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1、微生物基礎(chǔ)知識(shí)及消毒與滅菌培訓(xùn),鐘平2016.10.17.,一、微生物基礎(chǔ)知識(shí),什么是微生物,微生物（microorganism,microbe）:存在于自然界中的一群體型細(xì)小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、肉眼看不見，必須借助于特殊儀器放大后才能觀察到的微小生物。,微生物的特點(diǎn),個(gè)體小、面積大：小于0.1mm。非常小的單細(xì)胞或多細(xì)胞生物，肉眼不可見。分布廣、種類多（10萬多）：自然界中到處都有，如土壤、水、空氣等,土壤中的數(shù)量最多。代謝強(qiáng)、轉(zhuǎn)化快:發(fā)酵乳糖的細(xì)菌在1小時(shí)內(nèi)可分解其自重1000-10000倍的乳糖；產(chǎn)朊假絲酵母合成蛋白質(zhì)的能力比食用公牛強(qiáng)10萬倍。生長(zhǎng)旺、繁殖快：微生物有驚人的繁殖速度，大多數(shù)微生

2、物幾十分鐘內(nèi)就可以繁殖一代。適應(yīng)性強(qiáng)、易變異：耐藥性產(chǎn)生的原因。,微生物分類,1、按其結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及生活習(xí)性可分為:原核類:僅有原始核質(zhì)，無核仁或核膜，細(xì)胞器很不完善。如細(xì)菌、放線菌、支原體、立克次氏體、衣原體、螺旋體。真核類:細(xì)胞核的分化程度較高，有核膜、核仁和染色體，細(xì)胞器完整。如真菌（酵母菌和霉菌）、原生動(dòng)物、藻類。非細(xì)胞類:體積微小，能通過除菌過濾器。如病毒和朊病毒等。,微生物分類,2.按其致病性可分為:病原性微生物:侵犯人體，引起感染甚至傳染病的微生物，或稱病原體。非病原性微生物,微生物形態(tài)結(jié)構(gòu),一、細(xì)菌細(xì)菌是一類細(xì)胞細(xì)而短、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、細(xì)胞壁堅(jiān)韌，以二分裂方式無性繁殖的原核微生物，

3、分布廣泛。1.細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)球菌多數(shù)球菌直徑在1微米左右，外觀呈球形或近似球形。由于繁殖時(shí)分裂平面不同可形成不同的排列方式分為雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌等。桿菌形態(tài)多數(shù)呈直桿狀，也有的菌體稍彎，多數(shù)呈分散存在也有的呈鏈狀排列，分為棒狀桿菌、鏈狀桿菌、球桿菌等。螺形菌菌體彎曲呈弧形或螺旋形。如幽門螺桿菌。細(xì)菌雖小，仍具有一定的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)是細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)。,微生物的主要類群：球菌,鏈球菌,葡萄球菌,微生物的主要類群：桿菌,大腸桿菌,沙門氏菌,微生物的主要類群：弧狀菌,2.細(xì)菌的繁殖速度：細(xì)菌生長(zhǎng)速度很快，一般約20min完成一代繁殖。方式：二分裂繁殖。,細(xì)菌的繁殖

4、：二分裂繁殖,二、真菌,真菌是一類有細(xì)胞壁，無葉綠素，以寄生或腐生方式生存，少數(shù)為單細(xì)胞，多數(shù)為多細(xì)胞，能進(jìn)行無性或有性繁殖的一類真核細(xì)胞型微生物。真菌包括單細(xì)胞與多細(xì)胞兩類。單細(xì)胞真菌呈圓形或卵圓形，稱為酵母菌；多細(xì)胞真菌由菌絲和孢子組成，并交織成團(tuán)稱絲狀菌或霉菌。,微生物的主要類群：絲狀真菌,真菌生長(zhǎng)的最適的溫度為22-28，最適的pH值為4-6。其繁殖能力強(qiáng)，但生長(zhǎng)速度比細(xì)菌慢，常需1-4周才形成菌落。真菌對(duì)熱的抵抗力不強(qiáng)，一般加熱60701小時(shí)即被殺死，但對(duì)干燥、日光、紫外線和一些化學(xué)消毒劑有抵抗力，但對(duì)2.5%碘酒、10%甲醛則較敏感。,二、真菌,酵母菌的繁殖：出芽生殖,土壤真菌放線

