氣相液相色譜答案
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1、4.1 氣相色譜儀的核心部件是什么? 色譜柱是氣相色譜儀的核心部件。多組分樣品能否完全分離,主要決定于色譜柱的效能 和選擇性,色譜柱又可分為填充柱和空心毛細(xì)管柱。毛細(xì)管柱一般內(nèi)徑為 0.1?0.5mm,長(zhǎng) 30?300m,空心管壁涂有固定液,主要用于復(fù)雜混合物的分析。其分離效能高,但柱容量較 低。 4.2 氣相色譜儀的檢測(cè)類型有哪幾種?各有什么特點(diǎn)?各適合哪類物質(zhì)的分析? 氣相色譜檢測(cè)器按其原理不同可分為濃度型和質(zhì)量型兩大類: 濃度型檢測(cè)器的響應(yīng)信號(hào) 由進(jìn)入檢測(cè)器的組分濃度所決定, 如熱導(dǎo)池、 電子捕獲檢測(cè)器等; 而質(zhì)量型檢測(cè)器的響應(yīng)信 號(hào)則上單位時(shí)間內(nèi)進(jìn)入檢測(cè)器的組分質(zhì)量所決定,如氫焰
2、、火焰光度檢測(cè)器等等。 aLSVVRM PfpovtZ 。 (1) 熱導(dǎo)池檢測(cè)器(TCD是一種應(yīng)用很廣泛的通用型檢測(cè)器,它的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,靈敏度適 宜,穩(wěn)定性較好,對(duì)所有物質(zhì)都有響應(yīng)。 cJVLoMV Ws0s2oF (2) 氫焰離子化檢測(cè)器(FID)對(duì)大多數(shù)有機(jī)物有很高的靈敏度,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、響應(yīng)快、穩(wěn) 定性好,是目前應(yīng)用最廣的檢測(cè)器之一。 d1B9j5l。LzQaYeU (3) 電子捕獲檢測(cè)器(ECD是一種高靈敏度的選擇性檢測(cè)器, 它只對(duì)具有電負(fù)性的物質(zhì) (如含鹵素,S, P, N O的化合物)有響應(yīng),電負(fù)性越強(qiáng),靈敏度越高,響應(yīng)信號(hào) 與進(jìn)入檢測(cè)器的電負(fù)性物質(zhì)濃度有關(guān), ECD是濃
3、度型檢測(cè)器。kA5Altk。7x5NSSg (4) 火焰光度檢測(cè)器(FPD)對(duì)硫、磷化合物的高選擇性、高靈敏度的檢測(cè)器,亦稱硫磷 檢測(cè)器。 4.3 氫火焰離子化檢測(cè)器不能檢測(cè)哪些物質(zhì)? 氫火焰離子化檢測(cè)器對(duì)無機(jī)氣體、 水、四氯化碳等含氫少或不含氫的物質(zhì)靈敏度低或不 響應(yīng)。 4.4 可作為固定液使用的化合物必須滿足哪些條件?化合物極性是如何規(guī)定的? 固定液通常是高沸點(diǎn)、 難揮發(fā)的有機(jī)化合物或聚合物。 固定液使用的物質(zhì)需要滿足以下 的要求: ( 1) 揮發(fā)性小, 在操作溫度下具有較低的蒸氣壓, 以免在長(zhǎng)時(shí)間的載氣流動(dòng)下造成固 定液流失。 ( 2)熱穩(wěn)定性好,在工作溫度下不發(fā)生分解,故
