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固定化酶和固定化細(xì)胞

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1、第四章 固定化酶和固定化細(xì)胞 ( 2學(xué)時(shí)) 主要內(nèi)容: 1 固定化酶的定義與優(yōu)點(diǎn) 2 酶固定化技術(shù)發(fā)展史 3 固定化酶的制備方法 4 固定化酶的特性 5 固定化活細(xì)胞 6 酶催化反應(yīng)器及其類型 游離酶的使用 蒸汽 酶解罐簡(jiǎn)易圖 加熱滅酶 酶無法回收 穩(wěn)定性差 1 固定化酶的定義與優(yōu)點(diǎn) 所謂固定化酶 (immobilized enzyme), 是 指在一定的空間范圍內(nèi)起催化作用 , 并能 反復(fù) 和連 續(xù) 使用的酶 。 固定化酶的優(yōu)點(diǎn): ( 1) 同一批固定化酶能在工藝流程中 重復(fù)多次地使用 ; ( 2) 固定化后 , 和反應(yīng)物分開 , 有利于控制生產(chǎn)過程 , 同時(shí)也 省去了熱處理使酶失活的步驟

2、; ( 3) 穩(wěn)定性顯著提高 ; ( 4) 可長(zhǎng)期使用 , 并可預(yù)測(cè)衰變的速度; ( 5) 提供了 研究酶動(dòng)力學(xué)的良好模型 。 2 酶固定化技術(shù)發(fā)展史 起始研究 1916年 系統(tǒng)研究 1950年 - 工業(yè)化應(yīng)用 1969年 - 1916年 , Nelson和 Griffin將蔗糖酶吸附在骨炭粉上 , 吸附以后酶不溶于水且具有和液體酶同樣的活性 , 實(shí) 現(xiàn)了酶的固定化 , 可惜長(zhǎng)期未得到重視 。 1953年 Grubhofer和 Schleith將聚氨基苯乙烯樹脂重 氮化 , 然后將淀粉酶等與這種載體結(jié)合 , 制成了固定 化酶 。 60年代后期 , 酶固定化技術(shù)迅速發(fā)展 , 出現(xiàn)了 很多新的酶固

3、定化方法 。 1969年,千畑一郎等將固定化氨基酰化酶應(yīng)用于 DL-氨基酸的光學(xué)拆分上,來生產(chǎn) L-氨基酸, 開創(chuàng)了 固定化酶應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)的先例 。 1973年,將固定 化微生物細(xì)胞首次應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)。 目前 , 固定化技術(shù)已經(jīng)取得了許多重要成果 , 充分發(fā)揮了 固定化酶和固定化細(xì)胞在改革工藝和降低成本方面的巨大 潛力 。 但從目前的發(fā)展?fàn)顩r來看 , 盡管酶種類繁多 , 但已經(jīng)固定 化的酶卻相對(duì)有限 , 采用固定化酶技術(shù)大規(guī)模生產(chǎn)的企業(yè) 尚屬少數(shù) , 真正在工業(yè)上使用的固定化酶還僅限于 葡萄糖 異構(gòu)酶 、 葡萄糖氧化酶和青霉素?;?等為數(shù)不多的 十幾 個(gè)酶種 , 故仍需大力研究開發(fā)使更多的

4、固定化酶和細(xì)胞能 適用于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn) 。 應(yīng)用現(xiàn)狀: 3 固定化酶的制備方法 酶的固定化方法主要可分 為四類:吸附法 、 包埋法 、 共價(jià)鍵結(jié)合法和交聯(lián)法 。 對(duì)于特定的目標(biāo)酶 , 要根 據(jù)酶自身的性質(zhì) 、 應(yīng)用目 的 、 應(yīng)用環(huán)境來選擇固定 化載體和方法 。 在具體選擇時(shí),一般應(yīng)遵循以下 6個(gè)原則。 ( 1) 酶與載體的結(jié)合部位不應(yīng)當(dāng)是酶的活性部位 , 固 定化時(shí)應(yīng)采取盡可能溫和的條件 。 ( 2) 酶與載體必須有一定的結(jié)合程度 , 利于反復(fù)使用 。 ( 3) 用于固定化的載體必須 有一定的機(jī)械強(qiáng)度 , 不易 破壞或受損 。 ( 4) 固定化應(yīng)盡可能不妨礙酶與底物的接近 , 以提高 催化效率

