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臨床專用自動(dòng)生化分析儀分析技術(shù)

上傳人:san****019 文檔編號(hào):21709364 上傳時(shí)間:2021-05-07 格式:PPT 頁(yè)數(shù):108 大?。?.47MB
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1、第 七 章臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù)江 蘇 大 學(xué) 基 礎(chǔ) 醫(yī) 學(xué) 與 醫(yī) 學(xué) 技 術(shù) 學(xué) 院 姜 旭 淦 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 2 目 錄濁 度 自 動(dòng) 化 分 析 技 術(shù)1 電 解 質(zhì) 自 動(dòng) 化 分 析 技 術(shù)2 血 氣 自 動(dòng) 化 分 析 技 術(shù)3 電 泳 自

2、動(dòng) 化 分 析 技 術(shù)4 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 3 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 4 y濁 度 分 析通 過(guò) 檢 測(cè) 溶 液 濁 度 ,對(duì) 物 質(zhì) 含 量 進(jìn) 行 分 析 的 方 法 。臨 床 上 多 用 于 特 定 蛋 白 的 分 析 。y特 定 蛋 白 (

3、 special protein)在 機(jī) 體 內(nèi) 具 有 某 種 生 理 功 能 , 疾 病 狀 態(tài) 時(shí) 又 有 著 特定 的 病 理 生 理 意 義 的 蛋 白 質(zhì) 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 5 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 6 y1.膠 體 溶 液粒 子

4、對(duì) 光 具 有 反 射 、 折 射 、 散 射 和 吸 收 等 作 用 。y2.光 透 射 理 論朗 伯 -比 爾 ( Lambert-Beer) 定 律 :KLCA 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 7 當(dāng) 入 射 光 通 過(guò) 懸 浮 在 反 應(yīng) 溶 液 固 體 或 膠 體 粒 子 時(shí) :( 1) 顆 粒 直 徑 比 入 射 光 的 波 長(zhǎng) 小 , 則 散 射 光 比 較 均 勻 的 分 布于 顆 粒 的 四 周 , 稱 為 Ray

5、leigh散 射 。 ( 2) 顆 粒 直 徑 大 大 地 大 于 入 射 光 的 波 長(zhǎng) ( d) , 則 散 射 光的 分 布 呈 明 顯 不 均 勻 ,即 前 向 散 射 光 為 主 , 稱 為 Mile散 射 。Rayleigh散 射Mile散 射 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 8 顆 粒 直 徑 1/10 Rayleigh 散 射1/10顆 粒 直 徑 Debye 散 射 顆 粒 直 徑 Mile 散 射 全 國(guó) 高 等

6、 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 9 雷 萊 ( Rayleigh) 公 式 : 該 公 式 來(lái) 自 氣 溶 膠 懸 浮 微 粒 , 用 于 溶 液 時(shí) 需 進(jìn) 行 校 正 。當(dāng) 使 用 高 強(qiáng) 度 光 源 ( 如 激 光 ) 時(shí) , 液 相 懸 浮 顆 粒 與 非 偏 振 光 源 的散 射 作 用 公 式 為 : I s為 與 入 射 光 成 角 處 散 射 光 強(qiáng) 度 ; 和 I0為 入 射 光 的 波 長(zhǎng) 和 強(qiáng) 度 ;dn/dc為 校 正

7、因 子 , 反 映 了 溶 液 折 射 指 數(shù) 和 顆 粒 濃 度 的 變 化 ; M為 顆粒 分 子 量 ; c為 濃 度 ; N為 阿 佛 加 德 指 數(shù) ; 為 顆 粒 到 檢 測(cè) 器 的 距 離 ; 為 散 射 光 與 入 射 光 的 夾 角 ( 散 射 夾 角 ) 。 散 射 光 強(qiáng) 度 與 顆 粒 的 濃 度 和 分 子 量 有 關(guān) 。24 2220s rN )cos1(CM)dCdn(4II 22 2240s r )cos1(N8II 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專

8、 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 10 y4.免 疫 濁 度 分 析在 一 定 條 件 下 , 可 溶 性 抗 原 與 抗 體 在 液 相 中 特 異結(jié) 合 , 形 成 有 一 定 大 小 的 抗 原 -抗 體 免 疫 復(fù) 合 物顆 粒 , 使 反 應(yīng) 液 出 現(xiàn) 濁 度 ;當(dāng) 光 線 通 過(guò) 介 質(zhì) 中 的 復(fù) 合 物 顆 粒 時(shí) , 可 形 成 光 的吸 收 、 透 射 、 散 射 和 折 射 ;通 過(guò) 測(cè) 量 透 射 光 或 散 射 光 信 號(hào) 強(qiáng) 弱 , 從 而 推 算 出被 測(cè) 物 的 量 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨

9、 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 11 y濁 度 分 析 方 法 的 分 類根 據(jù) 檢 測(cè) 器 的 位 置 及 其 接 收 光 信 號(hào) 的 性 質(zhì) :v透 射 免 疫 濁 度 法 ( turbidimetry immunoassay)v散 射 免 疫 濁 度 法 ( nephelometry immunoassay)根 據(jù) 復(fù) 合 物 形 成 速 度 和 測(cè) 定 方 式 :v終 點(diǎn) 濁 度 法v速 率 濁 度 法根 據(jù) 濁 度 形 成 的 原 理 :v沉 淀 反 應(yīng) 免 疫 濁 度 法 : 靈 敏 度 低v

