《2019-2020學年高中生物 第一部分 微生物的利用 實驗2 分離以尿素為氮源的微生物知能演練輕巧奪冠 浙科版選修1》由會員分享，可在線閱讀，更多相關《2019-2020學年高中生物 第一部分 微生物的利用 實驗2 分離以尿素為氮源的微生物知能演練輕巧奪冠 浙科版選修1（10頁珍藏版）》請在裝配圖網上搜索。

1、實驗2 分離以尿素為氮源的微生物 一、選擇題 土壤中有些微生物能利用尿素是因為(　　) A．其體內含有脲酶 B．其體內含有氨(NH3)酶 C．它能將CO2合成為有機物 D．它們不需要氮源 解析：選A。能利用尿素的微生物就是因為體內含有脲酶，可降解尿素為其生長繁殖提供氮源。 從土壤中分離以尿素為氮源的微生物時，所用的LB培養(yǎng)基由以下哪一組成分構成(　　) A．蛋白胨、NaCl、水、酵母提取物、瓊脂 B．蛋白胨、NaCl、水、瓊脂糖 C．蛋白胨、NaCl、水、酵母提取物、瓊脂糖 D．葡萄糖、NaCl、水、酵母提取物、瓊脂 解析：選C。LB培養(yǎng)基必須含五大營養(yǎng)元素：碳源

2、、氮源、水、無機鹽、生長因子。由于是固體培養(yǎng)基還必須有凝固劑，為與尿素培養(yǎng)基作對比，所用凝固劑不能帶來氮源干擾，因此只能選擇相對更為純凈的瓊脂糖了。 用10－4稀釋度的細菌懸液分別涂布于LB、尿素培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后的結果，以下敘述正確的是(　　) A．LB培養(yǎng)基上未出現(xiàn)任何菌落 B．尿素培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數量和種類都多于LB培養(yǎng)基上的 C．尿素培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數量和種類都少于LB培養(yǎng)基上的 D．尿素培養(yǎng)基上是不可能出現(xiàn)菌落的 解析：選C。LB培養(yǎng)基為完全培養(yǎng)基，會出現(xiàn)大量菌落。尿素培養(yǎng)基上只有能以尿素做氮源的微生物能存活，因此其上的菌落數量和種類都將會減少。尿素培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落就

3、是能利用尿素的那些微生物菌落。 在做分離分解尿素的細菌實驗時，A同學從對應稀釋倍數為106的培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落。A同學的結果產生原因可能有(　　) ①由于土樣不同?、谟捎谂囵B(yǎng)基污染?、塾捎诓僮魇д`　④沒有設置對照 A．①②③　　　　　 B．②③④ C．①③④ D．①②④ 解析：選A。該同學可能取的土樣不同，可取其他同學的土樣進行培養(yǎng)，同時將未接種的培養(yǎng)基同時培養(yǎng)，如果結果不是大約50個菌落，可能是培養(yǎng)基污染或操作有誤；如果結果和其他同學數據相同，且未接種的培養(yǎng)基沒有菌落生成，說明是土樣不同。 能合成脲酶的微生物所需的碳源和氮源分別是(　

4、　) A．二氧化碳和氮氣 B．葡萄糖和氨 C．二氧化碳和尿素 D．葡萄糖和尿素 解析：選D。能合成脲酶的微生物主要是分解尿素的細菌，其碳源為葡萄糖，氮源為尿素。 某同學在稀釋倍數為106的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數的平均值為234，那么每克樣品中的菌落數是(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.1 mL)(　　) A．2.34×108 B．2.34×109 C．234 D．23.4 解析：選B。每克樣品中的菌落數＝(C÷V)×M＝(234÷0.1)×106＝2.34×109。 可以鑒定出分解尿素的細菌的方法是(　　) A．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑 B．以尿素為唯一氮