4、每種固定液應(yīng)給出最高使用溫度。 ( 3)熔點(diǎn)不能太高,在室溫下不一定為液體,但在使用溫度下一定呈液體狀態(tài),以保 持試樣在氣液兩相中的分配。故每種固定液也需要給出最低使用溫度。 ZAfDdGm EIQZ0U3 ( 4)對(duì)試樣中的各組分有適當(dāng)?shù)娜芙饽芰?具有高的選擇性。 ( 5)化學(xué)穩(wěn)定性好,不與被測(cè)物質(zhì)發(fā)生不可逆化學(xué)反應(yīng)。 ( 6)有合適溶劑溶解,使固定液能均勻涂敷在擔(dān)體表面,形成液膜。 色譜固定液的極性,通常采用相對(duì)極性( P)來表示。規(guī)定非極性固定相角鯊?fù)?異三 十烷)的相對(duì)極性為零,強(qiáng)極性固定相3,3'—氧二丙睛的相對(duì)極性為 100。其他固定液 的相對(duì)極性(0-100之間)
5、采用一對(duì)物質(zhì)(如苯與環(huán)己烷)由實(shí)驗(yàn)確定。 MkshH4R xk3USQb 4.5 氣相色譜固定液選擇的基本原則是什么?如何判斷化合物的出峰順序? 答:對(duì)于固定液的選擇,要根據(jù)其相對(duì)極性,根據(jù)試樣的性質(zhì), 按照“相似相溶”的原則 來選擇,通常固定液的選擇大致可分為以下五種情況: z4LS6ry。4I8sAlp。 (1 ) 分離非極性組分時(shí),通常選用非極性固定相。各組分按沸點(diǎn)順序出峰,低沸點(diǎn)組分 先出峰。 (2) 分離極性組分時(shí),一般選用極性固定液。各組分按極性大小順序流出色譜柱,極性 小的先出峰。 (3) 分離非極性和極性的(或易被極化的)混合物,一般選用極性固定液。此時(shí),非極 性組
6、分先出峰,極性的(或易被極化的)組分后出峰。 uWJuhoQ rLN55lc。 (4) 醇、胺、水等強(qiáng)極性和能形成氫鍵的化合物的分離,通常選擇極性或氫鍵性的固定 液。 (5) 組成復(fù)雜、較難分離的試樣,通常使用特殊固定液,或混合固定相,出峰順序需要 實(shí)驗(yàn)確定。 4.6 分離溫度與組分保留時(shí)間有什么關(guān)系?溫度升高,色譜峰形將發(fā)生什么改變? 分離溫度直接影響分離度和組分的保留時(shí)間。 首先應(yīng)使柱溫控制在固定液的最高使用溫 度(超過該溫度固定液易流失) 和最低使用溫度(低于此溫度固定液以固體形式存在) 范圍 之內(nèi)。溫度升高,被測(cè)組分在氣相中的濃度增加, K變小,tR縮短,色譜峰變窄變高,分
7、離 度增加;但對(duì)于低沸點(diǎn)組份峰易產(chǎn)生重疊,使分離度下降。 bM2LpEo vfr8lwF。 4.7 降低載氣流速,分離度是否一定增加? 答:不一定。增加柱效是提高分離度的一個(gè)直接有效手段,一般來說降低載氣流速,可以使 柱效提高; 但降低載氣流速又會(huì)使色譜峰變寬, 使分離度下降。 因此要看色譜峰型來改變條 件。最終目的是達(dá)到分離好,出峰時(shí)間快。 OOOlIrc。KuOQiPa 4.8 毛細(xì)管色譜的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是什么?為什么具有很高的分離效率? 答:毛細(xì)管柱的特點(diǎn)是:分離效能高,分析速度快,適合于分析十分復(fù)雜的試樣。 毛細(xì)管色譜柱為開管柱, 它采用交聯(lián)技術(shù)使固定液附著于管內(nèi)壁, 使固定液分子相
