懸浮粒子大小和 數(shù)量的不同參考現(xiàn)行 “藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范”分 為 A、 B、 C、 D 4 個(gè)級(jí)別。 人員要求、 初次使用的潔凈實(shí)驗(yàn)室參數(shù)確認(rèn)、 微生物監(jiān)測(cè)方法、 監(jiān)測(cè)頻次及監(jiān)測(cè)項(xiàng)目、 監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)、 警戒限和糾偏限、 數(shù)據(jù)分析及偏差處理、 微生物鑒定和微生物控制。 人員 從事藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室微生物監(jiān)測(cè)和控制

5、的人員應(yīng)符 合現(xiàn)行 中國(guó)藥典 通則中“藥品微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì) 量管理指導(dǎo)原則(通則 9203)”的相關(guān)要求。 (9203)藥品微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理指導(dǎo)原則 ( 1)人員專業(yè)背景 應(yīng)具備微生物學(xué)或相近專業(yè)知識(shí)的教育背景。 ( 2)人員培訓(xùn) -崗位和職責(zé)培訓(xùn) -設(shè)備操作培訓(xùn) -檢驗(yàn)技術(shù)培訓(xùn)(無(wú)菌操作、培養(yǎng)基制備、消毒、滅菌、 注平板、菌落計(jì)數(shù)、菌種的轉(zhuǎn)種、傳代和保藏、微 生物檢查方法和鑒定基本技術(shù)等) -生物安全培訓(xùn) -繼續(xù)教育培訓(xùn) ( 3)人員技能 檢驗(yàn)人員 :必須熟悉相關(guān)檢測(cè)方法、程序、檢測(cè)目的 和結(jié)果評(píng)價(jià)。 管理者 :專業(yè)技能和經(jīng)驗(yàn)水平應(yīng)與他們的職責(zé)范圍相 符,如:

6、管理技能、實(shí)驗(yàn)室安全、試驗(yàn)安排、預(yù)算、 實(shí)驗(yàn)研究、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的評(píng)估和數(shù)據(jù)偏差的調(diào)查、技 術(shù)報(bào)告書(shū)寫(xiě)等。 實(shí)驗(yàn)室 :應(yīng)通過(guò)參加內(nèi)部質(zhì)量控制、 能力驗(yàn)證或使用 標(biāo)準(zhǔn)菌株等方法客觀評(píng)估檢驗(yàn)人員的能力,必要時(shí) 對(duì)其進(jìn)行再培訓(xùn)并重新評(píng)估。當(dāng)使用一種非經(jīng)常使 用的方法或技術(shù)時(shí),有必要在檢測(cè)前確認(rèn)微生物檢 測(cè)人員的 操作技能 。 ( 4)人員檔案 所有人員的培訓(xùn)、考核內(nèi)容和結(jié)果均應(yīng)記錄歸檔 。 確認(rèn) 確認(rèn)目的:確保操作順暢,保證設(shè)備系統(tǒng)的運(yùn)行能 力和可靠性。 確認(rèn)時(shí)間:初次使用的潔凈實(shí)驗(yàn)室應(yīng)進(jìn)行參數(shù)確認(rèn), 物理參數(shù)的測(cè)試應(yīng)當(dāng)在微生物監(jiān)測(cè)方案實(shí)施之前。 確認(rèn)參數(shù):物理參數(shù)、空氣懸浮粒子和微

7、生物 --物理參數(shù):高效空氣過(guò)濾器完整性,氣流組織、空 氣流速(平均風(fēng)速) ,換氣次數(shù)、壓差、溫度和相 對(duì)濕度等。 --微生物:浮游菌、沉降菌、表面微生物 測(cè)試條件:模擬正常檢測(cè)條件 物理參數(shù)測(cè)試方法參照 潔凈室施工及驗(yàn)收規(guī)范 的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)( GB50591-2010)中附錄方法 --高效空氣過(guò)濾器完整性: 附錄 D3 高效空氣過(guò)濾器現(xiàn)場(chǎng)掃描檢漏方法 --氣流組織:附錄 E12 氣流的檢測(cè) --平均風(fēng)速:附錄 E1 風(fēng)量和風(fēng)速的檢測(cè) --壓差:附錄 E2 靜壓差的檢測(cè) --溫度、相對(duì)濕度:附錄 E5 溫濕度的檢測(cè) 空氣懸浮粒子和微生物的確認(rèn):