5、源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑 C．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹Ⅲ試劑 D．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑 解析：選A。酚紅指示劑是靈敏性高的堿性指示劑，分解尿素的細菌合成的脲酶將尿素分解成氨，使pH升高，使酚紅指示劑變紅。 進行系列稀釋時，按怎樣的順序進行(　　) A．稀釋倍數遞增 B．稀釋倍數遞減 C．不論稀釋度大小 D．A、B兩者都可 解析：選A。將菌液進行系列梯度稀釋，在稀釋倍數足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。 有關倒平板的操作錯誤的是(　　) A．將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上 B．使打開的錐形

6、瓶瓶口迅速通過火焰 C．將培養(yǎng)皿打開，培養(yǎng)皿蓋倒放在桌子上 D．等待平板冷卻凝固后需要倒過來放置 解析：選C。在倒平板時，左手將皿蓋打開一條縫隙，不能將培養(yǎng)皿完全打開，以免雜菌污染。 將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基都放入37 ℃恒溫箱的目的是(　　) A．對比觀察培養(yǎng)基有沒有被微生物利用 B．對比分析培養(yǎng)基上是否生有雜菌 C．沒必要放入未接種的培養(yǎng)基 D．為了下次接種時再使用 解析：選B。將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基都放入37 ℃恒溫箱的目的是檢測培養(yǎng)基是否被雜菌污染，即制備是否合格。 如圖為“土壤中分解尿素的細菌的分離和計數”實驗中樣品稀釋示意圖。據圖分析正

7、確的是(　　) A．3號試管的稀釋倍數為103倍 B．4號試管中稀釋液進行平板培養(yǎng)得到的菌落平均數恰好為5號試管的10倍 C．5號試管的結果表明每克土壤中的菌株數為1.7×109個 D．該實驗方法統(tǒng)計得到的結果往往會比實際活菌數目要高 答案：C 統(tǒng)計菌落數目的方法是(　　) ①涂布平板法?、谥亓糠ā、壑苯佑嫈捣ā、鼙葷岱ā、萆碇笜朔ā、弈み^濾法 A．①②③⑥ B．③④⑤⑥ C．②③④⑥ D．①③④⑥ 解析：選D。微生物計數法主要有顯微鏡直接計數法、平板菌落計數法、光電比濁法、最大可能數(MPN)法、膜過濾法等。 分離以尿素為氮源的細菌和分離大腸桿菌都使用了LB培養(yǎng)基

8、，其成分(　　) A．前者含瓊脂，后者不含瓊脂和瓊脂糖 B．兩者都含有瓊脂 C．前者含有瓊脂糖，后者不含瓊脂糖但含瓊脂 D．兩者都不含瓊脂和瓊脂糖 解析：選C。瓊脂和瓊脂糖都起凝固劑的作用，用于制備固體培養(yǎng)基。但瓊脂為混合物，含少量含氮化合物，瓊脂加以純化，去除含氮化合物就成為瓊脂糖。分離大腸桿菌和含脲酶的細菌用的都是固體培養(yǎng)基，因此都必須含有凝固劑：瓊脂或瓊脂糖。但是，由于瓊脂為混合物，其中含一定量的含氮化合物，因此不能用于分離以尿素為氮源的細菌。瓊脂糖為瓊脂的純化物，不含含氮化合物，可用于分離以尿素為氮源的細菌。 下列說法不正確的是(　　) A．科學家從70～80 ℃熱泉中分

9、離得到耐高溫的TaqDNA聚合酶 B．統(tǒng)計某一稀釋度的5個平板的菌落數依次為M1、M2、M3、M4、M5，以M3作為該樣品菌落數的估計值 C．設置對照實驗的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結果的影響，提高實驗結果的可信度 D．同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數量最大，種類最多 解析：選B。統(tǒng)計菌落數應注意選擇菌落數在30～300的平板進行計數，且至少涂布3個平板作為重復組，重復組的結果不能相差太多，然后取平均值進行計算。 通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌；在培養(yǎng)基中加入