10、膠 乳 凝 集 比 濁 法 ( 或 粒 子 強(qiáng) 化 免 疫 濁 度 法 ) : 靈 敏 度 高 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 12 y1.透 射 免 疫 濁 度 法在 光 源 的 光 路 0o角 方 向 上 測(cè) 量 透 射 光 強(qiáng) 度 , 并 研究 其 與 被 檢 測(cè) 溶 液 微 粒 濃 度 關(guān) 系 的 方 法 。y2.散 射 免 疫 濁 度 法在 光 路 的 5o 90o角 的 方 向 上 測(cè) 量 散 射 光 強(qiáng) 度 , 并研

11、究 其 與 被 測(cè) 溶 液 中 微 粒 濃 度 關(guān) 系 的 方 法 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 13 y ( 1) 沉 淀 反 應(yīng) 免 疫 透 射 濁 度 法 : 抗 原 抗 體 在 特 殊 緩 沖 液 中快 速 形 成 免 疫 復(fù) 合 物 , 使 反 應(yīng) 液 出 現(xiàn) 濁 度 。 免 疫 復(fù) 合 物 的 形 成 有 時(shí) 限 性 , 即 當(dāng) 抗 原 抗 體 相 遇 后 立 即 結(jié)合 成 小 復(fù) 合 物 , 幾 分 鐘 到 數(shù)

12、小 時(shí) 才 形 成 可 見 的 復(fù) 合 物 。 為 了提 高 復(fù) 合 物 形 成 速 度 , 加 入 促 聚 劑 , 如 4%聚 乙 二 醇 ( MW 6000 8000) , 可 使 免 疫 復(fù) 合 物 形 成 在 3 min l0min完 成 。y( 2) 粒 子 強(qiáng) 化 免 疫 濁 度 法 : 選 擇 一 種 大 小 適 中 、 均 勻 一 致的 膠 乳 顆 粒 , 吸 附 或 交 聯(lián) 抗 體 ; 當(dāng) 遇 到 相 應(yīng) 抗 原 時(shí) , 則 發(fā) 生聚 集 。 單 個(gè) 膠 乳 顆 粒 在 入 射 光 波 長(zhǎng) 之 內(nèi) , 光 線 可 透 過(guò) 。 當(dāng) 兩個(gè) 或 更 多 膠 乳 顆 粒 凝 聚 時(shí)

13、, 透 過(guò) 光 減 少 , 光 減 少 的 程 度 與 膠乳 凝 集 量 成 正 比 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 14 免 疫 膠 乳 比 濁 法 用 抗 體 致 敏 的 大 小 適 中 、 均 勻 一 致 的 膠 乳 顆 粒 ( 一 般 為 0.2 m) , 在 遇 到 相 應(yīng) 抗 原 時(shí) , 膠 乳 顆 粒 上 的 抗 體 與 抗 原 特 異 結(jié)合 , 引 起 膠 乳 顆 粒 凝 聚 , 使 透 射 光 和 散 射 光

14、即 出 現(xiàn) 顯 著 變 化 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 15 反 應(yīng) 要 求 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 16 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專

15、用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 17 抗 原 和 抗 體 反 應(yīng) 達(dá) 到 平 衡 時(shí) , 免 疫 復(fù) 合 物 形 成的 量 不 再 增 加 , 反 應(yīng) 體 系 的 濁 度 不 再 變 化( 需 要 十 分 鐘 以 上 ) 檢 測(cè) 形 成 的 抗 原 抗 體復(fù) 合 物 的 總 量 。 y 終 點(diǎn) 散 射 比 濁 法 可 以 實(shí) 現(xiàn) 自 動(dòng) 化 檢 測(cè) , 但 反 應(yīng)時(shí) 間 較 長(zhǎng) , 且 檢 測(cè) 靈 敏 度 低 于 速 率 散 射 比 濁 法的 檢 測(cè) 水 平 ( g/L水 平 ) 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué)

16、 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 18 抗 原 抗 體 相 遇 后 沉 淀 反 應(yīng) 立 即 開 始 , 在 反 應(yīng) 初 期 極 短 時(shí) 間 內(nèi) 反 應(yīng)體 系 檢 測(cè) 到 的 散 射 光 強(qiáng) 度 變 化 極 不 穩(wěn) 定 , 定 時(shí) 散 射 比 濁 法 選 擇 的檢 測(cè) 時(shí) 間 避 開 抗 原 抗 體 反 應(yīng) 初 期 的 不 穩(wěn) 定 階 段 , 在 抗 原 抗 體 反 應(yīng)趨 于 穩(wěn) 定 的 某 一 時(shí) 間 開 始 測(cè) 定 , 這 樣 可 以 較 少 系 統(tǒng) 誤 差 。y 技 術(shù) 要 點(diǎn) : 檢 測(cè) 過(guò) 程 分 兩 個(gè) 時(shí) 間 點(diǎn)