5、和產(chǎn)物的量 。 ( 5) 所選載體應(yīng)不和底物 、 產(chǎn)物或反應(yīng)液發(fā)生化學(xué)反 應(yīng) 。 ( 6) 固定化酶的成本適中 , 以利于工業(yè)使用 。 3.1吸附法 吸附法是通過載體表面和酶分子表面間的次級(jí)鍵 相互作用而達(dá)到固定目的的方法 , 是固定化中最 簡(jiǎn)單的方法 。 酶與載體之間的親和力是范德華力 、 疏水相互作 用 、 離子鍵和氫鍵等 。 吸附法又可分為物理吸附法和離子吸附法 。 物理吸附法是通過 物理方法 將酶直接吸附在水不溶性載體 表面上而使酶固定化的方法 。 是制備固定化酶最早采用的 方法 。 常用的載體:纖維素 、 膠原 、 淀粉及面筋 、 活性炭 、 氧化 鋁 、 皂土 、 多孔玻璃 、 硅

6、膠 、 二氧化鈦 、 羥基磷灰石等 。 優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)單 、 價(jià)廉 、 條件溫和 , 載體可反復(fù)使用 , 酶 與載體結(jié)合后 , 活性部位及空間構(gòu)象變化不大 , 固定化酶 活力較高 。 缺點(diǎn):酶和載體結(jié)合不牢固 , 在使用過程中容易脫落 , 常 與交聯(lián)法結(jié)合使用 。 ( 1)物理吸附法 離子吸附法 (ion adsorption)是 將酶與含有離子 交換基團(tuán)的水不溶性載體以靜電作用力相結(jié)合的 固定化方法 , 即通過離子鍵使酶與載體相結(jié)合的 固定化方法 。 DEAE-纖維素吸附的 -淀粉酶 、 蔗糖酶已作為商 品固定化酶 。 具有操作簡(jiǎn)便 、 條件溫和 、 酶活力不易喪失等優(yōu) 點(diǎn) 。 此外 , 吸附

7、過程同時(shí)可以純化酶 。 ( 2)離子吸附法 3.2包埋法 包埋法是將 酶包埋在高聚物的細(xì)微凝膠網(wǎng)格中或 高分子半透膜內(nèi)的固定化方法 。 前者又稱為凝膠 包埋法 , 酶被包埋成網(wǎng)格型;后者又稱為微膠囊 包埋法 , 酶被包埋成微膠囊型 。 ( 1)凝膠包埋法 凝膠包埋法常用的載體 有 海藻酸鈉 凝膠 、 角叉 菜膠 、 明膠 、 瓊脂凝膠 、 卡拉膠等天然凝膠以及 聚丙烯酰胺 、 聚乙烯醇 和光交聯(lián)樹脂等合成凝 膠或樹脂 。 1-2%海藻酸鈉 +酶液 E E E E 5%CaCl2溶液 ( 2)微膠囊包埋法 微膠囊包埋即將酶包埋在各種高聚物制成的半 透膜微膠囊內(nèi)的方法 。 它使酶存在于類似細(xì)胞內(nèi)的

8、環(huán)境中 , 可以防止 酶的脫落 , 防止微囊外的環(huán)境直接接觸 , 從而 增加了酶的穩(wěn)定性 。 常用于制造微膠囊的材料有聚酰胺 、 火棉膠 、 醋酸纖維素等 。 適合于 小分子 為底物和產(chǎn)物的酶的固定化 。 如 脲酶 、 天冬酰胺酶 、 尿酸酶 、 過氧化氫酶等 。 3.3共價(jià)鍵結(jié)合法 共價(jià)鍵結(jié)合法 (covalent binding) 是 將酶與 聚合物載體以共價(jià)鍵結(jié)合的固定化方法 。 酶蛋 白上可供載體結(jié)合的功能基團(tuán)有以下幾種: ( 1) 酶蛋白 N末端的 -氨基或賴氨酸殘基的 -氨基 。 ( 2) 酶蛋白 C末端的 -羧基 、 天門冬氨酸殘基的 -羧 基以及谷氨酸殘基的 -羧基 。 ( 3