10、10%的酚類可以抑制細菌和霉菌。利用上述方法不能從混雜的微生物群體中分離出(　　) A．大腸桿菌 B．霉菌 C．放線菌 D．固氮細菌 解析：選A。缺乏氮源的培養(yǎng)基可以選擇出固氮細菌；在培養(yǎng)基中加入青霉素，可以選擇出霉菌；在培養(yǎng)基中加入10%的酚類可以選擇出放線菌。 在農田土壤的表層自生固氮菌較多。將用表層土制成的稀泥漿接種到特制的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可將自生固氮菌與其他細菌分開，對培養(yǎng)基的要求是(　　) ①加抗生素?、诓患涌股亍、奂拥亍、懿患拥亍、菁悠咸烟恰、薏患悠咸烟恰、?7 ℃恒溫箱中培養(yǎng)?、?8～30 ℃溫度下培養(yǎng) A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．②④⑤⑧ D．①④⑥⑦

11、解析：選C。自生固氮菌生長繁殖的適宜溫度是28～30 ℃，能夠將無機氮源合成有機氮，不需要加氮源。細菌對抗生素敏感。固氮菌是異養(yǎng)生物，需要加葡萄糖。 能夠測定樣品活菌數的方法是(　　) A．稀釋涂布平板法 B．直接計數法 C．重量法 D．比濁法 解析：選A。利用稀釋涂布平板法能夠在不影響生活的情況下將細菌個體從固體培養(yǎng)基上分離出來，并可以繁殖形成菌落，可根據菌落數測定出樣品活菌數。 在做土壤中分解尿素的細菌的分離與計數實驗時，甲組實驗用氮源只含尿素的培養(yǎng)基，乙組實驗用氮源除尿素外還含硝酸鹽的培養(yǎng)基，其他成分都相同，在相同條件下操作，培養(yǎng)與觀察，則乙組實驗屬于(　　) A．空白對照

12、B．標準對照 C．相互對照 D．條件對照 解析：選D。乙組和甲組實驗僅是培養(yǎng)條件不同，所以為條件對照。 下列是關于“檢測土壤中細菌總數”實驗操作的敘述，其中錯誤的是(　　) A．用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經高溫、高壓滅菌后倒平板 B．取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL，分別涂布于各組平板上 C．將實驗組和對照組平板倒置，37 ℃恒溫培養(yǎng)24～48 小時 D．確定對照組無菌后，選擇菌落數在300以上的實驗組平板進行計數 解析：選D。選擇菌落數在30～300的一組平板為代表進行計數，所以D不對。 用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數，在對應稀

13、釋倍數為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結果，正確的是(　　) A．涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數是230 B．涂布了兩個平板，統(tǒng)計的菌落數是215和260，取平均值238 C．涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數分別是21、240和250，取平均值163 D．涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數分別是210、240和250，取平均值233 解析：選D。在設計實驗時，一定要涂布至少3個平板，作為重復組，才能增強實驗的說服力與準確性，所以A、B不正確。C項雖涂布了3個平板，但是，其中1個平板的計數結果與另兩個相差太遠，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，因此，不能簡單地將3個平板的計數值用來求平均值。

14、二、非選擇題 某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉栴}： (1)有些細菌能分解尿素，有些細菌則不能，原因是前者能產生__________________。能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產物CO2作為碳源，原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 但可用葡萄糖作為碳源，進入細菌體內的葡萄糖的主要作用是

15、________________________________________________________________________ (答出兩點即可)。 (2)為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養(yǎng)基時，應選擇________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作為氮源，不選擇其他兩組的原因是________________________________________________________________________ _______________________________________________________________

