2017高考生物總復(fù)習(xí) 第12單元 第43講 植物組織培養(yǎng)與植物有效成分的提取學(xué)案
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1、 第43講 植物組織培養(yǎng)與植物有效成分的提取 [考綱點擊] 1.植物的組織培養(yǎng) 2.從生物材料中提取某些特定的成分 一、植物組織培養(yǎng) 1.培養(yǎng)基 (1)成分:大量元素、微量元素、有機成分、激素和瓊脂。 (2)類型:MS培養(yǎng)基、發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基。 (3)作用:為植物組織或器官生長和發(fā)育提供營養(yǎng)條件。 (4)制備:配制各種母液→配制培養(yǎng)基→滅菌。 2.組織培養(yǎng) (1)含義:在無菌和人工控制條件下,將離體的植物器官、組織、細(xì)胞,培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽,最終形成完整的植株。 (2)原理:植物細(xì)胞具有全能性。 (3)過
2、程 ―→ 二、植物有效成分的提取 1.植物芳香油的提取 (1)植物芳香油的主要化學(xué)成分:萜類化合物及其衍生物,具有很強的揮發(fā)性。提取方法有蒸餾、壓榨和萃取法等。 2.胡蘿卜素的提取 (1)胡蘿卜素的性質(zhì):不溶于水,易溶于石油醚等有機溶劑。 (2)實驗設(shè)計 (3)鑒定方法:紙層析法。 1.植物組織培養(yǎng)的4個方面 (1)理論基礎(chǔ):全能性。 (2)基本過程:包括脫分化和再分化。 (3)培養(yǎng)基的制備:誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)基,分裝后要進(jìn)行滅菌。接種前,要對外植體進(jìn)行消毒。 (4)植物激素的影響:組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中必須加入生長素和細(xì)胞分裂素,兩種激素的使用順序和濃度
3、配比將影響組織培養(yǎng)過程中的細(xì)胞分裂和分化。 2.植物有效成分的提取 (1)植物芳香油的提取方法:壓榨法、蒸餾法和萃取法等。 (2)芳香油的性質(zhì):不溶于水,易溶于有機溶劑,因此可用有機溶劑作為提取劑來提取芳香油。 (3)胡蘿卜素的性質(zhì):是橘黃色結(jié)晶,從胡蘿卜中提取胡蘿卜素,常用親脂(水不溶)性有機溶劑(或有機溶劑)作萃取劑。 (4)胡蘿卜素的提取方法:萃取法。 (5)胡蘿卜素的鑒定:紙層析法,在鑒定過程中需要用標(biāo)準(zhǔn)樣品對照。 考法一 植物組織培養(yǎng) 1.MS培養(yǎng)基的成分及各成分的作用 成分 作用 微量元素和大量元素 提供植物細(xì)胞生活所必需的無機鹽 蔗糖 提供碳源
4、,維持細(xì)胞滲透壓 甘氨酸、維生素、煙酸、肌醇 滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求 2.脫分化和再分化的比較 過程 特點 條件 脫分化 外植體成為愈傷組織 排列疏松、高度液泡化的薄壁細(xì)胞團(tuán) 離體、營養(yǎng)物質(zhì)、植物激素和其他適宜條件 再分化 愈傷組織成為叢芽或胚狀體結(jié)構(gòu) 有根、芽或有生根發(fā)芽的能力 3.菊花組織培養(yǎng)過程 菊花組織形成愈傷組織長出叢芽―→生根菊花植株 4.月季花藥培養(yǎng)的兩種途徑 以上兩種途徑之間沒有絕對的界限,主要取決于培養(yǎng)基中激素種類及其濃度比。 5.植物激素在組織培養(yǎng)過程中的作用 生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞
5、分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素,其作用及特點為: 激素使用 實驗結(jié)果 使用順序 先使用生長素, 后使用細(xì)胞分裂素 有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化 先使用細(xì)胞分裂素, 后使用生長素 細(xì)胞既分裂又分化 同時使用 分化頻率提高 生長素用量和細(xì)胞分裂素用量的比例 比值高 利于根的分化、抑制芽的形成 比值低 利于芽的分化、抑制根的形成 比值適中 促進(jìn)愈傷組織的生長 視角1? 以基礎(chǔ)判斷或案例分析的形式,考查植物的組織培養(yǎng) 1.(概念流程圖示類)(2016·廣東韶關(guān)模擬)下面為植物組織培養(yǎng)過程的流程圖,以下相關(guān)敘述不正確的是( ) A.上述過程中脫分
