《2020屆高考生物一輪復(fù)習(xí) 高考真題分類題庫(kù) 2015年知識(shí)點(diǎn)19 生物技術(shù)實(shí)踐（含解析）》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《2020屆高考生物一輪復(fù)習(xí) 高考真題分類題庫(kù) 2015年知識(shí)點(diǎn)19 生物技術(shù)實(shí)踐（含解析）（11頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、知識(shí)點(diǎn)19 生物技術(shù)實(shí)踐 1.(2015·廣東高考·T3)關(guān)于DNA的實(shí)驗(yàn),敘述正確的是(　　) A.用兔的成熟紅細(xì)胞可提取DNA B.PCR的每個(gè)循環(huán)一般依次經(jīng)過(guò)變性—延伸—復(fù)性三步 C.DNA溶液與二苯胺試劑混合,沸水浴后生成藍(lán)色產(chǎn)物 D.用甲基綠對(duì)人的口腔上皮細(xì)胞染色,細(xì)胞核呈綠色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色 【解題指南】(1)題干關(guān)鍵詞:提取DNA、PCR、二苯胺試劑、甲基綠。 (2)關(guān)鍵知識(shí):DNA的提取與檢測(cè)方法、PCR反應(yīng)過(guò)程、甲基綠的作用。 【解析】選C。本題主要考查了實(shí)驗(yàn)的原理、選材以及試劑的使用。兔為哺乳動(dòng)物,其成熟的紅細(xì)胞中無(wú)細(xì)胞核,不能從中提取DNA,故A項(xiàng)錯(cuò)誤;PC

2、R每次循環(huán)都可以分為變性—復(fù)性—延伸三步,故B項(xiàng)錯(cuò)誤;在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺變成藍(lán)色,故C項(xiàng)正確;甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色,不論是細(xì)胞核還是細(xì)胞質(zhì),只要含有DNA,都會(huì)呈綠色,故D項(xiàng)錯(cuò)誤。 2.(2015·江蘇高考·T11)下列關(guān)于固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述,錯(cuò)誤的是 (　　) A.固定化酶的主要目的是實(shí)現(xiàn)酶的重復(fù)利用 B.溶解氧交換受阻是固定化酶應(yīng)用的重要限制因素 C.固定化細(xì)胞用于生產(chǎn)能分泌到細(xì)胞外的產(chǎn)物 D.凝膠與被包埋細(xì)胞之間不是通過(guò)共價(jià)鍵結(jié)合 【解析】選B。本題主要考查固定化酶和固定化細(xì)胞。固定化酶制作的目的是能夠順利從發(fā)酵產(chǎn)物中把酶分離出來(lái),并能夠使酶反復(fù)使用

3、,故A項(xiàng)正確;溶解氧交換受阻會(huì)影響細(xì)胞呼吸,是固定化細(xì)胞應(yīng)用的重要限制因素,故B項(xiàng)錯(cuò)誤;固定化細(xì)胞用于生產(chǎn)、獲得細(xì)胞的代謝產(chǎn)物,故C項(xiàng)正確;將細(xì)胞包埋在多孔載體內(nèi)部而制成固定化細(xì)胞,細(xì)胞并不與凝膠通過(guò)共價(jià)鍵結(jié)合,故D項(xiàng)正確。 3.(2015·江蘇高考·T17)關(guān)于“腐乳的制作”實(shí)驗(yàn),下列敘述錯(cuò)誤的是(　　) A.將腐乳坯堆積起來(lái)會(huì)導(dǎo)致堆內(nèi)溫度升高,影響毛霉生長(zhǎng) B.腐乳坯若被細(xì)菌污染,則腐乳坯表面會(huì)出現(xiàn)黏性物 C.勤向腐乳坯表面噴水,有利于毛霉菌絲的生長(zhǎng) D.裝壇階段加入料酒,可有效防止雜菌污染 【解析】選C。本題主要考查腐乳制作的過(guò)程和材料處理的方法及目的。將腐乳坯堆積起來(lái)會(huì)導(dǎo)致