17、進(jìn) 行 。 在 抗 原 抗 體 反 應(yīng) 的 初 始 階 段 ,加 入 少 量 標(biāo) 本 與 抗 體 反 應(yīng) , 幾 秒 鐘 后 檢 測(cè) 第 一 次 散 射 光 信 號(hào) , 然 后 加入 所 有 需 要 的 標(biāo) 本 , 幾 分 鐘 后 檢 測(cè) 第 二 次 散 射 光 信 號(hào) , 以 第 二 次 散 射光 信 號(hào) 減 去 第 一 次 散 射 光 信 號(hào) , 獲 得 待 測(cè) 抗 原 與 抗 體 反 應(yīng) 而 形 成 的 免疫 復(fù) 合 物 對(duì) 入 射 光 的 散 射 信 號(hào) 峰 值 , 通 過(guò) 標(biāo) 準(zhǔn) 曲 線 即 可 換 算 出 待 測(cè) 抗原 的 值 。y 與 終 點(diǎn) 散 射 比 濁 法 比 較 , 反

18、應(yīng) 時(shí) 間 縮 短 , 但 檢 測(cè) 靈 敏 度 ( g/L水 平 )依 然 不 及 速 率 散 射 比 濁 法 , 且 需 要 扣 除 本 底 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 19 y所 謂 速 率 是 指 抗 原 抗 體 反 應(yīng) 在 單 位 時(shí) 間 內(nèi) 形 成 免 疫復(fù) 合 物 的 速 度 ( 不 是 免 疫 復(fù) 合 物 累 積 的 量 ) 。y連 續(xù) 測(cè) 定 各 單 位 時(shí) 間 內(nèi) 復(fù) 合 物 形 成 的 速 率 與 其 產(chǎn)

19、 生的 散 射 光 信 號(hào) 聯(lián) 系 在 一 起 , 形 成 動(dòng) 態(tài) 的 速 率 散 射 比濁 法 , 每 項(xiàng) 檢 測(cè) 僅 1 min 2 min即 可 完 成 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 20 抗 原 抗 體 復(fù) 合 物 形 成 的 時(shí) 間 與 速 率 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析

20、 儀 分 析 技 術(shù) 21 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 22 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 23 y主 要 用 于 藥 物 、 激 素 以 及 毒 物 等 半 抗 原 或 小 分 子 的定 量 檢 測(cè) 。y原 理 : 將 一 定 量 的 已 知 半 抗 原 -載 體

21、 與 限 量 的 特 異 性抗 體 反 應(yīng) , 生 成 的 抗 體 -半 抗 原 -載 體 可 形 成 一 定 的速 率 散 射 峰 值 。 當(dāng) 反 應(yīng) 體 系 中 加 入 待 檢 標(biāo) 本 , 其 中所 含 的 半 抗 原 與 已 知 半 抗 原 -載 體 競(jìng) 爭(zhēng) 結(jié) 合 抗 體 , 使抗 體 -半 抗 原 -載 體 復(fù) 合 物 的 形 成 受 到 抑 制 , 速 率 散射 峰 值 降 低 , 降 低 的 程 度 與 標(biāo) 本 中 待 測(cè) 半 抗 原 的 濃度 呈 正 相 關(guān) , 根 據(jù) 標(biāo) 準(zhǔn) 曲 線 可 推 算 出 標(biāo) 本 中 待 測(cè) 半抗 原 的 含 量 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校

22、 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 24 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 25 y1.分 光 光 度 儀采 用 終 點(diǎn) 法 作 免 疫 濁 度 分 析 的 測(cè) 定 儀 。y2.自 動(dòng) 生 化 分 析 儀大 型 多 通 道 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 多 專 門 編 有 或 可 自 編透 射 濁 度 分 析

23、 程 序 。y3.散 射 濁 度 分 析 儀 ( 特 種 蛋 白 分 析 儀 )固 定 時(shí) 間 散 射 分 析 儀 、 速 率 散 射 分 析 儀 和 雙 光 路自 動(dòng) 免 疫 濁 度 分 析 儀 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 26 y主 要 由 分 析 系 統(tǒng) 、 計(jì) 算 機(jī) 系 統(tǒng) 組 成 。分 析 系 統(tǒng)v用 于 加 樣 、 稀 釋 、 保 溫 和 測(cè) 試 等 ;v包 括 散 射 測(cè) 濁 儀 、 加 液 系 統(tǒng) 、 試

24、劑 轉(zhuǎn) 盤 、 樣 品 轉(zhuǎn) 盤 、卡 片 閱 讀 器 以 及 軟 盤 驅(qū) 動(dòng) 器 等 ;計(jì) 算 機(jī) 系 統(tǒng)v用 于 輸 入 病 人 數(shù) 據(jù) 、 選 擇 程 序 菜 單 、 計(jì) 算 參 考 曲 線 和儲(chǔ) 存 測(cè) 試 結(jié) 果 ;v包 括 計(jì) 算 機(jī) 主 機(jī) 、 CRT顯 示 屏 和 鍵 盤 等 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 27 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn)

25、 ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 28 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 29 y免 疫 濁 度 分 析 的 基 本 要 求 :始 終 保 持 反 應(yīng) 體 系 中 抗 體 適 量 過(guò) 剩 。y抗 原 過(guò) 剩 的 檢 測(cè) 方 法 : 連 續(xù) 監(jiān) 測(cè) 抗 原 抗 體 反 應(yīng) 曲 線 , 當(dāng) 抗 原 過(guò) 剩 時(shí) ,反 應(yīng) 曲 線 呈 現(xiàn) 異 常 。 反 應(yīng) 體 系 中 追 加 抗

