高中生物 專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) 階段質(zhì)量檢測B卷 能力素養(yǎng)提升 新人教版選修1
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1、 階段質(zhì)量檢測(五) DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) (B卷 能力素養(yǎng)提升) (滿分:100分 時(shí)間:40分鐘) 一、選擇題(每小題4分,共48分) 1.蛋白酶能將蛋白質(zhì)水解而使染色質(zhì)中的DNA分離出來,下列藥品可達(dá)到上述同一目的的是( ) A.蒸餾水 B.NaCl溶液 C.NaOH溶液 D.鹽酸 解析:選B 染色質(zhì)中的主要成分是DNA和蛋白質(zhì),可以利用蛋白酶水解雜質(zhì)蛋白質(zhì),從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開。DNA在2 mol/L NaCl溶液中溶解度最高,而蛋白質(zhì)則不能溶解在2 mol/L NaCl溶液中,通過過濾除去不能溶解的雜質(zhì)蛋白。由此可看出兩種方法雖然原理不同,但
2、目的是一樣的。 2.下列關(guān)于蛋白質(zhì)性質(zhì)的敘述中,不會影響到蛋白質(zhì)在凝膠電泳中運(yùn)動速度的是( ) A.蛋白質(zhì)分子的大小 B.蛋白質(zhì)分子的密度 C.蛋白質(zhì)分子的形狀 D.蛋白質(zhì)分子所帶電荷量 解析:選B 電泳是利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。 3.下列有關(guān)PCR的描述錯誤的是( ) A.是一種酶促反應(yīng) B.引物決定了擴(kuò)增的特異性 C.PCR反應(yīng)中的目的片段一般以2n的方式積累(假設(shè)擴(kuò)增效率為100%) D.?dāng)U增對象是氨基酸序列 解析:選D PCR是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片
3、段的技術(shù),它以極少量的DNA為模板,以四種脫氧核苷酸為原料,在引物作用下使DNA聚合酶從引物的3′端連接脫氧核苷酸,短時(shí)間內(nèi)迅速復(fù)制上百萬份的DNA拷貝。 4.下列關(guān)于血紅蛋白的提取和分離操作的敘述,錯誤的是( ) A.色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在,一旦發(fā)現(xiàn)有氣泡,必須重裝 B.凝膠用自來水充分溶脹后,配成凝膠懸浮液 C.為加快凝膠膨脹,可以將加入洗脫液的濕凝膠用沸水浴加熱,逐漸升溫至接近沸騰,通常只需1~2 h D.在血紅蛋白提取過程中,不斷用磷酸緩沖液處理,是讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內(nèi),維持其結(jié)構(gòu)和功能 解析:選B 由于裝填凝膠柱時(shí)用到的是商品凝膠,為干燥的顆粒,使用前需要用蒸
4、餾水充分溶脹后,配成凝膠懸浮液,再用洗脫液進(jìn)行充分洗滌平衡,使凝膠裝填緊密,也可在沸水浴中加熱膨脹,既可節(jié)約時(shí)間,也可除去凝膠中的微生物,排出膠粒內(nèi)的空氣。 5.DNA具有半保留復(fù)制的特性,但是在DNA分子復(fù)制的過程中需要一些引物,其主要原因是( ) A.可加快DNA的復(fù)制速度 B.引物可與DNA母鏈通過堿基互補(bǔ)配對結(jié)合 C.引物的5′端有助于DNA聚合酶延伸DNA鏈 D.DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈 解析:選D DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?,DNA聚合酶不能從5′端開始合成DNA,而只能從3′端延伸DNA鏈,因此,DNA的復(fù)制需要引物。當(dāng)引物與DNA母鏈通過堿基互補(bǔ)配對結(jié)
5、合后,DNA聚合酶就能從引物的3′端開始延伸DNA鏈,故DNA的合成方向總是從子鏈的5′端向3′端延伸。 6.在蛋白質(zhì)和DNA的混合液中,要想得到較純的DNA,可采用的方法有( ) ①向混合液中加入足量的蒸餾水?、谙蚧旌弦褐屑尤隓NA水解酶?、巯蚧旌弦褐屑尤肜涞?5%的酒精?、芟蚧旌弦褐屑尤氲鞍酌? A.①② B.③④ C.①③ D.②④ 解析:選B DNA分子在冷的酒精中可析出,據(jù)此可將DNA和蛋白質(zhì)分離;而蛋白酶則能將蛋白質(zhì)水解成可溶性的多肽,從而將蛋白質(zhì)與DNA分離。 7.PCR技術(shù)是在遺傳實(shí)驗(yàn)室中常見的一種DNA片段進(jìn)行體外擴(kuò)增的方法,利用它能快速得到大量的目的基因或DN