6、化發(fā)生在步驟b,在此過程中植物激素發(fā)揮了重要作用 B.再分化發(fā)生在步驟d,是愈傷組織重新分化形成根或芽等器官的過程 C.從葉組織塊到種苗形成的過程利用的原理是植物葉片細(xì)胞具有全能性 D.人工種子可以解決有些作物品種繁殖能力差、結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問題 解析:選B。再分化發(fā)生在步驟c,為愈傷組織重新分化形成根或芽等器官的過程。 2.(表格信息類)(2016·山東聊城一中調(diào)研)在植物組織培養(yǎng)過程中,激素的添加已成為一種常規(guī)的實驗手段,在植物組織培養(yǎng)過程中已研究過的植物激素有:生長素、細(xì)胞分裂素、赤霉素等。下表為某同學(xué)研究激素的使用順序?qū)嶒灲Y(jié)果的影響,請回答相關(guān)問題: 使用順序 實驗
7、結(jié)果 先使用NAA,后使用KT 有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化 先使用KT,后使用NAA A 同時使用 B (1)植物激素中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、________和________的關(guān)鍵性激素。該實驗中屬于細(xì)胞分裂素類生長調(diào)節(jié)劑的是________。 (2)請將表格中空白處A和B補充完整,A為______________,B為________________。若NAA和KT的用量比值適中時,促進(jìn)________________的形成。 (3)用于離體培養(yǎng)的植物器官或組織稱為________。若該實驗材料為菊花,則應(yīng)對其進(jìn)行________(消毒/滅菌)。 (4)接
8、種后的錐形瓶最好放在無菌箱中培養(yǎng),培養(yǎng)環(huán)境應(yīng)注意調(diào)節(jié)合適的________和________________。接種過程中要注意在________________旁進(jìn)行。 解析:(1)生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素,NAA屬于生長素類生長調(diào)節(jié)劑,KT屬于細(xì)胞分裂素類生長調(diào)節(jié)劑。(2)先使用NAA,后使用KT,有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化;先使用KT,后使用NAA,細(xì)胞既分裂也分化;NAA和KT同時使用,分化頻率提高;NAA和KT的用量比值適中時,有利于愈傷組織的形成。(3)用于離體培養(yǎng)的植物器官或組織稱為外植體,組織培養(yǎng)過程中應(yīng)對外植體消毒。(4)接種后的錐形瓶最
9、好放在無菌箱中培養(yǎng),培養(yǎng)期間應(yīng)注意調(diào)節(jié)溫度和光照時間,接種過程要注意在酒精燈火焰旁進(jìn)行,以免雜菌污染。 答案:(1)脫分化 再分化 KT (2)細(xì)胞既分裂也分化 分化頻率提高 愈傷組織 (3)外植體 消毒 (4)溫度 光照時間 酒精燈火焰 視角2? 以案例分析的形式,考查植物的花藥培養(yǎng) 3.(概念流程圖示類)如圖為某二倍體植株花藥中未成熟的花粉,在適宜培養(yǎng)基上形成完整植株的過程。下列有關(guān)敘述正確的是( ) A.過程①②表示脫分化,過程③表示再分化 B.過程①②需要照光 C.過程①②③說明花粉細(xì)胞具有全能性 D.通過過程③獲得的完整植株自交后代不會發(fā)生性狀分離 解析:
10、選C。A錯誤,過程①表示脫分化,過程②表示再分化。B錯誤,通常幼小植株形成后才需要照光。C正確,通過過程①②③,花粉細(xì)胞形成了完整的植株,體現(xiàn)了花粉細(xì)胞的全能性。D錯誤,通過過程③獲得的完整植株是單倍體,高度不育。 4.(原理判斷類)(2016·河南焦作模擬)將基因型為AaBb的月季的花粉細(xì)胞通過無菌操作接入對應(yīng)的培養(yǎng)基中,在一定條件下誘導(dǎo)形成幼苗,其過程如下: 月季的花粉細(xì)胞①→愈傷組織②→叢芽③→植株④ (1)①→②過程需要的條件有(填序號)____________(A.營養(yǎng) B.激素 C.光照 D.pH)。最適合進(jìn)行培養(yǎng)花藥的時期為________,選擇花藥時,一般要通過鏡檢來確定
