高中生物 第三章 第3節(jié) DNA的復(fù)制課件 新人教版必修2
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1、DNA的復(fù)制的復(fù)制1981年美國(guó)加利福尼亞大學(xué)柏克萊分校波納教授海斯教授一枚琥珀切片4000萬(wàn)年前一只蚊子的細(xì)胞細(xì)胞結(jié)構(gòu)驚人地完整 基因工程(重組DNA)相關(guān)技術(shù)及應(yīng)用GENETIC ENGINEERING 基因診斷 疾病相關(guān)基因克隆、印跡技術(shù)、探針技術(shù)、PCR技術(shù)、DNA序列分析、生物芯片技術(shù)等基因治療 生物制藥 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和植物 SupermouseSuper tomato 地球上會(huì)出現(xiàn)嗎?n土豆番茄煙n“魚(yú)人魚(yú)人”新人種新人種n愛(ài)因斯坦愛(ài)因斯坦教學(xué)重點(diǎn) 中心法則DNA復(fù)制的概念、特點(diǎn)參與復(fù)制的主要物質(zhì)及其作用一、中心法則 THE CENTRAL DOGMAThe Central Dogm
2、aThe Central Dogma轉(zhuǎn)轉(zhuǎn) 錄錄翻翻 譯譯逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄復(fù)復(fù) 制制M. Temin 二、DNA的復(fù)制 DNA REPLICATION DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型中的重要知識(shí)點(diǎn)?方向相反堿基配對(duì)規(guī)則 (A=T GC)1.1.復(fù)制復(fù)制(replication)(replication) 是指以親代是指以親代DNADNA為模板合成子代為模板合成子代DNADNA的過(guò)程。即遺傳物質(zhì)的傳代。的過(guò)程。即遺傳物質(zhì)的傳代。復(fù)制復(fù)制親代親代DNA子代子代DNA2.DNA復(fù)制的方式(特征) 半保留復(fù)制 半不連續(xù)復(fù)制AGGTACTGCCACTGGTCCATGACGGTGACCCCACTGGGGTGACCAGGT
3、ACTGTCCATGACTCCATGACAGGTACTGAGGTACTGCCACTGGTCCATGACGGTGACCAGGTACTGCCACTGGTCCATGACGGTGACC+母鏈母鏈DNA 復(fù)制過(guò)程中形成的復(fù)制過(guò)程中形成的復(fù)制叉復(fù)制叉子代子代DNA 半保留復(fù)制半保留復(fù)制解鏈方向解鏈方向 半不連續(xù)性復(fù)制半不連續(xù)性復(fù)制(復(fù)制叉)(復(fù)制叉)3 5 3 5 3 5 3 5 3 5 領(lǐng)頭鏈領(lǐng)頭鏈( leading strand )( leading strand ) 隨從鏈隨從鏈 ( lagging strand ) ( lagging strand )岡崎片段岡崎片段(Okazaki fragme
4、nt)n領(lǐng)頭鏈領(lǐng)頭鏈 leading strandleading strand 合成方向與復(fù)制叉解鏈合成方向與復(fù)制叉解鏈方向方向相同相同,并可,并可連續(xù)連續(xù)合成的子鏈。合成的子鏈。n隨從鏈隨從鏈 lagging strand lagging strand 合成方向與復(fù)制叉解鏈合成方向與復(fù)制叉解鏈方向方向相反相反,并且是,并且是不連續(xù)不連續(xù)合成的子鏈。合成的子鏈。 n岡崎片段岡崎片段 okazakiokazaki fragment fragment 在在DNA復(fù)制過(guò)程復(fù)制過(guò)程中,中,隨從鏈隨從鏈上上初合成初合成的不連續(xù)的的不連續(xù)的DNA片段。片段。n半不連續(xù)性復(fù)制半不連續(xù)性復(fù)制 在在DNA復(fù)制過(guò)
