《高三生物一輪復(fù)習(xí) 第37講 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)課件 新人教版選修1》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《高三生物一輪復(fù)習(xí) 第37講 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)課件 新人教版選修1（52頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、生物技術(shù)實(shí)踐生物技術(shù)實(shí)踐第第 37 37 講講DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)和蛋白質(zhì)技術(shù)選修11 1進(jìn)行進(jìn)行DNADNA的粗提取與鑒定。的粗提取與鑒定。2 2嘗試嘗試PCRPCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用。技術(shù)的基本操作和應(yīng)用。3 3嘗試蛋白質(zhì)的提取和分離。嘗試蛋白質(zhì)的提取和分離。1 1(2010(2010江蘇江蘇) )某生物興趣小組開展某生物興趣小組開展DNADNA粗提粗提取的相關(guān)探究活動(dòng)。具體步驟如下：取的相關(guān)探究活動(dòng)。具體步驟如下：材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2 2份，每份份，每份10 g10 g。剪碎后分成兩組，一組置。剪碎后分成兩組，一組置于于20 20

2、 、另一組置于、另一組置于20 20 條件下保存條件下保存24 h24 h。DNADNA粗提?。捍痔崛。旱谝徊剑旱谝徊剑簩⑸鲜霾牧戏謩e放入研缽中，各加將上述材料分別放入研缽中，各加入入15 mL15 mL研磨液，充分研磨。用兩層紗布過研磨液，充分研磨。用兩層紗布過濾，取濾液備用。濾，取濾液備用。第二步：先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液，再加入20 mL體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。第三步：取6支試管，分別加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮狀物。DNA檢測(cè)：在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑，混合均勻后，置于沸水中加

3、熱5 min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺，結(jié)果如下表。(注：“”越多表示藍(lán)色越深)分析上述實(shí)驗(yàn)過程，回答下列問題：(1)該探究性實(shí)驗(yàn)課題名稱是 。( 2 ) 第 二 步 中 “ 緩 緩 地 ” 攪 拌 ， 這 是 為 了 減 少 。 探究不同材料和探究不同材料和不同保存溫度對(duì)不同保存溫度對(duì)DNA提取量的影響提取量的影響DNA斷裂斷裂(3)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出結(jié)論并分析。結(jié)論1：與20 相比，相同實(shí)驗(yàn)材料在20 條件下保存，DNA的提取量較多。 結(jié)論2： 。針對(duì)結(jié)論1，請(qǐng)?zhí)岢龊侠淼慕忉專?。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對(duì)DNA影響極小。為了進(jìn)一步提高DNA

4、純度，依據(jù)氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是： ，然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液使DNA析出。 等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)材料，在相同的保存溫等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)材料，在相同的保存溫度下，從蒜黃提取的度下，從蒜黃提取的DNA量最多量最多 低溫抑制了相關(guān)酶低溫抑制了相關(guān)酶的活性，的活性，DNA降解速度慢降解速度慢 將第三步獲得的溶液分別與將第三步獲得的溶液分別與等量的氯仿充分混合，靜置一段時(shí)間，吸取上清液等量的氯仿充分混合，靜置一段時(shí)間，吸取上清液 本題考查了DNA粗提取技術(shù)的原理、操作過程及學(xué)生的分析、判斷能力。從題目實(shí)驗(yàn)看出，該實(shí)驗(yàn)的課題名稱是探究不同材料和不同保存溫度對(duì)DNA提

5、取量的影響。在實(shí)驗(yàn)的第二步中，為了防止DNA斷裂，要緩緩地?cái)嚢?。從表中結(jié)果看出，由于低溫抑制了相關(guān)酶的活性，DNA降解慢，使得相同材料在低溫保存時(shí)，DNA提取量大；在相同保存條件下，蒜黃藍(lán)色最深，說(shuō)明相同條件下從蒜黃中提取的DNA量最大。由于氯仿密度比水大，可使蛋白質(zhì)變性后沉淀，而與水、DNA不相溶，這樣可將第三步獲得的溶液分別與等量的氯仿混合，靜置一段時(shí)間，吸取上清液即可得到較純凈的DNA。 2.(2008山東)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白。這種蛋白質(zhì)具有極強(qiáng)的抗菌能力，受到研究者重視。(1)分離該抗菌蛋白可用電泳法，其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的，大小及性狀不同，在電場(chǎng)中的不同而實(shí)現(xiàn)分