9、) 半胱氨酸殘基的 巰基 。 ( 4) 絲氨酸 、 蘇氨酸和酪氨酸殘基的羥基 。 ( 5) 組氨酸殘基的咪唑基 。 ( 6) 色氨酸殘基的吲哚 基 。 ( 7) 苯丙氨酸和酪氨酸殘基的苯環(huán) 。 其中最普遍的共價(jià)鍵結(jié)合基團(tuán)是 氨基 、 羧基以及 苯環(huán) 。 常用來和酶共價(jià)偶聯(lián)的載體的功能基團(tuán)有 芳香氨基 、 羥基 、 羧基和羧甲基等 。 這種方法是 固定化酶研究中最活躍的一大類方法 , 但必須注意 , 參加共價(jià)結(jié)合的氨基酸殘基應(yīng)當(dāng)是 酶催化活性非必需基團(tuán) , 如若共價(jià)結(jié)合包括了酶 活性中心有關(guān)的基團(tuán) , 會(huì)導(dǎo)致酶的活力損失 。 用共價(jià)鍵結(jié)合法制備的固定化酶 , 酶和載體之間都是通過 化學(xué)反應(yīng)以共價(jià)

10、鍵偶聯(lián) 。 由于共價(jià)鍵的鍵能高 , 酶和載體 之間的結(jié)合相當(dāng)牢固 , 即使用高濃度底物溶液或鹽溶液 , 也不會(huì)使酶分子從載體上脫落下來 , 具有酶 穩(wěn)定性好 、 可 連續(xù)使用較長(zhǎng)時(shí)間的優(yōu)點(diǎn) 。 但是采用該方法時(shí) , 載體活化的難度較大 , 操作復(fù)雜 , 反 應(yīng)條件較劇烈 , 制備過程中酶直接參與化學(xué)反應(yīng) , 易引起 酶蛋白空間構(gòu)象變化 , 酶活回收率一般為 30%左右 , 甚 至酶的底物的專一性等性質(zhì)也會(huì)發(fā)生變化 , 往往需要嚴(yán)格 控制操作條件才能獲得活力較高的固定化酶 。 3.4交聯(lián)法 交聯(lián)法 ( cross-linking) 是 使用雙功能或多功能試劑使酶 分子之間相互交聯(lián)呈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的固定

11、化方法 。 由于酶蛋白的功能團(tuán) , 如氨基 、 酚基 、 巰基等參與反應(yīng) , 所 以酶的活性中心構(gòu)造可能受到影響 , 使酶明顯失活 。 常用的雙功能試劑有戊二醛 、 己二胺 、 異氰酸衍生物 、 雙偶 氮聯(lián)苯和 N,N-乙烯雙順丁烯二酰亞胺等 , 其中使用最廣泛 的是戊二醛 。 戊二醛和酶蛋白中的游離氨基發(fā)生 Schiff反應(yīng) , 形成薛夫堿 , 從而使酶分子之間相互交聯(lián)形成固定化酶 。 以上四種固定化酶方法各有其優(yōu)缺點(diǎn) ( 見表 4-1) 。 往往一種酶可以用 不同方法固定化 , 但沒有一種固定化方法可以普遍地適用于每一種酶 。 在實(shí)際應(yīng)用時(shí) , 常將兩種或數(shù)種固定化方法并用 , 以取長(zhǎng)補(bǔ)短