4、微生物大量繁殖,堆內(nèi)溫度升高,影響毛霉生長(zhǎng),故A項(xiàng)正確;正常情況下毛霉等菌種,會(huì)使豆腐表面長(zhǎng)出一層菌絲,被細(xì)菌污染,腐乳坯表面會(huì)出現(xiàn)黏性物,故B項(xiàng)正確;適于做腐乳的豆腐含水量為70%左右,適于毛霉菌絲生長(zhǎng),再加水不利于腐乳成形,故C項(xiàng)錯(cuò)誤;裝壇時(shí)加入料酒,可抑制雜菌生長(zhǎng),故D項(xiàng)正確。 4.(2015·江蘇高考·T19)做“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí),下列敘述正確的是(　　) A.高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí),打開放(排)氣閥使壓力表指針回到零后,開啟鍋蓋 B.倒平板時(shí),應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊,以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上 C.為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落 D.用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中

5、菌落時(shí),應(yīng)標(biāo)記在皿底上 【解題指南】關(guān)鍵知識(shí):培養(yǎng)基的滅菌方法、倒平板的方法和接種的過(guò)程。 【解析】選D。本題主要考查微生物的分離與培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。高壓蒸汽滅菌加熱結(jié)束后,讓其自然冷卻后再慢慢打開排氣閥以排除余氣,然后才能開蓋取物,故A項(xiàng)錯(cuò)誤;倒平板時(shí)左手拿培養(yǎng)皿,右手拿錐形瓶,左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,倒入培養(yǎng)基后立即蓋上培養(yǎng)皿皿蓋,故B項(xiàng)錯(cuò)誤;灼燒接種環(huán)之后,要冷卻后才能伸入菌液,以免溫度太高殺死菌種,故C項(xiàng)錯(cuò)誤;皿底的標(biāo)記不會(huì)因?yàn)樯w子混淆而混淆,故D項(xiàng)正確。 5.(2015·四川高考·T3)下列是以酵母菌為材料進(jìn)行的實(shí)驗(yàn),有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是 (　　) A.探究酵母菌的呼吸方

6、式,可用溴麝香草酚藍(lán)檢測(cè)產(chǎn)生的CO2 B.用酵母菌發(fā)酵釀制果酒,選擇酸性重鉻酸鉀檢測(cè)產(chǎn)生的酒精 C.探究酵母菌種群數(shù)量變化,應(yīng)設(shè)空白對(duì)照排除無(wú)關(guān)變量干擾 D.用稀釋涂布平板法培養(yǎng)計(jì)數(shù),應(yīng)選擇有30～300菌落數(shù)的平板 【解題指南】(1)題干關(guān)鍵詞:“酵母菌”“錯(cuò)誤”。 (2)關(guān)鍵知識(shí):酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)物的鑒定原理、探究酵母菌種群數(shù)量變化的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原則及計(jì)數(shù)方法。 【解析】選C。本題考查酵母菌細(xì)胞呼吸方式探究及種群數(shù)量變化研究。A項(xiàng),酵母菌呼吸作用產(chǎn)生的CO2可使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃,故正確。B項(xiàng),橙色的酸性重鉻酸鉀與酒精發(fā)生化學(xué)反應(yīng),變成灰綠色,故正確。C項(xiàng),探究酵母菌

7、種群數(shù)量變化,不同時(shí)間的取樣即為對(duì)照,不必設(shè)空白對(duì)照,故錯(cuò)誤。D項(xiàng),菌落數(shù)若太少的話不準(zhǔn)確,太多的話不好計(jì)數(shù),一般選擇有30～300菌落數(shù)的平板計(jì)數(shù),故正確。 6.(2015·江蘇高考·T24)下圖為蘋果酒的發(fā)酵裝置示意圖,下列敘述錯(cuò)誤的是(多選)(　　) A.發(fā)酵過(guò)程中酒精的產(chǎn)生速率越來(lái)越快 B.集氣管中的氣體是酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生的CO2 C.發(fā)酵過(guò)程中酵母菌種群呈“J”型增長(zhǎng) D.若發(fā)酵液表面出現(xiàn)菌膜,最可能原因是發(fā)酵瓶漏氣 【解析】選A、B、C。本題主要考查果酒的制作原理、步驟和注意事項(xiàng)。發(fā)酵后期,底物減少、酒精濃度增加等因素,都會(huì)造成酒精生產(chǎn)速率減慢,故A項(xiàng)錯(cuò)誤;發(fā)酵初