8、互交聯(lián)起 來,形成一層不流動(dòng)、不被溶解的薄膜。 由于毛細(xì)管色譜柱內(nèi)不存在填充物,氣流可以直接 通過,所以柱阻力很小,柱長(zhǎng)可以大大增加,一般為 20-100m。由于沒有填充物,氣流是單 途徑的,不存在渦流擴(kuò)散;分析速度較快,縱向擴(kuò)散較小;而柱內(nèi)徑很細(xì) (0.2-0.5 mm)固 定液涂層又較薄,傳質(zhì)阻力也大為減小,因而柱效能很高。 Ex14npK 8kPtTnb。 4.9 為什么毛細(xì)管色譜多使用氫火焰離子化檢測(cè)器而不使用熱導(dǎo)檢測(cè)器? 毛細(xì)管色譜由于毛細(xì)管內(nèi)徑很小,柱容量很小,允許的進(jìn)樣量小。這可以通過采用分 流技術(shù)來解決。 而且毛細(xì)管柱后流出的試樣組分量少、 流速慢, 易產(chǎn)生擴(kuò)散而影響分
9、離效果, 在毛細(xì)管色譜柱中采取的解決方法是采用尾吹技術(shù),即用氣流將柱后流出物快速吹至檢測(cè) 器。因此毛細(xì)管色譜需要高靈敏度檢測(cè)器。氫火焰離子化檢測(cè)器結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單, 穩(wěn)定性好, 響應(yīng) 迅速, 線性范圍寬, 對(duì)有機(jī)化合物具有很高的靈敏度, 比熱導(dǎo)檢測(cè)器的靈敏度高出近 3個(gè)數(shù) 量級(jí),檢出限可達(dá)10-9mg/s。因此毛細(xì)管色譜通常采用高靈敏的氫焰檢測(cè)器,而不使用熱導(dǎo) 檢測(cè)器。mihy9UI。K7wFRoF 5.1 現(xiàn)代高效液相色譜的顯著特征是什么? 高效液相色譜法的特點(diǎn)是高壓、高效、高速、高靈敏度。適用于高沸點(diǎn)、熱不穩(wěn)定及 生化試樣的分析。 (1) 高壓:在高效液相色譜中,為了獲得高柱效而使用粒度很
10、小的固定相( <10卩m),液體 流動(dòng)相高速通過時(shí),將產(chǎn)生很高的壓力,其工作壓力范圍為150?350 x 105 Pa。1Lyd2vx。EG6rlMa (2) 高速。高效液相色譜由于釆用了高壓,流動(dòng)相流速快,因而所需的分析時(shí)間較經(jīng)典的 柱色譜少得多。 (3) 高效。高效液相色譜分析的柱效能約可達(dá) 3萬塔板 /米以上,氣相色譜的柱效能只有約 2 000 塔板/米。Yd8eaVn BL5Dxss (4) 高靈敏度。由于采用了高靈敏度的檢測(cè)器,最小檢測(cè)量可達(dá) 10-9 g,甚至10-11 g。而所 需試樣量很少,微升數(shù)量級(jí)的試樣就可以進(jìn)行全分析。 xBYcbgR ID8E9kA (5)
11、 可用于高沸點(diǎn)的、不能氣化的、 熱不穩(wěn)定的以及具有生理活性物質(zhì)的分析。一般來說, 沸點(diǎn)在450C以下,相對(duì)分子質(zhì)量小于 450的有機(jī)物可用氣相色譜分析,但這些物質(zhì)只占有 機(jī)物總數(shù)的15%?20%,而其余的80%?85%,原則上都可采用高效液相色譜分析。 cgUG9H6 2tVozO2 5.2為什么高效液相色譜分離柱的柱壓比較高? 在高效液相色譜中, 為了獲得高柱效而使用粒度很小的固定相 (<10卩m),液體流動(dòng)相高 速通過時(shí),將產(chǎn)生很高的壓力,其工作壓力范圍為 150?350X 105 Pa。obAIJxt。r0aVhPb。 5.3高效液相色譜中常用哪些檢測(cè)器?各有什么特點(diǎn)?哪些
