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1、2022年高三生物二輪復習 生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定教案2 人教版
【實驗指導】
一、實驗原理
某些化學試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機化合物,產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。
可溶性還原糖(如葡萄糖、果糖)與斐林試劑發(fā)生作用,可以生成磚紅色沉淀。斐林試劑實際是Cu2+的堿性溶液,能使具有自由醛基或酮基的糖氧化,Cu2+則被還原成磚紅色的Cu2O沉淀。反應(yīng)式為:
CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2—OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O
脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色。蘇丹Ⅲ在脂肪中的溶解度比在酒精中的溶解度大,當用蘇丹Ⅲ的酒精溶液處理含
2、有脂肪的生物組織時,酒精中的蘇丹Ⅲ進入脂肪中,將脂肪染成橘黃色。
蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用,可以產(chǎn)生紫色反應(yīng)。具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng)。蛋白質(zhì)的肽鍵在堿性溶液中能與Cu2+絡(luò)合成紫紅色的化合物。顏色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比。
二、目的要求
初步學會鑒定生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。
三、材料用具
1.實驗材料
(1)做可溶性還原糖的鑒定實驗,應(yīng)該選擇含糖量較高、顏色為白色或近于白色的植物組織,以蘋果、梨為最好。
(2)做脂肪的鑒定實驗,應(yīng)該選擇富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實驗前需浸泡3~4 h。
(3)做蛋白質(zhì)的鑒定實驗
3、,可用浸泡1~2 d的黃豆種子(或用豆?jié){),或用雞蛋蛋白。
2.儀器和試劑
(1)儀器:剪刀,解剖刀,雙面刀片,試管,試管架,試管夾,大小燒杯,小量筒,滴管,玻璃漏斗,酒精燈,三腳架,石棉網(wǎng),火柴,研缽,石英砂,紗布,載玻片,蓋玻片,毛筆吸水紙,顯微鏡。
(2)試劑:斐林試劑(主要由質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的NaOH溶液和質(zhì)量濃度為0.05 g/mL的CuSO4溶液配制而成),蘇丹Ⅲ或蘇丹IV染液,雙縮脲試劑,體積分數(shù)為50%的酒精溶液,蒸餾水。
?四、實驗的方法、步驟
1.可溶性還原糖的鑒定
制備生物組織樣液取樣注入試劑加熱和觀察
2.脂肪的鑒定
制備生物組織實驗材料染色去
4、浮色制作臨時裝片→放在顯微鏡下觀察(先低倍鏡后高倍鏡)
3.蛋白質(zhì)的鑒定
制備生物組織樣液注入組織樣液注入試劑A注入試劑B觀察顏色變化
?五、實驗成功的關(guān)鍵及注意事項
1.實驗成功的關(guān)鍵在于實驗材料的選擇
(1)可溶性還原糖的鑒定實驗中,最理想的實驗材料是含糖量較高的生物組織(或器官),而且組織的顏色較淺,或近于白色的。經(jīng)試驗比較,顏色反應(yīng)的明顯程度依次為蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜。
(2)脂肪的鑒定實驗中,實驗材料最好選用富含脂肪的種子,且徒手切片要成功。
(3)蛋白質(zhì)的鑒定實驗,最好選用富含蛋白質(zhì)的生物組織,植物材料常用的是大豆,動物材料常用的是雞蛋。
2.注意事項
(
5、1)斐林試劑很不穩(wěn)定,故應(yīng)將組成斐林試劑的甲液(0.1 g/mL的NaOH溶液)和乙液(0.05 g/mL的CuSO4溶液)分別配制、儲存,使用時再臨時配制,將4~5滴乙液滴入2 mL甲液中,配完后立即使用。
