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1、課時(shí)作業(yè)15　微生物的利用和生物技術(shù)在食品加 工中的應(yīng)用 時(shí)間：45分鐘　　滿(mǎn)分：100分 　　　　　　　　　　　　　　 一、選擇題(每小題5分，共60分) 1．(2012·北京海淀期中)從土壤中分離以尿素為氮源的細(xì)菌，下列實(shí)驗(yàn)操作不正確的是(　　) A．將土壤用無(wú)菌水稀釋?zhuān)苽?0－3～10－5土壤稀釋液 B．將不同濃度的土壤稀釋液涂布于不同平板上 C．用加入剛果紅指示劑的選擇培養(yǎng)基篩選分解尿素的細(xì)菌 D．從周?chē)霈F(xiàn)紅色環(huán)帶的菌落中挑取能夠分泌脲酶的菌株 解析：從土壤中分離以尿素為氮源的細(xì)菌時(shí)，將土壤用無(wú)菌水稀釋?zhuān)苽渫寥老♂屢?，將不同濃度的土壤稀釋液涂布于不同平板上，?/p>

2、加入酚紅指示劑的鑒別培養(yǎng)基可以鑒別分解尿素的細(xì)菌；從周?chē)霈F(xiàn)紅色環(huán)帶的菌落中挑取能夠分泌脲酶的菌株。 答案：C 2．(2012·內(nèi)蒙古赤峰第一次質(zhì)檢)下表為某培養(yǎng)基的配方，有關(guān)敘述正確的是(　　) 成分 牛肉膏 葡萄糖 K2HPO4 伊紅 美藍(lán) 青霉素 瓊脂 蒸餾水 含量 10 g 10 g 2 g 0.4 g 0.065 g 1萬(wàn)單位 適量 1 000 mL A.能在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的大腸桿菌，擬核上有抗青霉素的基因 B．此培養(yǎng)液是天然鑒別培養(yǎng)基 C．此培養(yǎng)基可以用來(lái)檢測(cè)自來(lái)水中細(xì)菌含量是否符合飲用水標(biāo)準(zhǔn) D．此培養(yǎng)基可以用于選育轉(zhuǎn)基因大腸桿菌菌

3、種的基因工程的操作過(guò)程中 解析：此表表示鑒定大腸桿菌的合成培養(yǎng)基；大腸桿菌屬原核生物，青霉素是由真核生物青霉菌分泌，二者基因不同。 答案：D 3．(2012·北京西城4月)下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和利用的敘述不正確的是(　　) A．利用稀釋涂布平板法只能分離微生物不能對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù) B．接種時(shí)連續(xù)劃線(xiàn)的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單菌落 C．以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌 D．用大白菜腌制泡菜的過(guò)程中亞硝酸鹽含量變化是先增加后減少 解析：接種劃線(xiàn)可以將菌體分散，最后得到單個(gè)菌體細(xì)胞，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)可以得到單個(gè)細(xì)菌；用稀釋涂布平板法可以分離微生物也可以對(duì)微生物進(jìn)行

4、計(jì)數(shù)；在泡菜的腌制過(guò)程中，開(kāi)始亞硝酸鹽含量增加，10天后含量開(kāi)始下降；以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌。 答案：A 4．(2012·北京海淀期中)下列關(guān)于微生物培養(yǎng)的敘述，不正確的是(　　) A．獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌入侵 B．高溫滅菌的目的是殺死微生物的細(xì)胞、孢子、芽孢 C．劃線(xiàn)分離可在培養(yǎng)基上獲得均勻分布的單菌落 D．稀釋涂布平板法易獲得單菌落和計(jì)數(shù)活菌數(shù)目 解析：獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌入侵；高溫滅菌的目的是殺死微生物的細(xì)胞、孢子、芽孢；稀釋涂布平板法易獲得單菌落和計(jì)數(shù)活菌數(shù)目；劃線(xiàn)分離可在培養(yǎng)基上獲得單菌落但不是均勻分布的。

5、答案：C 5．(2012·北京西城一模)組氨酸缺陷型沙門(mén)氏菌是由野生菌種突變形成的，自身不能合成組氨酸。將其接種在缺乏組氨酸的平板培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，有極少量菌落形成。2－氨基芴是一種致突變劑，將沾有2－氨基芴的濾紙片放到上述平板培養(yǎng)基中，再接種組氨酸缺陷型沙門(mén)氏菌進(jìn)行培養(yǎng)，會(huì)有較多菌落出現(xiàn)。以下敘述不正確的是 (　　) A．在接種前，2－氨基芴和濾紙片須進(jìn)行滅菌處理 B．若用劃線(xiàn)法接種可以根據(jù)菌落數(shù)計(jì)算活菌數(shù)量 C．基因突變的可逆性與是否存在致突變劑無(wú)關(guān) D．此方法可以用于檢測(cè)環(huán)境中的化學(xué)致突變劑 解析：在微生物培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)基、實(shí)驗(yàn)材料、實(shí)驗(yàn)用具都要進(jìn)行滅菌處理，A項(xiàng)正確；計(jì)算