8、見(jiàn)“監(jiān)測(cè)”項(xiàng)下。 物理參數(shù)建議標(biāo)準(zhǔn): 參照 GMP(2010)、 FDA(ISPE,換氣次數(shù) ) 最長(zhǎng)監(jiān)測(cè)周期: 參照 GB,詳見(jiàn)表 1 監(jiān)測(cè) 1、監(jiān)測(cè)內(nèi)容 空氣懸浮粒子數(shù)(非生物活性) 微生物(有生物活性) --環(huán)境浮游菌 --環(huán)境沉降菌 --表面微生物(關(guān)鍵檢測(cè)臺(tái)面、人員操 作服及 5指手套等) 2、監(jiān)測(cè)方法: 懸浮粒子: 醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))懸浮粒子的 測(cè)試方法 ( GB/T16292-2010) 浮游菌: 醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))浮游菌的測(cè)試 方法 (GB/T16293-2010) 沉降菌: 醫(yī)藥工

9、業(yè)潔凈室(區(qū))沉降菌的測(cè)試 方法 (GB/T16294-2010) 2.監(jiān)測(cè)方法 表面微生物(環(huán)境、設(shè)備和人員) 接觸碟法: 將充滿規(guī)定的瓊脂培養(yǎng)基的接觸碟對(duì)規(guī)則表面或平面 進(jìn)行取樣, 然后置合適的溫度下培養(yǎng)一定時(shí)間并計(jì)數(shù),每碟取 樣面積約為 25 cm2 ,微生物計(jì)數(shù)結(jié)果以 cfu/碟報(bào)告; 擦拭法: 用于不規(guī)則表面的微生物監(jiān)測(cè),特別是設(shè)備的不規(guī)則表 面。擦拭法是采用合適尺寸的無(wú)菌模板或標(biāo)尺確定擦拭的面積, 取樣后,將拭子置合適的緩沖液或培養(yǎng)基中,充分振蕩,然后 采用適宜的方法計(jì)數(shù),每個(gè)拭子取樣面積為約 25 cm2 ,微生 物計(jì)數(shù)結(jié)果以 cfu/拭子報(bào)告。 表面微生物測(cè)定應(yīng)在實(shí)驗(yàn)

10、結(jié)束后進(jìn)行。 培養(yǎng)基:一般采用胰酪大豆胨瓊脂 培養(yǎng)基( TSA) , 必要時(shí)可加入適宜的中和劑 , 當(dāng)監(jiān)測(cè)結(jié)果有疑似真菌或考慮季節(jié)因素影響時(shí), 可 增加沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基 (SDA)。 培養(yǎng)時(shí)間: ChP(2015) GB/T16293-2010 TSA: 3-5天 不少于 2天 SDA: 5-7天 不少于 5天 3.監(jiān)測(cè)頻次及監(jiān)測(cè)項(xiàng)目 參考 GMP( 2010)及 GB50073-2013,見(jiàn)表 2 檢測(cè)頻次的調(diào)整 如果如果出現(xiàn)連續(xù)超過(guò)糾偏

11、限和警戒限、 關(guān)鍵區(qū)域內(nèi)發(fā)現(xiàn)有污染微生物存在、 空氣凈化系統(tǒng) 進(jìn)行任何重大的維修、 消毒規(guī)程改變、設(shè)備有重大 維修或增加、潔凈室(區(qū))結(jié)構(gòu)或區(qū)域分布有重大 變動(dòng)、引起微生物污染的事故、日常操作記錄反映 出傾向性的數(shù)據(jù)時(shí)應(yīng)考慮修改監(jiān)測(cè)頻次。 4.監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn) 參考 GMP( 2010),見(jiàn)表 3、 4 5.警戒限和糾偏限(參考 FDA ,見(jiàn)表 5) 藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)歷史數(shù)據(jù),結(jié)合不 同潔凈區(qū)域的標(biāo)準(zhǔn),采用適宜的方法,制定適當(dāng)?shù)?微生物監(jiān)測(cè)警戒限和糾偏限。限度確定后,應(yīng)定期 回顧評(píng)價(jià),如歷史數(shù)據(jù)表明環(huán)境有所改善,限度應(yīng) 作出相應(yīng)調(diào)整以反映環(huán)境實(shí)際質(zhì)量狀況。 表 5 列