(2)雙縮脲試劑的使用,應(yīng)先加試劑A(0.1 g/mL的NaOH溶液),造成堿性的反應(yīng)環(huán)境,再加試劑B(0.01 g/mL的CuSO4溶液)。
(3)在鑒定可溶性糖的實驗中,對試管中的溶液進行加熱時,試管底部不要觸及燒杯底部,另外,試管口不要朝向?qū)嶒炚撸悦夥序v的溶液沖出試管,造成燙傷。
(4)在蛋白質(zhì)的鑒定實驗中,若用雞蛋清作實驗材料,必須稀釋,以免實驗后粘住試管,不易洗刷。
6、(5)在鑒定脂肪的實驗中,若用花生種子作實驗材料,必須提前浸泡3~4小時,浸泡時間短了,不容易切片,浸泡時間過長,則組織太軟,切下的薄片不易成形,染色時間不宜過長。
?【基礎(chǔ)訓練】
一、選擇題
1.可用于鑒定生物組織中可溶性還原糖的試劑是
A.斐林試劑 B.雙縮脲試劑 C.蘇丹Ⅲ染液 D.蘇丹Ⅳ染液
解析:斐林試劑能與還原性糖發(fā)生顏色反應(yīng),出現(xiàn)磚紅色沉淀,雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì),蘇丹Ⅲ、蘇丹IV鑒定脂肪。
答案:A
2.對斐林試劑和雙縮脲試劑的配方,敘述不正確的是
A.都含有NaOH溶液和CuSO4溶液
B.斐林試劑的配制是將4~5滴0.05 g/mL的CuSO4溶液滴
7、入2 mL 0.1 g/mL的NaOH溶液中即成
C.雙縮脲試劑是將3~4滴0.01 g/mL的CuSO4溶液滴入2 mL 0.1 g/mL的NaOH溶液中混合而成的
D.雙縮脲試劑含有兩種試劑:質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的NaOH溶液和質(zhì)量濃度為0.01 g/mL的CuSO4溶液
解析:斐林試劑和雙縮脲試劑的化學成分相同,但配制時使用的劑量和濃度及加入試劑的順序不同。斐林試劑的配制是將4~5滴0.05 g/mL的CuSO4溶液滴入2 mL0.1 g/mL的NaOH溶液中即成,必須現(xiàn)用現(xiàn)配。雙縮脲試劑是用質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的NaOH溶液和質(zhì)量濃度為0.01 g/mL的CuSO4溶
8、液配制而成的,使用時先向待檢樣品中加入2 mL0.1 g/mL的NaOH溶液,振蕩搖勻,再向試管中加入3~4滴0.01 g/mL的硫酸銅溶液,搖蕩均勻。
答案:C
3.用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時,溶液顏色的變化過程為
A.無色→磚紅色(沉淀) B.淺藍色→磚紅色(沉淀)
C.淺藍色→藍色→磚紅色(沉淀) D.淺藍色→棕色→磚紅色(沉淀)
解析:考查對實驗現(xiàn)象的觀察能力。斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05 g/mL的硫酸銅溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下,能
9、夠生成磚紅色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身氧化成葡萄糖酸。反應(yīng)之初,生成的Cu2O沉淀較少,而藍色的Cu(OH)2沉淀較多,二者的綜合效應(yīng)使溶液呈棕色,隨著反應(yīng)的進行,磚紅色的Cu2O增多,溶液變成磚紅色。
答案:D
4.在用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)實驗時,正確的操作是
A.2 mL蛋白稀釋液先加0.1 g/mL的NaOH,再加3~4滴0.01 g/mL的CuSO4溶液
B.2 mL蛋白稀釋液先加3~4滴0.01 g/mL的CuSO4溶液,再加0.1 g/mL的NaOH溶液
C.2 mL蛋白稀釋液,同時加入0.1 g/mL的NaOH和0.01 g/mL的CuSO4混合液
D.在NaOH和
10、CuSO4混合液中加入2 mL蛋白稀釋液
解析:雙縮脲試劑的成分是質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的NaOH溶液和質(zhì)量濃度為0.01 g/mL的CuSO4溶液。在堿性溶液NaOH中,蛋白質(zhì)能與Cu2+作用形成紫色的絡(luò)合物。在實驗時,應(yīng)先向蛋白稀釋液中加入0.1 g/mL的NaOH溶液,混合均勻,造成一個堿性環(huán)境,然后再加0.01 g/mL的CuSO4溶液3~4滴,才能出現(xiàn)紫色反應(yīng)。若先加入CuSO4,再加NaOH,則容易生成藍色的Cu(OH)2沉淀,而對實驗現(xiàn)象有遮蔽作用。