6、離。電荷電荷(帶電情況帶電情況)遷移速度遷移速度(2)可用金黃色葡萄球菌來(lái)檢驗(yàn)該蛋白質(zhì)的體外抗菌特性?？咕鷮?shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細(xì)菌生長(zhǎng)提供和。(3)分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)一定時(shí)間后，比較兩種培養(yǎng)基中菌落的，確定該蛋白質(zhì)的抗菌效果。(4)抗菌培養(yǎng)常用的接種方法有 .和。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行處理。碳源碳源 氮源氮源數(shù)量數(shù)量平板劃線法平板劃線法稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法(稀釋混合平板法稀釋混合平板法)滅菌滅菌(1)電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過程。許多重要的生物大分子，如多肽、蛋白質(zhì)、核酸等都具有可解離基團(tuán)，它們?cè)谀硞€(gè)特

7、定的pH下會(huì)帶上正電或負(fù)電；在電場(chǎng)的作用下，這些帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極方向移動(dòng)。電泳技術(shù)就是在電場(chǎng)的作用下，利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)以及分子本身大小、形狀等性質(zhì)的差異，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而達(dá)到對(duì)樣品進(jìn)行分離、鑒定或提純的目的。(2)牛肉膏和蛋白胨是成分復(fù)雜的天然有機(jī)物，能為微生物提供碳源、氮源。(3)可采用逆向思維。若抗菌蛋白具有抗菌效果，即抗菌蛋白抑制了金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)繁殖，則不形成菌落或菌落數(shù)量明顯偏少。(4)微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。平板劃線法通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到

8、培養(yǎng)基的表面。稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋。然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理才能倒掉，這樣做的目的是防止造成環(huán)境污染。一、DNA的粗提取與鑒定1.原理粗提取DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同。在0.14 mol/L 的NaCl溶液中DNA溶解度最 .DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精DNA與雜質(zhì)對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同鑒定DNA+藍(lán)色二苯胺二苯胺沸水浴沸水浴5 min低低2.粗提取流程(以雞血細(xì)胞液做實(shí)驗(yàn)材料為例)3.鑒定序號(hào)試管A試管B2 mol/L 的

9、NaCl溶液5 mL5 mL加絲狀物，用玻璃棒攪拌加二苯胺4 mL ，混勻4 mL ，混勻沸水浴5 min5 min實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象變藍(lán)不變藍(lán)實(shí)驗(yàn)結(jié)論絲狀物的主要成分是DNA分子本實(shí)驗(yàn)不能用哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞作實(shí)驗(yàn)材料，原因是哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞內(nèi)無(wú)細(xì)胞核，但它可作為血紅蛋白提取和制備細(xì)胞膜的理想材料。體內(nèi)復(fù)制PCR反應(yīng)解旋在解旋酶作用下，細(xì)胞提供能量，部分解開加熱至90 ，雙鏈全部解開，不需解旋酶溫度體內(nèi)溫和條件高溫引物一小段RNARNA或單鏈DNA分子片段合成子鏈在引物基礎(chǔ)上，一條鏈連續(xù)合成，另一條鏈不連續(xù)合成分別從兩條鏈的引物端開始，都是連續(xù)合成，控制溫度72 二、多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段