16、_________。 (3)用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有________________________________________________________________________ (答出兩點即可)。 解析：(1)土壤中的某些細菌之所以能夠分解尿素，是因為它們能產生脲酶。尿素分解菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來合成有機物，必須利用現(xiàn)成的有機物(如葡萄糖)作為碳源；葡萄糖通過呼吸作用被分解時，能為細胞生命活動提供能量，同時，葡萄糖還可以轉化成脂肪、某些氨基酸等物質，所以進入細菌體內的葡萄糖能為其他有機物的合成提供原料。(2)選擇培

17、養(yǎng)基是只允許特定種類的微生物(目的微生物)生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。本實驗的目的菌是可分解尿素的細菌，因此，配制的培養(yǎng)基應只允許尿素分解菌生長，NH4NO3可以作為所有細菌的氮源，培養(yǎng)基中如含有NH4NO3，將不能起到篩選作用。(3)KH2PO4和Na2HPO4能為細菌生長提供鉀鹽、鈉鹽和磷酸鹽，而H2PO/HPO可以使培養(yǎng)基中pH保持相對穩(wěn)定。 答案：(1)脲酶　分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來合成有機物　為細胞生命活動提供能量，為其他有機物的合成提供原料 (2)尿素　其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3，不

18、能起到篩選作用 (3)為細菌生長提供無機營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定 某化工廠的污水池中，含有一種有害的、難于降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選到能高效降解化合物A的細菌(目的菌)。實驗的主要步驟如圖所示。請分析回答問題： (1)培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選________，這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的________，實驗需要振蕩培養(yǎng)，由此推測“目的菌”的代謝類型是________。 (3)培養(yǎng)若干天后，應選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量_______

19、_的培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使“目的菌”的數量________。 (4)轉為固體培養(yǎng)時，常采用________的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。 (5)若研究“目的菌”的生長規(guī)律，將單個菌落進行液體培養(yǎng)，可采用________的方法進行計數，以時間為橫坐標，以________為縱坐標，繪制生長曲線。 (6)實驗結束后，使用過的培養(yǎng)基應該進行________處理后，才能倒掉。 解析：加入化合物A的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)目的菌。由于化合物A為有機物，且要振蕩，說明目的菌為異養(yǎng)需氧型?！澳康木鄙L繁殖過程中要不斷消耗營養(yǎng)物質，培養(yǎng)若干天后，應選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量減少的

20、培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使“目的菌”的數量增加。轉為固體培養(yǎng)時，常采用劃線的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。若研究“目的菌”的生長規(guī)律，將單個菌落進行液體培養(yǎng)，可采用定期取樣的方法進行計數，繪制生長曲線應以時間為橫坐標，以細菌數目的對數為縱坐標。實驗結束后要對培養(yǎng)基進行滅菌，以免污染環(huán)境。 答案：(1)目的菌　選擇 (2)化合物A　異養(yǎng)需氧型 (3)減少　增加 (4)劃線 (5)定期取樣　細菌數目的對數 (6)滅菌 土壤中的微生物種類和數量繁多，同學們試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設計了以下實驗，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如表所示

21、，實驗步驟如圖所示。請分析回答： KH2PO4 1.4 g Na2HPO4 2.1 g MgSO4·7H2O 0.2 g 葡萄糖 10 g 尿素 1 g 瓊脂糖 15 g 將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL (1)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選________，這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的________和________，實驗需要振蕩培養(yǎng)，原因是_____________________________________________________。 (3)圖中將細菌轉到固

22、體培養(yǎng)基上時，常采用________的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。 (4)下列材料或用具：①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿，②玻棒、試管、錐形瓶和吸管，③實驗操作者的雙手。其中需要滅菌的是：________；需要消毒的是：________。(填序號) 解析：培養(yǎng)基中添加尿素為氮源，目的是篩選分解尿素的微生物，這種培養(yǎng)基從功能上來說，屬于選擇培養(yǎng)基；該培養(yǎng)基的氮源為尿素，碳源為葡萄糖。培養(yǎng)過程中震蕩的目的是增加培養(yǎng)液中的氧氣，說明尿素分解菌為需氧型微生物；將菌液接種到固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，一般要采用稀釋涂布平板法或平板劃線法；培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿要進行高壓蒸汽滅菌，玻棒、試管、錐形瓶和吸管