8、期,由于發(fā)酵瓶中有氧氣,酵母菌能進(jìn)行有氧呼吸產(chǎn)生CO2,故B項(xiàng)錯(cuò)誤;酵母菌種群數(shù)量先增加后減少,故C項(xiàng)錯(cuò)誤;發(fā)酵瓶漏氣,會(huì)使醋酸菌等大量繁殖,從而形成表面可以觀察到的菌膜,故D項(xiàng)正確。 7.(2015·山東高考·T35)乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖,具有重要應(yīng)用價(jià)值。乳糖酶的制備及固定化步驟如下: (1)篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L(fēng)時(shí),宜用　　　　　　作為培養(yǎng)基中的唯一碳源。培養(yǎng)基中瓊脂的作用是　　　　　　　。從功能上講,這種培養(yǎng)基屬于　　　　　　　。 (2)培養(yǎng)微生物L(fēng)前,宜采用　　　　　　　方法對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌。 (3)純化后的乳糖酶可用電泳法檢測(cè)其分子量(相對(duì)分子質(zhì)量)大

9、小。在相同條件下,帶電荷相同的蛋白質(zhì)電泳速度越快,說(shuō)明其分子量(相對(duì)分子質(zhì)量)越　　　　　　。 (4)乳糖酶宜采用化學(xué)結(jié)合法(共價(jià)鍵結(jié)合法)進(jìn)行固定化,可通過(guò)檢測(cè)固定化乳糖酶的　　　　　　　確定其應(yīng)用價(jià)值。除化學(xué)結(jié)合法外,酶的固定化方法還包括　　　　　　　　、　　　　　　　　、離子吸附法及交聯(lián)法等。 【解析】(1)已知乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖,篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L(fēng)時(shí),宜用乳糖作為培養(yǎng)基中的唯一碳源,培養(yǎng)基中瓊脂的作用是凝固劑,從功能上講,這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。 (2)為了避免雜菌污染,在培養(yǎng)微生物前,對(duì)接種環(huán)應(yīng)采用灼燒滅菌。 (3)用電泳法純化乳糖酶時(shí),若在相同條件

10、下分離帶電荷相同的蛋白質(zhì),則其分子量(相對(duì)分子質(zhì)量)越小,電泳速度越快。 (4)固定化酶的應(yīng)用價(jià)值與酶的活性(或活力)有關(guān),因此用化學(xué)結(jié)合法固定化乳糖酶時(shí),可通過(guò)檢測(cè)固定化乳糖酶的活性(或活力)來(lái)確定其應(yīng)用價(jià)值。固定化酶的方法包括化學(xué)結(jié)合法、包埋法、物理吸附法、離子吸附法及交聯(lián)法等。 答案:(1)乳糖　凝固劑　選擇培養(yǎng)基 (2)灼燒　(3)小 (4)(酶)活性[或(酶)活力] 包埋法　物理吸附法(注:后兩空可顛倒) 8.(2015·全國(guó)卷Ⅰ·T39)已知微生物A可以產(chǎn)生油脂,微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?；卮鹩嘘P(guān)問(wèn)題: (1)顯微觀察時(shí),微生物A菌

11、體中的油脂通?？捎谩　?　　　染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā),可選用　　　　　　(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。 (2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落,可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣,并應(yīng)選用以　　　　　　為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 (3)若要測(cè)定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù),可在顯微鏡下用　　　　　　　　直接計(jì)數(shù);若要測(cè)定其活菌數(shù)量,可選用　　　　　　　　法進(jìn)行計(jì)數(shù)。 (4)為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度,某同學(xué)測(cè)得相同時(shí)間內(nèi),在 35℃、40℃、45℃溫度下降解10 g油脂所需酶量依次為4mg、1mg、6mg,則上述三個(gè)溫度中,　　

12、　　℃條件下該酶活力最小。為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度,應(yīng)圍繞　　　　℃設(shè)計(jì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)。 【解題指南】(1)題干關(guān)鍵詞:不易揮發(fā)、直接計(jì)數(shù)、活菌數(shù)量。 (2)關(guān)鍵知識(shí):提取油脂的方法、分解油脂的微生物的分離、測(cè)定微生物數(shù)量的方法和探究酶的最適溫度的方法。 【解析】(1)脂肪可被蘇丹Ⅲ(Ⅳ)染液染成橘黃色(紅色),題干中說(shuō)明微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā),則可以采用萃取法提取微生物A中的油脂。 (2)油脂為有機(jī)化合物,富含碳元素,故為了從自然界獲得能夠分解油脂的單菌落,應(yīng)以油脂為唯一碳源來(lái)配制培養(yǎng)基。在該培養(yǎng)基上,能分解油脂的微生物可以正常生長(zhǎng),其他微生物不能正常生長(zhǎng)。 (3)可利用血細(xì)胞計(jì)