10、1.生物體內(nèi)DNA復(fù)制與PCR反應(yīng)的比較體內(nèi)復(fù)制PCR反應(yīng)特點(diǎn)邊解旋邊復(fù)制，半保留復(fù)制體外迅速擴(kuò)增酶解旋酶、DNA聚合酶等TaqDNA聚合酶循環(huán)次數(shù)受生物體自身控制30多次相同點(diǎn)生物體內(nèi)的DNA復(fù)制和PCR體外DNA擴(kuò)增都需要模板、四種脫氧核苷酸，子鏈延伸的方向都是從5端3端條件穩(wěn)定的緩沖液環(huán)境；DNA模板；分別與模板DNA兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物；A、T、G、C四種脫氧核苷酸；耐熱的DNA聚合酶，一般用TaqDNA聚合酶；能嚴(yán)格控制溫度變化的溫控設(shè)備過程變性：當(dāng)溫度上升到90 以上時(shí)，雙鏈DNA解旋為單鏈復(fù)性：溫度下降為50 左右時(shí)，兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合延伸：當(dāng)溫度

11、上升到72 左右，四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈2.PCR反應(yīng)蛋白質(zhì)分離的方法三、血紅蛋白的提取和分離三、血紅蛋白的提取和分離1.蛋白質(zhì)分離的方法蛋白質(zhì)分離的方法凝膠色譜法凝膠色譜法電泳法電泳法蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量大相對(duì)分子質(zhì)量小運(yùn)動(dòng)方式排阻在凝膠顆粒外面，迅速通過進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，被滯留移動(dòng)速度.運(yùn)動(dòng)路程較短較長(zhǎng)洗脫次序先后凝膠色譜法凝膠色譜法較快較快較慢較慢原理:一些生物大分子(如多肽、核酸等),在一定pH下，其可解離的基團(tuán)會(huì)帶上正電或負(fù)電,在電場(chǎng)的作用下,這些帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷的電極移動(dòng)影響因素:各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、

12、形狀常用方法:瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳(通常使用聚丙烯酰胺凝膠電泳)電泳法電泳法相反相反SDS步驟目的過程樣品處理紅細(xì)胞洗滌去除雜蛋白，以利于后續(xù)步驟的分離純化分離(低速短時(shí)間離心)用膠頭吸管吸去上層透明黃色血漿下層紅色細(xì)胞用洗滌(低速短時(shí)間離心)三次血紅蛋白的釋放使紅細(xì)胞破裂釋放血紅蛋白依圖中abcd順序2.蛋白質(zhì)的提取和分離操作流程蛋白質(zhì)的提取和分離操作流程生理鹽水生理鹽水步驟目的過程樣品處理分離血紅蛋白經(jīng)過離心使血紅蛋白和其他雜質(zhì)分離開來(lái)，便于下一步對(duì)血紅蛋白的純化攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移至離心管中，2000 r/min速度離心10 min(高速長(zhǎng)時(shí)間)濾紙過濾除去雜質(zhì)得血紅蛋白粗分

13、離(透析)除去樣品中分子量較小的雜質(zhì)或用于更換樣品的緩沖液1 mL 血紅蛋白溶液透析袋20 mmol/L 的 (pH為7.0) 12h裝入裝入放入放入透析透析磷酸緩沖液磷酸緩沖液步驟目的過程純化凝膠色譜柱制作通過凝膠色譜操作，根據(jù) . .分離蛋白質(zhì)(將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去)取玻璃管制作柱底部制作柱頂部凝膠色譜柱的裝填固定色譜柱計(jì)算所需凝膠量凝膠用蒸餾水溶脹裝填洗滌平衡樣品的加入和洗脫調(diào)整緩沖液面滴加透析樣品樣品滲入凝膠床洗脫收集相對(duì)分子相對(duì)分子質(zhì)量的大小質(zhì)量的大小步驟目的過程純度鑒定判斷純化的蛋白質(zhì)是否達(dá)到要求使用最多的是SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳(操作選做) 相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通

