《高中生物 專題三 植物的組織培養(yǎng)技術(shù)課件 新人教版選修1》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《高中生物 專題三 植物的組織培養(yǎng)技術(shù)課件 新人教版選修1（58頁珍藏版）》請?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)是指在是指在人工培養(yǎng)基人工培養(yǎng)基上，上，離體培養(yǎng)離體培養(yǎng)植物的器官、組植物的器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體，并使其生長、增殖、分化以及再生織、細(xì)胞和原生質(zhì)體，并使其生長、增殖、分化以及再生植株的技術(shù)。植株的技術(shù)。 由由高度分化高度分化的植物器官、組織或細(xì)胞的植物器官、組織或細(xì)胞產(chǎn)生產(chǎn)生愈傷組織愈傷組織的過程，又稱去分化。的過程，又稱去分化。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織在培養(yǎng)過程中重脫分化產(chǎn)生的愈傷組織在培養(yǎng)過程中重新分化新分化根或芽根或芽等器官的過程等器官的過程植物組織培養(yǎng)的過程植物組織培養(yǎng)的過程離體的植物組織或細(xì)胞愈傷組織根和芽完整的植物體脫分化再分化MS固體培養(yǎng)基成分及比例固體培養(yǎng)基成

2、分及比例 JLSSYJLSSY BYHBYH知識回顧單倍體育種的過程？單倍體育種的過程？花藥離體培養(yǎng)（花藥離體培養(yǎng)（N）單倍體植株（單倍體植株（N）秋水仙素處理，秋水仙素處理，使染色體翻倍使染色體翻倍植株（植株（2N）特點(diǎn)：特點(diǎn)：1 明顯縮短育種年限明顯縮短育種年限2 后代植株都為純合子。后代植株都為純合子。正常植株（正常植株（2N）被子植物的被子植物的有性生殖有性生殖是在是在花里花里進(jìn)行進(jìn)行的，的，雌蕊雌蕊和和雄蕊雄蕊是進(jìn)行有性生殖的是進(jìn)行有性生殖的主要部分主要部分。雌雌蕊蕊雄雄蕊蕊花絲花絲花藥：花藥：囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉雄蕊雄蕊一、被子植物的花粉發(fā)育一、被子植物的花

3、粉發(fā)育花絲花絲花藥：花藥：囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉 花粉是由花粉母細(xì)胞（即小孢子母細(xì)胞）花粉是由花粉母細(xì)胞（即小孢子母細(xì)胞）經(jīng)過經(jīng)過而形成的，因此，花粉是而形成的，因此，花粉是。 花粉的發(fā)育要經(jīng)歷：花粉的發(fā)育要經(jīng)歷：時(shí)期、單核時(shí)期、單核期、雙核期期、雙核期等階段。等階段。雄蕊雄蕊 花粉母花粉母細(xì)胞細(xì)胞（小孢子母細(xì)胞）（小孢子母細(xì)胞）4 4個(gè)小孢子個(gè)小孢子( (小孢子四分體時(shí)期）小孢子四分體時(shí)期）減數(shù)分裂減數(shù)分裂小孢子四分體小孢子四分體1 1個(gè)小個(gè)小孢子孢子 花粉粒花粉粒（雙核期）（雙核期）有絲分裂有絲分裂單核單核雙核雙核營養(yǎng)細(xì)胞核營養(yǎng)細(xì)胞核營養(yǎng)細(xì)胞營養(yǎng)細(xì)胞生殖細(xì)胞核生殖細(xì)胞

4、核2個(gè)精子個(gè)精子花粉是花粉是單倍體單倍體的生殖細(xì)胞的生殖細(xì)胞有絲分裂有絲分裂花粉粒小孢子母細(xì)胞小孢子母細(xì)胞小孢子小孢子花粉囊花粉囊花藥花藥 花粉粒花粉粒（雙核期）（雙核期）成熟成熟花粉花粉8個(gè)精子個(gè)精子小孢子母細(xì)胞小孢子母細(xì)胞（ ）時(shí)期）時(shí)期單核（單核（ ）期）期雙核期雙核期（ ）細(xì)胞核）細(xì)胞核 （ ）細(xì)胞核）細(xì)胞核（ ）細(xì)胞）細(xì)胞（ ）細(xì)胞）細(xì)胞（ ）個(gè)精子）個(gè)精子（ ）分裂）分裂（ ）分裂）分裂單核（單核（ ）期）期（ ）分裂）分裂減數(shù)減數(shù)小孢子四分體小孢子四分體中中邊邊有絲有絲生殖生殖生殖生殖花粉管花粉管營養(yǎng)營養(yǎng)有絲有絲22NNNNNNNNN 愈傷組織愈傷組織花粉花粉分化分化 生根生根移