5、程中,領(lǐng)頭鏈復(fù)制過(guò)程中,領(lǐng)頭鏈連續(xù)復(fù)制而隨從鏈不連續(xù)復(fù)制。連續(xù)復(fù)制而隨從鏈不連續(xù)復(fù)制。 1)模板(template):解開(kāi)成單鏈的DNA母鏈2)底物(substrate)或稱原料:dATP、dGTP、dCTP、dTTP3)引物(primer):復(fù)制需要一小段RNA作引物4)能源:需ATP供能,原料dNTP本身也是高能化合物5)酶和蛋白質(zhì)因子:DNA聚合酶(polymerase)等3.3.參與參與DNADNA復(fù)制的物質(zhì)及作用復(fù)制的物質(zhì)及作用復(fù)復(fù) 制制 過(guò)過(guò) 程程 動(dòng)動(dòng) 畫(huà)畫(huà) 解鏈酶解鏈酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶SSBSSBSSBSSBSSBSSB引物酶引物酶引
6、物酶引物酶引物酶引物酶DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶(1 1)解鏈酶()解鏈酶(helicasehelicase)作用:作用:利用利用ATP供能,解開(kāi)供能,解開(kāi)DNA雙鏈雙鏈 消耗消耗 2 2 ATP/ /解開(kāi)解開(kāi) 1 1 bp 可隨復(fù)制叉的伸展向前移動(dòng)可隨復(fù)制叉的伸展向前移動(dòng)也稱:也稱:解螺旋酶解螺旋酶(2 2)拓?fù)洚悩?gòu)酶)拓?fù)洚悩?gòu)酶(topoisomerasetopoisomerase,TopoTopo)TopoTopo:拓?fù)涫侵肝矬w或圖像作彈性位移拓?fù)涫侵肝矬w或圖
7、像作彈性位移而又保持物體不變的性質(zhì)而又保持物體不變的性質(zhì)作用:作用:松馳松馳DNA超螺旋,克服扭結(jié)現(xiàn)象超螺旋,克服扭結(jié)現(xiàn)象解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶SSBSSBSSBSSBSSBSSB引物酶引物酶引物酶引物酶引物酶引物酶DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶SSBSSBSSBSSBSSBSSB引物酶引物酶引物酶引物酶引物酶引物酶DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDD
8、P-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶(2 2)拓?fù)洚悩?gòu)酶)拓?fù)洚悩?gòu)酶(topoisomerasetopoisomerase,TopoTopo)(3 3)單鏈)單鏈DNADNA結(jié)合蛋白結(jié)合蛋白 (SSB)(SSB)(single strand DNA binding protein)(single strand DNA binding protein)作用:作用:能與能與DNA單鏈可逆的結(jié)合,其作用有二單鏈可逆的結(jié)合,其作用有二解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶SSBSSB引物酶引
9、物酶引物酶引物酶引物酶引物酶DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶也稱:也稱:DNA結(jié)合蛋白(結(jié)合蛋白(DNA binding proteinDNA binding protein,DBP)DBP)防止防止DNA復(fù)性復(fù)性防止防止DNA單鏈單鏈模板被水解模板被水解(4 4)引物酶()引物酶(primaseprimase)F模板模板 以以DNADNA單鏈為模板單鏈為模板F底物底物 NTP(ATP、GTP、CTP、UTP)F按按堿基配對(duì)原則堿基配對(duì)原則 (A = U G C)F按按5
10、 5 3 3 方向方向 解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶SSBSSBSSBSSBSSBSSB引物酶引物酶DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶作用:作用:復(fù)制起始時(shí)催化生成復(fù)制起始時(shí)催化生成RNA引物引物本質(zhì):本質(zhì):是一種是一種RNA聚合酶(可以使兩個(gè)聚合酶(可以使兩個(gè)游離游離的的NTP聚聚合,此不同于催化轉(zhuǎn)錄過(guò)程的合,此不同于催化轉(zhuǎn)錄過(guò)程的RNA聚合酶)聚合酶) (5 5)()(6 6)DNADNA聚合酶聚合酶全