26、體 , 如 果 濁 度 繼 續(xù) 增 大 則 提示 抗 原 過(guò) 剩 。 待 測(cè) 標(biāo) 本 用 兩 種 稀 釋 度 測(cè) 定 , 濃 度 高 的 樣 本 濁度 反 而 降 低 則 提 示 抗 原 過(guò) 剩 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 30 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 3

27、1定 時(shí) 散 射 比 濁 法 測(cè) 定 原 理 示 意 圖 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 32 y偽 濁 度 :在 反 應(yīng) 體 系 中 , 除 待 測(cè) 抗 原 抗 體 免 疫 復(fù) 合 物 產(chǎn) 生的 濁 度 外 , 其 它 可 引 起 透 射 光 或 散 射 光 發(fā) 生 變 化的 濁 度 都 稱 為 偽 濁 度 。y減 少 產(chǎn) 生 偽 濁 度 的 方 法 :標(biāo) 本 : 采 用 新 鮮 、 合 格 標(biāo) 本 。檢 測(cè) 體 系 : 保 持

28、比 色 杯 和 稀 釋 杯 清 潔 。試 劑 : 使 用 合 格 的 抗 體 試 劑 。增 濁 劑 濃 度 : 嚴(yán) 格 控 制 增 濁 劑 的 濃 度 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 33 y無(wú) 論 是 散 射 比 濁 還 是 透 射 比 濁 , 入 射 光 波 長(zhǎng) 的 選 擇原 則 :除 了 抗 原 抗 體 免 疫 復(fù) 合 物 外 , 反 應(yīng) 體 系 中 的 其 他成 分 對(duì) 入 射 光 的 干 擾 應(yīng) 為 最 小 , 因 為

29、 如 果 反 應(yīng) 體系 中 其 他 成 分 吸 收 了 部 分 入 射 光 , 透 射 比 濁 法 測(cè)定 結(jié) 果 將 使 抗 原 濃 度 偏 高 , 而 散 射 比 濁 法 測(cè) 定 將使 抗 原 濃 度 偏 低 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 34 ypH值 : 反 應(yīng) 體 系 中 pH值 的 變 化 可 影 響 抗 原 抗 體 的親 和 力 , 從 而 影 響 抗 原 抗 體 復(fù) 合 物 的 形 成 。 過(guò) 高 或過(guò) 低 的

30、pH值 均 可 使 反 應(yīng) 體 系 中 包 括 抗 體 、 待 測(cè) 抗 原以 及 待 測(cè) 標(biāo) 本 中 其 它 蛋 白 質(zhì) 變 性 而 形 成 偽 濁 度 。y電 解 質(zhì) : 一 定 濃 度 的 電 解 質(zhì) 可 促 進(jìn) 抗 原 抗 體 復(fù) 合 物的 形 成 , 但 離 子 濃 度 太 高 可 導(dǎo) 致 蛋 白 質(zhì) 鹽 析 , 也 可形 成 偽 濁 度 。 另 外 , 不 同 的 離 子 也 可 影 響 抗 原 抗 體復(fù) 合 物 的 形 成 , 通 常 免 疫 濁 度 測(cè) 定 采 用 磷 酸 鹽 溶 液作 為 緩 沖 液 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨

31、 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 35 y1.選 擇 合 適 的 校 準(zhǔn) 品y2.校 準(zhǔn) 曲 線 的 繪 制多 推 薦 5點(diǎn) 或 6點(diǎn) 定 標(biāo) 。選 擇 適 當(dāng) 的 數(shù) 學(xué) 方 法 進(jìn) 行 曲 線 擬 合 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 36 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢

32、驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 37 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 38 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 39 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué)

33、 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 40 y電 解 質(zhì)在 溶 液 中 能 解 離 成 帶 電 離 子 而 具 有 導(dǎo) 電 性 能 的 一 類 物 質(zhì) 。主 要 指 體 液 中 最 常 測(cè) 定 的 Na+、 K+、 Cl-、 Ca2+、 Mg2+、HCO3-和 無(wú) 機(jī) 磷 等 。y電 解 質(zhì) 分 析 儀 ( electrolyte analyzer)采 用 ISE或 其 他 部 件 來(lái) 測(cè) 量 溶 液 中 離 子 濃 度 的 儀 器 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué)

34、 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 41 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 42 y離 子 選 擇 性 電 極 ( ion selective electrode, ISE)對(duì) 溶 液 中 某 種 特 定 離 子 具 有 選 擇 性 響 應(yīng) 的 電 化學(xué) 傳 感 器 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢

35、驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 43 y通 常 由 電 極 管 、 內(nèi) 電 極 、 電 極 內(nèi) 充 溶 液 和 電 極 膜( 或 稱 敏 感 膜 ) 四 個(gè) 部 分 組 成 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 44 y大 多 數(shù) 電 極 膜 電 位 的 產(chǎn) 生 是 基 于 膜 材 料 與 溶 液 界 面 發(fā) 生 的 離子 交 換 反 應(yīng) 。當(dāng) 電 極 置 于 溶 液 中