12、出了各級(jí)別潔凈環(huán)境微生物糾偏限參考值。 6.數(shù)據(jù)分析及偏差處理 參考 USP(35) (1)數(shù)據(jù)分析 應(yīng)當(dāng)對(duì)日常環(huán)境監(jiān)測(cè)的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和回 顧, 通過(guò)收集的數(shù)據(jù)和趨勢(shì)分析,總結(jié)和評(píng)估潔凈 實(shí)驗(yàn)室是否受控,評(píng)估警戒限和糾偏限是否適合, 評(píng)估所采取的糾偏措施是否合適。 應(yīng)當(dāng)正確評(píng)估微生物污染, 不僅僅關(guān)注微 生物數(shù)量,更應(yīng)關(guān)注微生物污染檢出的頻率, 往往 在一個(gè)采樣周期內(nèi)同一環(huán)境中多點(diǎn)發(fā)現(xiàn)微生物污染, 可能預(yù)示著風(fēng)險(xiǎn)增加,應(yīng)仔細(xì)評(píng)估。幾個(gè)位點(diǎn)同時(shí) 有污染的現(xiàn)象也可能由不規(guī)范的采樣操作引起, 所 以在得出環(huán)境可能失控的結(jié)論之前,應(yīng)仔細(xì)回顧采 樣操作過(guò)程。在污染后的幾天對(duì)環(huán)

13、境進(jìn)行重新采樣 是沒(méi)有意義的, 因?yàn)椴蓸舆^(guò)程不具有可重復(fù)性。 ( 2)偏差處理 當(dāng)微生物監(jiān)測(cè)結(jié)果超出糾偏限度時(shí),應(yīng)當(dāng) 按照偏差處理規(guī)程進(jìn)行報(bào)告、記錄、調(diào)查、處理以 及采取糾正措施,并對(duì)糾正措施的有效性進(jìn)行評(píng)估。 7.微生物鑒定 建議對(duì)受控環(huán)境收集到的微生物進(jìn)行適當(dāng) 水平的鑒定, 微生物菌群信息有助于預(yù)期常見(jiàn)菌群, 并有助于評(píng)估清潔 /消毒規(guī)程、方法、清潔 /消毒劑 及微生物監(jiān)測(cè)方法的有效性,尤其當(dāng)超過(guò)監(jiān)測(cè)限度 時(shí),微生物鑒定信息有助于污染源的調(diào)查。關(guān)鍵區(qū) 域分離到的菌落應(yīng)先于非關(guān)鍵區(qū)域進(jìn)行鑒定。 微生 物鑒定參照微生物鑒定指導(dǎo)原則“通則 9204 微生 物鑒定指

14、導(dǎo)原則 ”進(jìn)行。 微生物控制 微生物控制手段: 為了保證藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室環(huán)境維持適當(dāng)?shù)?水平, 并處于受控狀態(tài), 除保持空調(diào)系統(tǒng)的良好 運(yùn)行狀態(tài),對(duì)設(shè)施進(jìn)行良好維護(hù),潔凈室內(nèi)人員應(yīng) 嚴(yán)格遵守良好的行為規(guī)范,并定期進(jìn)行環(huán)境監(jiān)控。 除保持空調(diào)系統(tǒng)的良好運(yùn)行狀態(tài),對(duì)設(shè)施進(jìn)行良好 維護(hù),潔凈室內(nèi)人員應(yīng)嚴(yán)格遵守良好的行為規(guī)范, 并定期進(jìn)行環(huán)境監(jiān)控。 消毒劑和清潔劑的要求: 應(yīng)當(dāng)監(jiān)測(cè)消毒劑和清潔劑的微生物污染狀 況, 并在規(guī)定的有效期內(nèi)使用, A/B 級(jí)潔凈區(qū)應(yīng)當(dāng) 使用無(wú)菌的或經(jīng)無(wú)菌處理的消毒劑和清潔劑。 所采 用的化學(xué)消毒劑應(yīng)經(jīng)過(guò)驗(yàn)證或有證據(jù)表明其消毒效 果, 其種類(lèi)