5、菌絲狀真菌真菌-蘑菇,真菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)多細(xì)胞,霉菌霉菌曲霉菌真菌-子囊孢子,三、病毒,病毒屬非細(xì)胞型微生物，在自然界分布非常廣泛，可在人、動(dòng)物、植物、真菌和細(xì)菌中寄居并引起感染。病毒是體積最小、結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的微生物，它僅有一種核酸（DNA或RNA）作其遺傳物質(zhì)。病毒必須在宿主活細(xì)胞內(nèi)寄生，依靠細(xì)胞提供的能量、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及生物大分子合成機(jī)制，完成病毒的復(fù)制過程。病毒與人類的關(guān)系極為密切，人類的傳染病約75%是由病毒引起的。有些病毒傳染性強(qiáng)，可引起世界大流行（如流感、艾滋病等）。,微生物的分布,土壤：是微生物生活的最適環(huán)境。水：僅次于土壤，是微生物分布、定居的第二場(chǎng)所?？諝猓嚎諝庵械奈⑸镏饕獊碓从趲?/p>

6、有微生物菌體及孢子的灰塵，這類微生物大多數(shù)是腐生性的；還來源于人和動(dòng)物，它們大多數(shù)是通過呼吸道排出的，其中也包含有病原微生物，懸浮在大氣中。,人體中的微生物,人自出生后,外界的微生物就逐漸進(jìn)入人體。在正常人體皮膚、粘膜及外界相通的各種腔道（如口腔、鼻咽腔、腸道和泌尿道等）部位，存在著對(duì)人體無害的微生物群（包括細(xì)菌、真菌、螺旋體、支原體等）稱為正常菌群。能使宿主致病的為致病菌或病原菌；不能造成宿主感染的為非致病菌或非病原菌；有些細(xì)菌在正常情況下并不致病，但當(dāng)在某些條件改變的特殊情況下可以致病，這類菌稱為條件致病菌或機(jī)會(huì)致病菌。,微生物的作用與危害,1.微生物的作用絕大多數(shù)微生物對(duì)人和動(dòng)物是有益的

7、，已廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、食品、醫(yī)藥、釀造、化工、制革、石油等行業(yè)發(fā)揮了越來越重要的作用。例如與我們?nèi)粘Ｉ蠲芮邢嚓P(guān)的如酸奶、酒類、抗生素、疫苗等。,微生物的益處,啤酒，葡萄酒的生產(chǎn)面包酵母的生產(chǎn)奶酪的生產(chǎn)醋的生產(chǎn)酸奶的生產(chǎn)維生素的生產(chǎn)類固醇的生產(chǎn)抗菌素、干擾素的生產(chǎn),分解廢物，循環(huán)利用幫助腸道中的食物消化除蟲,2.微生物的危害微生物中也有一部分能引起人及動(dòng)、植物發(fā)生病害，這些具有致病性的微生物，稱為病原微生物。如人類的許多傳染?。ǜ忻啊?、痢疾、結(jié)核、病毒性肝炎等）均是由病原微生物引起的。,化妝品的微生物污染,污染:,污染就是指當(dāng)某物與不潔凈的或腐壞物接觸或混合在一起使該物變的不純凈或不適用時(shí)，

8、即受污染。簡(jiǎn)單的說當(dāng)一個(gè)產(chǎn)品中存在不需要的物質(zhì)時(shí)，他即受到了污染。,化妝品的微生物污染,為什么要控制微生物對(duì)化妝品污染？化妝品本身性狀乃至質(zhì)量發(fā)生變化。有些微生物可以致病，我們不能讓我們的顧客有感染致病微生物的潛在危險(xiǎn)。,化妝品的微生物污染,化妝品微生物指標(biāo)是評(píng)價(jià)化妝品成品及原料中的微生物質(zhì)量極其對(duì)人類健康和化妝品質(zhì)量影響的重要內(nèi)容?；瘖y品受微生物污染后可使化妝品的色、形、氣味等發(fā)生變化，品質(zhì)下降。致病菌的污染可導(dǎo)致人體健康損害，如化膿性細(xì)菌污染可引起皮膚和眼部的感染。當(dāng)人體抵抗力低時(shí)，某些非病原菌或條件致病菌也會(huì)引起感染。,化妝品微生物污染,微生物的有毒代謝產(chǎn)物可使人中毒。即使污染的微生物被