14、過凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較小的容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，而相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)只能在凝膠外部移動(dòng)，移動(dòng)速度快，因此相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子彼此分離。1.如何正確區(qū)分破碎動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞的原理和方法？原理方法動(dòng)物細(xì)胞(雞血細(xì)胞)在低濃度溶液中會(huì)吸水甚至漲破雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水，同時(shí)用玻璃棒攪拌，過濾后收集濾液植物細(xì)胞(洋蔥細(xì)胞)洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜在切碎的洋蔥中，加入一定的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過濾后收集研磨液2.教材中去除濾液中雜質(zhì)的三種方案有什么不同？原理方法方案一DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同在濾液中加入2 mol/L NaCl溶液，過濾除去不溶雜

15、質(zhì)；再調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度為0.14 mol/L ，析出DNA，過濾除去不溶的雜質(zhì)，再用2 mol/L NaCl溶液溶解DNA原理方法方案二DNA對(duì)酶的耐受性直接在濾液中加入嫩肉粉，反應(yīng)1015 min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì)方案三DNA對(duì)高溫的耐受性將濾液放在6075 的恒溫水浴箱中保溫1015 min，注意嚴(yán)格控制溫度范圍，使蛋白質(zhì)沉淀而DNA分子還未變性，可將DNA與蛋白質(zhì)分離3.如何區(qū)分DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中部分操作的目的？加蒸餾水加到雞血細(xì)胞液，使血細(xì)胞吸水脹裂加到含DNA的2 mol/L NaCl溶液，使DNA析出用紗布過濾過濾血細(xì)胞破裂液，提取細(xì)胞核物質(zhì)(濾液)濾取0.1

16、4 mol/L NaCl溶液中析出的DNA(黏稠物)過濾溶有DNA的2 mol/L NaCl溶液(濾液)用NaCl溶液加2 mol/L NaCl溶液，溶解提取的細(xì)胞核物質(zhì)(加蒸餾水)0.14 mol/L NaCl溶液使DNA析出加2 mol/L NaCl溶液，溶解濾取的DNA黏稠物用2 mol/L NaCl溶液，溶解絲狀物用于鑒定DNA4.什么是3端和5端？DNA復(fù)制為什么需要引物？ 為了明確地表示DNA的方向，通常將DNA的羥基(OH)末端稱為3端，而含磷酸基團(tuán)的末端稱為5端；一個(gè)雙鏈DNA分子中含2個(gè)3端和2個(gè)5端，如果一條鏈的方向是35，則另一條鏈的方向就是53，這就是反向平行的含意。D

17、NA聚合酶不能從頭開始合成DNA，而只能從3端延伸DNA鏈。PCR實(shí)驗(yàn)中，引物長(zhǎng)度通常為2030個(gè)核苷酸。5.PCR實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意哪些問題？如何進(jìn)行PCR結(jié)果的分析與評(píng)價(jià)？ (1)PCR實(shí)驗(yàn)中的注意事項(xiàng)：避免外源DNA污染：所用儀器、緩沖液、蒸餾水等使用前進(jìn)行高壓滅菌。緩沖液和酶分裝成小份，-20 低溫保存。每添加一種反應(yīng)成分，更換一個(gè)移液器的槍頭?；靹蚝箅x心處理，使反應(yīng)液集中在離心管底部。(2)PCR結(jié)果的分析與評(píng)價(jià)：對(duì)于教材中的方法，可以通過計(jì)算DNA含量來(lái)評(píng)價(jià)擴(kuò)增的效果。原理：DNA在260 nm的紫外線波段有一強(qiáng)烈的吸收峰，峰值的大小與DNA的含量有關(guān)。過程：稀釋對(duì)照調(diào)零測(cè)定計(jì)算。對(duì)于電