13、數(shù)板計(jì)數(shù)法測(cè)定菌液中的微生物數(shù)量,活菌和死亡的細(xì)菌都會(huì)被計(jì)數(shù),所以測(cè)定培養(yǎng)液中的活菌數(shù)應(yīng)采用稀釋涂布平板法。 (4)在45℃下,降解10 g油脂所需酶量最多,則該溫度下酶活性最低;由題干信息可知,40℃下降解10 g油脂所需的酶量最少。應(yīng)圍繞40℃設(shè)置不同溫度梯度來(lái)探究酶的最適溫度。 答案:(1)蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)　萃取法 (2)油脂(其他合理答案也可) (3)血細(xì)胞計(jì)數(shù)板　稀釋涂布平板(其他合理答案也可) (4)45　40 9.(2015·全國(guó)卷Ⅱ·T39)回答與胡蘿卜素有關(guān)的問(wèn)題: (1)胡蘿卜含有的胡蘿卜素中,最主要的是　　 　　(填“α-胡蘿卜素”“β-胡蘿卜素”或“

14、γ-胡蘿卜素”),該胡蘿卜素在人體內(nèi)可以轉(zhuǎn)變成兩分子　　　　,后者缺乏會(huì)引起人在弱光下視物不清的病癥,該疾病稱為　　　　　　。胡蘿卜素是　　　　　　(填“揮發(fā)性”或“非揮發(fā)性”)物質(zhì)。 (2)工業(yè)生產(chǎn)上,用養(yǎng)殖的巖藻作為原料提取胡蘿卜素時(shí),　　　　　　　　　　 (填“需要”或“不需要”)將新鮮的巖藻干燥。 (3)現(xiàn)有乙醇和乙酸乙酯兩種溶劑,應(yīng)選用其中的　　　　　　作為胡蘿卜素的萃取劑,不選用另外一種的理由是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 【解題指南】(1)題干關(guān)鍵信息:“弱光下視物不清”“萃取劑”。 (

15、2)關(guān)鍵知識(shí):胡蘿卜素不溶于水;一分子β-胡蘿卜素可被氧化成兩分子維生素A;含水量影響胡蘿卜素的萃取效果。 【解析】本題考查胡蘿卜素的提取。 (1)根據(jù)雙鍵的數(shù)目可以將胡蘿卜素劃分α、β、γ三類,β-胡蘿卜素是其中最主要的組成成分。一分子β-胡蘿卜素在人或動(dòng)物的小腸、肝臟等器官被氧化成兩分子維生素A。胡蘿卜素可以用來(lái)治療因缺乏維生素A而引起的各種疾病,如夜盲癥等。胡蘿卜素的化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定,不溶于水,是非揮發(fā)性物質(zhì)。 (2)萃取的效果受到含水量、溫度等條件的影響,要保證好的萃取效果,需要將巖藻進(jìn)行粉碎和干燥。 (3)萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑應(yīng)不與水混溶,而乙醇為水溶性有機(jī)溶劑,乙酸乙酯為

16、水不溶性有機(jī)溶劑,故選乙酸乙酯。 答案：(1)β-胡蘿卜素　維生素A　夜盲癥　非揮發(fā)性 (2)需要　(3)乙酸乙酯　萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑應(yīng)不與水混溶,而乙醇為水溶性有機(jī)溶劑 10.(2015·廣東高考·T29)泡菜是我國(guó)的傳統(tǒng)食品之一,但制作過(guò)程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽對(duì)人體健康有潛在危害,某興趣小組準(zhǔn)備參加“科技創(chuàng)新大賽”,查閱資料得到下圖。 (1)制作泡菜時(shí),泡菜壇一般用水密封,目的是　　　　。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物有　　　　　　。 (2)據(jù)題圖,與第3天相比,第8天后的泡菜更適于食用,因?yàn)楹笳摺　　　　　?pH值呈下降趨勢(shì),原因是　　　　　　。 (3)該小組得到一株“優(yōu)選”乳