答案:A
5.用蘇丹Ⅲ染液對脂肪組織進行染色時,可用來沖洗浮色的藥品是
A.HCl B.H2O C.50%的酒
11、精 D.無水酒精
解析:因為蘇丹Ⅲ易溶于50%酒精中,故選C。
答案:C
6.下列物質(zhì)中,能被蘇丹Ⅳ染液染成紅色的是
A.馬鈴薯塊莖 B.浸軟的花生種子 C.蛋清液 D.蘋果
答案:B
7.下列哪個實驗用到顯微鏡
A.可溶性還原糖的鑒定 B.蛋白質(zhì)的鑒定
C.脂肪的鑒定 D.淀粉的鑒定
答案:C
8.下列哪組試劑在使用過程中,必須經(jīng)過加熱
A.斐林試劑鑒定可溶性還原糖的過程中 B.蘇丹Ⅲ和蘇丹Ⅳ染液在鑒定動物組織中的脂肪時
C.雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)時 D.碘化鉀溶液鑒定淀粉時
答案:A
9.某組織
12、細胞被蘇丹Ⅲ試劑染成橘黃色,被染色的物質(zhì)是
A.葡萄糖 B.脂肪 C.蛋白質(zhì) D.蘋果組織液
解析:蘇丹Ⅲ試劑與脂肪發(fā)生顏色反應(yīng)呈現(xiàn)橘黃色,因此被染色的物質(zhì)應(yīng)該是脂肪。
答案:B
10.下列糖中能與斐林試劑反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀的是
A.淀粉 B.果糖 C.蔗糖 D.纖維素
解析:斐林試劑用于鑒定可溶性還原糖,果糖是可溶性還原糖,其他幾項都不是還原糖。
答案:B
11.花生種子子葉細胞內(nèi)的圓形透亮的小顆粒與蘇丹Ⅲ染液發(fā)生了顏色反應(yīng),形成
A.藍色 B.紅色 C.黃色 D.紫色
答案:C
12.某學生在顯微鏡下觀察落花生子葉的切片
13、,當轉(zhuǎn)動細準焦螺旋時,有一部分細胞看得清晰,另一部分細胞較模糊,這是由于
A.反光鏡未調(diào)節(jié)好 B.標本切得厚薄不均 C.細調(diào)節(jié)器未調(diào)節(jié)好 D.顯微鏡物鏡損壞
答案:B
13.可溶性糖的鑒定中,制備生物組織樣液時加入少許石英砂,其目的是
A.研磨充分 B.防止糖被破壞 C.防止反應(yīng) D.無作用
答案:A
14.下列哪一項沒有顏色反應(yīng)
A.用碘處理淀粉 B.用碘處理麥芽糖 C.用斐林試劑處理葡萄糖 D.用雙縮脲試劑處理蛋白質(zhì)
解析:A項呈現(xiàn)藍色,C項呈現(xiàn)磚紅色沉淀,D項呈現(xiàn)紫色反應(yīng),只有B項無顏色反應(yīng)。
答案:B
15.下列關(guān)于有關(guān)物質(zhì)鑒定的顏色
14、反應(yīng),哪一項是不正確的
A.用斐林試劑處理葡萄糖顯磚紅色 B.用蘇丹Ⅲ處理脂肪顯橘黃色
C.用雙縮脲處理蛋白質(zhì)顯紫色 D.用碘處理果糖呈紫色
解析:A、B、C的顏色反應(yīng)都正確,D不出現(xiàn)顏色反應(yīng)。
答案:D
?二、非選擇題
16.根據(jù)“生物組織中可溶性糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定”實驗,回答問題:
(1)實驗原理是依據(jù)生物組織中的有機物與某些化學試劑所產(chǎn)生的___________反應(yīng),鑒定生物組織中某種有機物的存在。
(2)鑒定成熟梨果肉內(nèi)存在還原性糖所用的試劑是_________,該試劑與細胞內(nèi)可溶性糖中的還原性糖如____________發(fā)生作用,形成_______
15、_色的沉淀,該沉淀是_______。
(3)鑒定花生子葉存在脂肪,所用的試劑是___________;若用物理方法鑒定脂肪的存在,請敘述鑒定方法____________________________。
(4)鑒定黃豆組織中存在蛋白質(zhì)時,先向試管內(nèi)注入2 mL黃豆組織樣液;然后向試管內(nèi)加入2 mL雙縮脲試劑A,搖勻;再向試管內(nèi)加入3~4滴雙縮脲試劑B,搖勻。為什么只加3~4滴雙縮脲劑B而不能過量?________________________________________________。