6、活菌的數(shù)目常用稀釋涂布法，而不是用劃線(xiàn)法，B錯(cuò)誤；2－氨基芴可使沙門(mén)氏菌中野生型增多，缺陷型減少，如果再由野生型突變?yōu)槿毕菪?，則與該突變劑無(wú)關(guān)，C正確；根據(jù)菌落的變化情況，可推測(cè)環(huán)境中的化學(xué)致突變劑，D正確。 答案：B 6．(2012·北京朝陽(yáng)一模)耐冷菌是生活在低溫環(huán)境下的一類(lèi)微生物，在0～5℃可生長(zhǎng)繁殖，最高生長(zhǎng)溫度一般在30℃左右。關(guān)于耐冷菌下列選項(xiàng)中錯(cuò)誤的是(　　) A．耐冷菌參與代謝的酶在低溫下仍具有較高的催化活性 B．不同取樣地點(diǎn)相比較，北方寒冷地區(qū)水土中較易分離出耐冷菌 C．探究耐冷菌生活的最適溫度，自變量應(yīng)為溫度，無(wú)關(guān)變量應(yīng)相同且適宜 D．分離純化耐冷菌的過(guò)程中，使

7、用過(guò)的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)消毒處理后才能丟棄 解析：使用過(guò)的培養(yǎng)基必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后再丟棄，經(jīng)消毒可能還會(huì)存在細(xì)菌的芽孢。 答案：D 7．(2012·北京石景山一模)下列有關(guān)生物技術(shù)的說(shuō)法，正確的是(　　) A．DNA粗提取時(shí)，用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻酒精進(jìn)一步純化DNA B．制作果醋時(shí)應(yīng)避免通入空氣以保證有關(guān)菌種正常代謝 C．制作果酒時(shí)應(yīng)反復(fù)沖洗葡萄以避免雜菌的影響 D．測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌數(shù)目，應(yīng)采用平板劃線(xiàn)法 解析：制作果醋的醋酸桿菌是好氧菌，應(yīng)通入空氣以保證菌種正常代謝。制作果酒時(shí)的酵母菌來(lái)自葡萄的表面，沖洗葡萄要適當(dāng)。測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌數(shù)目，應(yīng)采用稀釋

8、涂布平板法。 答案：A 8．(2012·江蘇百校聯(lián)考一)下列關(guān)于果酒和果醋的制作原理、發(fā)酵過(guò)程的敘述中，錯(cuò)誤的是(　　) A．果酒和果醋的發(fā)酵菌種不同，但代謝類(lèi)型相同 B．制作果酒和果醋時(shí)都應(yīng)用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精對(duì)發(fā)酵瓶消毒 C．變酸果酒的表面觀察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落 D．果酒和果醋的制作可用同一裝置，但需控制不同發(fā)酵條件 解析：果酒的制作菌種是酵母菌，是兼性厭氧菌，制作果醋的醋酸菌是好氧菌。 答案：A 9．(2012·皖南十校聯(lián)考)有關(guān)現(xiàn)代生物技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．用平板劃線(xiàn)法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí)，可以用相同的培養(yǎng)基 B．若將加酶洗衣粉設(shè)

9、計(jì)為加酶搓衣板，會(huì)提高酶的利用率，減少污染物的排放 C．誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化成器官的過(guò)程需要無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境 D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基成分一樣 解析：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基成分不同。 答案：D 10．(2012·北京海淀期未)下圖中甲是果醋發(fā)酵裝置，乙是發(fā)酵過(guò)程中培養(yǎng)液pH的變化曲線(xiàn)圖，下列敘述正確的是(　　) A．發(fā)酵初期不通氣，溶液中沒(méi)有氣泡產(chǎn)生 B．中期可以聞到酒香，說(shuō)明進(jìn)行了酒精發(fā)酵 C．后期接種醋酸菌，適當(dāng)通氣并保持原有溫度 D．圖乙中能正確表示pH變化的曲線(xiàn)是③ 解析：發(fā)酵初期不通氣，酵母菌無(wú)氧呼吸仍能產(chǎn)生二氧化碳，溶液中有氣泡

