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1、2022高考生物一輪總復(fù)習(xí) 生物技術(shù)實(shí)踐 練案36 微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用 新人教版選修1 一、選擇題 1．(2016·海淀質(zhì)檢)通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌的生長；在培養(yǎng)基中加入10%的酚可以抑制細(xì)菌和霉菌的生長。利用上述方法能從混雜的微生物群體中分別分離出 (　A　) ①大腸桿菌?、诿咕、鄯啪€菌　④固氮細(xì)菌 A．④②③ B．①②③ C．①③④ D．只有③④ [解析]　缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長，而固氮細(xì)菌能生長；在培養(yǎng)基中加青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌

2、等原核生物細(xì)胞壁的合成，而霉菌屬于真核生物，故能生長；在培養(yǎng)基中加入10%的酚可以抑制細(xì)菌和霉菌的生長，對(duì)放線菌的生長無影響。 2．(2016·廣州質(zhì)檢)利用農(nóng)作物秸稈為原料可生產(chǎn)乙醇，生產(chǎn)過程中可采用微生物將秸稈水解或用酶水解，基主要技術(shù)流程如下圖所示，下列相關(guān)說法錯(cuò)誤的是(　B　) 秸稈碎屑反應(yīng)罐水解壓濾出渣酒精發(fā)酵真空分餾 A．可用剛果紅染色法篩選過程①所需的纖維素分解菌 B．過程①加入的是葡萄糖苷酶 C．酒精發(fā)酵接種的酵母菌需在無氧條件下發(fā)酵 D．酒精發(fā)酵前需對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌 [解析]　篩選纖維素分解菌可采用剛果紅染色法；纖維素酶為復(fù)合酶，至少包含三種組分，C1酶

3、、Cx酶和葡萄糖苷酶；酒精發(fā)酵需在無氧條件下進(jìn)行；酒精發(fā)酵前需對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。 3．下列有關(guān)微生物培養(yǎng)與應(yīng)用的說法，正確的是(　C　) A．天然培養(yǎng)基是指直接取自自然界不需加工的培養(yǎng)基 B．接種前需對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手等進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理 C．大腸桿菌的純化培養(yǎng)過程包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個(gè)階段 D．分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源和碳源 [解析]　天然培養(yǎng)基是指用天然物質(zhì)制成的培養(yǎng)基，但也需要加工；實(shí)驗(yàn)操作者的雙手應(yīng)消毒，不能滅菌；分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源，不是碳源，需加入不含氮元素的有機(jī)物(如葡萄糖)作

4、為碳源。 4．平板劃線法和稀釋涂布平板法是接種微生物的兩種常用方法，下列描述正確的是(　D　) A．都要將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋 B．平板劃線法是將不同稀釋度的菌液通過接種環(huán)連續(xù)劃在固體培養(yǎng)基表面 C．稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng) D．都會(huì)在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落 [解析]　平板劃線法不需要進(jìn)行梯度稀釋；稀釋涂布平板法需要將不同稀釋度的菌液涂布到固體培養(yǎng)基的表面；平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。 5．做“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí)，下列敘述正確的是(　D　) A．高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí)，立即開啟鍋蓋，拿出培養(yǎng)基和工具待用

5、 B．倒平板時(shí)，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上 C．為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落 D．用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底上 [解析]　高壓滅菌加熱結(jié)束，等待壓力表指針回到零后，才能開啟鍋蓋，不能打開放氣閥使壓力表指針回到零，A錯(cuò)誤；倒平板過程中不能打開培養(yǎng)皿的皿蓋，B錯(cuò)誤；接種環(huán)火焰上灼燒后，待冷卻后才可以快速挑取菌落，C錯(cuò)誤；用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底上，D正確。 6．消毒和滅菌是兩個(gè)不同的概念，滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠(yuǎn)喪失生長繁殖的能力。消毒僅指殺死一部分對(duì)人體有害的病原菌而對(duì)被消毒的物體基本無害。下列哪些事物適用于消毒

6、處理(　A　) ①皮膚　 ②飲用水?、叟Ｄ獭、茏⑸淦鳌、菖囵B(yǎng)皿?、藿臃N環(huán)?、吲囵B(yǎng)基?、喙、後u油?、馐中g(shù)刀 A．①②③⑧⑨ B．④⑤⑥⑦⑩ C．①②④⑤⑥⑧ D．以上全部 [解析]　消毒指用比較溫和的方法殺死微生物的營養(yǎng)細(xì)胞，適用于那些不耐高溫的液體，如③牛奶、⑧果汁、⑨醬油，這樣可以使其中的營養(yǎng)成分不被破壞。 另外對(duì)要求不是很嚴(yán)格的①皮膚、②飲用水也用消毒的方法處理；而對(duì)于嚴(yán)格要求的④注射器、⑤培養(yǎng)皿、⑥接種環(huán)、⑦培養(yǎng)基、⑩手術(shù)刀等必須進(jìn)行滅菌處理。 所以，①②③⑧⑨立該用消毒的方法處理。 7．下列是關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是(　D　) A．用蒸