15、應(yīng)當(dāng)多于一種, 并定期進(jìn)行更換以防 止產(chǎn)生耐受菌株。不得用紫外線消毒代替化學(xué)消毒。 必要時(shí),可采用熏蒸等適宜的方法降低潔凈區(qū)的衛(wèi) 生死角的微生物污染, 并對(duì)熏蒸劑的殘留水平進(jìn)行 驗(yàn)證。 各潔凈級(jí)別的轉(zhuǎn)換(約相當(dāng)) GMP(2010) GB(50457-2008) GB(50073-2013) A級(jí)(動(dòng)態(tài)) 100級(jí) ISO 5級(jí) B級(jí)(靜態(tài)) B級(jí)(動(dòng)態(tài)) 100級(jí) 10000級(jí) ISO 5級(jí) ISO 7級(jí) C級(jí)(靜態(tài)) C級(jí)(動(dòng)態(tài)) 10000級(jí) 100000級(jí) ISO 7級(jí) ISO 8級(jí) D級(jí)(靜態(tài)) 100000級(jí) ISO 8級(jí) GB50457-20

16、08 醫(yī)藥工業(yè)潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范 GB50073-2013潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范 四、 9206無(wú)菌檢查用隔離系統(tǒng)驗(yàn)證指導(dǎo)原則 新軟艙體無(wú)菌檢查隔離器 無(wú)菌檢查用隔離器的結(jié)構(gòu) 1. 空氣處理系統(tǒng) 2. 傳遞接口及傳遞門(mén) 3.滅菌設(shè)備 4. 配套設(shè)備與輔助設(shè)施 汽化過(guò)氧化氫發(fā)生器 無(wú)菌傳遞艙 隔離器安裝位置的選擇 無(wú)菌檢查用隔離器安裝環(huán)境的潔凈度要求 建議 不 低于我國(guó)現(xiàn)行 GMP 中 D 級(jí)空氣潔凈度要求,安裝隔 離器的房間應(yīng)限制無(wú)關(guān)人員出入。 應(yīng)保證隔離器安 裝地點(diǎn)周?chē)凶銐虻目臻g, 以便于隔離器的移動(dòng)、 物品的輸送和正常維護(hù)。 隔離系統(tǒng)驗(yàn)證 1 操作驗(yàn)證

17、 2 隔離器完整性驗(yàn)證 3 滅菌驗(yàn)證 4 滅菌循環(huán)驗(yàn)證 5. 隔離器內(nèi)部潔凈度驗(yàn)證 6. 儀器儀表的驗(yàn)證 隔離器的應(yīng)用 1. 包裝完整性驗(yàn)證 2. 隔離器內(nèi)部環(huán)境的無(wú)菌維持 3. 無(wú)菌檢驗(yàn)結(jié)果的解釋 4. 安全與培訓(xùn) 1101 無(wú)菌檢查法 細(xì)菌培養(yǎng)基:硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基 霉菌培養(yǎng)基: 胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基 檢驗(yàn)數(shù)量:除另有規(guī)定外,出廠產(chǎn)品按表 1規(guī)定;上市產(chǎn)品監(jiān)督檢驗(yàn)按表 2規(guī)定。 表 1、表 2中最少檢驗(yàn)數(shù)量不包括陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)的供試品用量。 表 2 上市抽驗(yàn)樣品的最少檢驗(yàn)數(shù)量

18、 供試品 供試品最少檢驗(yàn)數(shù)量(瓶或支) 液體制劑 固體制劑 血液制品 V<50ml V50ml 醫(yī)療器具 10 10 6 2 10 注: 1.若供試品每個(gè)容器內(nèi)的裝量不夠接種兩種培養(yǎng)基,那么表中的最少檢驗(yàn)數(shù)量應(yīng)增加相應(yīng)倍數(shù)。 2.抗生素粉劑( 5g)及抗生素原料藥( 5g)的最少檢驗(yàn)數(shù)量為 6瓶(或支)。 桶裝固體原料的最少 檢驗(yàn)數(shù)量為 4個(gè)包裝。 表 3 供試品的最少檢驗(yàn)量 供試品 供試品裝量 每支供試品接入每種培養(yǎng) 基的最少量 液體制劑 1ml 1ml

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