(5)鑒定蛋清組織中存在蛋白質(zhì)時,為何充分稀釋?_______________________
16、____。
(6)做鑒定糖和蛋白質(zhì)的實驗時,在鑒定之前,可以留出一部分樣液,以做_______之用,這樣會增強說服力。
答案:(1)顏色 (2)斐林試劑 葡萄糖、果糖 磚紅 Cu2O (3)蘇丹Ⅲ 烘烤花生種子后,把子葉放在白紙上用手指擠壓,白紙上會出現(xiàn)透明的油跡,說明子葉中含有脂肪(4)加入過量的雙縮脲試劑B,CuSO4在堿性溶液中生成大量藍色Cu(OH)2沉淀,會遮蔽所產(chǎn)生的紫色 (5)如果蛋清液稀釋不夠,與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng)后會粘固在試管的內(nèi)壁上,使反應(yīng)不容易徹底,并且試管也不容易刷洗干凈(6)與鑒定后的樣液的顏色變化作對比
17.用下列實驗材料做鑒定實驗,從理論上分析能否成功,試
17、說明道理。
(1)用綠色葉片做可溶性還原糖的鑒定實驗;
(2)用蓖麻種子做脂肪鑒定實驗;
(3)用新鮮牛奶做蛋白質(zhì)鑒定實驗。
答案:(1)不能成功。因為綠色葉片的顏色對于鑒定實驗中的顏色反應(yīng)有遮蔽作用。
(2)能成功。因為蓖麻種子中含有較多的脂肪,但必須切片較薄。
(3)不能成功。因為新鮮牛奶中含有大量的還原性糖,有可能與雙縮脲試劑中的發(fā)生顏色反應(yīng),干擾蛋白質(zhì)鑒定實驗中的顏色反應(yīng)。
18.根據(jù)下表中的實驗結(jié)果回答問題:
?
?
鑒定反應(yīng)
實驗結(jié)果
實驗一
葡萄糖+斐林試劑
磚紅色
實驗二
蔗糖液+斐林試劑
無反應(yīng)
實驗三
蔗糖液產(chǎn)物+斐林試劑
磚紅色
18、?
(1)等量葡萄糖和蔗糖溶液,分別加入等量斐林試劑,用小火加熱2~3分鐘后,兩者顏色反應(yīng)不同。這表明斐林試劑可用于鑒別_________________________________________。
(2)蔗糖液以蔗糖酶處理后,與斐林試劑呈磚紅色反應(yīng),這個事實說明____________
_________________________________________________________。
答案:(1)葡萄糖 (2)蔗糖被蔗糖酶分解后的產(chǎn)物中有葡萄糖
19.鑒定黃豆組織中存在蛋白質(zhì)時,先向試管內(nèi)注入2 mL黃豆組織樣液;然后向試管內(nèi)注入2 mL雙縮脲試劑A(___
19、____________________________溶液),搖勻;再向試管內(nèi)加入3~4滴雙縮脲試劑B(________溶液),這樣實驗才能成功,原因是___________________;加入雙縮脲試劑B僅為3~4滴,不能過量,為什么?_______________________________。
答案:0.1 g/mL的NaOH 0.01 g/mL的CuSO4 在堿性溶液中,蛋白質(zhì)容易與Cu2+發(fā)生紫色反應(yīng) 否則就容易生成藍色Cu(OH)2沉淀對實驗現(xiàn)象有遮蔽作用
20.蘇丹Ⅲ染液可以把脂肪染成_____________色,染色后要用酒精沖洗浮色,用酒精沖洗的原因是_____
20、___________________________________________。
答案:橘黃 蘇丹Ⅲ染液易溶解于酒精中
21.通常情況下,正常人的尿液中沒有葡萄糖。當一次食用大量糖時,尿液中是否有葡萄糖存在?試運用對照的方法設(shè)計實驗方案進行鑒定。
答案:(1)取3支試管分別標號1、2、3。
(2)在1號和2號試管內(nèi)各加入2 mL正常人的尿液,3號試管內(nèi)加2 mL大量食糖者的尿液。2號試管內(nèi)加入少量的葡萄糖。
(3)然后向3支試管分別加入剛配制好的斐林試劑2 mL。振蕩試管,使溶液混合均勻。
(4)將這3支試管放入盛有開水的大燒杯中,用酒精燈加熱煮沸2 min左右。在加熱煮沸過程中隨時仔細觀察試管中溶液顏色的變化。
(5)結(jié)果分析:1號試管不會出現(xiàn)磚紅色沉淀,2號試管出現(xiàn)磚紅色沉淀,3號試管若不出現(xiàn)磚紅色沉淀,則說明不含葡萄糖;若出現(xiàn)磚紅色沉淀,則說明該尿液中含葡萄糖。
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