11、其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期,最常用的方法為________。 (2)形成花粉的細(xì)胞分裂方式是________,花粉發(fā)育成植物體的細(xì)胞分裂方式是________,要促進(jìn)花粉細(xì)胞發(fā)育成完整植株,培養(yǎng)基中應(yīng)加入有________________的兩種激素。 (3)植株④叫做________。若要得到可育植株,需要用________對③進(jìn)行處理,所得的植株基因型為________________________。 解析:(1)植物組織培養(yǎng)過程的①→②脫分化需要營養(yǎng)、激素、適當(dāng)pH。在花粉發(fā)育過程中,一般是單核靠邊期離體培養(yǎng)成功率最高。確定花粉發(fā)育時期常用醋酸洋紅法。(2)花粉通過減數(shù)分裂形成
12、,花粉發(fā)育成植物體的細(xì)胞分裂方式是有絲分裂,細(xì)胞分裂素和生長素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素。(3)植株④由花粉離體培養(yǎng)而來,為單倍體。單倍體高度不育,需要用秋水仙素對③單倍體幼苗處理,誘導(dǎo)染色體組加倍,所得植株基因也加倍,月季AaBb產(chǎn)生4種花粉:AB、Ab、aB、ab,故加倍后為AABB、AAbb、aaBB、aabb。 答案:(1)ABD 單核期(單核靠邊期) 醋酸洋紅法 (2)減數(shù)分裂 有絲分裂 細(xì)胞分裂素和生長素 (3)單倍體 秋水仙素 AABB、AAbb、aaBB、aabb 考法二 植物有效成分的提取 1.三種提取方法的比較 提取 方法 水蒸氣蒸餾法
13、壓榨法 有機溶劑萃取法 實驗 原理 利用水蒸氣將揮發(fā)性較強的植物芳香油攜帶出來 通過機械加壓,壓榨出果皮中的芳香油 使芳香油溶解在有機溶劑中,蒸發(fā)溶劑獲得芳香油 方法 步驟 ①水蒸氣蒸餾 ②分離油層 ③除水過濾 ①石灰水浸泡、漂洗 ②壓榨、過濾、靜置 ③再次過濾 ①粉碎、干燥 ②萃取、過濾 ③濃縮 適用 范圍 適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強的芳香油 適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取 適用范圍廣,要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小,能充分浸泡在有機溶液中 優(yōu)點 簡單易行,便于分離 生產(chǎn)成本低,易保持原料原有的結(jié)構(gòu)和功能 出油率高,易分離 局限
14、性 水中蒸餾會導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問題 分離較為困難,出油率相對較低 使用的有機溶劑處理不當(dāng)會影響芳香油的質(zhì)量 2.植物有效成分提取過程的注意事項 (1)在玫瑰精油的提取過程中,加入NaCl的目的是增加水層的密度,有利于玫瑰油與水分層,加入無水Na2SO4的目的是吸收精油中殘留的水分。 (2)在提取橘皮精油時,為了提高出油率,需要將柑橘皮干燥去水,并用石灰水浸泡,浸泡時間為10 h以上。橘皮要浸透,這樣壓榨時不會滑脫,且出油率高,過濾時不會堵塞篩眼。 (3)在胡蘿卜素的提取中,原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度和時間等條件也能影響萃取。因此在萃取的過程中,要先
15、將蘿卜進(jìn)行粉碎和干燥,使之與萃取劑充分接觸,提高溶解度。 視角1? 以案例分析的形式,考查植物芳香油的提取 1.(概念流程圖類)某同學(xué)設(shè)計的提取玫瑰精油的實驗流程如圖所示,據(jù)圖分析不正確的是( ) ?、佟? ② ?、邸 、堋 、荨 ?⑥ →→→→→ A.在②中使用水氣蒸餾更簡便易行 B.在操作時可向蒸餾燒瓶中加入幾片碎瓷片防止暴沸 C.提取精油時,向混合物中加入NaCl更利于油水分層 D.加入無水Na2SO4,再用過濾法可除去分離的油層中的水分 解析:選A。由于玫瑰精油難溶于水,易溶于有機溶劑,因此在②中使用水中蒸餾更簡便易行;在操作時可向蒸餾燒瓶中加入幾片碎