36、 時(shí) , 由 于 離 子 交 換 和 擴(kuò) 散 作 用 , 改 變了 二 相 中 原 有 的 電 荷 分 布 , 因 而 形 成 雙 電 層 , 其 間 產(chǎn) 生一 定 的 電 位 差 即 膜 電 位 。ISE的 電 位 與 溶 液 中 特 定 離 子 活 度 的 對(duì) 數(shù) 呈 線 性 關(guān) 系 。Nernst方 程 式 : : 陰 離 子 時(shí) 為 , 陽(yáng) 離 子 時(shí) 為 iISE lgnF2.303RTKE 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù)

37、 45 yISE的 EISE值 不 能 直 接 測(cè) 定將 ISE與 參 比 電 極 共 同 浸 入 待 測(cè) 樣 品 中 組 成 一 個(gè)原 電 池 , 通 過(guò) 測(cè) 量 E電 池 來(lái) 測(cè) 定 EISE值 。y電 池 的 電 動(dòng) 勢(shì) 在 一 定 條 件 下 , 原 電 池 的 電 動(dòng) 勢(shì) 與 被 測(cè) 離 子活 度 的 對(duì) 數(shù) 呈 線 性 關(guān) 系 。 i lgnF2.303RTKE 電 池 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 46 選 擇 性

38、好 :多 數(shù) 情 況 下 共 存 離 子 的 干 擾 小 , 組 成 復(fù) 雜 的 試 樣 往往 不 需 分 離 處 理 即 可 直 接 測(cè) 定 。 靈 敏 度 高 : 可 達(dá) 10-5 10-8mmol/L 線 性 范 圍 寬 : Na+為 10-6 10-1mmol/L K +為 310-5 1mol/L Cl -為 510-5 1mol/L Ca+為 310-5 1mol/L 溶 血 、 黃 疸 不 影 響 測(cè) 定 , 對(duì) 有 色 、 渾 濁 溶 液 都 可 進(jìn) 行 分 析 。 設(shè) 備 簡(jiǎn) 單 , 分 析 速 度 快 , 易 于 自 動(dòng) 化 , 標(biāo) 本 用 量 少 , 應(yīng) 用 范圍 廣 。

39、 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 47 y( 1) 離 子 強(qiáng) 度 : 實(shí) 際 測(cè) 量 的 是 離 子 的 活 度 , 而 臨 床 則是 以 離 子 的 濃 度 報(bào) 告 結(jié) 果 , 二 者 之 間 的 系 數(shù) 則 是 活 度系 數(shù) , 而 活 度 系 數(shù) 又 是 溶 液 離 子 強(qiáng) 度 的 函 數(shù) , 因 此 ,必 須 保 持 標(biāo) 準(zhǔn) 液 與 標(biāo) 本 之 間 離 子 強(qiáng) 度 的 一 致 性 。y( 2) 溶 液 的 pH值 : 溶

40、液 的 pH值 變 化 可 影 響 待 測(cè) 離 子在 溶 液 中 的 存 在 狀 態(tài) , 從 而 影 響 測(cè) 定 的 準(zhǔn) 確 性 , 如 離子 鈣 的 測(cè) 定 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 48 y( 3) 溫 度 : 溫 度 的 變 化 對(duì) 離 子 選 擇 電 極 電 位 的 影 響 稱 為溫 度 效 應(yīng) 。 主 要 表 現(xiàn) 在 : 影 響 電 極 的 響 應(yīng) 斜 率 、 標(biāo) 準(zhǔn) 電 極 的 截 距 、 溶 液 待 測(cè)離 子

41、 的 活 度 系 數(shù) 以 及 參 比 電 極 電 位 和 液 接 電 位 ; 影 響 電 活 性 物 質(zhì) 的 溶 解 度 、 檢 出 下 限 ; 影 響 活 性 平 衡 的 移 動(dòng) 以 至 溶 液 中 待 測(cè) 離 子 的 濃 度 發(fā)生 明 顯 的 變 化 。 ( 溫 度 、 溫 差 )y( 4) 干 擾 離 子 : 溶 液 中 的 共 存 離 子 影 響 反 應(yīng) 液 的 離 子 強(qiáng)度 從 而 影 響 了 被 測(cè) 離 子 的 測(cè) 定 ; 共 存 離 子 還 可 與 待 測(cè) 離子 形 成 絡(luò) 合 物 或 發(fā) 生 氧 化 還 原 反 應(yīng) , 導(dǎo) 致 待 測(cè) 離 子 的 數(shù)量 減 少 。 全 國(guó) 高

42、等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 49 ( 1) 標(biāo) 準(zhǔn) 比 較 法 ( 或 直 讀 法 )v在 pH計(jì) 或 離 子 計(jì) 上 直 接 讀 出 數(shù) 值 的 方 法 , 適 用 于 少 量 樣本 的 分 析 。( 2) 標(biāo) 準(zhǔn) 曲 線 法v適 用 于 大 批 量 的 試 樣 分 析 。( 3) 標(biāo) 準(zhǔn) 加 入 法v當(dāng) 待 測(cè) 溶 液 組 分 較 復(fù) 雜 , 很 難 控 制 相 同 的 離 子 強(qiáng) 度 時(shí) ,選 用 標(biāo) 準(zhǔn) 加 入 法 。 全 國(guó) 高