12、適合梯度淋洗? 答:高效液相色譜要求檢測(cè)器具有靈敏度高、重現(xiàn)性好,響應(yīng)快、檢測(cè)限低、線性范 圍寬、應(yīng)用范圍廣等特性。目前應(yīng)用較廣的有紫外光度檢測(cè)器,差示折光檢測(cè)器,熒光檢 測(cè)器等數(shù)種。I2ccw6a。vdXMm4L_ (1) 紫外光度檢測(cè)器:紫外光度檢測(cè)器的作用原理是基于待測(cè)組分在流出色譜柱后對(duì)特 定波長(zhǎng)紫外光的選擇性吸收的大小,待測(cè)組分的濃度與吸光度的關(guān)系遵從比爾定律。 這 種檢測(cè)器的靈敏度很高,其最小檢測(cè)濃度可達(dá) 10-9g ? mi1。對(duì)溫度和流速都不敏感,可用于 梯度洗提,結(jié)構(gòu)也較簡(jiǎn)單。其缺點(diǎn)是不適用于對(duì)紫外光完全不吸收的試樣,也不能使用對(duì) 紫外光不透過的溶劑如苯等。 N
13、WiVRQ3 koxlQw乙 (2) 熒光檢測(cè)器:熒光檢測(cè)器是利用許多物質(zhì)在受到紫外光激發(fā)后能發(fā)射熒光的性質(zhì)而 制成的檢測(cè)器。被測(cè)物受強(qiáng)激發(fā)光照射后,輻射出比紫外光波長(zhǎng)更長(zhǎng)的熒光,熒光強(qiáng)度與 被測(cè)物濃度成正比,通過熒光檢測(cè)器采用光電倍增管使光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)檢測(cè)出來。熒 光檢測(cè)器的靈敏度一般要比紫外光度檢測(cè)器高 2個(gè)數(shù)量級(jí),選擇性也好.但其線性范圍較差。 sJKTyNO PuHnkNN (3) 差示折光檢測(cè)器:差示折光檢測(cè)器是利用連續(xù)測(cè)定工作池中試液折射率的變化,來 測(cè)定試液濃度的檢測(cè)器。溶有被測(cè)組分的載液和單純載液之間折射率之差, 和被側(cè)組分在試 液中的濃度直接有關(guān),因此可以根據(jù)折
14、射率的改變,測(cè)定被測(cè)組分。 VyTUYeX WF1RQQO 5.4用甲苯為流動(dòng)相時(shí),不能使用哪種檢測(cè)器? 用甲苯為流動(dòng)相時(shí),由于甲苯有紫外吸收,不能使紫外光透過,不能使用 UV檢測(cè)器。 5.5哪種液相色譜檢測(cè)器可獲得三維不停留掃描譜圖?原理是什么? 紫外陣列檢測(cè)器中的光電二極管陣列,可由多達(dá) 1024個(gè)二極管組成,各接受一定波長(zhǎng) 的光譜。由光源發(fā)射的光通過測(cè)量池時(shí)被組分吸收, 包含了組分對(duì)各波長(zhǎng)吸收的信息, 分光 后投射到二極管陣列上,因而不需要停流掃描即可獲得色譜流出物各個(gè)瞬間的動(dòng)態(tài)光譜吸收 圖。結(jié)合了計(jì)算機(jī)處理技術(shù),可獲得組分的三維色譜 -光譜圖。weBizAr。LuwfeEb
15、。 5.6對(duì)比填充柱氣相色譜、毛細(xì)管氣相色譜、高效液相色譜速率方程中三項(xiàng)的變化。 速率方程(也稱范.弟姆特方程式):H = A+ B/u + c ? u它說明了影響柱效能的幾個(gè) 因素,它們包括:(1)渦流擴(kuò)散項(xiàng)(A); 2)分子擴(kuò)散項(xiàng)(B/u) ; (3)傳質(zhì)阻力項(xiàng)(C?u)。 5QeOmmnUZI05CH (2 )充柱氣相色譜:由于影響柱效能的因素彼此以相反的效果存在著,如流速加大,分子 擴(kuò)散項(xiàng)的影響減小, 傳質(zhì)阻力項(xiàng)的影響增大; 溫度升高,有利于傳質(zhì),但又加劇了分子擴(kuò)散 的影響等等。因此必須全面考慮這些相互矛盾的影響因素,選擇適當(dāng)?shù)纳V分離操作條件, 才能提高柱效能。 wliwJE
