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(課標(biāo)版)高考生物一輪總復(fù)習(xí) 隨堂跟蹤訓(xùn)練 生物技術(shù)實驗 第2講 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用(選修1)-人教版高三選修1生物試題

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1、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 1.(2015·吉林長春二模)醋酸菌和纖維素分解菌是工業(yè)中常用的微生物。請分析回答下列問題。 (1)在________和糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸;當(dāng)缺少糖源時,醋酸菌可將乙醇氧化為________,進(jìn)而生成醋酸。 (2)為了從某細(xì)菌樣品中篩選出纖維素分解菌,可采用________染色法進(jìn)行篩選。如果樣品中細(xì)菌濃度較低,可以通過________培養(yǎng)來增加纖維素分解菌的濃度,該過程所用的培養(yǎng)基為________(固體/液體)培養(yǎng)基。為了純化纖維素分解菌,某同學(xué)采用平板劃線法進(jìn)行接種,在做第二次以及其后的劃線操作時,應(yīng)該從上一次劃線的________開始

2、劃線。為了避免環(huán)境中微生物的污染,實驗操作應(yīng)在________附近進(jìn)行。 (3)將菌種進(jìn)行臨時保存時,可在低溫下使用試管斜面保存,但該方法除保存時間短外,菌種還易______________;若需較長時間保存菌種,可用的方法是______________。 [解析] 在氧氣和糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸;當(dāng)缺少糖源時,醋酸菌可將乙醇氧化為乙醛,進(jìn)而生成醋酸。篩選纖維素分解菌可采用剛果紅染色法,如果樣品中細(xì)菌濃度較低,可以通過選擇培養(yǎng)來增加纖維素分解菌的濃度。某同學(xué)采用平板劃線法進(jìn)行接種,在做第二次以及其后的劃線操作時,應(yīng)該從上一次劃線的末端開始劃線。為了避免環(huán)境中微生物的污

3、染,實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。試管斜面保存菌種,菌種易被污染或產(chǎn)生變異,若需較長時間保存菌種,可采用甘油管藏的方法。 [答案] (1)氧氣 乙醛 (2)剛果紅 選擇 液體 末端 酒精燈火焰 (3)被污染或產(chǎn)生變異 甘油管藏 2.微生物連續(xù)培養(yǎng)時,一部分舊的培養(yǎng)基以一定的速度流出,同時不斷有等量的新鮮培養(yǎng)基流入以保證微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要。研究人員將大腸桿菌JA122菌株接種到葡萄糖含量受到限制的培養(yǎng)基中,連續(xù)培養(yǎng)多代,然后取樣分析其中存在的新菌株。請回答下列問題: (1)用于連續(xù)培養(yǎng)JA122大腸桿菌的培養(yǎng)基從物理性質(zhì)看屬于____________。培養(yǎng)基中除了含葡萄糖作為__

4、______外,還應(yīng)該含有__________________________________________。 (2)樣品中共發(fā)現(xiàn)CV101、CV103、CV116三種新菌株,產(chǎn)生新菌株的原因是由于JA122大腸桿菌發(fā)生了____________導(dǎo)致的,產(chǎn)生三種不同類型的新菌株說明__________________________。 (3)下圖表示將CV101、CV103、CV116三種新菌株混合在一起培養(yǎng)的生長情況,三者之間互為競爭關(guān)系,并保持穩(wěn)定生長水平,沒有出現(xiàn)一種菌株生存而另外兩種菌株滅絕的現(xiàn)象,說明它們已經(jīng)具有了不同的適應(yīng)能力,這是________的結(jié)果。 (4)對三種

5、菌株的代謝差異進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn),CV103對葡萄糖吸收率最高,代謝終產(chǎn)物是醋酸鹽。進(jìn)一步研究表明,CV101可以在過濾的培養(yǎng)過CV103的培養(yǎng)基中生長,據(jù)此作出的推測是:____________________________________。請設(shè)計并完成下列實驗步驟,來驗證你的觀點(diǎn)。 ①配制____________________________的固體培養(yǎng)基(A組)和不含碳源的固體培養(yǎng)基(B組); ②將等量的適量稀釋的CV101菌液分別接種到A、B培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間,并觀察記錄菌株的生長情況。實驗過程應(yīng)在________條件下進(jìn)行。 ③預(yù)期實驗結(jié)果:___________________

6、_________________________。 [答案] (1)液體培養(yǎng)基 碳源 氮源、無機(jī)鹽、水 特殊營養(yǎng)物質(zhì)(生長因子) (2)基因突變 基因突變的不定向性 (3)進(jìn)化(或自然選擇) (4)CV101菌株能以CV103菌株產(chǎn)生的醋酸鹽為碳源 ①以醋酸鹽為唯一碳源 ②無菌 ③A組菌株生長(形成菌落),B組菌株不能生長(無菌落) 3.(2015·赤峰模擬)高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌,其篩選過程如下圖所示。請回答下列問題。 (1)實驗過程應(yīng)采用無菌技術(shù),防止培養(yǎng)物被微生物污染及____________被微

7、生物感染,操作者的雙手需要進(jìn)行清潔和________處理。 (2)Ⅰ、Ⅱ號培養(yǎng)基配制和滅菌時,滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是____________。 (3)Ⅰ號培養(yǎng)基中的碳源為________。若Ⅰ號培養(yǎng)基中的菌落連成一片,最可能的原因是____________。 (4)部分嗜熱菌的菌落周圍形成透明圈,應(yīng)挑出透明圈________(填“大”或“小”)的菌落接種到Ⅱ號培養(yǎng)基,該過程的目的是________目的菌;下次劃線時接種環(huán)上的菌種來源于____________。 [解析] (1)微生物培養(yǎng)時,為了防止培養(yǎng)物被微生物污染及操作者自身被微生物感染,應(yīng)采用無菌技術(shù),對操作者的雙手需要進(jìn)行清