9、殺滅，其殘存的菌酶也可能會(huì)引起產(chǎn)品變質(zhì)，變質(zhì)時(shí)分解的某些組分可對(duì)皮膚產(chǎn)生刺激作用。因此化妝品的微生物污染不僅影響化妝品的質(zhì)量，而且影響產(chǎn)品的使用安全。對(duì)化妝品進(jìn)行微生物檢驗(yàn)是十分必要的。,化妝品微生物指標(biāo),菌落總數(shù)霉菌和酵母菌糞大腸菌群銅綠假單胞菌金黃色葡萄球菌,化妝品的微生物污染源,生產(chǎn)操作人員原輔料（水）空氣廠房與設(shè)備包裝材料昆蟲和其它嚙齒動(dòng)物,如何防止污染？,有需要時(shí)要洗手及消毒盡量減少直接以雙手接觸化妝品接觸化妝品的表面、用具用后清洗消毒轉(zhuǎn)換產(chǎn)品時(shí)清洗消毒,主要的微生物污染源生產(chǎn)人員,要勤洗手及消毒盡量減少直接以雙手接觸化妝品進(jìn)入潔凈區(qū)要遵守更衣程序,手的衛(wèi)生,每只手可攜帶40萬個(gè)細(xì)菌

10、；剛洗過的手，每平方厘米也可檢驗(yàn)出3200個(gè)細(xì)菌。皮膚表面110萬個(gè)細(xì)菌/1cm2。,洗手的重要性:,用流水（如自來水）洗手，能使手上的致病微生物減少80%；用皂液充分洗手，再用自來水沖洗能使致病微生物減少95%。洗手后正確使用消毒劑能使致病微生物減少99%。,洗手的正確方法,正確洗手的步驟：,1.手心搓手心；2.手指交叉，手心搓手背；3.手指交叉；手心搓手心4.兩手互握，相互搓背5.手心搓拇指；6.指尖搓手心。,更衣,更衣,標(biāo)準(zhǔn)更衣程序：一更：脫衣?lián)Q鞋洗手二更：穿潔凈服/戴帽子/戴口罩緩沖：消毒雙手潔凈區(qū).,更衣,著衣種類測(cè)定日期細(xì)菌數(shù)/10CM2上衣內(nèi)側(cè)使用五日后300外側(cè)使用五日后200

11、褲子內(nèi)側(cè)使用五日后450外側(cè)使用五日后70帽子內(nèi)側(cè)使用五日后100外側(cè)使用五日后150口罩內(nèi)側(cè)使用一日后22000外側(cè)使用一日后100襪子內(nèi)側(cè)使用一日后30000外側(cè)使用一日后2800,更衣的目的：,想混進(jìn)去，沒門！,主要的微生物污染源-人員,No,Yes,人員不良行為所產(chǎn)生的污染:,當(dāng)有如下行為時(shí)將相應(yīng)增加微粒的產(chǎn)生量:-吸煙者的呼吸500%噴嚏2000%搓手200%行走200%跺腳5000%,主要的微生物污染源-空氣,懸浮粒子微生物-浮游菌-沉降菌-表面微生物,主要的微生物污染源-水,飲用水純化水注射用水無菌注射用水,自來水,工藝用水,主要的微生物污染源-設(shè)備,幾乎沒有細(xì)菌不“吃”的東西及

12、時(shí)清洗消毒設(shè)備和器具與化妝品直接接觸設(shè)備和器具清洗和存放設(shè)備、器具處應(yīng)與生產(chǎn)區(qū)域潔凈等級(jí)相同,主要的微生物污染源-原輔料,包括厡輔料、內(nèi)包裝材料-厡輔料微生物-內(nèi)包裝材料微生物符合國(guó)標(biāo)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)厡輔料、內(nèi)包裝材料的貯存：-包裝嚴(yán)密，不得破損，污染。-清潔貯存。,二、消毒與滅菌,常用術(shù)語,1.消毒(disinfection)殺滅物體或環(huán)境中的病原微生物。但不一定能殺死細(xì)菌芽胞或非病原微生物的方法。用以消毒的藥品稱為消毒劑。,2.滅菌(sterilization)殺滅物體上所有微生物的方法。包括殺滅細(xì)菌芽胞在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。,消毒與滅菌概念的鑒別,消毒相對(duì)的，不一定達(dá)到無菌的要求