12、 。 4 固定化酶的特性 4.1固定化酶的形狀 固定化酶的形式多樣 , 依不同用途有顆粒 、 線 條 、 薄膜和酶管等形狀 。 其中 顆粒占絕大多數(shù) , 它和線條主要用于工業(yè) 發(fā)酵生產(chǎn) , 如裝成酶柱用于連續(xù)生產(chǎn) , 或在反 應(yīng)器中進(jìn)行批式攪拌反應(yīng); 薄膜主要用于酶電極 , 應(yīng)用于分析化學(xué); 酶管機(jī)械強(qiáng)度較大 , 亦宜用于工業(yè)生產(chǎn) 。 4.2酶活力 固定化酶的活力在多數(shù)情況下比天然酶的活力 低 , 其原因可能是: 酶活性中心的重要氨基酸殘基與水不溶性載體相 結(jié)合; 當(dāng)酶與載體結(jié)合時(shí) , 它的高級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化; 酶與底物間的相互作用受到空間位阻的影響 。 也有在個(gè)別情況下 , 酶經(jīng)固定化后其活

13、力升高 , 可能 是由于固定化后酶的抗抑能力提高使得它反而比游離 酶活力高 。 4.3固定化酶的穩(wěn)定性 1) 操作穩(wěn)定性 一般情況下,半衰期在一個(gè)月以上,即有工業(yè)應(yīng)用價(jià)值。 3)熱穩(wěn)定性 大多數(shù)酶在固定化后,熱穩(wěn)定性提高,但有些酶采用吸附法固定化時(shí)會(huì)降低。 2) 貯藏穩(wěn)定性 可延長(zhǎng)酶的貯藏有效期。如果貯藏條件 比較好,亦可較長(zhǎng)時(shí)間保持活力。 4)對(duì)蛋白酶的 穩(wěn)定性 由于酶固定化后受到空間位阻的影響, 蛋白酶不能有效接觸,因此抵抗力提高。 5)酸堿 穩(wěn)定性 多數(shù)固定化酶的酸堿穩(wěn)定性提高。極少 數(shù)酶固定化后由于酶活性構(gòu)象的敏感區(qū)受 到牽連導(dǎo)致穩(wěn)定性下降。 4.4固定化酶的反應(yīng)特性 固定化酶的反應(yīng)特

14、性 , 例如 , 底物特異性 、 酶反應(yīng)的 最適 pH、 酶反應(yīng)的最適溫度 、 動(dòng)力學(xué)常數(shù) 、 最大反應(yīng) 速度等均與游離酶有所不同 。 ( 1)底物特異性 固定化酶的底物特異性與底物分子量的大小有一定關(guān)系。 一般來說, 當(dāng)酶的底物為小分子化合物時(shí),固定化酶的 底物特異性大多數(shù)情況下不發(fā)生變化。 而當(dāng)酶的底物為大分子化合物時(shí) , 如蛋白酶 、 -淀粉酶 、 磷酸二酯酶等 , 一般隨著底物分子量的增大 , 固定化酶 的活力下降 。 這是由于載體引起的 空間位阻作用 , 使大分子底物難以 與酶分子接近而無法進(jìn)行催化反應(yīng) , 酶的催化活力難以 發(fā)揮出來 , 催化活性大大下降 。 例如 , 糖化酶用 C

15、MC疊氮衍生物固定化時(shí) , 對(duì)分子量 8000的直鏈淀粉的活性為游離酶的 77 , 而對(duì)分子量 為 50萬的直鏈淀粉的活性只有 15% 17 。 ( 2)反應(yīng)的最適 pH 酶被固定后 , 其最適 pH和 pH曲線常會(huì)發(fā)生偏 移 。 一般來說 , 產(chǎn)物為酸性時(shí) , 固定化酶的最適 pH與游離酶相比升高;產(chǎn)物為堿性時(shí) , 固定 化酶的最適 pH與游離酶相比降低 。 ( 3)反應(yīng)的最適溫度 固定化酶的最適反應(yīng)溫度多數(shù)較游離酶高 。 如色氨酸酶經(jīng)共價(jià)結(jié)合后最適溫度比固定前提 高 5 15 , 但也有不變甚至降低的 。 固定化 酶的作用最適溫度會(huì)受固定化方法以及固定化 載體的影響 。 ( 4)米氏常數(shù)

