《人教版高中生物選修一教材用書：專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 課題3 分解纖維素的微生物的分離 Word版含答案》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《人教版高中生物選修一教材用書：專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 課題3 分解纖維素的微生物的分離 Word版含答案（11頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、 1．纖維素酶是復(fù)合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶等組分。 2．纖維素酶的作用：纖維素纖維二糖葡萄糖。 3．剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被分解后，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。 4．分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程：土壤取樣―→選擇培養(yǎng)―→梯度稀釋―→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上―→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落。 5．分離后，為確定得到的是纖維素分解菌，還需進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)。 課題3分解纖維素的微生物的分離 纖維素酶及纖維素分解菌的篩選 [自讀教材·夯基礎(chǔ)] 1．纖維素 (1)基本組成單位：葡萄糖。 (2)含量：是地球上最

2、豐富的多糖類物質(zhì)。 (3)分布：棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物。此外，木材、作物秸稈等也富含纖維素。 2．纖維素酶 (1)組成：纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三種組分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。 (2)作用： 纖維素纖維二糖葡萄糖 (3)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證： 試管 濾紙條 緩沖液pH＝4.8 纖維素酶(70～80 U/mL) 條件 結(jié)果 1 1 cm×6 cm 10 mL 1_mL 將兩支試管固定在50 mL的錐形瓶中，在搖床上以140 r/min的轉(zhuǎn)速振蕩反應(yīng)1 h 完全 分解 2 1 cm× 6 cm 11 mL 基本 無(wú)變化

3、 3.纖維素分解菌的篩選 (1)方法：剛果紅染色法，常用的有兩種。一種是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)；另一種是在倒平板時(shí)就加入剛果紅。 (2)原理： [跟隨名師·解疑難] 纖維素分解菌的篩選 (1)篩選原理： 剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，該復(fù)合物無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。 (2)篩選方法： 方法一 方法二 操作 先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅 倒平板時(shí)加入剛果紅 優(yōu)點(diǎn) 顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用 操作簡(jiǎn)便，不存在菌落混雜的問(wèn)題

4、 缺點(diǎn) 操作繁瑣，加入剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜 ①由于在纖維素粉、瓊脂和土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì)，可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)透明圈較為模糊的假陽(yáng)性反應(yīng) ②有些微生物具有降解色素的能力，長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)會(huì)降解剛果紅而形成明顯的透明圈 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和課題延伸 [自讀教材·夯基礎(chǔ)] 1．實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)流程 2．課題延伸——纖維素分解菌的鑒定 (1)為確定得到的透明圈中的菌落是纖維素分解菌，需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)。纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種。 (2)纖維素酶的測(cè)定方法，一般是采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定。 1．閱讀教

5、材P29旁欄中的纖維素分解菌選擇培養(yǎng)基的成分回答下列問(wèn)題。 (1)旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基？為什么？ 提示：是液體培養(yǎng)基，因?yàn)榕浞街袩o(wú)凝固劑。 (2)這個(gè)培養(yǎng)基對(duì)微生物是否具有選擇作用？如果有，是如何進(jìn)行選擇的？ 提示：有選擇作用。本配方中的唯一碳源是纖維素粉，所以能分解纖維素的微生物可以大量繁殖，而不能分解纖維素的微生物被抑制。 (3)你能否設(shè)計(jì)一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，說(shuō)明選擇培養(yǎng)的作用？ 提示：用接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行對(duì)照，若牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)大于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)，說(shuō)明選擇培養(yǎng)基具有篩選作用。 2．在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，為什么要進(jìn)行梯度稀釋？ 提示：通過(guò)梯

6、度稀釋使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)菌，在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。 3．分離分解纖維素的微生物實(shí)驗(yàn)，只是分離純化的第一步，為確保得到的是纖維素分解菌，還需要做什么工作？ 提示：還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)。 [跟隨名師·解疑難] 1．纖維素分解菌的篩選過(guò)程中所用兩種培養(yǎng)基的成分和作用 (1)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基： 組分 含量 提供的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 纖維素粉 5 g 碳源、能源 NaNO3 1 g 無(wú)機(jī)鹽 Na2HPO4·7H2O 1.2 g KH2PO4 0.9 g MgSO4·7H2O 0.5 g KCl 0.5 g 酵母膏 0.5 g

