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2017-2018學年高中生物 第一部分 微生物的利用 實驗1 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離學案 浙科版選修1

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1、 第一部分 微生物的利用 實驗1 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離 一、大腸桿菌 1.大腸桿菌屬于革蘭氏________性菌,為________型的腸道桿菌。 2.結構:屬于________生物。 3.用途:是在________技術中被廣泛采用的工具。 4.與人類的關系:它生活在人類的________中,一般對人________(“有”還是“無”)害。有一些菌株對人體能產(chǎn)生危害,因為它們可以侵蝕________并產(chǎn)生________。任何大腸桿菌如果進入人的________系統(tǒng),都會對人體產(chǎn)生危害。 答案:1.陰 兼性厭氧 2.原核 3.基因工程 4.腸道 無 腸黏膜 毒素 泌尿 二

2、、細菌的培養(yǎng)和分離 1.細菌的培養(yǎng): (1)細菌的繁殖:細菌以________的方式繁殖,分裂速度很快,約________分裂一次。 (2)培養(yǎng)細菌的方法:培養(yǎng)細菌,需要將________________________________________________________________________ 轉移到________中,一般用________來轉移帶菌的培養(yǎng)物。 (3)用不同培養(yǎng)基培養(yǎng)細菌的差別: 接種后,培養(yǎng)細菌的培養(yǎng)基類型 接種方法 接種后培養(yǎng)的時間(單位:小時) 培養(yǎng)結果 液體培養(yǎng)基 接種環(huán)直接接種 培養(yǎng)8 h后 每毫升培養(yǎng)基中有_

3、_______個細菌 固體培養(yǎng)基 用接種環(huán)在培養(yǎng)基上用________________________________________________________________________的方式接種(該法還可以用于______) 培養(yǎng)10~20 h后 一個細菌細胞會繁殖成許多個細菌細胞,這些細胞________________________________________________________________________________,形成____________________________________________________________

4、 2.細菌的分離: (1)分離的方法與特點:分離細菌有________和________2種。前者方法簡單,后者操作復雜,但是______________________________________________________________更易分開。 (2)本實驗進行大腸桿菌分離,是用________法,就是在________培養(yǎng)基上進行細菌的________。 答案:1.(1)分裂 20 min (2)已有細菌的培養(yǎng)物 新的培養(yǎng)基 接種環(huán) (3)幾億 劃線 分離細菌 緊緊聚集在一起 菌落 2.(1)劃線分離法 涂布分離法 單菌落 (2)劃線分離 固體平面 劃線培養(yǎng)

5、 三、滅菌操作 1.滅菌操作的原因:為了獲得________的培養(yǎng)物,其關鍵是防止外來________的入侵污染。因此,在培養(yǎng)微生物時必須進行________操作。 2.無菌操作的條件: (1)首要條件是________必須是無菌的; (2)________必須是無菌的; (3)________的過程必須是無菌的等。 答案:1.純凈 雜菌 無菌 2.(1)各種器皿 (2)各種培養(yǎng)基 (3)菌轉移操作 四、大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實驗 1.實驗目的: (1)進行大腸桿菌的________,利用________培養(yǎng)基進行細菌培養(yǎng)的操作; (2)進行大腸桿菌的________

6、,用________培養(yǎng)基進行細菌的________培養(yǎng); (3)說明大腸桿菌培養(yǎng)的條件和操作要求的原理。 2.實驗步驟 (1)滅菌:用________在________壓力下對LB液體培養(yǎng)基、LB固體培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌________min。 (2)自________向________中轉移并分裝固體培養(yǎng)基: 待冷卻至______左右,將三角錐形瓶中的______培養(yǎng)基,在______上分裝至幾個______中,制成______培養(yǎng)基。 (3)將大腸桿菌自________轉移到________中的________培養(yǎng)基中培養(yǎng): 將大腸桿菌用________在無菌操作下接種至

7、三角錐形瓶中的________培養(yǎng)基中,在________搖床振蕩培養(yǎng)________,完成大腸桿菌的培養(yǎng)。 (4)將菌液在________培養(yǎng)基上進行________分離: 從前一步培養(yǎng)得到的菌液中獲取菌種,用________以__________法接種至第二步所制得的__________培養(yǎng)基中,在________℃恒溫箱中培養(yǎng)________h后觀察菌落。 (5)菌種保存: 在無菌操作下將________用________取出,再用________法接種在________上,________培養(yǎng)________后,________冰箱保存。 3.分離實驗的結果及相應結論: 觀

8、察中若看到在________的末端出現(xiàn)________,則表明菌已被分離了。 4.大腸桿菌分離的用途:________的通用方法,也是用于________的最簡便方法之一。 答案:1.(1)擴增 液體 (2)分離 固體平面 劃線 2.(1)高壓鍋 1 kg 15 (2)三角瓶 培養(yǎng)皿 60 ℃ 固體 超凈臺 培養(yǎng)皿 固體平面 (3)斜面 三角瓶 液體 接種環(huán) 液體 37 ℃ 12 h (4)固體平面 劃線 接種環(huán) 劃線 固體平面 37 12~24 (5)單菌落 接種環(huán) 劃線 斜面 37 ℃ 24 h 4 ℃ 3.劃線 不連續(xù)的單個菌落 4.消除污染雜菌 篩選高表達量菌株 3

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