16、酶經(jīng)固定化后 , 酶蛋白分子的高級(jí)結(jié)構(gòu)的變化 以及載體電荷的影響可導(dǎo)致底物和酶的親合力 的變化 。 使用載體結(jié)合法制成的固定化酶 Km有時(shí)變動(dòng) 的原因 , 主要是由于載體與底物間的靜電相互 作用的緣故 。 ( 5)最大反應(yīng)速度 固定化酶的最大反應(yīng)速度與游離酶大多數(shù)是相同 的 。 有些酶的最大反應(yīng)速度會(huì)因固定化方法的 不同而有所差異 。 5 固定化活細(xì)胞 20世紀(jì) 70年代 , 在固定化酶的基礎(chǔ)上科學(xué)家們研制成固 定化細(xì)胞 ( Immobilized Cell) , 并且用于生產(chǎn) 。 直接固定那些含有所需胞內(nèi)酶的細(xì)胞 , 并且利用這樣的細(xì) 胞來催化化學(xué)反應(yīng) 。 70年代末 , 法國(guó)研究成功固定化

17、細(xì)胞生產(chǎn)啤酒 , 80年代 初我國(guó)居乃琥等用固定化細(xì)胞批量生產(chǎn)啤酒和酒精取得重 要研究成果 。 固定化細(xì)胞按其生理狀態(tài)又可分為固定化死細(xì)胞和活細(xì)胞 兩大類 。 固定化細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn): 固 定 化 活 細(xì) 胞 優(yōu)點(diǎn) 缺點(diǎn) 必須保持菌體的完整 , 防止菌體的自溶 , 否則 影響產(chǎn)物的純度; 必須抑制細(xì)胞內(nèi)蛋白 酶對(duì)目的酶的分解; 胞內(nèi)多酶的存在 , 會(huì) 形成副產(chǎn)物; 載體 、 細(xì)胞膜或細(xì)胞 壁會(huì)造成底物滲透與擴(kuò) 散的障礙等 。 無需進(jìn)行酶的分離和 純化 , 減少酶活損失 , 降 低成本; 可進(jìn)行多酶反應(yīng) , 且不 需添加輔助因子; 活細(xì)胞保持了酶的原始 狀態(tài) , 穩(wěn)定性更高 , 對(duì)污 染的抵抗力

18、更強(qiáng); 細(xì)胞生長(zhǎng)停滯時(shí)間短 , 細(xì)胞多 , 反應(yīng)快等等 。 物理吸附法 包埋法 6 酶催化反應(yīng)器及其類型 以酶為催化劑進(jìn)行反應(yīng)所需要的設(shè)備稱 之為酶催化反應(yīng)器,簡(jiǎn)稱 酶反應(yīng)器 。 6.1酶反應(yīng)器的類型 酶反應(yīng)器有兩種類型: 一類是直接用游離酶進(jìn)行反應(yīng) , 即均相酶反應(yīng)器; 另一類是應(yīng)用固定化酶進(jìn)行的非均相酶反應(yīng)器 。 均相酶反應(yīng)能在批量式攪拌桶反應(yīng)器或超濾膜反應(yīng)器中進(jìn) 行 , 而非均相酶反應(yīng)則可在多種反應(yīng)器中進(jìn)行 , 適用于連 續(xù)催化反應(yīng) , 包括: 連續(xù)流攪拌桶反應(yīng)器 、 填充床反應(yīng)器 、 流化床反應(yīng)器 、 連續(xù)攪拌桶 -超濾和循環(huán)式反應(yīng)器等 。 6.2反應(yīng)器的結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 這類反應(yīng)器結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單