7、 特殊營(yíng)養(yǎng)成分、碳源、氮源 水解酪素 0.5 g 氮源、特殊營(yíng)養(yǎng)成分 上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容至1 000 mL 　　(2)鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基： 組分 含量 提供的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) CMC-Na 5～10 g 碳源 酵母膏 1 g 碳源、氮源、特殊營(yíng)養(yǎng)成分 KH2PO4 0.25 g 無(wú)機(jī)鹽 瓊脂 15 g 凝固劑 土豆汁 100 mL 碳源 上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容至1 000 mL 2.纖維素分解菌的篩選過(guò)程中所用兩種培養(yǎng)基的比較 (1)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，利用液體培養(yǎng)基能使?fàn)I養(yǎng)成分充分消耗，以增加纖維素分解

8、菌的濃度。 (2)纖維素分解菌的鑒別培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，因?yàn)樾枰谂囵B(yǎng)基上形成我們?nèi)庋劭梢姷木洹? (3)在上述選擇培養(yǎng)基中能以纖維素作為碳源和能源的微生物可以正常生長(zhǎng)，而其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長(zhǎng)；而在上述鑒別培養(yǎng)基中，絕大多數(shù)微生物都可以正常生長(zhǎng)。 [特別提醒]　 (1)判斷某個(gè)培養(yǎng)基是否具有選擇作用時(shí)，應(yīng)設(shè)立基礎(chǔ)培養(yǎng)基進(jìn)行對(duì)照。 (2)判斷所使用的培養(yǎng)基是否被雜菌污染時(shí)，應(yīng)設(shè)立不接種該菌種的培養(yǎng)基進(jìn)行空白對(duì)照。 剛果紅染色法分析 [例1] 下列有關(guān)剛果紅染色法的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．剛果紅可以在細(xì)菌菌落形成前倒平板時(shí)加入 B．剛果紅可以在菌落形成后加入

9、 C．在菌落形成前倒平板時(shí)加入，剛果紅不需要滅菌 D．在菌落形成后加入剛果紅時(shí)，剛果紅不需要滅菌 [解析]　利用剛果紅篩選纖維素分解菌時(shí)，剛果紅可以在細(xì)菌菌落形成前倒平板時(shí)加入，也可以在菌落形成后加入。在細(xì)菌菌落形成前倒平板時(shí)加入，要進(jìn)行滅菌，以防雜菌的侵入，影響纖維素分解菌菌落的形成；在菌落形成后加入剛果紅，則不需要滅菌。 [答案]　C 實(shí)驗(yàn)的拓展應(yīng)用 [例2] 某實(shí)驗(yàn)小組欲從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟如下，請(qǐng)給予合理的補(bǔ)充。 (1)采樣與培養(yǎng)：將采集的土樣混勻后稱取1 g，置于經(jīng)過(guò)________________法滅菌處理的________(填“固體

10、”或“液體”)培養(yǎng)基中，28 ℃振蕩培養(yǎng)。 (2)接種與選擇：為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過(guò)高，需將培養(yǎng)液進(jìn)行________處理。之后，將菌液涂布接種于以________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，30 ℃條件下培養(yǎng)。為避免污染，需將培養(yǎng)皿呈________狀態(tài)放置。此外，為排除其他因素的影響，提高實(shí)驗(yàn)可信度，本步驟需設(shè)計(jì)________________________作為空白對(duì)照。 (3)篩選與純化：將適量的碘液滴加在平板中的菌落周圍，如果菌落周圍的現(xiàn)象是________________，則說(shuō)明此種菌能夠____________________________。從平板中挑取實(shí)驗(yàn)效果明顯的目的菌

11、株，采用____________法接種于新的培養(yǎng)基平板上，可對(duì)菌株進(jìn)行進(jìn)一步的純化。 [解析]　(1)對(duì)培養(yǎng)基的滅菌方式是高壓蒸汽滅菌，因?yàn)楹竺嬉M(jìn)行涂布，所以應(yīng)該用液體培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)。(2)減小培養(yǎng)液菌體濃度一般用稀釋方法。由于題目要求選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌，所以培養(yǎng)基中的碳源就應(yīng)只有淀粉。倒置可以減少培養(yǎng)基受污染，為排除其他因素影響，需要設(shè)置未接種的空白的培養(yǎng)基作對(duì)照組。(3)淀粉被水解，培養(yǎng)基會(huì)出現(xiàn)透明圈的現(xiàn)象。用平板劃線法來(lái)培養(yǎng)，可進(jìn)一步純化菌種。 [答案]　(1)高壓蒸汽滅菌　液體 (2)系列稀釋(或梯度稀釋)　淀粉　倒置　未接種的空白培養(yǎng)基(或接種等量無(wú)菌水的培養(yǎng)基) (