7、餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板 B．取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL，分別涂布于各組平板上 C．將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，37℃恒溫培養(yǎng)24～48小時(shí) D．確定對(duì)照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù) [解析]　首先要進(jìn)行培養(yǎng)基的制備、用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板，A正確；然后將土壤稀釋液涂布于各組平板上，B正確；將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，37℃恒溫培養(yǎng)24～48小時(shí)，C正確；確定對(duì)照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，再通過計(jì)算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)，D錯(cuò)誤。 8．微生物

8、培養(yǎng)過程中，要十分重視無菌操作，現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的許多方面也要進(jìn)行無菌操作，防止雜菌污染，請(qǐng)分析下列操作，錯(cuò)誤的是(　D　) ①煮沸消毒可以殺死微生物的營養(yǎng)細(xì)胞和部分芽孢 ②接種操作要在酒精燈火焰附近進(jìn)行 ③無菌繁殖脫毒苗時(shí)，植物的外植體要進(jìn)行消毒 ④家庭制作葡萄酒時(shí)要將容器和葡萄進(jìn)行滅菌 ⑤培養(yǎng)基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌 ⑥加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌 A．①③ B．②④ C．③⑤ D．④⑥ [解析]　100℃煮沸5～6 min可以殺死微生物細(xì)胞和一部分芽孢，①正確；酒精燈火焰附近存在一個(gè)無菌區(qū)，為了無菌操作，接種操作要在酒精燈火焰附近進(jìn)行，②正確；無菌繁殖脫毒苗，植物的

9、外植體要進(jìn)行消毒，③正確；葡萄制作葡萄酒利用的是附著于葡萄皮表面的野生型酵母菌，所以制作葡萄酒時(shí)葡萄不進(jìn)行滅菌，以免殺死酵母菌，④錯(cuò)誤；培養(yǎng)基的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌，⑤正確；指示劑和染料混有微生物，故加入培養(yǎng)基前需滅菌，⑥錯(cuò)誤。所以，④⑥錯(cuò)誤。 二、填空題 9．(2016·河南鄭州二模)某同學(xué)要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌，并統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，培養(yǎng)基配方如下。將各種物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL，再經(jīng)高溫滅菌，制成固體培養(yǎng)基備用。 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO47H2O 蛋白胨 葡萄糖 尿素 瓊脂 1.4 g 2.1 g 0.2 g 1

10、.0 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g (1)根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)能否分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌？__不能__(填“能”或“不能”)，原因是__培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物(培養(yǎng)基含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素)__。 (2)培養(yǎng)基用__高壓蒸汽滅菌__方法滅菌，培養(yǎng)皿用__干熱滅菌__方法滅菌，待培養(yǎng)基冷卻到__50__℃(填“20”、“30”、“40”或“50”)左右時(shí)，在__酒精燈火焰__附近倒平板，等平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，可以防止__培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基__，以免造成污染。 (3)要統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活

11、菌數(shù)目，宜采用__(稀釋)涂布平板__法接種，根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的__菌落數(shù)目__就能大約推測(cè)出樣品中活菌數(shù)。 (4)培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是__將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生__。 (5)某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均值為234，那么每克樣品中的菌落數(shù)是(涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.1mL)__2.34×109__。 [解析]　(1)據(jù)表分析，表中的蛋白胨可以為微生物的生存提供氮源，所以不能分離尿素分解菌，篩選尿素分解菌

12、，應(yīng)以尿素為唯一氮源。(2)微生物培養(yǎng)中的培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，玻璃器皿可以使用干熱滅菌。倒平板時(shí)需要培養(yǎng)基冷卻至50 ℃左右時(shí)在酒精燈火焰旁進(jìn)行，等平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，可以防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。(3)固體培養(yǎng)基上的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法適用于微生物的統(tǒng)計(jì)計(jì)數(shù)，根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)目或平均菌落數(shù)能夠推測(cè)樣品中的活菌數(shù)。(4)檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染，需要將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生，如果有菌落說明被污染，否則沒有被污染。(5)依據(jù)公式得每克樣品中菌

13、落數(shù)＝×M＝×106＝2.34×109。 10．如圖所示為分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問題： →→梯度稀釋→→ (1)圖中采集土樣時(shí)，一般選擇__纖維素__豐富的環(huán)境。圖中②過程所用的培養(yǎng)基以纖維素為唯一__碳源__，選擇培養(yǎng)的目的是__使纖維素分解菌得到增殖__。 (2)圖中③過程采用的接種方法為__稀釋涂布平板法__(填“平板劃線法”或“稀釋涂布平板法”)，所用的培養(yǎng)基中的染料是__剛果紅__，該染料能與纖維素形成__紅色__復(fù)合物。圖中④過程挑選菌落的標(biāo)準(zhǔn)是__菌落周圍有透明圈__。 (3)常采用__高壓蒸汽滅菌__法對(duì)實(shí)驗(yàn)中所用的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。 [解析