19、, 造價(jià)較低 , 傳 質(zhì)阻力很小 , 反應(yīng)能迅速達(dá)到穩(wěn)態(tài) , 主要應(yīng)用在 飲料等食品工業(yè)中 。 其缺點(diǎn)是操作麻煩 , 在反復(fù)回收過程 中固定化酶容易損失 , 所以工業(yè)規(guī)模 的固定化酶很少采用 。 但是 , 常用于 游離酶 。 圖 4-2 批量式攪拌桶反應(yīng)器 6.2.1 批量式攪拌桶反應(yīng)器 這種反應(yīng)器在運(yùn)轉(zhuǎn)過程中 , 底 物以恒定的流速流入反應(yīng)器 , 與此同時(shí) , 反應(yīng)液則以同樣的 流速流出反應(yīng)器 。 反應(yīng)桶內(nèi)裝 有攪拌器 , 使反應(yīng)組分與 固定 化酶顆粒 混合均一 , 出口處有 過濾膜 , 可使不斷補(bǔ)充新鮮底 物與反應(yīng)液流量維持動(dòng)態(tài)平衡 , 如圖 4-3。 6.2.2 連續(xù)流攪拌桶反應(yīng)器 圖

20、4-3 連續(xù)流攪拌桶反應(yīng)器 6.2.3 填充床反應(yīng)器 圖 4-4填充床反應(yīng)器 PBR具有高效率、 易操作、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單 等優(yōu)點(diǎn)。 它適用于各種形狀 的固定化酶和不含 固體顆粒、黏度不 大的底物溶液,以 及有產(chǎn)物抑制的轉(zhuǎn) 化反應(yīng)。 其缺點(diǎn)是傳質(zhì)系數(shù) 和傳熱系數(shù)相對(duì)較低。 當(dāng)?shù)孜锶芤汉腆w 顆粒或黏度很大時(shí), 不宜采用 目前工業(yè)生產(chǎn)及研究中應(yīng)用最為普遍的反應(yīng)器。 6.2.4 流化床反應(yīng)器 圖 4-5 流化床反應(yīng)器 主要被用來處理一些 粘度高 的液體和顆粒細(xì)小 的底物,如 用于水解牛乳中的蛋白質(zhì)。同 時(shí),亦可用于需要供氣體或排 放氣體的酶反應(yīng)(即固、液、 氣三相反應(yīng))。 但因 FBR混合均勻,故不適 用

21、于有產(chǎn)物抑制的酶反應(yīng)。 6.2.5 連續(xù)攪拌桶 -超濾反應(yīng)器 (CSTR UF) 圖 4-6 連續(xù)攪拌桶 -超濾反應(yīng)器 適用于顆粒較細(xì) 的固定化酶、游離 酶和細(xì)胞以及小分 子產(chǎn)物與大分子底 物。 如: 纖維素的連續(xù)糖 化、 -淀粉酶水解淀 粉 6.2.6 循環(huán)反應(yīng)器( Recycle Reactor, RCR) 外循環(huán)反應(yīng)器 內(nèi)循環(huán)反應(yīng)器 循環(huán)操作仍能為底物與酶提供足夠的接觸 機(jī)會(huì),以達(dá)到所需的轉(zhuǎn)化率。這種反應(yīng)器可 用于 難溶或者不溶性底物 的轉(zhuǎn)化反應(yīng)。 6.3膜式反應(yīng)器 膜式反應(yīng)器是 20世紀(jì) 70年代以來發(fā)展起來的一種新型反 應(yīng)器 , 它是利用膜的分離功能 , 同時(shí)完成反應(yīng)和分離過程 的一

22、種反應(yīng)器 。 6.3.1膜式反應(yīng)器的類型: 根據(jù)酶的存在狀態(tài) 、 相數(shù) 、 膜組件型式 、 膜材料類型 、 耦 合方式 、 傳質(zhì)推動(dòng)力等的不同 , 酶膜反應(yīng)器有不同的分類 方式 。 根據(jù)膜組件的型式不同 , 可把酶膜反應(yīng)器分為板框 式 、 螺旋卷式 、 管式和中空纖維式酶膜反應(yīng)器 。 以下以螺 旋卷膜式反應(yīng)器和中空纖維膜式反應(yīng)器為例來說明 。 ( 1)螺旋卷膜式反應(yīng)器 此反應(yīng)器的螺旋結(jié)構(gòu)是將 含酶的膜片與支持材料交替 地纏繞在中心棒上 。 所用的 膜片一般是膠原蛋白;而支 持材料則是一種稱為凡克塞 的惰性聚合網(wǎng)狀物 。 把上述螺旋元件裝進(jìn)圓筒 , 筒兩端加蓋板 , 并安裝進(jìn)出 口管 , 這樣