43、等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 50 直 接 法v樣 本 不 經(jīng) 稀 釋 直 接 由 電 極 測(cè) 量 離 子 活 度 ;v優(yōu) 點(diǎn) : 可 采 用 全 血 測(cè) 定 , 迅 速 方 便 , 結(jié) 果 準(zhǔn) 確 , 不會(huì) 因 血 清 中 水 體 積 所 占 比 例 改 變 而 影 響 結(jié) 果 。間 接 法v樣 本 經(jīng) 一 定 離 子 強(qiáng) 度 緩 沖 溶 液 稀 釋 后 , 由 電 極 測(cè) 量離 子 活 度 。v優(yōu) 點(diǎn) : 樣 品 用 量 少 ; 樣 品

44、預(yù) 稀 釋 , 不 易 堵 塞 管 道 ;降 低 了 血 脂 、 不 溶 性 蛋 白 質(zhì) 對(duì) 電 極 的 污 染 , 電 極 壽命 延 長(zhǎng) 。直 接 法 比 間 接 法 測(cè) 定 結(jié) 果 高 3 5 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 51 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù)

45、52 y1.按 自 動(dòng) 化 程 度 分 類半 自 動(dòng) 和 全 自 動(dòng) 電 解 質(zhì) 分 析 儀 。y2.按 工 作 方 式 分 類濕 式 和 干 式 電 解 質(zhì) 分 析 儀 。y3.按 儀 器 的 功 能 分 類電 解 質(zhì) 分 析 儀 、 含 電 解 質(zhì) 分 析 的 血 氣 分 析 儀 、 含電 解 質(zhì) 分 析 的 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 等 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 53 y濕 式 電 解 質(zhì) 分 析 儀一 般 由 離

46、 子 選 擇 性 電 極 組 、 液 路 系 統(tǒng) 、 電 路 系 統(tǒng) 、程 序 控 制 模 塊 和 顯 示 操 作 系 統(tǒng) 等 組 成 。y鈉 、 鉀 、 氯 電 極鈉 電 極 是 一 種 含 鉛 硅 酸 鈉 的 玻 璃 膜 電 極 ;鉀 電 極 為 由 纈 氨 霉 素 和 聚 氯 乙 烯 ( PVC) 等 組 成的 膜 電 極 ;氯 電 極 由 一 個(gè) 銀 氯 化 銀 電 極 組 成 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 54 全

47、國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 55 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 56 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 57

48、 采 血 用 器 材 必 須 干 燥 、 清 潔 , 最 好 選 用 一 次 性 用 品 。 選 擇 正 確 采 血 時(shí) 間 和 部 位 , 減 少 輸 液 對(duì) 結(jié) 果 的 影 響 。 采 血 中 應(yīng) 避 免 溶 血 。 應(yīng) 盡 快 送 檢 , 不 能 劇 烈 振 蕩 , 不 能 長(zhǎng) 時(shí) 間 被 日 光 照 射 ;不 能 立 即 測(cè) 定 時(shí) 應(yīng) 分 離 血 清 , 置 于 4 冰 箱 中 保 存 。 當(dāng) 血 樣 與 空 氣 接 觸 時(shí) , 可 造 成 血 樣 中 的 CO2濃 度 偏 低 ,pH值 升 高 , 進(jìn) 而 使 鈣 離 子 濃 度 降 低 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué)

49、檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 58 抗 凝 劑v血 樣 不 能 使 用 EDTA、 檸 檬 酸 鹽 或 草 酸 鹽 等 抗 凝 劑 。v即 使 用 肝 素 , 其 濃 度 通 常 也 不 超 過(guò) 20U/ml血 樣 。藥 物v藥 物 或 它 的 代 謝 產(chǎn) 物 , 能 引 起 患 者 體 內(nèi) 被 測(cè) 物 的 濃 度發(fā) 生 改 變 。 如 利 尿 劑 促 進(jìn) K+、 Na+、 Cl-從 尿 中 排 出 。v藥 物 直 接 對(duì) ISE的 響 應(yīng) 產(chǎn) 生 影 響 。 如 水

50、楊 酸 鹽 對(duì) Cl-電極 響 應(yīng) 有 干 擾 , 維 生 素 C對(duì) K+電 極 響 應(yīng) 有 干 擾 等 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 59 場(chǎng) 所 : 儀 器 要 求 安 裝 在 干 凈 、 平 穩(wěn) 的 工 作 臺(tái) 上 ,盡 可 能 避 免 潮 濕 和 陽(yáng) 光 直 射 ;電 源 : 實(shí) 驗(yàn) 室 的 供 電 必 須 符 合 要 求 , 必 要 時(shí) 需 連接 穩(wěn) 壓 電 源 ;環(huán) 境 : 周 圍 不 得 有 強(qiáng) 的 電 磁 干

51、擾 源 ( 如 離 心 機(jī)等 ) , 并 確 保 儀 器 外 殼 接 地 良 好 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 60 y1.定 標(biāo) 校 正 液 定 標(biāo) 液 ( A標(biāo) ) 、 斜 標(biāo) 液 ( B標(biāo) )各 廠 家 的 定 標(biāo) 校 正 液 不 能 互 換 使 用 。y2.電 極 保 養(yǎng) 電 極 活 化 液 、 去 蛋 白 液電 極 使 用 一 段 時(shí) 間 后 就 需 要 保 養(yǎng) 。y3.質(zhì) 控 品選 用 質(zhì) 量 好 、 性 能 穩(wěn)