16、v o wlOoMSm (2)氣相色譜:當(dāng)采用毛細(xì)管作為氣相色譜分離柱時(shí), 柱內(nèi)不裝填料,空心柱(管徑0.2mm) 阻力小,長(zhǎng)度可達(dá)百米的毛細(xì)管柱。載氣氣流以單途徑通過柱子, 消除了組分在柱中的渦流 擴(kuò)散現(xiàn)象,即: H = B/u + C u 。另外,將固定液直接涂在管壁上,總柱內(nèi)壁面積較大,涂 層很薄,則氣相和液相傳質(zhì)阻力 C u大大降低。AOYzluW LlfpMav。 (3)相色譜:在高效液相色譜中 , 液體的擴(kuò)散系數(shù)僅為氣體的萬分之一,則速率方程中的 分子擴(kuò)散項(xiàng)B/U較小,可以忽略不計(jì),即: H = A + C U。而液體的粘度比氣體大一百倍, 密度為氣體的一千倍, 故降低傳質(zhì)
17、阻力是提高液相色譜中提高柱效的主要途徑。 由速率方程, 降低固定相粒度和液膜厚度可顯著提高柱效,故在液相色譜中,擔(dān)體粒度由早期的 100卩m 的大顆粒降低為5-10卩化學(xué)鍵合使固定相表面有機(jī)層的傳質(zhì)阻力大大降低。 液相色譜中, 不可能通過增加柱溫來改善傳質(zhì)。改變淋洗液組成、極性是改善分離的最直接的因素。WsnEmYJ pbBW0lc。 5.7 解釋氣相色譜和高效液相色譜的柱效與流速關(guān)系曲線的不同。 液相色譜 H-u 曲線與其氣相色譜不同,是一段斜率不大的直線,是因?yàn)榉肿訑U(kuò)散相對(duì) H 值的影響可以忽略不計(jì)。 在液相色譜中, 使用較高流速, 柱效不會(huì)明顯下降,有利于實(shí)現(xiàn)快 速分離。qR3
18、m9v。hrZNV87。 5.8 正相色譜柱與反相色譜柱是如何界定的?各適合哪類物質(zhì)的分離? 答:親水性固定液常采用疏水性流動(dòng)相, 即流動(dòng)相的極性小于固定相的極性, 稱為正相液液 色譜法,極性柱也稱正相柱。適合極性化合物的分離,極性小的組分先流出,極性大的組分 后流出。 若流動(dòng)相的極性大于固定液的極性, 則稱為反相液液色譜, 非極性柱也稱為反相柱。 適用于非極性化合物的分離,出峰順序與正相分配色譜相反。 LMOnnbz mOFaUpm 5.9 高效液相色譜中為什么要采用梯度淋洗?如果組分保留時(shí)間太長(zhǎng),可采取什么措施調(diào) 節(jié)? 在一個(gè)分析周期內(nèi),按一定程序不斷改變流動(dòng)相的組成或濃度配比,稱
19、為梯度淋洗.梯 度淋洗通過連續(xù)改變的是流動(dòng)相的極性、 pH或離子強(qiáng)度借以改變被分離組分的分配系數(shù), 以提高分離效果和加快分離速度。 Ut2oWVm GYZ8aA。 在反相高校色譜中,如果保留時(shí)間過長(zhǎng),可以增加流動(dòng)相體系中弱極性組成的比例,使 保留時(shí)間縮短。 5.10 液相色譜中可否采用毛細(xì)管柱來提高分離效果?為什么? 可以。 高效液相色譜用毛細(xì)管柱又稱微填充毛細(xì)管柱, 通常采用較細(xì)的填料, 填料越細(xì)柱 效越高。 5.11 離子色譜與離子交換色譜有什么差別? 離子交換色譜采用專門制備的離子交換色譜分離柱填料, 則可以使液相色譜能夠用于各 種無機(jī)離子、 有機(jī)酸堿及各種生物大分子的快速分