23、要用干熱滅菌，實驗操作者的雙手用酒精消毒。 答案：(1)目的菌　選擇 (2)尿素　葡萄糖　為目的菌提供氧氣 (3)涂布平板(劃線) (4)①②?、? 幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內采集樣本并制成菌液后，進行分離培養(yǎng)。實驗基本步驟如下： ―→―→―→―→ 請回答下列問題： (1)在配制培養(yǎng)基時，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因為Hp含有________，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周圍會出現(xiàn)________色環(huán)帶。 (2)下列對尿素溶液進行滅菌的最適方法是________滅菌。 A．高壓蒸汽 B．紫外燈照射 C．70%酒精浸泡

24、 D．過濾 (3)步驟X表示________。在無菌條件下操作時，先將菌液稀釋，然后將菌液________到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得________菌落。 (4)在培養(yǎng)時，需將培養(yǎng)皿倒置并放在________________中。若不倒置培養(yǎng)，將導致________________。 (5)臨床上用14C呼氣實驗檢測人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將14C標記的________分解為NH3和14CO2。 解析：(1)幽門螺桿菌(Hp)含有脲酶，能以尿素為氮源，在加入尿素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)Hp，由于尿素經脲酶的降解可產生堿性的NH3，NH3能使培養(yǎng)基中的酚紅指示

25、劑變成紅色，故菌落周圍出現(xiàn)紅色環(huán)帶。(2)由于尿素加熱會分解，對尿素溶液進行滅菌最好用G6玻璃砂漏斗過濾。(3)微生物的分離和培養(yǎng)步驟是：配制培養(yǎng)基―→滅菌、倒平板―→接種―→培養(yǎng)。為獲得單菌落，接種操作前應先將菌液稀釋，然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上即可。(4)微生物培養(yǎng)時需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中，若不倒置培養(yǎng)，則無法形成單菌落。(5)幽門螺桿菌能將14C標記的尿素分解為NH3和14CO2，故臨床上常用14C呼氣實驗檢測人體內幽門螺桿菌的存在。 答案：(1)脲酶　紅 (2)D (3)接種　涂布　單 (4)恒溫培養(yǎng)箱　無法形成單菌落 (5)尿素 臨床使用抗生素前，有時需要做細

26、菌耐藥實驗，實驗時，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實驗步驟操作，以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性。 回答下列問題： (1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用________法或________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經過選擇培養(yǎng)，鑒別等步驟獲得。 (2)取該單菌落適當稀釋，用________法接種于固體培養(yǎng)基表面，在37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，使其均勻生長，布滿平板。 (3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A________；

27、含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素B________；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明______________________ ____________________；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的________。 (4)據上述實驗結果，為達到抗菌目的，最好應選用抗生素________。 解析：(1)將細菌接種到固體培養(yǎng)基上的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)由(1)獲取的致病菌單菌落，經過適當稀釋，用涂布法接種至固體培養(yǎng)基表面進一步培養(yǎng)。(3)在檢測致病菌對抗生素的敏感性實驗中，若含A種抗生素的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明周圍的致病菌死亡，該致病菌對A種抗生素敏感；若含B種抗生素的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈說明致病菌對B種抗生素不敏感；若含C種抗生素的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明該致病菌對C的敏感性比對A的弱；若含D種抗生素的濾紙片周圍透明圈也比含A的小，說明A、B、C、D四種抗生素的殺菌效果最顯著的為A。透明圈中出現(xiàn)的菌落為耐藥菌。(4)根據(3)中分析，為達到抗菌目的最好選用抗生素A。 答案：(1)平板劃線　稀釋涂布(或涂布)平板 (2)涂布 (3)敏感　不敏感　該致病菌對C的敏感性比對A的弱　耐藥菌 (4)A 10