17、酸菌(亞硝酸鹽還原酶活力比普通乳酸菌高5倍),擬參照資料的實(shí)驗(yàn)方案和食鹽濃度(4%～10%),探究與普通乳酸菌相比用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜過(guò)程中亞硝酸鹽含量的高低,并確定其最適條件,請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表,并推測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)論。 【解題指南】(1)圖示信息:pH隨乳酸菌數(shù)量的增加而降低,隨乳酸菌數(shù)量的減少下降速率減慢;亞硝酸鹽的含量超過(guò)一定時(shí)間會(huì)降低。 (2)關(guān)鍵知識(shí):乳酸發(fā)酵原理、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與分析。 【解析】本題考查泡菜制作原理及實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法。 (1)乳酸菌是嚴(yán)格厭氧微生物,制作泡菜時(shí)用水密封泡菜壇,其目的是為了保持無(wú)氧的環(huán)境。乳酸菌進(jìn)行乳酸發(fā)酵,其第一階段的物質(zhì)變化與有氧呼吸的第一階段

18、相同,均為葡萄糖分解產(chǎn)生丙酮酸、[H]、少量ATP。 (2)亞硝酸鹽對(duì)人體的危害比較大,泡菜制作后一段時(shí)間才能食用,從圖中曲線可看出第8天后亞硝酸鹽含量與之前相比含量較低。在此過(guò)程中乳酸菌進(jìn)行了乳酸發(fā)酵,產(chǎn)生了乳酸導(dǎo)致泡菜壇內(nèi)pH下降。 (3)設(shè)計(jì)的記錄表中要包含乳酸菌類型、食鹽濃度和發(fā)酵時(shí)間等自變量,因變量為亞硝酸鹽的含量。通過(guò)相互對(duì)照確定用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜過(guò)程中亞硝酸鹽含量的高低,并確定最適發(fā)酵條件。 答案:(1)隔絕空氣,創(chuàng)造無(wú)氧環(huán)境,有利于乳酸菌發(fā)酵 丙酮酸、[H]、ATP (2)亞硝酸鹽含量較低　乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生的乳酸增多 (3)兩種乳酸菌在泡菜腌制過(guò)程中亞硝酸鹽含

19、量變化表 推測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)論:與普通乳酸菌相比,“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜時(shí),相同條件下產(chǎn)生的亞硝酸鹽含量低。 11.(2015·江蘇高考·T31)人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動(dòng)物的胃,可用來(lái)發(fā)酵處理秸稈,提高秸稈的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。為了增強(qiáng)發(fā)酵效果,研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株,并對(duì)其降解纖維素能力進(jìn)行了研究。請(qǐng)回答下列問(wèn)題: (1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中,下列選項(xiàng)不需要的是　　　　　(填序號(hào))。 ①酒精燈　　②培養(yǎng)皿　?、埏@微鏡　　④無(wú)菌水 (2)在涂布平板時(shí),滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過(guò)多的原因是　　　　　　　　　　　　　　　。 (3)向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時(shí),若試管口粘附

20、有培養(yǎng)基,需要用酒精棉球擦凈的原因是　　　　　　。 (4)剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上,篩選到了幾株有透明降解圈的菌落(見上圖)。圖中降解圈大小與纖維素酶的　　　　　有關(guān)。圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是　　　　　(填圖中序號(hào))。 (5)研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和J4,在不同溫度和pH條件下進(jìn)行發(fā)酵,測(cè)得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見下圖,推測(cè)菌株　　　　　更適合用于人工瘤胃發(fā)酵,理由是　　　　 。 【解析】本題主要考查微生物的分離和培養(yǎng)。(

21、1)樣品稀釋和涂布平板的操作過(guò)程不需要顯微鏡。(2)涂布平板時(shí),若培養(yǎng)基表面的菌懸液過(guò)多會(huì)出現(xiàn)積液,造成菌體堆積,影響分離效果。(3)試管口粘附的培養(yǎng)基,需要用酒精棉球擦凈,避免培養(yǎng)基污染棉塞。(4)菌株產(chǎn)生的降解纖維素酶的量越多、活性越高,會(huì)使降解圈越大。降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是①,因其菌株菌落小,但降解圈大。(5)分析圖中曲線可知,J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高,而發(fā)酵過(guò)程會(huì)產(chǎn)熱和產(chǎn)酸,所以J4菌株更適合用于人工瘤胃發(fā)酵。 答案:(1)③　(2)培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液,導(dǎo)致菌體堆積,影響分離效果 (3)避免培養(yǎng)基污染棉塞　(4)量與活性?、? (5)J4　發(fā)酵過(guò)程會(huì)