20、析。 離子色譜是在 20 世紀(jì) 70 年代中期發(fā) 展起來的一種技術(shù), 與離子交換色譜的區(qū)別是其采用了特制的、 具有極低交換容量的離子交 換樹脂作為柱填料, 并采用淋洗液本底電導(dǎo)抑制技術(shù)和電導(dǎo)檢測(cè)器, 是測(cè)定混合陰離子的有 效方法。lxJog3q。 MmNNk2c 5.12 連續(xù)抑制型離子色譜的抑制原理是什么。 在離子色譜中檢測(cè)器為電導(dǎo)檢測(cè)器 ,以電解質(zhì)溶液作為流動(dòng)相 , 為了消除強(qiáng)電解質(zhì)背景 對(duì)電導(dǎo)檢測(cè)器的干擾 ,通常除了分析柱外 , 還增加一根抑制柱 , 這種雙柱型離子色譜法稱為化 學(xué)抑制型離子色譜法? BfQ2Cy9 eQx5aC2 5.13 分離陽離子時(shí),采用的是陽離子交換樹脂分離
21、柱。為什么分析有機(jī)酸時(shí),也可以使用 陽離子交換樹脂?原理是什么? 7Dr7N6i。qUCXQed 在離子排斥色譜中,可以用高容量的陽離子交換樹脂分析有機(jī)酸。純水通過分離柱時(shí), 會(huì)圍繞鍵合在樹脂上面的磺酸基形成一水合殼層, 這個(gè)殼層只允許未解離的化合物通過, 完 全解離的鹽酸淋洗液不能通過。 中性的水分子可以進(jìn)入樹脂的孔穴并回到流動(dòng)相。 有機(jī)酸進(jìn) 入柱子后,根據(jù)淋洗液的pH值,可以部分處于未解離狀態(tài)。 所以可以通過調(diào)整溶液 pH值控 制有機(jī)酸的解離。有機(jī)酸的保留主要取決于分析物的 pK,值,酸性越弱,保留時(shí)間越長(zhǎng)。E3wn13r。 IB6vB1G。 5.14 分離下列物質(zhì),宜采用何種分
22、離模式? (1) 稠環(huán)芳烴混合物:液 - 液分配與化學(xué)鍵合相色譜 (2) 脂肪醇混合物:液 - 液分配與化學(xué)鍵合相色譜 (3) 有機(jī)酸:離子交換色譜或離子色譜 (4) 聚合物:凝膠色譜 (5) 過渡金屬離子:離子色譜 5.15在硅膠分離柱上,用甲苯為流動(dòng)相,某組分的保留時(shí)間為 25min。若改用四氯化碳或三 氯甲烷為流動(dòng)相,分析哪種溶劑能縮短該組分的保留時(shí)間? ekiEf47。z8tVvvL。 答:三氯甲烷 5.16 指出下列物質(zhì)分別在正相色譜柱和反相色譜柱上的流出順序: ( 1)酯,乙醚,硝基丁烷; ( 2)正己烷,正己醇,苯。 正相柱:( 1)乙醚,乙酸已酯,硝基丁烷;
23、 (2)正己烷,苯,正己醇 反相柱:與正相柱流出順序相反。 5.17 毛細(xì)管電泳中,電滲流是如何產(chǎn)生的?朝何方向移動(dòng)?對(duì)陰離子分離是否有利? 當(dāng)固體與液體接觸時(shí), 固體表面由于某種原因帶一種電荷, 則因靜電引力使其周圍液體 帶有相反電荷,在液 - 固界面形成雙電層,二者之間存在電位差。當(dāng)液體兩端施加電壓時(shí), 就會(huì)發(fā)生液體相對(duì)于固體表面的移動(dòng)。這種液體相對(duì)于固體表面的移動(dòng)現(xiàn)象叫做電滲現(xiàn)象, 整體移動(dòng)著的液體叫電滲流。 X9g2o7G cFqzbSk。 電滲流的方向取決于毛細(xì)管內(nèi)表面電荷的性質(zhì): 內(nèi)表面帶負(fù)電荷, 溶液帶正電荷, 電滲 流流向陰極;內(nèi)表面帶正負(fù)電荷,溶液帶負(fù)電荷,電滲流流