12、3)出現(xiàn)透明圈　分泌淀粉酶使淀粉發(fā)生水解　平板劃線 歸納拓展 選擇培養(yǎng)的“濃縮”作用 在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些能夠適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖，而那些不適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“濃縮”的作用。 [隨堂基礎(chǔ)鞏固] 1．下列關(guān)于纖維素的敘述錯(cuò)誤的是(　　) A．纖維素是由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物 B．纖維素能被土壤中某些微生物分解利用，是因?yàn)檫@些微生物能產(chǎn)生纖維素酶 C．植物的根、莖、葉等器官都含有大量的纖維素 D．自然界中的各種生物均能把纖維素分解成葡萄糖，從而作為生物體的能量來(lái)源 解析：選D　自然界中許多生物都不能分解纖維

13、素，只有能合成纖維素酶的生物才能分解纖維素。 2．在加入剛果紅的培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)透明圈，產(chǎn)生的透明圈是(　　) A．剛果紅與纖維素形成的復(fù)合物 B．剛果紅與纖維二糖形成的復(fù)合物 C．纖維素分解后形成的葡萄糖導(dǎo)致的 D．以纖維素分解菌為中心形成的 解析：選D　剛果紅可以與纖維素結(jié)合形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅－纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。 3．微生物體內(nèi)能夠使纖維素分解成纖維二糖的酶是(　　) A．C1酶和Cx酶 B．C1酶和葡萄糖苷酶 C．Cx酶和葡萄糖苷酶 D．C1

14、酶、Cx酶和葡萄糖苷酶 解析：選A　纖維素酶包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。前兩種酶將纖維素分解為纖維二糖。 4．纖維素酶的測(cè)定方法一般是(　　) A．對(duì)纖維素進(jìn)行定量測(cè)定 B．對(duì)纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖量進(jìn)行測(cè)定 C．對(duì)纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的纖維二糖進(jìn)行定量測(cè)定 D．對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行定量測(cè)定 解析：選B　纖維素分解菌的鑒定常用發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，即對(duì)纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定。 5．(2014·新課標(biāo)Ⅰ)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉?wèn)題： (1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其

15、中的葡萄糖苷酶可將________分解成________。 (2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時(shí)，CR可與纖維素形成________色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的________。 (3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表)： 酵母膏 無(wú)機(jī)鹽 淀粉 纖維素粉 瓊脂 CR溶液 水 培養(yǎng)基甲 ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ 培養(yǎng)基乙 ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ 注：“＋”表示有，“－”表示無(wú)。 據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲_____

16、___(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是____________________________________；培養(yǎng)基乙________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是____________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析：(1)纖維素酶包括三種組分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，C1酶、Cx酶催化纖維素分解成纖維二糖，葡萄糖苷酶將纖維二糖分解成葡萄糖。(2

17、)CR能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，CR—纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌的菌落為中心的透明圈。(3)培養(yǎng)基甲中未添加瓊脂，為液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基上不能形成單菌落，故不能用于分離和鑒別纖維素分解菌。培養(yǎng)基乙中未添加纖維素，不能和CR形成紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定為纖維素分解菌。 答案：(1)纖維二糖　葡萄糖　(2)紅　透明圈　(3)不能　液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落　不能　培養(yǎng)基中沒有纖維素，不會(huì)形成CR—纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌 [課時(shí)跟蹤檢測(cè)] (滿分50分　時(shí)間25分鐘) 一、選擇

18、題(每小題3分，共24分) 1．在加入剛果紅的培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈的菌落是(　　) A．分解尿素的細(xì)菌　　 B．硝化細(xì)菌 C．分解纖維素的細(xì)菌 D．乳酸菌 解析：選C　分解纖維素的細(xì)菌能將纖維素分解，則剛果紅－纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中就會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。 2．使用剛果紅染色時(shí)，加入剛果紅應(yīng)在(　　) ①制備培養(yǎng)基時(shí)?、谔荻认♂寱r(shí)?、鄣蛊桨鍟r(shí) ④涂布時(shí)?、蓍L(zhǎng)出菌落時(shí) A．①③ B．②⑤ C．③⑤ D．④⑤ 解析：選C　常用的剛果紅染色法有兩種：一種是先培養(yǎng)微生物，長(zhǎng)出菌落后再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)；另一種是倒平板時(shí)就加入剛

19、果紅。最終，兩種染色法都可以在培養(yǎng)基上觀察到以纖維素分解菌為中心的透明圈。 3．下列關(guān)于纖維素酶的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．纖維素酶只有一種，只能將纖維素分解為葡萄糖 B．纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括C1、Cx和葡萄糖苷酶三種 C．纖維素可被纖維素酶水解成葡萄糖，為微生物提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) D．分解纖維素的細(xì)菌、真菌、放線菌，都是通過(guò)產(chǎn)生纖維素酶來(lái)分解纖維素的 解析：選A　纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為至少包括三種組分，C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。其中C1酶和Cx酶將纖維素分解為纖維二糖，葡萄糖苷酶將纖維二糖分解為葡萄糖。纖維素可以為以纖維素為碳源的真菌、細(xì)菌、放線菌提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