5、栽移栽誘導(dǎo)誘導(dǎo)脫分化脫分化 叢芽叢芽 植物體植物體胚狀體胚狀體移栽移栽花藥中花藥中的花粉的花粉胚狀體胚狀體脫分化脫分化 愈傷組織愈傷組織 花藥中花藥中的花粉的花粉脫分化脫分化 分化分化 叢芽叢芽 再分化再分化 叢芽叢芽 誘導(dǎo)誘導(dǎo)生根生根體細(xì)胞胚（胚狀體）：在組織培養(yǎng)過程中，某些細(xì)胞在形態(tài)上轉(zhuǎn)體細(xì)胞胚（胚狀體）：在組織培養(yǎng)過程中，某些細(xì)胞在形態(tài)上轉(zhuǎn)變?yōu)榕c變?yōu)榕c合子發(fā)育成的胚非常相似的結(jié)構(gòu)合子發(fā)育成的胚非常相似的結(jié)構(gòu)，發(fā)育過程亦與合子胚類，發(fā)育過程亦與合子胚類似，胚芽，胚軸，胚根等結(jié)構(gòu)完整，就像一顆種子似，胚芽，胚軸，胚根等結(jié)構(gòu)完整，就像一顆種子原因：原因：培養(yǎng)基中的培養(yǎng)基中的激素種類激素種類及及

6、濃度配比濃度配比減數(shù)分裂減數(shù)分裂細(xì)胞生長細(xì)胞生長小孢子母細(xì)胞小孢子母細(xì)胞或花粉母細(xì)胞或花粉母細(xì)胞2N4個(gè)小孢子個(gè)小孢子N四分體時(shí)期四分體時(shí)期1個(gè)小孢子個(gè)小孢子N單核居中期單核居中期單核靠邊期單核靠邊期N單核花粉粒單核花粉粒有絲分裂有絲分裂有絲分裂有絲分裂精子（花粉或花粉精子（花粉或花粉細(xì)胞細(xì)胞）營養(yǎng)細(xì)胞營養(yǎng)細(xì)胞核核營養(yǎng)細(xì)胞營養(yǎng)細(xì)胞生殖細(xì)胞生殖細(xì)胞 小孢子母細(xì)胞：小孢子母細(xì)胞：20小孢子：小孢子：10營養(yǎng)細(xì)胞：營養(yǎng)細(xì)胞：10精子：精子：10神奇的人工種子神奇的人工種子: :通過通過胚狀體胚狀體途徑形成小植株途徑形成小植株煙草花藥培養(yǎng)煙草花藥培養(yǎng)胚狀體發(fā)育途徑胚狀體發(fā)育途徑能否成功：能否成功：1

7、1、材料的選擇、材料的選擇2 2、培養(yǎng)基的組成、培養(yǎng)基的組成（ MSMS培養(yǎng)基培養(yǎng)基+ +不同比例的植物生長調(diào)節(jié)激素）不同比例的植物生長調(diào)節(jié)激素）此外，植株生長條件、材料低溫預(yù)處理、接種密度等此外，植株生長條件、材料低溫預(yù)處理、接種密度等(三三)、影響花藥培養(yǎng)的主要因素、影響花藥培養(yǎng)的主要因素（一）材料選?。ㄒ唬┎牧线x取 2、通過、通過鏡檢鏡檢來確定是否處于適宜的發(fā)育期來確定是否處于適宜的發(fā)育期。 方法：方法：醋酸洋紅法醋酸洋紅法(將染色體染成紅色將染色體染成紅色)常用方法常用方法 焙花青焙花青-鉻礬法鉻礬法(花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色)。1、從花藥看：從花藥看： 從花粉看：從花