52、定 和 對(duì) 離 子 選 擇 性 電 極 響 應(yīng)沒(méi) 有 干 擾 的 質(zhì) 控 血 清 , 作 為 實(shí) 驗(yàn) 室 內(nèi) 的 質(zhì) 控 品 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 61 y4.評(píng) 價(jià) 分 析 性 能儀 器 、 試 劑 、 方 法 等 整 個(gè) 檢 測(cè) 系 統(tǒng) 一 旦 確 定 之 后 ,必 須 對(duì) 整 個(gè) 系 統(tǒng) 的 不 精 密 度 、 不 準(zhǔn) 確 度 、 病 人 結(jié)果 的 可 報(bào) 告 范 圍 、 分 析 靈 敏 度 、 分 析 干 擾

53、和 參 考范 圍 等 分 析 性 能 進(jìn) 行 評(píng) 價(jià) ;并 建 立 嚴(yán) 格 的 質(zhì) 量 控 制 規(guī) 范 ( 包 括 選 用 質(zhì) 控 品 ,設(shè) 定 靶 值 、 標(biāo) 準(zhǔn) 差 , 繪 制 質(zhì) 控 圖 , 失 控 情 況 處 理及 原 因 分 析 等 ) 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 62 y異 常 結(jié) 果 的 分 析 取 舍 :如 葡 萄 糖 、 碳 酸 氫 根 過(guò) 低 , 同 時(shí) 鉀 離 子 過(guò) 高 往 往 是 血 樣 未經(jīng) 分

54、離 放 置 時(shí) 間 過(guò) 長(zhǎng) 所 致 。多 項(xiàng) 檢 測(cè) 結(jié) 果 過(guò) 低 , 往 往 提 示 樣 品 稀 釋 比 例 不 對(duì) 、 樣 品 中有 纖 維 蛋 白 凝 塊 或 吸 樣 針 部 分 堵 塞 導(dǎo) 致 吸 樣 量 不 足 所 致 。y對(duì) 某 些 急 診 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 :如 血 鉀 、 血 鈣 等 遇 到 特 別 異 常 結(jié) 果 時(shí) , 應(yīng) 及 時(shí) 與 臨 床 醫(yī) 生聯(lián) 系 , 以 便 對(duì) 患 者 進(jìn) 行 緊 急 處 置 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化

55、分 析 儀 分 析 技 術(shù) 63y詳 見 第 十 三 章 體 液 與 酸 堿 平 衡 紊 亂 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 64 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 65 y血 氣 分 析 儀 (blood gas analyzer)應(yīng) 用 電 化 學(xué) 分 析 技 術(shù) 和

56、原 理 , 采 用 電 極 對(duì) 血 液 中 的 pH值 、PCO2和 PO2進(jìn) 行 測(cè) 定 的 臨 床 分 析 儀 器 。近 年 來(lái) , 血 氣 分 析 儀 增 加 了 新 功 能 , 如 電 解 質(zhì) , 尿 素 氮 、肌 酐 、 葡 萄 糖 、 乳 酸 等 代 謝 物 及 血 氧 系 統(tǒng) 定 量 測(cè) 定 , 現(xiàn) 代血 氣 分 析 儀 又 稱 為 全 自 動(dòng) 血 氣 電 解 質(zhì) 代 謝 物 血 氧 分析 儀 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分

57、析 技 術(shù) 66 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 67 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 68 ypH測(cè) 定 系 統(tǒng) : 玻 璃 電 極 、參 比 電 極 和 兩 種 電 極 間 的 液體 介 質(zhì) 。y玻 璃 電 極 : 對(duì) H+十 分 敏 感 ,用 于 測(cè) 定 樣 品 中

58、 的 H+活 度 。y測(cè) 定 原 理 : 標(biāo) 本 的 H 與 玻璃 電 極 膜 中 的 金 屬 離 子( Na+) 進(jìn) 行 離 子 交 換 , 產(chǎn)生 電 位 變 化 , 該 電 位 與 H成 正 比 , 同 時(shí) 用 參 比 電 極 比較 測(cè) 量 , 得 出 溶 液 的 pH值 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 69 y將 pH敏 感 的 玻 璃 電 極 的 玻 璃 膜放 置 在 碳 酸 氫 鈉 溶 液 中 。 溶 液 的外 側(cè) 再

59、 包 一 層 由 聚 四 氟 乙 烯 或 硅橡 膠 膜 , 它 只 允 許 CO2自 由 透 過(guò) ,其 它 離 子 不 能 通 過(guò) 。y當(dāng) 血 樣 品 與 此 膜 接 觸 時(shí) , 血 漿 中溶 解 的 CO2透 過(guò) 此 膜 , 擴(kuò) 散 到 碳酸 氫 鈉 溶 液 中 與 H2O發(fā) 生 反 應(yīng) :y結(jié) 果 使 膜 內(nèi) 側(cè) 溶 液 的 pH值 發(fā) 生變 化 , 并 通 過(guò) 玻 璃 電 極 測(cè) 定 pH。 CO2 + H2O H2CO3 H+ + HCO3- 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床