18、泳檢測(cè)的方法，可以通過在紫外線下直接觀察DNA帶的分布及粗細(xì)程度來(lái)評(píng)價(jià)擴(kuò)增的效果。擴(kuò)增不成功的可能原因有：漏加了PCR的反應(yīng)成分，各反應(yīng)成分的用量不當(dāng)，PCR程序設(shè)置不當(dāng)?shù)取?.分離血紅蛋白的樣品處理中，紅細(xì)胞洗滌時(shí)為什么要低速短時(shí)間離心，并且要洗滌三次？ 紅細(xì)胞洗滌時(shí)，洗滌次數(shù)、離心速度與離心時(shí)間十分重要。洗滌次數(shù)過少，無(wú)法除去血漿蛋白；離心速度過高和時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)使白細(xì)胞等一起沉淀，達(dá)不到分離的效果。洗滌三次后，若上清液仍有黃色，可增加洗滌次數(shù)，否則無(wú)法除去血漿蛋白。7.凝膠色譜柱的裝填有什么要求？如何進(jìn)行樣品的加入和洗脫？ 在色譜柱中填凝膠的時(shí)候要盡量緊密，以降低凝膠顆粒之間的空隙。一是在裝

19、填凝膠柱時(shí)，不能有氣泡存在，因?yàn)闅馀輹?huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果。二是在凝膠色譜操作過程中，不能發(fā)生洗脫液流干，露出凝膠顆粒的現(xiàn)象。一旦發(fā)生上述兩種情況，凝膠色譜柱需要重新裝填。滴加樣品時(shí)，吸管管口貼著管壁環(huán)繞移動(dòng)加樣，不要破壞凝膠面。在蛋白質(zhì)分離過程中，仔細(xì)觀察紅色區(qū)帶在洗脫過程中的移動(dòng)情況，如果紅色區(qū)帶均勻一致地移動(dòng)，說(shuō)明色譜柱制作成功。根據(jù)紅色區(qū)帶的移動(dòng)狀況判斷收集流出液時(shí)間，待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí)，用試管收集流出液，每5 mL 收集一管，連續(xù)收集。DNA的粗提取與鑒定 下表是關(guān)于DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，所使用的材料、操作及其作用的表述，正確的是()試劑操作作用

20、A檸檬酸鈉溶液與雞血混合防止DNA受損B蒸餾水與雞血細(xì)胞混合保持細(xì)胞形狀C蒸餾水加入到溶解有DNA的NaCl溶液中析出DNA絲狀物D冷卻的酒精加入到過濾后含DNA的NaCl溶液中產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng) C在“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中檸檬酸鈉可以防止血液凝固；雞血中加入蒸餾水可以使細(xì)胞膜破裂；DNA在不同的氯化鈉溶液中的溶解度不同，在0.14 mol/L 時(shí)，溶解度最低，有利于DNA析出；DNA不溶于酒精，但細(xì)胞中的某些物質(zhì)可以溶于酒精，所以加入酒精，可以獲得較純的DNA；DNA遇二苯胺產(chǎn)生藍(lán)色反應(yīng)(需要沸水浴加熱)。在“DNA粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)中，將含有一定雜質(zhì)的DNA絲狀物分別放入體積為2

21、mL 的四種溶液中，經(jīng)攪拌后過濾，獲得4種濾液，含DNA較少的是()A.B.C.D.C1 蒸餾水中攪拌后過濾 濾液E2 2 mol/L 的NaCl溶液攪拌后過濾 濾液F3 0.14 mol/L 的NaCl溶液中攪拌后過濾 濾液G4 冷卻的95%的酒精溶液中 攪拌后過濾 濾液HDNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，在0.14 mol/L 的NaCl溶液中溶解度最低，參照DNA在NaCl溶液中溶解度曲線，可知中只有濾液G中DNA含量較少。DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精，利用這一原理可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離，可見濾液H中DNA也較少。DNA與蛋白質(zhì)的溶解性不同：溶解

22、規(guī)律2mol/LNaCl溶液0.14mol/LNaCl溶液DNA溶解析出蛋白質(zhì)NaCl溶液濃度從2 mol/L降低過程中，其溶解度逐漸增大部分發(fā)生鹽析沉淀溶解多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段 關(guān)于DNA的復(fù)制，下列敘述正確的是()A.DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從5端延伸DNA鏈B.DNA復(fù)制不需要引物C.引物與DNA母鏈通過堿基互補(bǔ)配對(duì)進(jìn)行結(jié)合D.DNA的合成方向總是從子鏈的3端向5端延伸 C由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從引物的3端即復(fù)制方向由3端向5端延伸；由于DNA分子是反向平行的，子鏈?zhǔn)且罁?jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，在DNA聚合酶作用下合成的，其合成方向是從子鏈5端向3