10、產(chǎn)生。接種醋酸菌，應(yīng)適當(dāng)通氣并提高培養(yǎng)溫度。產(chǎn)生醋酸使pH下降，圖乙中能正確表示pH變化的曲線(xiàn)是④。 答案：B 11．(2012·徐州模擬)下面關(guān)于腐乳制作過(guò)程說(shuō)法正確的是(　　) A．制作腐乳時(shí)只有毛霉發(fā)揮作用 B．豆腐表面長(zhǎng)出青色物質(zhì)則標(biāo)志著制作完成 C．制作腐乳時(shí)要進(jìn)行控水 D．制作腐乳時(shí)加鹽是為了促進(jìn)毛霉的生長(zhǎng) 解析：此題考查腐乳制作的原理、條件及注意事項(xiàng)。腐乳的制作是多種微生物共同作用的結(jié)果；豆腐的表面長(zhǎng)出青色物質(zhì)僅是制作腐乳的第一步，還需要加鹽腌制、配制鹵湯等；加鹽一是可以析出水分，二是可以抑制微生物的生長(zhǎng)。不熟悉腐乳制作流程及注意事項(xiàng)容易錯(cuò)選。 答案：C 12．

11、在植物有效成分的提取過(guò)程中，常用萃取法、蒸餾法和壓榨法，下列關(guān)于這三種方法敘述錯(cuò)誤的是(　　) A．蒸餾法的實(shí)驗(yàn)原理是利用水將芳香油溶解出來(lái)，再把水蒸發(fā)掉，剩余的就是芳香油 B．壓榨法的實(shí)驗(yàn)原理是通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油 C．萃取法的實(shí)驗(yàn)原理是使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)掉溶劑后就可獲得芳香油 D．蒸餾法適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油 解析：蒸餾法是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來(lái)，適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油；壓榨法通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油，適用于柑橘，檸檬等易焦糊原料的提??；萃取法使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)掉溶劑后就可獲得

12、芳香油，它的適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶液中。 答案：A 二、簡(jiǎn)答題(共40分) 13．(10分)生物柴油是一種可再生的清潔能源，其應(yīng)用在一定程度上能夠減緩人類(lèi)對(duì)化石燃料的消耗?？茖W(xué)家發(fā)現(xiàn)，在微生物M產(chǎn)生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇反應(yīng)能夠合成生物柴油(如下圖)。 (1)用于生產(chǎn)生物柴油的植物油不易揮發(fā)，宜選用________、________方法從油料作物中提取。 (2)篩選產(chǎn)脂肪酶的微生物M時(shí)，選擇培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生長(zhǎng)提供________，培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是________法。 (3)測(cè)定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，可選用_____

13、___法直接計(jì)數(shù)；從微生物M分離提取的脂肪酶通常需要檢測(cè)________，以確定其應(yīng)用價(jià)值；為降低生物柴油生產(chǎn)成本，可利用________技術(shù)使脂肪酶能夠重復(fù)使用。 (4)若需克隆脂肪酶基因，可應(yīng)用耐熱DNA聚合酶催化的________技術(shù)。 解析：(1)因?yàn)橹参镉筒灰讚]發(fā)，不能選用蒸餾法，可以用壓榨法、萃取法從油料作物中提取。(2)微生物的生長(zhǎng)需要水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽等，選擇培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生長(zhǎng)提供碳源。分析灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌等實(shí)驗(yàn)室常用滅菌方法的特點(diǎn)可知，培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是高壓蒸汽滅菌法。(3)測(cè)定培養(yǎng)液中微生物的數(shù)量，可選用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法直接計(jì)數(shù)

14、。提取的脂肪酶在應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)之前，要先檢測(cè)其活性，以確定其應(yīng)用價(jià)值。固定化酶技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)酶的反復(fù)利用，降低了生產(chǎn)成本。(4)在應(yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段時(shí)，DNA合成(延伸)時(shí)溫度要控制在72℃，需要具有較強(qiáng)的耐熱性的DNA聚合酶催化。 答案：(1)壓榨　萃取(注：兩空順序無(wú)先后) (2)碳源　高壓蒸汽滅菌 (3)顯微鏡直接計(jì)數(shù)　酶活性(或：酶活力)　固定化酶(或：固定化細(xì)胞) (4)PCR(或：多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)) 14．(15分)(2012·武漢5月) 某些微生物能合成纖維素酶，通過(guò)對(duì)這些微生物的研究，人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn)酒精，用纖維素酶處理服裝面

15、料等。研究人員用化合物A、硝酸鹽、磷酸鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選到能產(chǎn)生纖維素酶的微生物。請(qǐng)分析并回答問(wèn)題： (1)培養(yǎng)基中加入的化合物A是________，為微生物的生長(zhǎng)提供________，這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (2)在篩選纖維素分解菌的過(guò)程中，通常用________染色法，這種方法能夠通過(guò)顏色反應(yīng)直接對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行篩選。甲同學(xué)在實(shí)驗(yàn)時(shí)得到了如上圖所示的結(jié)果，則纖維素分解菌位于________內(nèi)。 A．③ B．①② C．②③ D．①②③ (3)在培養(yǎng)纖維素分解菌的過(guò)程中，進(jìn)行平板劃線(xiàn)時(shí)，每次劃線(xiàn)結(jié)束后仍然要