6、A分子片段。在PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水使用前必須進(jìn)行的關(guān)鍵步驟是( ) A.反復(fù)洗滌 B.不被外源DNA污染 C.高壓滅菌 D.在-20 ℃保存 解析:選C 通過對PCR實(shí)驗(yàn)中所用儀器和試劑進(jìn)行高壓滅菌,可以避免外源DNA等因素的污染。 8.某同學(xué)用洋蔥進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn),操作錯誤的是 ( ) A.加入洗滌劑后用力進(jìn)行快速、充分的研磨 B.用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNA C.加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌 D.加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱 解析:選A 加入洗滌劑后研磨動作要輕緩、柔和,否則容易產(chǎn)生許多泡沫,不利于后續(xù)
7、步驟的操作,A項(xiàng)錯誤;蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì),因此能起到純化DNA的目的,B項(xiàng)正確;加入酒精后用玻璃棒攪拌時(shí),動作要輕緩,以免引起DNA分子的斷裂,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀,C項(xiàng)正確;DNA可與二苯胺試劑在沸水浴條件下呈藍(lán)色,D項(xiàng)正確。 9.將經(jīng)處理破裂后的紅細(xì)胞混合液以2 000 r/min的速度離心10 min后,離心管中的溶液分為4層,從上到下的順序依次是( ) A.血紅蛋白、甲苯層、脂類物質(zhì)層、沉淀層 B.甲苯層、沉淀層、血紅蛋白、脂類物質(zhì)層 C.脂類物質(zhì)層、血紅蛋白、甲苯層、沉淀層 D.甲苯層、脂類物質(zhì)層、血紅蛋白、沉淀層 解析:選D 混合液經(jīng)離心后,按密度大小排列
8、,在離心管中從上到下的順序依次是:第1層為無色透明的甲苯層;第2層為白色薄層固體,是脂溶性物質(zhì)沉淀層;第3層是紅色透明液體,這是血紅蛋白的水溶液;第4層是其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物,主要是紅細(xì)胞破碎物沉淀。 10.PCR又稱多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),現(xiàn)在已成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的一種常規(guī)手段,它可以在體外很短的時(shí)間內(nèi)將DNA大量擴(kuò)增。你認(rèn)為下列符合在體外進(jìn)行PCR反應(yīng)條件的一組是( ) ①穩(wěn)定的緩沖液環(huán)境?、贒NA模板?、酆铣梢铩、芩姆N脫氧核苷酸?、軩NA聚合酶 ⑥D(zhuǎn)NA解旋酶?、呦拗菩院怂醿?nèi)切酶 ⑧溫控設(shè)備 A.①②③④⑤⑥ B.①②③④⑤⑥⑦⑧ C.③④⑤⑥⑧ D.①②③④⑤⑧
9、解析:選D 體外DNA擴(kuò)增(PCR技術(shù))是模擬生物細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制的條件,只是無需解旋酶(可熱變性),也不需要基因工程的工具酶(限制性核酸內(nèi)切酶),但需要耐高溫的DNA聚合酶。 11.某考古學(xué)家在西伯利亞泰加林地區(qū)的冰中發(fā)現(xiàn)了一種冰凍的已滅絕的巨型動物的肌肉。他想了解該巨型動物的DNA與現(xiàn)今印度大象的DNA的相似性,于是做了如下檢測工作,其中正確的操作步驟及順序是( ) ①降低溫度,檢測處理后的雜合DNA雙鏈 ②通過PCR技術(shù)擴(kuò)增巨型動物和大象的DNA ③把巨型動物的DNA導(dǎo)入大象的細(xì)胞中 ④在一定溫度條件下,將巨型動物和大象的DNA水浴共熱 A.②④① B.②④③① C.③④①