20、 4．分離土壤中纖維素分解菌用到的方法是(　　) ①稀釋平板法　②涂布平板法?、蹎渭?xì)胞挑取法 ④選擇培養(yǎng)分離法 A．①② B．②③④ C．②③ D．①③④ 解析：選B　分離土壤中的纖維素分解菌，先進(jìn)行選擇培養(yǎng)，增加纖維素分解菌的濃度，然后梯度稀釋，涂布平板、培養(yǎng)，最后單細(xì)胞挑取以獲得純種培養(yǎng)。稀釋平板法是先進(jìn)行梯度稀釋，然后分別取不同稀釋液少許，與已熔化并冷卻至50 ℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合搖勻后，傾入滅菌的培養(yǎng)皿中，制成可能含菌的瓊脂平板，保溫一定時(shí)間即可出現(xiàn)菌落。但此方法只適用于耐高溫微生物的分離，不能用來(lái)分離纖維素分解菌。 5．要將能分解纖維素的細(xì)菌從土

21、壤中分離出來(lái)，應(yīng)將它們接種在(　　) A．加入指示劑的鑒別培養(yǎng)基上 B．含有蛋白胨的固體培養(yǎng)基上 C．只含纖維素粉而無(wú)其他碳源的選擇培養(yǎng)基上 D．含四大營(yíng)養(yǎng)要素的培養(yǎng)基上 解析：選C　分解纖維素菌的選擇條件是以纖維素為唯一碳源。 6．下列關(guān)于分離纖維素分解菌實(shí)驗(yàn)過(guò)程的操作，有誤的是(　　) A．經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品直接涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 B．富集培養(yǎng)這一步可省略，但培養(yǎng)的纖維素分解菌少 C．經(jīng)稀釋培養(yǎng)后，用剛果紅染色 D．對(duì)照組可用同樣量的培養(yǎng)液涂布到不含纖維素的培養(yǎng)基上 解析：選A　經(jīng)選擇培養(yǎng)后，再經(jīng)稀釋，才能將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上；富集培養(yǎng)

22、可省略；經(jīng)稀釋培養(yǎng)后，用剛果紅染色；設(shè)置對(duì)照能證明經(jīng)富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的微生物。 7．利用農(nóng)作物秸稈為原料可生產(chǎn)乙醇，生產(chǎn)過(guò)程中可采用微生物將秸稈水解或用酶水解，其主要技術(shù)流程如下圖所示，下列相關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是(　　) 秸稈―→秸稈碎屑反應(yīng)罐水解壓濾出渣酒精發(fā)酵真空分餾 A．可用剛果紅染色法篩選過(guò)程①所需的纖維素分解菌 B．過(guò)程①加入的纖維素酶是葡萄糖苷酶 C．酒精發(fā)酵接種的酵母菌需在無(wú)氧條件下發(fā)酵 D．酒精發(fā)酵前需對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌 解析：選B　篩選纖維素分解菌可采用剛果紅染色法；纖維素酶為復(fù)合酶，至少包含三種組分，C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶；酒精發(fā)酵需在無(wú)氧條件下進(jìn)

23、行；酒精發(fā)酵前需對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。 8．下表資料表明在各種培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長(zhǎng)情況，(S、C、M)為簡(jiǎn)單培養(yǎng)基，U、V、X、Y、Z代表加入培養(yǎng)基的不同物質(zhì)，問(wèn)哪一種物質(zhì)細(xì)菌不能合成(　　) 培養(yǎng)基 生長(zhǎng)狀態(tài) S、C、M － S、C、M＋V＋Z － S、C、M＋U＋Y ＋ S、C、M＋Z＋X － S、C、M＋V＋Y ＋ S、C、M＋U＋X － S、C、M＋Y＋Z ＋ 注：表中“＋”表示能生長(zhǎng)，“－”表示不能生長(zhǎng)。 A．U B．V C．Y D．Z 解析：選C　從表中可以看出，凡是能生長(zhǎng)的均有Y，而不能生長(zhǎng)的均無(wú)Y。因此，Y是細(xì)菌不