22、產(chǎn)熱和產(chǎn)酸,J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高 12.(2015·浙江高考·T17)“生物技術(shù)實(shí)踐”模塊 某工廠為了生產(chǎn)耐高溫植酸酶飼料添加劑,開展了產(chǎn)該酶菌株的篩選、酶的固定化及其特性分析研究,其流程如下圖所示。 土樣中的菌種篩選 → 菌株鑒定 → 優(yōu)良菌株擴(kuò)大培養(yǎng) → 植酸酶提純 → 植酸酶固定化 → 植酸酶特性分析 請(qǐng)回答: (1)土壤懸液首先經(jīng)80℃處理15分鐘,其目的是篩選出　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (2)在無(wú)菌條件下,將經(jīng)過(guò)處理的土壤懸液進(jìn)行　　　,然后涂布于含有植酸鈉的固體培養(yǎng)基上。培養(yǎng)后觀察

23、到　　　　,其周圍出現(xiàn)透明水解圈,圈的直徑大小與　　　　強(qiáng)弱相關(guān)。 (3)篩選獲得的菌株經(jīng)鑒定后,將優(yōu)良菌株進(jìn)行液體擴(kuò)大培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)需要振蕩,其主要目的是　　　　　　。液體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基相比,不含有的成分是　　　　　　　。 (4)在合適條件下,將提純的植酸酶與海藻酸鈉混合后,滴加到一定濃度的鈣離子溶液中,使液滴形成凝膠固體小球。該過(guò)程是對(duì)酶進(jìn)行　　　　　。 A.吸附　　　B.包埋　　　C.裝柱　　　D.洗滌 (5)溫度與植酸酶相對(duì)酶活性的關(guān)系如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是　　　　。 A.測(cè)試溫度中,固定化與非固定化植酸酶的最適溫度分別為60℃和45℃ B.測(cè)試溫度范圍內(nèi),固定化

24、植酸酶的相對(duì)酶活性波動(dòng)低于非固定化植酸酶 C.固定化與非固定化植酸酶相比,相對(duì)酶活性在80%以上時(shí)的溫度范圍較寬 D.65℃時(shí)固定化與非固定化植酸酶的相對(duì)酶活性因蛋白質(zhì)變性而位于最低點(diǎn) 【解題指南】(1)關(guān)鍵詞:“菌株的篩選”“擴(kuò)大培養(yǎng)”“相對(duì)酶活性”。 (2)關(guān)鍵知識(shí):選擇培養(yǎng)的應(yīng)用、篩選耐高溫菌株的方法、擴(kuò)大培養(yǎng)方法、包埋法的應(yīng)用、溫度影響酶活性的特點(diǎn)。 【解析】本題考查細(xì)菌的分離與培養(yǎng)及酶的固定化。 (1)土壤懸液首先經(jīng)80℃處理15分鐘,殺死不耐高溫的菌株,篩選出耐高溫菌株。 (2)將處理過(guò)的土壤懸液在無(wú)菌條件下稀釋,降低細(xì)菌濃度,以便得到相互分離的單菌落。用含有植酸鈉的

25、培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌,植酸酶活性高的菌株分解植酸鈉多,其周圍出現(xiàn)較大的透明水解圈。(3)菌株的擴(kuò)大培養(yǎng)一般用液體培養(yǎng)基,它與固體培養(yǎng)基成分基本相同,但不含瓊脂。用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)優(yōu)良菌株時(shí),需要振蕩,以便使液體培養(yǎng)基底部有較高的含氧量,有利于細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖。(4)海藻酸鈉遇到鈣會(huì)形成凝膠固體小球,用此方法可將植酸酶包埋進(jìn)來(lái)。(5)從圖中可知,測(cè)試溫度中非固定化植酸酶的最適溫度為45℃,固定化植酸酶的最適溫度為60℃,故A項(xiàng)正確。固定化植酸酶的相對(duì)酶活性波動(dòng)范圍約為75%～110%,非固定化植酸酶的相對(duì)酶活性波動(dòng)范圍約為10%～100%,故B項(xiàng)正確。固定化植酸酶相對(duì)酶活性在80%以上的溫度范圍為30～65