8、粉看： 從花蕾看：從花蕾看： 花藥（載玻片上）花藥（載玻片上）1%的醋酸洋紅的醋酸洋紅1滴滴用鑷柄將花藥搗碎，用鑷柄將花藥搗碎，蓋上蓋玻片蓋上蓋玻片鏡檢（花粉粒的細(xì)胞核被染成紅色）鏡檢（花粉粒的細(xì)胞核被染成紅色） 花藥（在卡諾氏固定液中處理花藥（在卡諾氏固定液中處理20min）取出，置于載玻片上取出，置于載玻片上焙花青鉻礬溶液染色焙花青鉻礬溶液染色蓋上蓋玻片蓋上蓋玻片鏡檢（花粉粒的細(xì)胞核鏡檢（花粉粒的細(xì)胞核被染成藍(lán)黑色）被染成藍(lán)黑色）月季的初花期月季的初花期單核靠邊期單核靠邊期完全未開放的完全未開放的（二）材料的消毒（二）材料的消毒5 5、 沖洗沖洗3 35 5次次 花藥的外面有花萼、花瓣保護(hù)

9、，通常處于無菌狀態(tài)花藥的外面有花萼、花瓣保護(hù)，通常處于無菌狀態(tài)1、花蕾用、花蕾用 浸泡浸泡30秒秒2、 清洗清洗3、 吸干花蕾表面的水分吸干花蕾表面的水分4、放入、放入 溶液中溶液中24分鐘分鐘 （質(zhì)量分?jǐn)?shù)為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的的次氯酸鈣溶液次氯酸鈣溶液或飽和漂白粉溶液或飽和漂白粉溶液）體積分?jǐn)?shù)為體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精的酒精無菌水無菌水質(zhì)量分?jǐn)?shù)為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞的氯化汞無菌水無菌水無菌吸水紙無菌吸水紙思考：思考： 月季花蕾的消毒與菊花外植體的消毒月季花蕾的消毒與菊花外植體的消毒相比較，二者有何不同？相比較，二者有何不同？ 在酒精消毒前，花藥不需要預(yù)先用在酒精消毒前，花藥不需要預(yù)先用流水沖

10、洗、洗衣粉洗滌和軟刷刷洗流水沖洗、洗衣粉洗滌和軟刷刷洗 為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料的為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料的消毒帶來困難？消毒帶來困難？答：花瓣松動(dòng)后，微生物就答：花瓣松動(dòng)后，微生物就可能侵入到花藥，給材料可能侵入到花藥，給材料的消毒帶來困難。的消毒帶來困難。（三）接種和培養(yǎng)（三）接種和培養(yǎng) 1 1 滅菌后花蕾，要在滅菌后花蕾，要在 下除去萼片和花瓣，下除去萼片和花瓣，并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。 3 通常每瓶接種花藥通常每瓶接種花藥 ，溫度控制在，溫度控制在 左左右，右， 。幼小植株形成后才。幼小植株形成后才 。 2 在剝離花藥時(shí)，要盡量在剝離花藥時(shí)，要盡量 （否則接

11、種后，否則接種后，容易從受傷部位產(chǎn)生二倍體的愈傷組織容易從受傷部位產(chǎn)生二倍體的愈傷組織），同時(shí)還要徹），同時(shí)還要徹底底 ，因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于愈傷組織或因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成胚狀體的形成。 一般經(jīng)過一般經(jīng)過20-30天培養(yǎng)后，會(huì)發(fā)現(xiàn)花藥開裂，長出天培養(yǎng)后，會(huì)發(fā)現(xiàn)花藥開裂，長出愈傷組織愈傷組織或釋放出胚狀體或釋放出胚狀體。將愈傷組織及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上，以便。將愈傷組織及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上，以便進(jìn)一步分化出再生植株。進(jìn)一步分化出再生植株。 4 進(jìn)一步鑒定和篩選：進(jìn)一步鑒定和篩選：常常會(huì)出現(xiàn)染色體倍性的變化常常會(huì)出現(xiàn)染色體倍性的變化無菌條件無菌條件不損傷花藥不損傷花藥去除花絲去除花絲7-10個(gè)個(gè)25不需要光照不需要光照需要光照需要光照主要原因是主要原因是花粉管核和花粉管核和生殖核融合生殖核融合造成的造成的