11、稱:全稱:依賴依賴DNADNA的的DNADNA聚合酶聚合酶 ( DNA dependent DNA polymerase )( DNA dependent DNA polymerase )簡(jiǎn)稱:簡(jiǎn)稱:DNA DNA polpol (DDDPDDDP)解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶SSBSSBSSBSSBSSBSSB引物酶引物酶引物酶引物酶引物酶引物酶DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶A. A. KornbergKornberg試管內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)試管內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)加有加有: :模板、底物、引物模板
12、、底物、引物該酶可催化新鏈該酶可催化新鏈DNADNA生成生成(5 5)()(6 6)DNADNA聚合酶聚合酶DNA DNA polpol (DDDPDDDP)主要作用:主要作用:5 5 3 3 的聚合活性的聚合活性解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶SSBSSBSSBSSBSSBSSB引物酶引物酶引物酶引物酶引物酶引物酶DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶 dTTP33 A T G C A A T T G C 5 | | | |5 T A C G ppi T(5 5)()(6 6)DNADNA聚
13、合酶聚合酶機(jī)理:機(jī)理: 使核苷酸之間生成使核苷酸之間生成3 3 ,5 5 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵主要作用:主要作用: 5 5 3 3 的聚合活性的聚合活性F 模板模板 以以DNADNA單鏈為模板單鏈為模板F 底物底物 dNTP(dATP、dGTP、dCTP、dTTP)F 引物引物 以小片段以小片段RNARNA為引物為引物 注:引物的原料(注:引物的原料(ATP、GTP、CTP、UTP)F 按按堿基配對(duì)原則堿基配對(duì)原則 (A=T GC)F 按按5 5 3 3 方向方向 在在 RNARNA引物的引物的 3 3 -OH末端上開(kāi)始逐個(gè)添加末端上開(kāi)始逐個(gè)添加dNTP解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶拓?fù)?/p>
14、異構(gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶SSBSSBSSBSSBSSBSSB引物酶引物酶引物酶引物酶引物酶引物酶DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶解鏈方向解鏈方向3 5 3 5 3 3 3 領(lǐng)頭鏈領(lǐng)頭鏈( leading strand )( leading strand ) 隨從鏈隨從鏈 ( lagging strand ) ( lagging strand )岡崎片段(岡崎片段(Okazaki fragmentOkazaki fragment)5 3 5 3 5 3 DNADNA聚合反應(yīng)(新鏈生成)的特點(diǎn)聚合反應(yīng)(新鏈生成)的特點(diǎn) 需
15、要 模板 n具方向性具方向性 新鏈的延長(zhǎng)新鏈的延長(zhǎng) 5 5 3 3 n需要需要 引物引物(5 5)()(6 6)DNADNA聚合酶聚合酶E.coliE.coli大腸桿菌大腸桿菌DNADNA聚合酶的聚合酶的作用作用解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶SSBSSBSSBSSBSSBSSB引物酶引物酶引物酶引物酶引物酶引物酶DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶DNA-DNA-polpol DNA-DNA-polpol DNA-DNA-polpol 分子數(shù)分子數(shù)/ /細(xì)胞細(xì)胞40040040402020