14、]　(1)纖維素分解菌大多分布在富含纖維素的環(huán)境中，選擇培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素為唯一碳源。選擇培養(yǎng)的目的是使那些能夠適應(yīng)選擇培養(yǎng)基中的營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖。(2)將樣品用稀釋涂布平板法接種到鑒別培養(yǎng)基上。剛果紅是一種染料，它可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，挑選菌落時(shí)應(yīng)選那些周圍有透明圈的菌落。(3)對(duì)培養(yǎng)基常采用的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌法。 11．(2017·山東濟(jì)寧檢測(cè))高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉嗜熱菌樣品中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示： (1)進(jìn)行①過程的目的是__稀釋__，②過程所使用的接種方法是__稀釋涂布平板__法。 (

15、2)從用途上來說，Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基屬于__選擇__培養(yǎng)基，配制時(shí)僅以__淀粉__作為唯一碳源；從物理狀態(tài)上來說，Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時(shí)應(yīng)加入__瓊脂__作為凝固劑。 (3)Ⅰ、Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基配制和滅菌時(shí)，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是__先調(diào)節(jié)pH，后滅菌__。一般對(duì)配制的培養(yǎng)基采用__高壓蒸汽滅菌__法滅菌。 (4)培養(yǎng)一段時(shí)間后，應(yīng)從Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基上挑出__透明圈大__的菌落，接種到Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基上。 [解析]　(1)分析題圖可知，①過程是梯度稀釋，目的是對(duì)樣品進(jìn)行稀釋；②過程是用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種。(2)本題實(shí)驗(yàn)的目的是篩選高效產(chǎn)生耐高溫淀粉酶的嗜熱菌，從用途上來說，Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)

16、基，本培養(yǎng)基以淀粉為唯一碳源；從物理狀態(tài)上來說，Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時(shí)應(yīng)加入瓊脂作為凝固劑。(3)培養(yǎng)基配制和滅菌時(shí)應(yīng)先調(diào)節(jié)pH，然后再進(jìn)行滅菌，如果先滅菌再凋節(jié)pH，在調(diào)節(jié)pH時(shí)會(huì)污染培養(yǎng)基；一般對(duì)配制的培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法滅菌。(4)能分解淀粉的嗜熱菌在Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基上生長時(shí)可釋放淀粉酶，分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈，透明圈越大淀粉酶的活性越強(qiáng)，所以要從Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基上挑出透明圈大的菌落，接種到Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基上。 12．牛奶是微生物培養(yǎng)的良好培養(yǎng)基，牛奶在飲前都要經(jīng)過巴氏消毒，以殺死有害微生物，為檢測(cè)消毒前后牛奶中細(xì)菌含量變化情況，做如圖所示操作。用無菌吸管從錐形瓶中吸取1

17、 mL生牛奶稀釋液至盛有9 mL無菌水的試管中，混合均勻，如此再重復(fù)2次。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題： (1)巴氏消毒的方法是__70～75_℃煮30分鐘(80_℃煮15分鐘)__，使用這種方法對(duì)生鮮牛奶進(jìn)行消毒的好處是__牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞__。 (2)取最終的牛奶稀釋液0.1mL滴在培養(yǎng)基上進(jìn)行涂布，應(yīng)選擇的涂布工具是圖中的__B__。 (3)圖中所示方法為稀釋培養(yǎng)法，理想情況下，培養(yǎng)一段時(shí)間后可在培養(yǎng)基表面形成菌落。若用該方法培養(yǎng)設(shè)置了3個(gè)培養(yǎng)皿，菌落數(shù)分別為35個(gè)、33個(gè)、34個(gè)，則可以推測(cè)生牛奶中每毫升含細(xì)菌數(shù)為__3.4×106__個(gè)，運(yùn)用這種方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往較實(shí)際值__偏小__(填“偏大”或“偏小”)，原因是__個(gè)別菌落可能是由2個(gè)或多個(gè)細(xì)菌形成的__。 (4)消毒后的牛奶中絕大部分細(xì)菌被殺死，若繼續(xù)用該方法檢測(cè)消毒后的牛奶中細(xì)菌的數(shù)量，則在操作步驟上應(yīng)做什么改動(dòng)？__稀釋次數(shù)減少__。 (5)從生牛奶取樣培養(yǎng)得到的菌落中，混有各種雜菌，從中檢測(cè)出大腸桿菌的方法是在培養(yǎng)基中加入__伊紅美藍(lán)(金屬光澤的紫)__，菌落具有__黑色__特征的可以認(rèn)定為大腸桿菌。