10、 D.②④③ 解析:選A PCR技術(shù)是分子生物學(xué)發(fā)展史上的一個(gè)里程碑,它大大簡化了基因克隆的步驟,已廣泛應(yīng)用于生物學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域。PCR反應(yīng)通過變性、復(fù)性、延伸三個(gè)循環(huán)步驟,使目標(biāo)DNA片段呈指數(shù)擴(kuò)增。因此,PCR系統(tǒng)是一個(gè)極其靈敏的信號放大系統(tǒng),能將極微弱甚至是單拷貝的基因信號檢測出來。通過PCR技術(shù)擴(kuò)增巨型動物和大象的DNA,然后利用DNA分子在高溫時(shí)解螺旋的特點(diǎn),將巨型動物和大象的DNA水浴共熱,再降低溫度,檢測處理后的雜合DNA雙鏈。 12.PCR技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù),如圖表示合成過程。下列說法錯誤的是( ) A.甲過程高溫使DNA變性解
11、旋,該過程不需要解旋酶的作用 B.丙過程用到的酶在高溫下失活,因此在PCR擴(kuò)增時(shí)需要再添加 C.如果把模板DNA的兩條鏈用15N標(biāo)記,游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記,控制“94 ℃~55 ℃~72 ℃”溫度循環(huán)3次,則在形成的子代DNA中含有15N標(biāo)記的DNA占25% D.PCR中由堿基錯配引起的變異屬于基因突變 解析:選B 丙過程用到的酶是Taq DNA聚合酶,其特點(diǎn)是耐高溫。 二、非選擇題(共52分) 13.(20分)CTAB法是一種從高等真核生物細(xì)胞中制備基因組DNA(總DNA)的技術(shù)。CTAB能跟核酸形成復(fù)合物,在高鹽溶液(>0.7 mol/L的NaCl溶液)中可溶并且穩(wěn)定存在,
12、當(dāng)降低溶液中鹽的濃度(<0.3 mol/L的NaCl溶液)時(shí),CTAB-核酸的復(fù)合物就會因溶解度降低而沉淀,再用70%酒精浸泡可洗脫掉CTAB;氯仿能使蛋白質(zhì)發(fā)生變性而沉淀。提取和檢測水稻基因組DNA的操作步驟如下: ①在50 mL離心管中加入20 mL的CTAB抽提緩沖液(主要成分是1.4 mol/L的NaCl、2%的CTAB),于65 ℃水浴中預(yù)熱; ②將20 g新鮮的水稻幼嫩葉片剪成小段后放于研缽中,用液氮速凍并研磨成粉末,加入上述離心管中,于65 ℃水浴中保溫30 min; ③取出離心管,冷卻至室溫,加入20 mL的氯仿,輕輕混勻20 min; ④在室溫下以12 000 r/m
13、in的轉(zhuǎn)速離心10~20 min; ⑤將上清液移入另一個(gè)離心管中,加入2/3體積的經(jīng)冷卻的異丙醇,用玻璃棒輕輕攪動,小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB-核酸的復(fù)合物沉淀; ⑥將沉淀移入另一個(gè)離心管中,加入70%酒精洗滌,重復(fù)洗滌1~2次; ⑦吹干酒精后,將DNA溶于適量的TE緩沖液中,在0.8%的瓊脂糖凝膠上電泳分離并在核酸紫外檢測儀上觀察。 請回答下列問題: (1)植物基因組DNA(總DNA)的提取通常采用機(jī)械研磨的方法。常溫下研磨時(shí),植物細(xì)胞勻漿中含有的多種酶會對DNA的提取產(chǎn)生不利影響。用液氮速凍,材料在研磨時(shí)易破碎,同時(shí)還能___________________________
14、_______________________ ________________________________________________________________________。 (2)實(shí)驗(yàn)步驟③④的目的是________________________________________________________________________。 (3)實(shí)驗(yàn)步驟⑤中,玻璃棒上出現(xiàn)沉淀的主要原因是________________________________________________________________________ ______________