13、。滅菌絕對(duì)的，一定達(dá)到無菌的要求。,3.抑菌(bacteriostasis)抑制人體內(nèi)部或外部細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法。常用的抑菌劑為各種抗生素。,4.防腐(antisepsis)體外防止或抑制細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法。用以防腐的藥品稱為防腐劑。5.無菌(asepsis)不存在任何活菌、多是滅菌的結(jié)果。,熱力滅菌法輻射殺菌法濾過除菌法超聲波殺菌法干燥與低溫抑菌法,物理消毒滅菌法,物理消毒滅菌法一、熱力滅菌法高溫對(duì)細(xì)菌具有明顯的致死作用，因此最常用于消毒和滅菌。分為干熱滅菌和濕熱滅菌兩大類。,（一）干熱滅菌法殺菌作用是通過脫水干燥和大分子變性。1.焚燒用于廢棄物品或動(dòng)物尸體等2.燒灼用于微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的接種

14、環(huán)、試管口等的滅菌。,3.干烤利用干烤箱滅菌（160170C，2h）適用于高溫下不變質(zhì)、不損壞、不蒸發(fā)的物品4.紅外線是一種0.71000m波長(zhǎng)的電磁波，尤以110m波長(zhǎng)的熱效應(yīng)最強(qiáng)。熱效應(yīng)只能在照射到的表面產(chǎn)生。多用于醫(yī)療器械的滅菌。,（二）濕熱滅菌法最常用，效果優(yōu)于干熱滅菌法。理由：濕熱中細(xì)菌菌體蛋白質(zhì)較易凝固變性。濕熱滅菌時(shí)，菌體吸收水分，蛋白質(zhì)含水愈多，凝固所需溫度降低。濕熱的穿透力比干熱大，可使被滅菌物品內(nèi)部溫度迅速上升。濕熱的蒸氣有潛熱效應(yīng)存在。這種潛熱迅速提高被滅菌物體的溫度。,干熱滅菌與濕熱滅菌穿透力及滅菌效果比較,1.巴氏消毒法用較低溫度殺滅液體中的病原菌或特定微生物、保持物

15、品中所需不耐熱成分不被破壞的消毒方法。用于消毒牛乳、酒類（61.162.8C，30min或71.7C，1530s）。,2.煮沸法100C，5min殺死細(xì)菌繁殖體100C，12h殺滅細(xì)菌芽胞加入2%的碳酸氫鈉，促進(jìn)芽胞的殺滅，防止金屬器皿生銹，一般用于食具、刀剪、注射器的消毒。3.流動(dòng)蒸氣消毒法利用1個(gè)大氣壓下100C的水蒸氣進(jìn)行消毒。細(xì)菌繁殖體1530min可被殺滅。但芽胞不被全部殺滅,4.間歇蒸氣滅菌法利用反復(fù)多次的流動(dòng)熱蒸氣間歇加熱以達(dá)到滅菌的目的。100C，1530min，37C孵箱過夜*3次適用于一些不耐熱的含糖、牛奶等培養(yǎng)基。,5.高壓蒸氣滅菌法滅菌效果最好。高壓蒸氣滅菌器是一個(gè)密閉

16、、耐高壓蒸鍋。103.4kPa（1.05kg/cm2）溫度可達(dá)121.3C，1530min，可殺滅包括細(xì)菌芽胞在內(nèi)的所有微生物。常用于一般培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)敷料等耐高溫、耐濕物品的滅菌。利用水的沸點(diǎn)隨水蒸汽壓力的增加而上升的原理,6.超高溫殺菌（UHT）：135150和28s對(duì)牛乳或其他液態(tài)食品（如果汁及果汁飲料、豆乳、茶、酒及礦泉水等）最大優(yōu)點(diǎn)是既能殺死產(chǎn)品中的微生物，又能較好地保持食品品質(zhì)與營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。,二、輻射殺菌法1.紫外線（1）波長(zhǎng)240300nm的紫外線具有殺菌作用，其中以260266nm最強(qiáng)。（2）主要作用于DNA，形成二聚體，干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致細(xì)菌的變異或死亡。,（