26、℃,非固定化植酸酶相對(duì)酶活性在80%以上的溫度范圍為40～50℃,故C項(xiàng)正確。65℃時(shí),固定化植酸酶相對(duì)酶活性高于最低點(diǎn),故D項(xiàng)錯(cuò)誤。 答案:(1)耐高溫菌株 (2)稀釋　單菌落　植酸酶的活性 (3)供氧　瓊脂 (4)B　(5)D 13.(2015·海南高考·T30)【生物-選修1:生物技術(shù)實(shí)踐】 生產(chǎn)果汁時(shí),用果膠酶處理果泥可提高果汁的出汁率?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問(wèn)題: (1)某同學(xué)用三種不同的果膠酶進(jìn)行三組實(shí)驗(yàn),各組實(shí)驗(yàn)除酶的來(lái)源不同外,其他條件都相同,測(cè)定各組的出汁量,據(jù)此計(jì)算各組果膠酶活性的平均值并進(jìn)行比較。這一實(shí)驗(yàn)的目的是　　　　　　　　　　　　。 (2)現(xiàn)有一種新分離出

27、來(lái)的果膠酶,為探究其最適溫度,某同學(xué)設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn):取試管16支,分別加入等量的果泥、果膠酶、緩沖液,混勻,平均分為4組,分別置于0℃、5℃、10℃、40℃下保溫相同時(shí)間,然后,測(cè)定各試管中的出汁量并計(jì)算各組出汁量平均值。該實(shí)驗(yàn)溫度設(shè)置的不足之處有　　　　　　　　　　 和　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (3)某同學(xué)取5組試管(A～E)分別加入等量的同種果泥,在A、B、C、D 4個(gè)實(shí)驗(yàn)組的試管中分別加入等量的緩沖液和不同量的同種果膠酶,然后,補(bǔ)充蒸餾水使4組試管內(nèi)液體體積相同;E組加入蒸餾水使試管中液體體積與實(shí)驗(yàn)組相同。將5組試管置于適宜溫度下保溫一定時(shí)間

28、后,測(cè)定各組的出汁量。通過(guò)A～D組實(shí)驗(yàn)可比較不同實(shí)驗(yàn)組出汁量的差異。本實(shí)驗(yàn)中,若要檢測(cè)加入酶的量等于0而其他條件均與實(shí)驗(yàn)組相同時(shí)的出汁量,E組設(shè)計(jì)　　　　　(填“能”或“不能”)達(dá)到目的,其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 【解題指南】(1)題干關(guān)鍵信息:“果膠酶”“出汁量”“探究其最適溫度”。 (2)關(guān)鍵知識(shí):實(shí)驗(yàn)流程設(shè)計(jì)的分析與糾錯(cuò)。 【解析】本題以果膠酶為載體,考查擬定實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟以及設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)應(yīng)遵循的原則。 (1)根據(jù)題意,設(shè)計(jì)的各組實(shí)驗(yàn)中除酶的來(lái)源不同外,其他條件都相同,然后測(cè)定各組的出汁量,據(jù)此計(jì)算各組果膠酶的活性的平均值并進(jìn)行比較,可見實(shí)驗(yàn)的自變量是

29、果膠酶的來(lái)源,因變量是果膠酶的活性(可用出汁量的多少來(lái)反映),所以該實(shí)驗(yàn)的目的是比較不同來(lái)源果膠酶的活性。 (2)根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)可知,該實(shí)驗(yàn)是探究果膠酶的最適溫度,所以自變量是溫度,因變量是果膠酶的活性(用出汁量表示,出汁量越多則果膠酶活性越高)。該實(shí)驗(yàn)方案中,應(yīng)該在低溫、適溫、高溫范圍內(nèi)設(shè)置系列溫度梯度的實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行實(shí)驗(yàn),且梯度差要相等。 (3)根據(jù)題意,本實(shí)驗(yàn)的自變量是果膠酶的量,因變量是出汁量,對(duì)照實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)應(yīng)遵循單一變量原則、等量原則和對(duì)照原則,根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置,通過(guò)A～D組實(shí)驗(yàn)可比較不同實(shí)驗(yàn)組出汁量的差異。若要檢測(cè)加入酶的量等于0而其他條件均與實(shí)驗(yàn)組相同時(shí)的出汁量,則E組應(yīng)加入與實(shí)驗(yàn)組等量的緩沖液才符合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的單一變量和等量原則,因此E組設(shè)計(jì)不能達(dá)到目的。 答案:(1)比較不同來(lái)源果膠酶的活性 (2)溫度范圍設(shè)置不合理　溫度梯度設(shè)置不合理 (3)不能　未加入緩沖液 11