16、瓷片,目的是防止暴沸;提取精油時,為了使油水分層更徹底,要向油水混合物中加入NaCl;分離的油層還含有一定的水分,需加入無水Na2SO4,再用過濾方法將其除去。 2.(原理判斷類)下列是與牡丹精油提取相關(guān)的問題,請回答: (1)牡丹精油適合用水蒸氣蒸餾法提取,其理由是牡丹精油具有_________________________的性質(zhì)。 (2)當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時,蒸餾過程中,影響牡丹精油提取量的主要因素有蒸餾時間和__________。當(dāng)原料量等其他條件一定時,提取量隨蒸餾時間的變化趨勢是_____________________________________________
17、___________________________。 (3)如果蒸餾過程中不進(jìn)行冷卻,則牡丹精油提取量會________,原因是________________________________________________________________________。 (4)用萃取法提取牡丹精油時,采用的溶劑是________,原理是__________________________________。 (5)牡丹花中精油的相對含量隨花的不同生長發(fā)育時期的變化趨勢如圖所示。提取牡丹精油時采摘花的最合適時間為________天左右。 (6)從薄荷葉中提取薄荷精油時_____
18、___(填“能”或“不能”)采用從牡丹花中提取牡丹精油的方法,理由是__________________________________________。 解析:(1)牡丹精油難溶于水、易溶于有機溶劑,化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,故采用水蒸氣蒸餾法和萃取法提取。(2)當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時,蒸餾過程中,影響牡丹精油提取量的主要因素有蒸餾時間和蒸餾溫度;當(dāng)原料量等其他條件一定時,提取量隨蒸餾時間的變化趨勢是:一定時間內(nèi)隨蒸餾時間的延長而增加,一定時間后提取量不再增加。(3)蒸餾時牡丹精油隨水蒸氣一起蒸餾出來,如果不進(jìn)行冷卻,部分精油會隨水蒸氣揮發(fā)而流失。(4)牡丹精油易溶于有機溶劑,因此萃取時所選用的
19、溶劑必須是有機溶劑,如石油醚等。(5)根據(jù)圖示可以確定提取牡丹精油時采摘花的最合適時間為a天左右,此時牡丹精油相對含量最高。(6)薄荷精油與牡丹精油化學(xué)性質(zhì)相似,同樣可以采用水蒸氣蒸餾法提取。 答案:(1)難溶于水、易溶于有機溶劑、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定 (2)蒸餾溫度 在一定時間內(nèi)提取量隨提取時間的延長而增加,一定時間后提取量不再增加 (3)下降 部分精油會隨水蒸氣揮發(fā)而流失 (4)石油醚等 牡丹精油易溶于有機溶劑 (5)a (6)能 薄荷精油與牡丹精油化學(xué)性質(zhì)相似 視角2? 以案例分析的形式,考查胡蘿卜素的提取與鑒定 3.(概念流程圖類)胡蘿卜素可用于治療因缺乏維生素A而引起的各種疾病,下圖是
20、提取胡蘿卜素的實驗流程示意圖,相關(guān)說法正確的是( ) →→→→→→ A.圖中干燥處理時的溫度越高、時間越長越利于胡蘿卜素提取 B.圖中甲過程表示萃取,此過程用到的有機溶劑具有較低的沸點 C.圖中乙過程表示濃縮,濃縮之前進(jìn)行過濾的目的是除去萃取液中的不溶物 D.只能從植物中提取β-胡蘿卜素 解析:選C。新鮮胡蘿卜素含大量水分,提取時應(yīng)干燥,但要控制干燥時間和溫度,若溫度太高、干燥時間太長會導(dǎo)致胡蘿卜素分解。圖中甲是萃取,所用萃取劑應(yīng)具有較高的沸點,并能充分溶解胡蘿卜素。圖中乙是濃縮,在濃縮之前要進(jìn)行過濾除去萃取液中的不溶物。工業(yè)生產(chǎn)上,β-胡蘿卜素的提取方法主要有三種:一是從植物中
21、提取,二是從巖藻中獲得,三是利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)。 4.(概念流程圖類)胡蘿卜素是一種常用的食用色素,可分別從胡蘿卜或產(chǎn)胡蘿卜素的微生物菌體中提取獲得,流程如下: (1)篩選產(chǎn)胡蘿卜素的酵母菌R時,可選用____________或平板劃線法接種。采用平板劃線法接種時需先灼燒接種環(huán),其目的是________。 (2)培養(yǎng)酵母菌R時,培養(yǎng)基中的蔗糖和硝酸鹽可分別為酵母菌R的生長提供________和________。 (3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時,干燥過程應(yīng)控制好溫度和________,以防止胡蘿卜素分解;萃取過程中宜采用________方式加熱以防止溫度過高;萃取液濃縮前需進(jìn)行過濾,