23、, 就制成了螺旋 卷膜式反應(yīng)器 。 螺旋模型可將流體流動(dòng)的單 元分隔成許多獨(dú)立空間 , 改 善接觸效果 , 消除短路; 另外 , 網(wǎng)狀支持材料可以提 高每一流動(dòng)間隔的混合效果 , 加快物質(zhì)傳遞 。 ( 2)中空纖維膜式反應(yīng)器 外層: 中空纖維膜 水 和 小 分 子 產(chǎn) 物 多孔海綿狀的支 持層(固定酶) 半透性膜 大分子底物 用這種固定化酶填充的 反應(yīng)器 可以提供較大的 催化表面 , 缺點(diǎn):中空纖維的制造 極為困難,難以保證纖 維束內(nèi)流體流動(dòng)的均勻 性,以及存在較大的物 質(zhì)傳遞阻力等。 6.3.2 膜式反應(yīng)器的特點(diǎn) ( 1) 膜的選擇透過性使某些組分 (如產(chǎn)物 )連續(xù)脫除 , 使 反應(yīng)轉(zhuǎn)化率不

24、受 化學(xué)平衡轉(zhuǎn)化率的限制 , 提高了反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率 。 ( 2) 酶膜反應(yīng)器可將目的產(chǎn)物分離出去 , 而酶可以重復(fù)利用 , 可實(shí)現(xiàn)連 續(xù)操作 , 并有可能提高復(fù)雜反應(yīng)的選擇性 。 ( 3) 膜作為酶的固定化載體可以使酶在類似生物膜的環(huán)境中高效發(fā)揮作 用 。 ( 4) 可實(shí)現(xiàn)對(duì)流傳質(zhì)代替自由擴(kuò)散 , 強(qiáng)化了傳質(zhì)速率 , 提高了反應(yīng)速率 。 ( 5) 可以簡(jiǎn)化工藝流程和操作步驟 , 降低生產(chǎn)成本和增加產(chǎn)量的作用 。 ( 6) 膜作為相分離器和相接觸器 , 避免了乳化和破乳等問題 , 也擺脫了 液泛的限制 。 但是膜反應(yīng)器在使用過程中也存在著一些問題 , 這些問題 嚴(yán)重制約了膜反應(yīng)器的推廣應(yīng)用: 膜孔

25、分布與形態(tài)結(jié)構(gòu)的均一性差 , 造成酶分子和小分子激活劑 (金 屬離子或輔助因子等 )的泄漏損失 。 酶在膜表面的隨機(jī)吸附引起酶空間構(gòu)型的改變或活性位點(diǎn)的遮蔽 , 降低或破壞酶的催化活性 。 酶分子在酶膜反應(yīng)器中容易因湍流等原因而發(fā)生剪切失活 。 有些情形下 , 由于產(chǎn)物分子在靠近膜面的位置逐漸積聚而形成凝 膠層 , 造成酶膜反應(yīng)器中嚴(yán)重的產(chǎn)物抑制 。 濃差極化和膜污染使酶膜反應(yīng)器的傳質(zhì)速率和生產(chǎn)能力急劇下降 , 膜孔堵塞 、 膜厚增加使膜的結(jié)構(gòu)形態(tài)發(fā)生不利變化 , 膜需要頻繁 地清洗或更換 。 6.3.3 膜式反應(yīng)器的應(yīng)用 其在食品中的應(yīng)用如: 透過果膠水解來降低果汁粘度; 通過將乳糖轉(zhuǎn)化為可以消化的糖類來降低牛奶和乳 清中乳糖的含量; 通過多酚化合物和花色素的轉(zhuǎn)化來進(jìn)行白酒的處理; 從牛奶產(chǎn)品中去除過氧化物等 。 本章重點(diǎn): 1、 固定化酶的優(yōu)點(diǎn)及應(yīng)用實(shí)例 。 2、 酶被固定化后的理化性質(zhì)的變化 , 對(duì)工業(yè)應(yīng)用的利弊

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