16、灼燒接種環(huán)，原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)某同學(xué)打算從牛胃中分離纖維素分解菌并計(jì)數(shù)，與分離醋酸菌相比，進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)除了營(yíng)養(yǎng)不同外，最主要的實(shí)驗(yàn)條件差別是________，該同學(xué)采用活菌計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)目往往比活菌的實(shí)際數(shù)目________。 (5)丙同學(xué)在提取和分離纖維素酶的過(guò)程中，為了保證抵制外界酸和堿對(duì)酶活性的影

17、響，采取的措施是向提取液和分離液中添加________；若探究纖維素酶活性的最適溫度，如何設(shè)置對(duì)照？______________________________________。 解析：(1)根據(jù)該微生物能產(chǎn)生纖維素酶的特點(diǎn)，在其選擇培養(yǎng)基中添加纖維素，可為其生長(zhǎng)提供碳源。(2)利用剛果紅染色法來(lái)篩選纖維素分解菌，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)培養(yǎng)基中的纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。(3)進(jìn)行平板劃線(xiàn)接種時(shí)，每次劃線(xiàn)后要灼燒接種環(huán)是為了及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免污染。(4)牛胃內(nèi)是無(wú)氧環(huán)境，故應(yīng)在無(wú)氧

18、環(huán)境下分離牛胃中的纖維素分解菌。菌落是同種菌體的集合，相距很近的細(xì)菌可以形成一個(gè)菌落，故菌落數(shù)比活菌數(shù)少。(5)在提取液和分離液中添加緩沖溶液可保證液體的pH不受干擾。探究某種酶活性的最適溫度應(yīng)設(shè)置不同的溫度梯度進(jìn)行相互對(duì)照。 答案：(1)纖維素　碳源　選擇 (2)剛果紅　A (3)及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境 (4)保證無(wú)氧環(huán)境　小(低) (5)緩沖溶液　設(shè)置不同的溫度梯度進(jìn)行相互對(duì)照 15．(15分)(2012·江西盟校二聯(lián))甘蔗含糖量高，是生產(chǎn)燃料酒精的優(yōu)質(zhì)材料。為了提高酒精產(chǎn)量，需要優(yōu)質(zhì)甘蔗品種和具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌作為理想的酒精發(fā)酵菌種。根據(jù)所學(xué)知

19、識(shí)回答下面的問(wèn)題。 (1)如果要用甘蔗的外植體作為材料對(duì)甘蔗進(jìn)行大規(guī)模種植，在對(duì)甘蔗外植體細(xì)胞進(jìn)行接種前，需要進(jìn)行________、________兩項(xiàng)工作。 (2)在外植體培養(yǎng)獲得幼苗的過(guò)程中，需要________與________等激素的作用。 (3)為了獲得理想的酵母菌菌種，可以對(duì)野生菌種進(jìn)行________，然后在________(A.固體　B．液體　C．選擇　D．鑒別)培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，該培養(yǎng)基要比基本培養(yǎng)基額外添加________，并且將pH________(填“調(diào)高”或“調(diào)低”)。在該培養(yǎng)基中挑選______________菌落，即為耐高糖、耐酸特性的突變酵母菌。 (4)

20、突變菌往往帶有一些特殊的基因，在獲得這些基因的過(guò)程中，PCR技術(shù)相當(dāng)重要。PCR擴(kuò)增反應(yīng)中加入________以催化DNA鏈的延伸。 解析：(1)在利用外植體進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)，需要配制培養(yǎng)基和對(duì)外植體消毒。(2)植物組織培養(yǎng)基中需要加入生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素等植物激素。(3)可采用誘變育種的方法處理野生菌，以得到理想菌，并采用固體選擇培養(yǎng)基篩選理想菌；耐高糖、耐酸特性的突變酵母菌可以在高濃度蔗糖(或葡萄糖)、低pH的選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。(4)PCR擴(kuò)增反應(yīng)中加入耐高溫的DNA聚合酶以催化DNA鏈的延伸。 答案：(1)配制培養(yǎng)基　外植體消毒 (2)生長(zhǎng)素　細(xì)胞分裂素 (3)誘變處理(或：紫外線(xiàn)照射)　AC　高濃度蔗糖(或葡萄糖)　調(diào)低　能在(選擇)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的 (4)DNA聚合酶