22、其目的是________________。 (4)紙層析法可用于鑒定所提取的胡蘿卜素,鑒定過程中需用胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)樣品作為________。 解析:(1)微生物分離和培養(yǎng)中常用的接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法。微生物培養(yǎng)需要無菌操作,其中對接種針需進(jìn)行灼燒滅菌處理。(2)蔗糖和硝酸鹽可分別為微生物的生長提供碳源和氮源。(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時,干燥過程中若溫度過高、干燥時間太長會導(dǎo)致胡蘿卜素分解;萃取過程應(yīng)避免明火加熱,宜采用水浴方式加熱,以防止溫度過高;萃取液在濃縮之前,還要進(jìn)行過濾,以除去萃取液中的不溶物。(4)利用紙層析法鑒定所提取的胡蘿卜素時,需用胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)樣品作對照,
23、對比分析標(biāo)準(zhǔn)樣品和萃取樣品出現(xiàn)的層析帶。 答案:(1)稀釋涂布平板法 滅菌(或防止雜菌污染) (2)碳源 氮源 (3)時間 水浴 濾去不溶物 (4)(實驗)對照 易錯點 植物組織培養(yǎng)實驗操作中的易錯點 [點撥] (1)材料的選取:菊花的組織培養(yǎng)實驗中,應(yīng)選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝;月季花藥的培養(yǎng)實驗中,應(yīng)選擇花粉發(fā)育過程中的單核靠邊期的花粉進(jìn)行培養(yǎng)。 (2)外植體消毒:所用消毒劑為體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液,所使用的清洗液是無菌水。 (3)培養(yǎng)過程:在初期,菊花的組織培養(yǎng)需光照,月季花藥的培養(yǎng)不需光照;而在后期均需光照。 (4)月季花
24、藥培養(yǎng)得到的并不都是單倍體植株:花粉壁發(fā)育成二倍體,花藥發(fā)育成單倍體。 (5)花藥開裂長出愈傷組織或釋放出胚狀體時,應(yīng)及時轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上。 ?微觀清障 (1)培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是組織培養(yǎng)。( ) (2)生根時,培養(yǎng)基通常應(yīng)含α-萘乙酸等生長素類調(diào)節(jié)劑。( ) (3)在誘導(dǎo)離體菊花莖段形成幼苗的過程中,基因的突變與重組不會同時發(fā)生。( ) (4)通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株一般有兩種途徑,這兩種途徑之間沒有絕對的界限,主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。( ) (5)用于生產(chǎn)生物柴油的植物油不易揮發(fā),可選用蒸餾、壓榨和萃取等方法從油料作物中提取。( )
25、 (6)柚皮易焦糊,宜采用壓榨法提取柚皮精油,該過程得到的糊狀液體可通過過濾除去其中的固體雜質(zhì)。( ) (7)萃取加熱時需安裝冷凝回流裝置,其目的是防止有機溶劑揮發(fā)。( ) (8)橘皮精油主要貯藏在橘皮部分,橘皮精油的有效成分在水蒸氣蒸餾時會發(fā)生部分水解,一般采用壓榨法。( ) (9)胡蘿卜素易溶于有機溶劑,可以采用萃取的方法進(jìn)行提取。( ) (10)可利用明火加熱提高胡蘿卜素的萃取速度。( ) 答案:(1)√ (2)√ (3)√ (4)√ (5)× (6)√ (7)√ (8)√ (9)√ (10)× 1.(2016·湖南長沙質(zhì)檢)下圖表示菊花的嫩枝和月季的花藥離體培