16、聚合的核苷聚合的核苷酸數(shù)酸數(shù)/ /分鐘分鐘 100010005050150,000150,000(2500bp/2500bp/s s)5 5 33 的聚合的聚合3 3 55 的外切的外切5 5 33 的外切的外切主要作用主要作用切除引物填補(bǔ)空隙切除引物填補(bǔ)空隙校讀校讀損傷修復(fù)損傷修復(fù)校讀校讀損傷修復(fù)損傷修復(fù)DNADNA復(fù)制復(fù)制校讀校讀(7 7)DNADNA連接酶連接酶(DNA (DNA ligaseligase) )作用:作用:消耗消耗ATP,將隨從鏈中相鄰的兩個(gè),將隨從鏈中相鄰的兩個(gè)DNA片段連接片段連接起來(lái)起來(lái)催化催化同一模板同一模板DNA鏈上的鏈上的兩個(gè)相鄰兩個(gè)相鄰DNA片段的片段的3
17、3端與端與5 5端間形成磷酸二酯鍵,把相鄰的兩段端間形成磷酸二酯鍵,把相鄰的兩段DNA連成完整的鏈連成完整的鏈解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶SSBSSBSSBSSBSSBSSB引物酶引物酶引物酶引物酶引物酶引物酶DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-連接酶連接酶DNA連接酶連接酶ATPADPHO5POO-O-O353POO-O-O3553起始:形成復(fù)制叉replication fork需解決兩個(gè)問(wèn)題 DNADNA解開(kāi)成單鏈,提供模板解開(kāi)成單鏈,提供
18、模板 合成合成RNARNA引物,提供引物,提供 3 3 -OH-OH末端末端4.DNA4.DNA復(fù)制的過(guò)程復(fù)制的過(guò)程解鏈酶解鏈酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶SSBSSB引物酶引物酶DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶起始起始延長(zhǎng)延長(zhǎng)延長(zhǎng)延長(zhǎng)延長(zhǎng)延長(zhǎng)終止終止終止終止終止終止Topo引物酶引物酶延長(zhǎng):DNA-pol ( DDDP- )的5 3的聚合活性使核苷酸之間生成3,5磷酸二酯鍵 模板 以DNA單鏈為模板 底物 dNTP(dATP、dGTP、dCTP、dTTP) 引物 以小片段RNA
19、為引物,在 RNA引物的 3 -OH末端上開(kāi)始逐個(gè)添加dNTP 按堿基配對(duì)原則 (A = T G C) 按5 3 方向 4.DNA4.DNA復(fù)制的過(guò)程復(fù)制的過(guò)程解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶SSBSSBSSBSSBSSBSSB引物酶引物酶引物酶引物酶引物酶引物酶DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶連接酶起始起始起始起始起始起始延長(zhǎng)延長(zhǎng)終止終止終止終止終止終止 5 5 3 35 5dATPdGTPdTTPdCTPdTTPdGTPdATPdCTPOH 33 3
20、DNA-pol目目 錄錄4.DNA4.DNA復(fù)制的過(guò)程復(fù)制的過(guò)程解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶解鏈酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶SSBSSBSSBSSBSSBSSB引物酶引物酶引物酶引物酶引物酶引物酶DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-連接酶連接酶起始起始起始起始起始起始延長(zhǎng)延長(zhǎng)延長(zhǎng)延長(zhǎng)延長(zhǎng)延長(zhǎng)終止終止5 5 5 DNA-pol OHP5 DNA-pol dNTP5 5 PATP ADP+Pi5 5 DNA連接酶連接酶n終止終止:隨從鏈隨從鏈上不連續(xù)性片段的連接上不連續(xù)性片段的連接解鏈酶解鏈酶拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶SSB
21、SSB引物酶引物酶DDDP-DDDP-DDDP-DDDP-連接酶連接酶起始起始延長(zhǎng)延長(zhǎng)終止終止復(fù)復(fù) 制制 過(guò)過(guò) 程程 動(dòng)動(dòng) 畫(huà)畫(huà) 5.5.半保留復(fù)制的意義半保留復(fù)制的意義保證了物種保證了物種遺傳的穩(wěn)定性遺傳的穩(wěn)定性( (高保真性、保守性高保真性、保守性) )是物種穩(wěn)定的分子基礎(chǔ),但是物種穩(wěn)定的分子基礎(chǔ),但不是絕對(duì)的不是絕對(duì)的。 按半保留復(fù)制方式,子代按半保留復(fù)制方式,子代DNADNA與親代與親代DNADNA的的堿基序列一致堿基序列一致,即子代保留了親代的,即子代保留了親代的全部遺傳信息,體現(xiàn)了遺傳的穩(wěn)定性。全部遺傳信息,體現(xiàn)了遺傳的穩(wěn)定性。 過(guò)程過(guò)程 酶和蛋白酶和蛋白 作用作用 復(fù)制的條件復(fù)制
22、的條件小結(jié)小結(jié)1 1:E.coliE.coli (原核生物)(原核生物)DNADNA復(fù)制復(fù)制 過(guò)程過(guò)程 酶和蛋白酶和蛋白 作用作用 復(fù)制的條件復(fù)制的條件起始起始延長(zhǎng)延長(zhǎng)終止終止小結(jié)小結(jié)1 1:E.coliE.coli (原核生物)(原核生物)DNADNA復(fù)制復(fù)制 過(guò)程過(guò)程 酶和蛋白酶和蛋白 作用作用 復(fù)制的條件復(fù)制的條件起始起始解鏈酶解鏈酶 拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶 SSB(DBP) SSB(DBP) 引物酶引物酶 延長(zhǎng)延長(zhǎng)DNA-DNA-polpol 終止終止DNA-DNA-polpol DNADNA連接酶連接酶 小結(jié)小結(jié)1 1:E.coliE.coli (原核生物)(原核生物)DNADNA復(fù)制
23、復(fù)制 過(guò)程過(guò)程 酶和蛋白酶和蛋白 作用作用 復(fù)制的條件復(fù)制的條件起始起始解鏈酶解鏈酶 解開(kāi)解開(kāi)DNADNA雙鏈雙鏈拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶 松馳超螺旋松馳超螺旋 SSB(DBP) SSB(DBP) 防止復(fù)性防止復(fù)性防止被水解防止被水解 引物酶引物酶 合成合成RNARNA引物引物 延長(zhǎng)延長(zhǎng)DNA-DNA-polpol DNADNA鏈的延伸、校讀鏈的延伸、校讀 終止終止DNA-DNA-polpol 切除引物切除引物,填補(bǔ)空隙填補(bǔ)空隙,校讀校讀 DNADNA連接酶連接酶 連接連接DNADNA片段片段 小結(jié)小結(jié)1 1:E.coliE.coli (原核生物)(原核生物)DNADNA復(fù)制復(fù)制 過(guò)程過(guò)程 酶和蛋
24、白酶和蛋白 作用作用 復(fù)制的條件復(fù)制的條件起始起始解鏈酶解鏈酶 解開(kāi)解開(kāi)DNADNA雙鏈雙鏈模板模板 拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶 松馳超螺旋松馳超螺旋 SSB(DBP) SSB(DBP) 防止復(fù)性防止復(fù)性防止被水解防止被水解 引物酶引物酶 合成合成RNARNA引物引物 RNARNA引物引物 延長(zhǎng)延長(zhǎng)DNA-DNA-polpol DNADNA鏈的延伸、校讀鏈的延伸、校讀 底物底物dNTPdNTP 終止終止DNA-DNA-polpol 切除引物切除引物,填補(bǔ)空隙填補(bǔ)空隙,校讀校讀 DNADNA連接酶連接酶 連接連接DNADNA片段片段 能源能源ATP ATP 酶和蛋白酶和蛋白 小結(jié)小結(jié)1 1:E.col
