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1、實驗二 動物實驗基本操作技術 實驗目的 掌握： 常用實驗動物的捉取、固定與給藥方法；實驗動物 的麻醉方法、氣管插管方法、動靜脈插管方法、尿管插管 方法、輸尿管插管方法。 熟悉： 頸部和腹部手術操作的基本技術，常用儀器設備與 手術器械的使用方法，實驗動物取血法和處死的方法。 了解： 常用實驗動物的主要生物學特性及應用；動物的去 毛、編號、去毛、取血和處死方法。 操作練習 全身麻醉 家兔 氣管插管 頸總 A插管 哺乳動物手術器材清單 金屬用品 玻璃 /塑料用品 其他 粗剪 1把 氣管插管 1個 紗布 手術剪 1把 動脈插管 1根 棉簽 眼科剪 1把 玻璃分針 1根 絲線 血管鉗 4把 三通管 1-

2、2個 布條 手術鑷 1把 注射器 2支 壓力換能器 手術刀 1把 動脈夾 1個 藥品 戊巴比妥鈉（ 1.5%） 為中效巴比妥類藥物。是最常用的麻醉劑，需 保存在陰涼處。一般作用時間可維持 2-4h。使用 劑量為 2ml/kg，使用方法為靜脈注射（ iv.）或腹 腔注射（ ip.）。 生理鹽水肝素（ 1:10000） 肝素是一種酸性粘多糖，主要是 由肥大細胞 和嗜堿性粒細胞產(chǎn)生。肺、心、肌肉等組織中含 量豐富，生理情況下血漿中含量甚微。無論在體 內(nèi)還是體外，肝素的抗凝作用都很強，故臨床把 它作為抗凝劑廣泛使用。肝素在動物體內(nèi)抗凝的 劑量一般為 3-10mg/kg，體外血液抗凝濃度為 0.1- 0

3、.2mg/ml。 家兔全身麻醉 麻醉劑： 1.5%戊巴比妥鈉 2ml/kg 給藥方法：耳緣靜脈注射 麻醉藥物應用原則： 依據(jù)動物體重計算麻醉藥物的劑量； 依據(jù)動物生命體征變化控制給藥速度； 掌握 寧少勿多、分階段給藥 的方式。 針對不同的動物，選擇不同的麻醉藥物、實施 不同的麻醉方法。 家兔耳緣靜脈注射麻醉具體操作 備皮。 用手指輕彈血管，使耳緣靜脈充盈。 用左手食指和中指夾住靜脈近心端，拇指和小指夾住耳緣 部分，以左手無名指和小指放在耳下作墊。 右手持注射器使針頭由靜脈末端呈 30 刺入，順血管方向 向心端推進約 1-1.5cm 放松左手拇指和食指對血管的壓迫，右手試推注射器針芯， 若注射阻

4、力較大或出現(xiàn)局部腫脹，說明針頭沒有刺入靜脈， 應立即拔出針頭，若推注阻力不大，可將藥物徐徐注入， 注射完畢后將針頭抽出，隨即以棉球壓迫止血。 給藥速度 前 2/3快速推入 ， 使動物能順利 、 快速地渡 過興奮期； 后 1/3速度宜慢 ， 且邊注射邊注 意觀察動物的生命體征變化 ， 當確定已達到 麻醉效果時 ， 即停止給藥 ， 不必急于將剩余 的麻醉藥物全部推入 。 麻醉成功標志 角膜反射遲鈍 肢體肌肉松弛 疼痛反射消失 呼吸變淺變慢 動物實驗常用插管技術 氣管插管術 頸動脈插管術 頸靜脈插管術 插管技術的基本步驟 1. 動物稱重、麻醉、固定。 2. 插管部位皮膚去毛、備皮。 3. 皮膚切開。

5、 4. 皮下組織結構的分離。 5. 目標器官或組織結構的游離。 6. 導管的插入或固定。 家兔頸部神經(jīng)和血管的解剖位置 迷走神 經(jīng) 交感神經(jīng) 減 壓 神 經(jīng) 氣管插管術 1、麻醉固定、頸部皮 膚去毛、備皮 2、在頸前區(qū)正中 作一約 5-7cm的切 口 3、鈍性分離皮下組織、肌肉，游離出氣管，穿線 備用。 4、 在甲狀軟骨下方第 3-4軟骨環(huán)處作一倒 “ T”形切口 ， 向胸腔 方向插入氣管插管 ， 確認插管通暢后用線 固定 ， 再在插管分叉 處打結 （ 二次固定 ） 。 頸動脈插管技術 1、由頸正中剪開一約 5-7cm的口、鈍性分離皮 下筋膜（略）。 2、換能器與插管的準備。 換能器與三通管、

6、動脈插管連接，充灌滿 1:10000生理鹽水肝素，并關閉三通管。 三通管的使用 3、 用玻璃分針分離一側頸總動脈 ， 暴露血管 2-3cm， 穿雙線備用 。 4、 結扎頸總動脈遠心端 ， 在近心端 用動脈夾夾閉 。 5、 在靠近結扎線處用眼科剪剪一 “ v”形切口 ， 切 口大小約為動脈口徑的 1/31/2。 6、 將充滿肝素的動脈插管 向近心端插入 ， 用線打 雙結結扎 ， 再固定于插管纏膠布處 （ 二次固定 ） 。 進入 BL 410/420系統(tǒng)。 選擇 “ 輸入信號 ” 選擇 “ 通道 ” “ 壓力 ” 點擊 “ 開始 ” 實驗按鈕 ， 即可在屏幕上觀察到正常的血壓曲 線 。 選擇 “ 實驗項目 ” 選擇 “ 循環(huán)實驗 ” “ 兔動脈 血壓調(diào)節(jié) ” 實驗模塊。 7、打開生物機能實驗系統(tǒng)，觀察并記錄動 脈血壓。 先小心松開動脈夾，確認無誤后再取走。若有滲血或血 液回流等意外，可立刻夾閉再進一步處理。 動脈插管注意事項 動脈插管和血壓換能器內(nèi)一定要排凈空氣； 壓力換能器與動物心臟等高； 動脈插管與頸總動脈呈一條直線，方向一致； 掌握好三通管的方向； 結扎固定牢固。