8、潔和消毒處理。(2)培養(yǎng)基配制時,應(yīng)先調(diào)節(jié)pH,然后滅菌處理。(3)從熱泉中篩選高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌,應(yīng)以淀粉作為唯一碳源。若涂布平板時培養(yǎng)基中的菌落連成一片,最可能的原因是菌液濃度過高(或稀釋不夠)。(4)嗜熱菌的菌落周圍形成透明圈,透明圈越大,則表明該菌能更高效利用淀粉。Ⅱ號培養(yǎng)基上采用平板劃線法接種,是為了純化目的菌,下次劃線時接種環(huán)上的菌種來源于上次劃線末端。 [答案] (1)操作者自身 消毒 (2)先調(diào)節(jié)pH,后滅菌 (3)淀粉 菌液濃度過高(或稀釋不夠) (4)大 純化 上次劃線末端 4.(2015·新課標(biāo)全國卷Ⅰ)已知微生物A可以產(chǎn)生油脂,微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。

9、脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?;卮鹩嘘P(guān)問題。 (1)顯微觀察時,微生物A菌體中的油脂通??捎胈_______染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā),可選用________(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。 (2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落,可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣,并應(yīng)選用以________為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 (3)若要測定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù),可在顯微鏡下用____________直接計數(shù);若要測定其活菌數(shù)量,可選用____________法進(jìn)行計數(shù)。 (4)為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度,某同學(xué)測得相同時間內(nèi),在

10、35 ℃、40 ℃、45 ℃溫度下降解10 g油脂所需酶量依次為4 mg、1 mg、6 mg,則上述三個溫度中,________℃條件下該酶活力最小。為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度,應(yīng)圍繞________℃設(shè)計后續(xù)實驗。 [解析] 本題主要考查了植物油脂的染色和提取方法、選擇培養(yǎng)基的配制、微生物的計數(shù)以及確定酶的最適溫度的實驗設(shè)計等。(1)脂肪可用蘇丹Ⅲ染液(或蘇丹Ⅳ染液)進(jìn)行染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā),不能用水蒸氣蒸餾法提取,應(yīng)用萃取法加以提取。(2)能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B可存在于含有油料作物種子的腐爛物的土壤中,為了選擇培養(yǎng),固體培養(yǎng)基上應(yīng)以油脂作為唯一碳源。(3)測定培養(yǎng)液中的微生

11、物的菌體數(shù),可在顯微鏡下用血細(xì)胞計數(shù)板直接計數(shù);而要測定活菌數(shù),則可利用稀釋涂布平板法進(jìn)行計數(shù)。(4)酶量需要最多的溫度下,其酶活力最小,即酶活力最小的溫度應(yīng)為45℃。三個溫度下酶活力最大的溫度是40℃,但40℃不一定是該酶的最適溫度,故應(yīng)圍繞40℃設(shè)計后續(xù)實驗。 [答案] (1)蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ) 萃取法 (2)油脂 (3)血細(xì)胞計數(shù)板 稀釋涂布平板 (4)45 40 5.(2014·四川卷)有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑,長期使用會污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn),苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實驗過程如圖甲、乙所示。 (1)微生物生長繁殖所需的主要營

12、養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、________四類,該實驗所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源,其原因是_____________。 (2)與微生物培養(yǎng)基相比,植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長素和________,這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配制成________保存?zhèn)溆谩? (3)純化菌株時,通常使用的劃線工具是________。劃線的某個平板培養(yǎng)后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌,第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落,其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有 ______________________________________________ _____________

13、_________________________________。 (4)為探究苯磺隆的降解機(jī)制,將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心,取上清液做圖乙所示實驗。該實驗的假設(shè)是____________________,該實驗設(shè)計是否合理?為什么?____________________________________。 [解析] (1)微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括水、碳源、氮源和無機(jī)鹽;在培養(yǎng)基中加入苯磺隆作為唯一碳源,可將只能利用此碳源的菌種篩選出來。(2)植物組織培養(yǎng)基與微生物培養(yǎng)基相比,常常需要添加植物激素,包括生長素和細(xì)胞分裂素;這些植物激素事先按一定的質(zhì)量濃度單獨(dú)配成母液保存?zhèn)溆谩?3)純化菌株時,通常用接種環(huán)進(jìn)行劃線操作;第二區(qū)域劃第一條線時,接種環(huán)灼燒后未冷卻,致使所劃第一條線上無菌落。若第二次劃線未從第一區(qū)域末端開始,則也會導(dǎo)致第二劃線區(qū)域第一條線上無菌落。(4)由圖乙可知本實驗的目的是探究能降解苯磺隆的物質(zhì)是否是該菌種所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)。為使實驗設(shè)計更合理還需再設(shè)置一個對照組,將蛋白酶溶液改為等量的蒸餾水,其余設(shè)置不變。 [答案] (1)氮源和無機(jī)鹽 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長繁殖 (2)細(xì)胞分裂素 母液 (3)接種環(huán)?、俳臃N環(huán)灼燒后未冷卻;②劃線未從第一區(qū)域末端開始 (4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì) 不合理,缺少空白對照

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