25、iE.coli (原核生物)(原核生物)DNADNA復(fù)制復(fù)制 過(guò)程過(guò)程 復(fù)制復(fù)制 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄 轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄翻譯翻譯概念概念部位部位底物底物主要酶主要酶方向方向過(guò)程(模型)過(guò)程(模型)意義意義特點(diǎn)特點(diǎn)小結(jié)小結(jié)2 2:歸納與比較:歸納與比較 過(guò)程過(guò)程 復(fù)制復(fù)制 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄 轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄翻譯翻譯概念概念DNADNADNADNA部位部位核、線核、線底物底物dNTPdNTP主要酶主要酶DDDPDDDP方向方向5 5 3 3 過(guò)程(模型)過(guò)程(模型)復(fù)制叉復(fù)制叉意義意義DNADNA連接酶連接酶 特點(diǎn)特點(diǎn)半保留半保留半不連續(xù)半不連續(xù)小結(jié)小結(jié)2 2:歸納與比較:歸納與比較 基因診斷在法醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用:基因診斷在法醫(yī)
26、學(xué)上的應(yīng)用: 物證檢驗(yàn)物證檢驗(yàn) 個(gè)體識(shí)別個(gè)體識(shí)別 親子鑒定親子鑒定荔枝荔枝DNADNA找到殺人者找到殺人者被害人:被害人:1212歲女孩,死者胃里發(fā)現(xiàn)咖啡色肉絲狀物歲女孩,死者胃里發(fā)現(xiàn)咖啡色肉絲狀物嫌疑人:嫌疑人:家中發(fā)現(xiàn)一些荔枝殼和核家中發(fā)現(xiàn)一些荔枝殼和核植物植物DNADNA檢驗(yàn)技術(shù):檢驗(yàn)技術(shù):進(jìn)行進(jìn)行DNADNA擴(kuò)增擴(kuò)增檢驗(yàn),證明肉絲狀物檢驗(yàn),證明肉絲狀物(果肉)和外殼呈現(xiàn)相同(果肉)和外殼呈現(xiàn)相同DNADNA譜帶,而市場(chǎng)上隨機(jī)購(gòu)買(mǎi)譜帶,而市場(chǎng)上隨機(jī)購(gòu)買(mǎi)的荔枝卻與前兩者的的荔枝卻與前兩者的DNADNA譜帶不同譜帶不同說(shuō)明事實(shí):說(shuō)明事實(shí):兩者兩者DNADNA具有同源性(同一棵樹(shù)上結(jié)的果實(shí))具
27、有同源性(同一棵樹(shù)上結(jié)的果實(shí))小結(jié)小結(jié)3 3:應(yīng)用與思考:應(yīng)用與思考聚合酶鏈反應(yīng)聚合酶鏈反應(yīng)PCRPCR(Polymerase Chain ReactionPolymerase Chain Reaction)是一種體外的是一種體外的特異特異DNADNA擴(kuò)增擴(kuò)增技術(shù)。技術(shù)。KaryKary Mullis Mullis于于19851985年發(fā)明,年發(fā)明,19871987年完成自動(dòng)化操作裝置,年完成自動(dòng)化操作裝置,19931993年獲諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)年獲諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)理論上講,只要存在一分子的理論上講,只要存在一分子的DNADNA,就可最終進(jìn)行基因檢測(cè),就可最終進(jìn)行基因檢測(cè)實(shí)際工作中,一滴血、一根毛發(fā)或一個(gè)細(xì)胞已足以滿足檢測(cè)需實(shí)際工作中,一滴血、一根毛發(fā)或一個(gè)細(xì)胞已足以滿足檢測(cè)需要,但首先需進(jìn)行要,但首先需進(jìn)行DNADNA擴(kuò)增擴(kuò)增,即,即PCRPCR 根據(jù)根據(jù)DNADNA變性與復(fù)性及半保留復(fù)制的知識(shí),請(qǐng)思考變性與復(fù)性及半保留復(fù)制的知識(shí),請(qǐng)思考PCRPCR反反應(yīng)體系應(yīng)有哪些基本成分?應(yīng)體系應(yīng)有哪些基本成分? 小結(jié)小結(jié)3 3:應(yīng)用與思考:應(yīng)用與思考
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