17、3）紫外線穿透力較弱，一般只用于手術(shù)室等的空氣消毒，或用于不耐熱物品的表面消毒。（4）紫外線對(duì)人體皮膚、眼睛有損傷作用。（5）紫外線燈距離照射物以不超過1.2m為宜,2.電離輻射（包括高速電子、射線和射線）具有較高的能量和穿透力，對(duì)微生物有致死作用。常用于大量一次性醫(yī)用塑料制品的消毒；亦可用于食品、藥品和生物制品的消毒或滅菌。,3.微波波長(zhǎng)為11000mm的電磁波可穿透玻璃、陶瓷和薄塑料等物質(zhì)，但不能穿透金屬表面。主要用于食品、非金屬器械、檢驗(yàn)室用品、無菌室和病房中食品用具、藥杯及其他用品的消毒。,機(jī)制,利用特殊的濾器以去除液體或空氣中的細(xì)菌，以達(dá)到無菌目的。,用途,主要用于不耐高溫?zé)o菌的血清

18、、毒素、抗生素、藥液，以及空氣的除菌。,特點(diǎn),僅能除去細(xì)菌，不能去除病毒、支原體、衣原體和有些L型細(xì)菌等。,三.濾過除菌法,不被人耳感受的高于20kHz/s的聲波，稱為超聲波。超聲波可裂解多數(shù)細(xì)菌，尤其是G-菌。主要用于粉碎細(xì)胞，以提取細(xì)胞組分或制備抗原等。,四、超聲波消毒法,五、干燥和低溫抑菌法有些細(xì)菌的繁殖體在空氣中干燥時(shí)會(huì)很快死亡。低溫可使細(xì)菌的新陳代謝減慢，故常用作保存細(xì)菌菌種為避免解凍時(shí)對(duì)細(xì)菌的損傷，可在低溫狀態(tài)下真空抽去水分，此方法稱為冷凍真空干燥法。該法是目前保存菌種的最好方法。,化學(xué)消毒滅菌法用于防腐、消毒甚至滅菌的化學(xué)藥物稱為化學(xué)消毒劑。只能外用或用于環(huán)境的消毒。,化學(xué)消毒劑

19、的殺菌機(jī)制：促進(jìn)菌體蛋白質(zhì)變性或凝固如酚類（高濃度）、醇類、重金屬鹽類（高濃度）、酸堿類、醛類；干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝，破壞蛋白與核酸的基團(tuán)，如某些氧化重金屬鹽類（低濃度）與細(xì)菌蛋白的-SH基結(jié)合；,損傷細(xì)菌的細(xì)胞膜如酚類（低濃度）、表面活性劑、脂溶劑等能降低細(xì)菌菌膜和病毒包膜的表面張力并增加其通透性。,消毒劑的種類：酚類、醇類、重金屬鹽類、氧化劑、表面活性劑、烷化劑。消毒劑的應(yīng)用：皮膚、粘膜、飲水、廁所、空氣、手、病人排泄物與分泌物.,消毒劑的主要類型及應(yīng)用,影響消毒滅菌效果的因素一、消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間1.理化性質(zhì)不同，對(duì)微生物的作用大小各異。2.同一種消毒劑的濃度不同，其消毒效果也不同。一般消毒劑在高濃度時(shí)殺菌作用大（醇類例外）。3.消毒劑在一定濃度下，對(duì)細(xì)菌的作用時(shí)間越長(zhǎng)，消毒效果也愈好。,二、微生物的種類與數(shù)量1.不同微生物對(duì)不同化學(xué)消毒劑的敏感性不同。2.同一消毒劑對(duì)不同微生物的殺菌效果不同。3.微生物的數(shù)量越大，所需消毒的時(shí)間就越長(zhǎng),三、溫度消毒劑的殺菌作用實(shí)質(zhì)是化學(xué)反應(yīng)，其反應(yīng)速度隨溫度升高而加快。因此，溫度升高可提高消毒效果。,四、酸堿度消毒劑的殺菌作用受酸堿度的影響。（戊二醛溶液中加入碳酸氫鈉后才有殺菌作用。）五、有機(jī)物環(huán)境中有機(jī)物的存在，能夠影響消毒劑的效果,謝謝大家！,