23、端延伸。下圖示PCR技術(shù)擴(kuò)增獲取DNA的過程。擴(kuò)增時(shí)首先使DNA兩條鏈解開為單鏈；然后冷卻使“引物”(DNA復(fù)制時(shí)所需的約20個(gè)核苷酸的短鏈)與單鏈相應(yīng)堿基互補(bǔ)序列結(jié)合；再在熱穩(wěn)定DNA聚合酶的作用下進(jìn)行延伸，合成與模板互補(bǔ)的DNA新鏈，如此反復(fù)循環(huán)。上述過程可在PCR擴(kuò)增儀中自動(dòng)完成。(1)圖中過程也稱為DNA的變性，此過程在溫度高達(dá)9095 時(shí)才能完成，說(shuō)明DNA分子具有性。(2)過程在人體內(nèi)可由.催化完成。(3)由題中信息可知，在PCR擴(kuò)增儀中進(jìn)行DNA自動(dòng)擴(kuò)增時(shí)，若起始時(shí)有a個(gè)DNA分子，連續(xù)擴(kuò)增n代，可形成個(gè)DNA分子。穩(wěn)定穩(wěn)定DNA聚合酶聚合酶(DNAa2n聚合酶、聚合酶、DNA連

24、接酶連接酶) DNA比蛋白質(zhì)更能忍受高溫，分子結(jié)構(gòu)具有相對(duì)的穩(wěn)定性，其中GC堿基對(duì)占比例越高的DNA分子越穩(wěn)定。為延伸過程，在體外擴(kuò)增是耐高溫的DNA聚合酶催化，在體內(nèi)是由DNA聚合酶催化完成。依據(jù)起始a個(gè)以及DNA擴(kuò)增呈指數(shù)增長(zhǎng)，可得答案。 PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都包括變性、復(fù)性、延伸三步。兩引物之間的固定長(zhǎng)度的DNA序列呈指數(shù)擴(kuò)增。血紅蛋白的提取和分離 蛋白質(zhì)的分離與純化技術(shù)是蛋白質(zhì)研究的重要技術(shù)。下列有關(guān)敘述不正確的是()A.根據(jù)蛋白質(zhì)分子不能透過半透膜的特性，可將樣品中各種不同的蛋白質(zhì)分離B.根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小等，可通過電泳分離蛋白質(zhì)C.根據(jù)蛋白質(zhì)相

25、對(duì)分子質(zhì)量的大小，可通過凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)D.根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小、密度不同，可通過離心沉降法分離蛋白質(zhì) AA項(xiàng)蛋白質(zhì)分子既然不能透過半透膜，那樣品中的各種不同的蛋白質(zhì)仍在透析袋內(nèi)，而不能達(dá)到分離的目的。B正確：電泳利用了分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。C正確：凝膠色譜法也稱作分配色譜法，是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。D正確：根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小、密度不同，可通過離心沉降法分離蛋白質(zhì)，分子大、密度大的在沉淀物中。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.在一定范圍內(nèi)，緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對(duì)溶液pH的影響，維持pH基本不變B.電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過程C.洗滌紅細(xì)胞時(shí)，用五倍體積的蒸餾水充分沖洗D.緩沖溶液通常由12種緩沖劑溶解于水中配制而成C洗滌紅細(xì)胞時(shí)，應(yīng)是加入五倍體積的生理鹽水，以維持紅細(xì)胞的正常形態(tài)和結(jié)構(gòu)。 血液樣品處理后，若分層不明顯，原因有：洗滌次數(shù)少，未能除去血漿蛋白；離心速度過高和時(shí)間過長(zhǎng)。