60、專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 70 y由 鉑 (Pt)絲 陰 極 和 Ag/AgCl參 比 陽(yáng)極 組 成 的 O2敏 感 電 極 , 磷 酸 鹽 緩 沖液 使 兩 極 溝 通 。y緩 沖 液 外 包 裹 一 層 聚 丙 烯 膜 , 將 樣品 池 與 磷 酸 鹽 緩 沖 液 隔 開 , 能 阻 止血 液 中 各 種 離 子 透 入 , 但 允 許 O2自由 透 過(guò) 。yO2透 過(guò) 聚 丙 烯 膜 到 鉑 陰 極 表 面 時(shí) ,不 斷 被 還 原 ; 陽(yáng) 極 不 斷 地 產(chǎn) 生 Ag +并 Cl-結(jié) 合 成 AgCl沉 積 在 電 極 上 。y化 學(xué) 變 化 如 下 : O2

61、 2H+ 4e H2O2 2e 2OH- Ag Ag+ + e Ag+ + Cl- AgCl 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 71 在 0.65V的 極 化 電 壓 下 , 電 極 電 流 的 大 小 取 決 于鉑 陰 極 表 面 O2量 。O2在 鉑 陰 極 表 面 發(fā) 生 的 反 應(yīng) 如 下 :極 限 擴(kuò) 散 電 流 的 大 小 決 定 于 滲 透 到 陰 極 表 面 氧 的多 少 , 后 者 又 取 決 于 膜 外 的 PO2

62、。vPO2電 極 電 流 與 PO2成 正 比 , 過(guò) 0點(diǎn) 的 一 條 直 線 , 只 需要 1點(diǎn) 定 標(biāo) ( 校 準(zhǔn) ) 。v其 他 電 極 的 電 壓 與 含 量 ( 或 對(duì) 數(shù) 含 量 ) 關(guān) 系 都 不 過(guò) 0點(diǎn) ,所 以 需 要 兩 點(diǎn) 定 標(biāo) , 且 偏 差 不 能 大 于 5% 。2222 OH2OH2O OH2e2OH 22 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 72由 電 極 系 統(tǒng) 、 管 路 系 統(tǒng) 和 電 路 系

63、 統(tǒng) 組 成 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 73 y由 溶 液 瓶 、 氣 瓶 、 正 壓 泵 、 負(fù) 壓 泵 、 電 磁 閥 、 轉(zhuǎn) 換裝 置 和 連 接 管 道 等 部 分 組 成 。y1.氣 路 系 統(tǒng)主 要 用 來(lái) 提 供 PO2和 PCO2兩 種 電 極 定 標(biāo) 時(shí) 所 需 的兩 種 標(biāo) 準(zhǔn) 氣 體 。依 據(jù) 配 氣 方 式 , 氣 路 系 統(tǒng) 可 分 兩 種 類 型 :v(1) 外 配 氣 方 式 , 又 叫 壓 縮

64、氣 瓶 供 氣 方 式 。v(2) 內(nèi) 配 氣 方 式 , 又 叫 氣 體 混 合 器 供 氣 方 式 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 74 y(1) 外 配 氣 方 式儀 器 由 兩 個(gè) 壓 縮 氣 瓶 提 供 定 標(biāo) 氣 , 一 個(gè) 含 有 5CO2和 20 O2; 另 一 個(gè) 含 10 CO2, 不 含 O2。y(2) 內(nèi) 配 氣 方 式儀 器 本 身 配 備 有 氣 體 混 合 器 , 以 產(chǎn) 生 定 標(biāo) 氣 。 來(lái)自

65、空 氣 壓 縮 機(jī) 產(chǎn) 生 的 壓 縮 空 氣 和 氣 瓶 送 來(lái) 的 純CO2氣 體 由 氣 體 混 合 器 進(jìn) 行 配 比 、 混 合 , 產(chǎn) 生 符合 要 求 的 定 標(biāo) 氣 體 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 75 y2.液 路 系 統(tǒng)兩 種 功 能 : 為 pH電 極 系 統(tǒng) 提 供 定 標(biāo) 緩 沖 液 ; 管 道 沖 洗 。一 般 需 要 四 個(gè) 溶 液 瓶 , 分 別 盛 放 緩 沖 液 1、 緩 沖 液 2、沖

66、洗 液 和 廢 液 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 76 y電 路 系 統(tǒng) 將 儀 器 測(cè) 量 信 號(hào) 進(jìn) 行 放 大 和 模 數(shù)轉(zhuǎn) 換 , 對(duì) 儀 器 實(shí) 行 有 效 控 制 、 顯 示 和 打 印結(jié) 果 , 通 過(guò) 鍵 盤 輸 入 指 令 。 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 77 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 專 業(yè) 規(guī) 劃 教 材 臨 床 生 物 化 學(xué) 檢 驗(yàn) ( 第 二 版 ) 第 八 章 臨 床 專 用 自 動(dòng) 生 化 分 析 儀 分 析 技 術(shù) 78 y (一 ) 定 標(biāo)y( 二 ) 質(zhì) 控 物 的 使 用y( 三 ) 合 格 的 標(biāo) 本y (四 ) 儀 器 狀 態(tài) 與 工 作 環(huán) 境 全 國(guó) 高 等 醫(yī) 藥 院 校 醫(yī) 學(xué) 檢

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