15、__________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)對DNA進(jìn)行定性檢測常用的試劑是____________。DNA在260 nm的紫外線波段有一強(qiáng)烈的吸收峰,利用核酸紫外檢測儀可以進(jìn)行________________________________________________________________________ _____________________
16、_。 解析:低溫下酶活性降低,由題干信息可知,氯仿能使蛋白質(zhì)變性而沉淀,因此步驟③④的目的是去除溶液中的蛋白質(zhì)。當(dāng)鹽濃度<0.3 mol/L時(shí),CTAB-核酸的復(fù)合物會沉淀。 答案:(1)降低細(xì)胞勻漿中酶的活性,避免對DNA的提取產(chǎn)生不利的影響 (2)去除溶液中的蛋白質(zhì)(使蛋白質(zhì)變性和沉淀) (3)NaCl溶液的濃度<0.3 mol/L,CTAB-核酸的復(fù)合物因溶解度降低而沉淀 (4)二苯胺 DNA含量的測定(或檢測DNA) 14.(16分)PCR技術(shù)是把一DNA片段在體外酶的作用下,合成許許多多相同片段的一種方法,利用它能快速而特異性地?cái)U(kuò)增任何目的基因或DNA片段。它的基本過程如
17、圖所示: 注:圖中短線表示每次擴(kuò)增過程中需要的引物。每個(gè)引物約含20個(gè)核苷酸,并分別與兩條單鏈DNA結(jié)合,其作用是引導(dǎo)合成DNA子鏈。 (1)PCR技術(shù)的原理是模擬生物體內(nèi)________的過程。 (2)PCR擴(kuò)增過程中需要對DNA片段進(jìn)行高溫處理,其目的是________________________________________________________________________, 此過程在生物體內(nèi)稱為________,需________酶的參與。 (3)假如引物都用3H標(biāo)記,從理論上計(jì)算,所得DNA分子中含有3H標(biāo)記的占________。 解析:由圖可知高
18、溫變性的過程就是DNA在高溫條件下解旋的過程,在生物體內(nèi)則需要解旋酶催化才能進(jìn)行;低溫復(fù)性時(shí)兩個(gè)DNA分子都需要引物。 答案:(1)DNA復(fù)制 (2)使DNA的兩條鏈彼此分開 解旋 解旋 (3)100% 15.(16分)如圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實(shí)驗(yàn)裝置,請回答下列問題: (1)血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細(xì)胞的主要組成成分,其在紅細(xì)胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有______功能。 (2)甲裝置中,B是血紅蛋白溶液,則A是__________;乙裝置中,C溶液的作用是_________________________________________________________
19、_______________。 (3)甲裝置用于________,目的是________________________________________________________________________。 用乙裝置分離蛋白質(zhì)的方法叫____________,是根據(jù)____________________分離蛋白質(zhì)的有效方法。 (4)用乙裝置分離血紅蛋白時(shí),待____________________________時(shí),用試管收集流出液,每5 mL收集一管,連續(xù)收集。 解析:甲裝置為透析過程,即對蛋白質(zhì)的粗分離階段,除去的是能通過透析袋的小分子物質(zhì)。乙裝置為凝膠色譜操作,可
20、以將相對分子質(zhì)量大小不同的蛋白質(zhì)分離,血紅蛋白呈紅色,具有運(yùn)輸氧氣的功能。 答案:(1)運(yùn)輸 (2)磷酸緩沖液 洗脫血紅蛋白 (3)透析(粗分離) 去除樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) 凝膠色譜法 相對分子質(zhì)量的大小 (4)紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端 6EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F375
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