26、養(yǎng)過程,請據(jù)圖回答下面的問題。 (1)對菊花來說,要選取________的嫩枝來進(jìn)行組織培養(yǎng)。對月季來說,適宜花粉培養(yǎng)的時期是________期。為確定花粉是否處于該時期,最常用的方法是________。 (2)在培養(yǎng)花粉的培養(yǎng)基中要加入一定的植物激素,常用的植物激素有________________________________________________________________________。 (3)某同學(xué)在培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上感染了幾種細(xì)菌。若在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入________指示劑培養(yǎng)幾種菌后,指示劑變紅就可以鑒定其中含有能夠分解尿素的細(xì)菌。為
27、了避免其他微生物對培養(yǎng)造成的影響,所以在進(jìn)行接種時應(yīng)注意________。 ①接種室要消毒 ②只要戴口罩,操作時便可說話 ③外植體可預(yù)先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精浸泡,取出用無菌水沖洗后,再用0.1%的氯化汞溶液消毒,并用無菌水沖洗干凈 ④接種操作要在酒精燈火焰旁進(jìn)行 ⑤接種完畢應(yīng)立即蓋好瓶蓋 A.①②③④⑤ B.①②③④ C.①③④⑤ D.②③④⑤ (4)月季的花藥培養(yǎng)與菊花的嫩枝組織培養(yǎng)不同,從植株產(chǎn)生的途徑來說,花粉植株產(chǎn)生的途徑除了圖中所示外,還可以通過________階段發(fā)育而來,這兩種發(fā)育途徑的差別主要取決于_________
28、_______________________________________________________________。 (5)不同植物對各種條件的要求往往不同,進(jìn)行菊花組織培養(yǎng)一般將溫度控制在________℃,并且對光照的控制為____________________。 [導(dǎo)學(xué)號29520662] 解析:(1)植物組織培養(yǎng)法獲取菊花植株時選用的材料一般是生長旺盛的嫩枝。月季的花藥培養(yǎng)中選擇單核期的花藥離體培養(yǎng),成功率最高,確定花粉發(fā)育期最常用的方法是醋酸洋紅法。(2)在培養(yǎng)花粉的培養(yǎng)基中要加入細(xì)胞分裂素和生長素。(3)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,培養(yǎng)某幾種細(xì)菌后
29、,如果pH升高,指示劑將變紅,可知道其中含有能夠分解尿素的細(xì)菌。(4)月季的花藥培養(yǎng)與菊花的嫩枝組織培養(yǎng)不同,從植株產(chǎn)生的途徑來說,花粉植株的產(chǎn)生一般有兩種途徑:一是花粉通過胚狀體階段發(fā)育為植株;另一種是花粉在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,先形成愈傷組織,再將其誘導(dǎo)分化成植株。這兩種發(fā)育途徑的差別主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。 答案:(1)生長旺盛 單核 醋酸洋紅法 (2)細(xì)胞分裂素和生長素 (3)酚紅 C (4)胚狀體 培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比 (5)18~22 每天12小時光照 2.傳統(tǒng)藥用植物栝樓的根、果、種子等均能入藥,其合成的天花粉蛋白是中藥天花粉的主要有效成分??蒲腥?/p>
30、員進(jìn)行以下的研究,大致流程如下: (1)接種在MS培養(yǎng)基中的栝樓種子,如先經(jīng)加水浸沒的萌發(fā)率為75%,不加水浸沒的萌發(fā)率為2.5%,說明栝樓種子萌發(fā)需要 ____________________。 (2)在培育“無菌苗”過程中,使用的部分激素組合如表1(注:—表示未添加該種植物激素),除甲組僅有頂芽長成小苗外,所有的培養(yǎng)基上都有腋芽長出,可見誘導(dǎo)腋芽生長加入____________________________是必需的。 組別 6-BA(mg/L) NAA(mg/L) 甲 — — 乙 1.0 — 丙 — 0.5 丁 1.0 0.5 戊 2