24、能合成的物質(zhì)。 二、非選擇題(共26分) 9．(12分)有些微生物能合成纖維素酶，通過(guò)對(duì)這些微生物的研究和應(yīng)用，使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn)酒精，用纖維素酶處理服裝面料等。研究人員成功地從土壤中篩選到能產(chǎn)生纖維素酶的微生物。分析回答問(wèn)題： (1)在將樣品稀釋涂布到鑒別培養(yǎng)基之前，可以通過(guò)______(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基進(jìn)行______以增加纖維素分解菌的濃度。 (2)剛果紅可以與纖維素等多糖形成紅色復(fù)合物，但并不與纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。常用的剛果紅染色法有兩種，第一種是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)；第二種是在________時(shí)就加入剛果紅。________

25、(填“第一種”或“第二種”)方法會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜。 (3)如果觀察到產(chǎn)生________的菌落，說(shuō)明可能獲得了纖維素分解菌。為了確定是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行________產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)。纖維素酶的測(cè)定方法一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的________進(jìn)行定量的測(cè)定。 (4)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理才能倒掉，這樣做的目的是________________________________________________________________________。 解析：(1)在將樣品稀釋涂布到鑒別培養(yǎng)基之前，可以通過(guò)液體培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)以增加纖

26、維素分解菌的濃度。 (2)常用的剛果紅染色法有兩種，一種是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)，另一種是在倒平板時(shí)就加入剛果紅。但第一種方法會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜。 (3)如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落，說(shuō)明可能獲得了纖維素分解菌。為了確定是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)。纖維素酶的測(cè)定方法一般是采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測(cè)定。 (4)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理才能倒掉，以免菌種對(duì)環(huán)境造成污染。 答案：(1)液體　選擇培養(yǎng)　(2)倒平板　第一種 (3)透明圈　發(fā)酵　葡萄糖　(4)防止造成環(huán)境污染 10．(14分)進(jìn)入冬季，

27、部分城市出現(xiàn)嚴(yán)重霧霾，與秸稈野外焚燒有一定關(guān)系。為破解秸稈處理瓶頸，微生物專家力圖通過(guò)微生物降解技術(shù)使秸稈能盡快腐爛掉，增加土壤肥力。緩解環(huán)境污染。試分析并回答有關(guān)問(wèn)題： (1)專家研制的降解秸稈的催腐劑是十余種能分解纖維素的霉菌、細(xì)菌和酵母菌的組合。其中________在細(xì)胞結(jié)構(gòu)上與其他兩者不同。 (2)纖維素酶是一種復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可以將__________分解為______________。 (3)微生物專家為從發(fā)黑的樹干上分離出有分解纖維素能力的高產(chǎn)菌株，制備了選擇培養(yǎng)基，將菌液進(jìn)行一系列__________，從而得到單個(gè)菌落，再采用_________________法進(jìn)

28、行鑒定，得到如圖所示的菌落。那么，圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是___________(填圖中序號(hào))。 (4)圖中所示培養(yǎng)基從物理狀態(tài)上看，屬于____________培養(yǎng)基。 (5)為探究催腐劑在不同條件下對(duì)玉米秸稈的分解作用，將經(jīng)過(guò)滅菌處理的秸稈平分成下表的甲、乙、丙三組，均放在無(wú)菌環(huán)境條件下進(jìn)行培養(yǎng)，得到如下實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象： 組別 催腐劑 溫度/℃ 實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象 甲 無(wú) 25 第25天落葉還沒變化 乙 有 25 第25天落葉完全腐爛 丙 有 35 第18天落葉完全腐爛 該實(shí)驗(yàn)還存在不完善之處，請(qǐng)說(shuō)出其中一點(diǎn)_________________________

29、_____________________________________。 解析：(1)霉菌和酵母菌屬于真核生物中的真菌，細(xì)菌屬于原核生物，原核細(xì)胞和真核細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上最主要的區(qū)別是原核細(xì)胞沒有核膜包被的成形的細(xì)胞核。(2)纖維素酶是一種復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可以將纖維二糖分解為葡萄糖。(3)將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋，可以得到單個(gè)菌落，再采用剛果紅染色法進(jìn)行鑒定。纖維素酶的量越多，活性越強(qiáng)，分解的纖維素越多，透明圈越大，所以圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是①。(4)圖中所示培養(yǎng)基從物理狀態(tài)上看，屬于固體培養(yǎng)基。(5)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)應(yīng)遵循單一變量和對(duì)照性原則，分析實(shí)驗(yàn)表格可知，該實(shí)驗(yàn)還存在不完善之處，即缺少35 ℃無(wú)催腐劑的對(duì)照組。 答案：(1)細(xì)菌　(2)纖維二糖　葡萄糖　(3)梯度稀釋　剛果紅染色?、佟?4)固體　(5)缺少35 ℃無(wú)催腐劑的對(duì)照組