24、向陽極。 6iSMN91 vlhtNKQ。 對(duì)于石英毛細(xì)管柱,當(dāng)內(nèi)充液 pH>3時(shí),表面電離成-SiO-,管內(nèi)壁帶負(fù)電荷,形成雙電 層。在高電場(chǎng)的作用下, 帶正電荷的溶液表面及擴(kuò)散層向陰極移動(dòng), 陰離子受電泳和電滲流 兩種效應(yīng)影響的運(yùn)動(dòng)方向相反, 由于電滲流速度大于電泳遷移速度, 陰離子在陰極最后流出。 YAjezdA。5VnCB50 5.18 與傳統(tǒng)電泳相比,高效毛細(xì)管電泳有哪些改進(jìn)? 高效毛細(xì)管電泳在技術(shù)上采取了兩項(xiàng)重要改進(jìn): (1)采用了 0.05 mm內(nèi)徑的毛細(xì)管,(2) 采用了高達(dá)數(shù)千伏的電壓。 Pe77j4h。JshYtJG。 5.19 為什么毛細(xì)管電泳具有非常高的
25、分離效率? 毛細(xì)管的采用使產(chǎn)生的熱量能夠較快的散發(fā), 大大減小溫度效應(yīng), 使電場(chǎng)電壓可以提高; 電 壓升高,電場(chǎng)推動(dòng)力大, 又可以進(jìn)一步使柱徑變小,柱長(zhǎng)增加,所以高效毛細(xì)管電泳的柱效 遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于高效液相色譜,理論塔板數(shù)高達(dá)幾十萬塊 / 米,特殊柱子可以達(dá)到數(shù)百萬。 I4cRsKZ。 F6F4XdS。 5.20 什么是電滲淌度?電滲淌度與電泳淌度有什么不同? 電滲淌度,即電滲遷移率取決于電泳介質(zhì)及雙電層的 Zet, 電勢(shì);電泳淌度指的是帶電 離子在單位電場(chǎng)強(qiáng)度下的電泳遷移速度,取決于離子所帶的有效電荷和平動(dòng)摩擦阻力系數(shù)。 tmDHlXm。 gqZIzEF。 5.21 影響毛細(xì)管電泳
26、分離的關(guān)鍵因素有哪些? 縱向擴(kuò)散的影響; 進(jìn)樣的影響; 焦耳熱與溫度梯度的影響; 溶質(zhì)與管壁間存在吸附與疏 水作用;電分散作用和層流現(xiàn)象對(duì)譜帶展寬的影響。 SzszuUE HBfQWh。 5.22 膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳為什么能夠分離中性組分,其分離原理與色譜有哪些異同點(diǎn)? 膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳是以膠束為固定相的一種色譜, 是電泳技術(shù)與色譜技術(shù)的結(jié)合。 MEKC 是在電泳緩沖液中加入表面活性劑, 當(dāng)溶液中表面活性劑濃度超過臨界膠束濃度時(shí), 表面活 性劑分子之間的疏水基因聚集在一起形成膠束, 溶質(zhì)不僅可以由于淌度差異而分離, 同時(shí)又 可基于在水相和膠束相之間的分配系數(shù)不同而得到分離, 這樣一般毛細(xì)管電泳中不能分離的 中性化合物.在 MEKC中也可以分離。 所以MEKC能夠像色譜分離一樣,在電解質(zhì)溶液和膠 束兩相間進(jìn)行多次分配。 ScBmrgR S34MRfs 5.23為什么毛細(xì)管電泳在生命科學(xué)領(lǐng)域有較多應(yīng)用? 由于毛細(xì)管電泳分離的柱效與溶質(zhì)的擴(kuò)散系數(shù)成反比, 所以在分離大分子時(shí),擴(kuò)散系數(shù) 小,可以得到高柱效,擴(kuò)散系數(shù)越小,柱效越高,因此毛細(xì)管電泳能高效分離生物大分子, 在生命科學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。 n2mlsfa。ZF7eV8R
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