31、.0 0.5 表1 (3)在誘導(dǎo)“愈傷組織”的MS培養(yǎng)基中,使用了以下一些激素組合(如表2),以下培養(yǎng)基均能誘導(dǎo)葉盤緩慢長出黃綠色的愈傷組織,其中B2組和B3組誘導(dǎo)產(chǎn)生的愈傷組織在培養(yǎng)30天后分化出小芽點,并迅速長大成無根苗,兩組的分化率分別為25.0%和14.3%,可見0.2 mg/L NAA與激動素(6-BA等)配合可誘導(dǎo)栝樓葉片________長出愈傷組織,但不利于誘導(dǎo)愈傷組織 ________。 組別 NAA 6-BA(mg/L) IAA(mg/L) RT(mg/L) A1 0.2 2.0 B1 0.2 4.0 C1 0.2
32、 6.0 A2 2.0 0.2 B2 4.0 0.2 C2 6.0 0.2 A3 0.2 2.0 B3 0.2 4.0 C3 0.2 6.0 表2 [導(dǎo)學(xué)號29520663] 解析:(1)從題意中可以看出,種子浸泡后萌發(fā)率提高,說明種子萌發(fā)過程中需要水分。 (2)比較表格中信息和實驗結(jié)果可以推測:只加入6-BA或NAA或6-BA和NAA二者均加入,都可以促進(jìn)腋芽的生長。 (3)A1、B1、C1組中都是0.2 mg/L NAA與激動素(6-BA等)配合,根據(jù)實驗結(jié)果,只出現(xiàn)愈傷組織,說明0.2 m
33、g/L NAA與激動素(6-BA等)配合可以促進(jìn)脫分化過程,由于沒有長成幼苗,說明不利于再分化過程。 答案:(1)充足的水分 (2)6-BA或NAA或6-BA和NAA(植物激素) (3)脫分化 再分化 3.(2016·湖北武漢模擬)從玫瑰花中提取出的玫瑰精油稱為“液體黃金”,是世界香料工業(yè)不可取代的原料,多用于制造高級香水、化妝品等。為了擴大玫瑰的種植面積,選育優(yōu)良品種,常采用植物組織培養(yǎng)技術(shù),包括花粉培養(yǎng)等。請回答相關(guān)問題: (1)玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,難溶于______,易溶于____________。除可用蒸餾法提取外,還可用____________法提取。通過蒸餾形成的油水混
34、合物中需要加入NaCl,目的是____________;加入無水Na2SO4的目的是________________________。 (2)對于玫瑰而言,________期的花粉最易培養(yǎng)成功。確定花粉發(fā)育時期時常用____________對花粉進(jìn)行染色,對于細(xì)胞核不易著色的植物,常用____________法染色。 (3)組織培養(yǎng)過程一定要進(jìn)行嚴(yán)格滅菌消毒處理。下列各項中應(yīng)使用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒的是__________,采用高壓蒸汽法進(jìn)行滅菌的是__________________。(填寫相關(guān)序號) ①培養(yǎng)皿?、谂囵B(yǎng)基?、蹖嶒灢僮髡叩碾p手?、苋清F形瓶 ⑤接種環(huán)?、藁ɡ? [導(dǎo)學(xué)號295
35、20664] 解析:(1)玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,難溶于水,易溶于有機溶劑,所以可以用蒸餾法和萃取法。通過蒸餾形成的油水混合物中需要加入NaCl,目的是使油水分離。加入無水Na2SO4的目的是除水即吸收芳香油中殘留的水分。(2)對玫瑰而言,單核靠邊期的花粉最易培養(yǎng)成功。為了確定花粉的發(fā)育時期常用醋酸洋紅法對花粉進(jìn)行染色,對于細(xì)胞核不易著色的應(yīng)用焙花青—鉻礬法可以將細(xì)胞核染成藍(lán)黑色。(3)對實驗者的雙手和外植體花蕾應(yīng)采用消毒,即③⑥消毒。而對培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基和三角錐形瓶需要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,而對接種環(huán)應(yīng)進(jìn)行灼燒滅菌,故應(yīng)是①②④。 答案:(1)水 有機溶劑 萃取 使油水分離 吸收芳香油中殘留的水分 (2)單核(靠邊) 醋酸洋紅 焙花青—鉻礬 (3)③⑥ ①②④ 10
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