《尿酮體尿膽紅素尿膽原尿血紅蛋白尿肌紅蛋白乳糜尿定性檢查》由會員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《尿酮體尿膽紅素尿膽原尿血紅蛋白尿肌紅蛋白乳糜尿定性檢查（28頁珍藏版）》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。

1、邱群鳳2016Mar.龍巖市第一醫(yī)院 當(dāng) 機 體 能 量 代 謝 發(fā) 生 障 礙 ， 脂 肪分 解 代 謝 增 加 ， 血 中 酮 體 升 高 ， 過 多的 酮 體 從 尿 中 排 出 ， 稱 為 酮 尿 。實 驗 一 尿 酮 體 改 良 rothera法 定 性 檢 查(羅 瑟 拉 ) 實 驗 一 尿 酮 體 改 良 rothera法 定 性 檢 查【 原 理 】本 法 對 乙 酰 乙 酸 靈 敏 度 為 80mg/L 丙 酮 靈 敏 度 為 1000mg/L+亞 硝 基 鐵 氰 化 鈉 紫 色 化 合 物丙 酮乙 酰 乙 酸 堿 性 條 件亞 硝 基 鐵 氰 化 鈉 法 (改 良 roth

2、era法 ) 【 操 作 】 （ 詳 見 實 驗 課 本 P96 ） 1 加 酮 體 粉 : 1小 勺 2 滴 加 尿 液 : 23滴 ,沒 過 酮 體 粉 為 宜 3 觀 察 結(jié) 果 : 如 下 規(guī) 則 立 即 出 現(xiàn) 深 紫 色 強 陽 性 +立 即 呈 現(xiàn) 淡 紫 色 后 漸 轉(zhuǎn) 深 紫 色 陽 性 +逐 漸 呈 現(xiàn) 淡 紫 色 弱 陽 性 + 5min內(nèi) 無 紫 色 出 現(xiàn) 陰 性 - 【 干 擾 因 素 】假 陽 性 較 多 肌 酐 、 肌 酸 ， 高 色 素 尿 ，酞 、 苯 丙 酮 、 左 旋 多 巴 代 謝 物假 陰 性 標(biāo) 本 收 集 和 保 存 不 當(dāng) ； 亞 硝 基 鐵

3、氰 化 鈉 對 溫 度 、 熱 度 或 光 線 很靈 敏 ； 試 帶 受 潮 失 活 。 【 注 意 事 項 】1.試 劑 配 制 要 準(zhǔn) 確 ,易 受 潮 ,應(yīng) 密 閉 、 干 燥 保 存 ；2.乙 酰 乙 酸 不 穩(wěn) 定 ,丙 酮 易 揮 發(fā) ,使 用 新 鮮 尿 液 ；3.控 制 反 應(yīng) 溫 度 ,實 驗 室 溫 度 過 低 時 在 30 水 浴 箱 中完 成 ；4.存 在 大 量 非 結(jié) 晶 尿 酸 鹽 時 ， 可 能 出 現(xiàn) 橙 色 反 應(yīng) 影響 結(jié) 果 判 斷 ， 離 心 除 去 。 實 驗 二 尿 膽 紅 素 Harrison法 定 性 檢 查 膽 紅 素 +氯 化 鋇 沉 淀

4、+三 價 鐵 膽 青 素 /膽 綠 素 /膽 黃 素 (藍 綠 色 /綠 色 或 黃 綠 色 )酸 性 條 件【 原 理 】 (哈 里 森 ) 【 操 作 】 （ 詳 見 實 驗 課 本 P97 ） 1.加 尿 液 : 加 尿 液 5ml2.吸 附 膽 紅 素 : 加 2.5ml氯 化 鋇 溶 液 于 尿 中 混 勻 離 心 35min 棄 上 清 液3.加 試 劑 : 向 沉 淀 表 面 加 Fouchet試 劑 2滴 放置 片 刻 ,觀 察 沉 淀 表 面 顏 色 變 化4.判 斷 結(jié) 果 沉 淀 即 刻 變 為 藍 綠 色 強 陽 性 +沉 淀 變 為 綠 色 陽 性 +沉 淀 逐 漸

5、變 為 淡 綠 色 弱 陽 性 +長 時 間 不 變 色 陰 性 -【 結(jié) 果 判 斷 】 【 干 擾 因 素 】假 陽 性 水 楊 酸 、 阿 司 匹 林 、 牛 黃 紫 紅 色 干 擾 Harrison法 .假 陰 性 標(biāo) 本 保 存 不 當(dāng) （ 未 避 光 ） Fouchet試 劑 加 入 的 量 不 準(zhǔn) 確 【 注 意 事 項 】1. 使 用 新 鮮 尿 液 ,避 光 收 集 ,堿 性 尿 液 先 酸 化 ;2 . 保 證 硫 酸 根 離 子 充 足 ,確 保 能 產(chǎn) 生 沉 淀 ;3 . 嚴(yán) 格 控 制 加 入 Fouchet試 劑 量 ;4 . 注 意 可 能 影 響 結(jié) 果 藥

6、物 的 因 素 ;5 . 改 實 驗 法 優(yōu) 點 :靈 敏 度 較 高 ,0 .9 umpl/L 實 驗 三 尿 膽 原 改 良 Ehrlich法 定 性 檢 查 【 原 理 】尿 膽 原 +對 二 甲 氨 基 苯 甲 醛 櫻 紅 色 化 合 物 簡 單 快 速 ， 分 析 儀 ， 定 性 或 定 量 ； 不 同 試 帶 靈 敏 度 不 同 （ 1-4mg/L） 。 偶 氮 反 應(yīng) 試 帶 不 受 膽 紅 素 影 響 ， 對 尿 膽 原 特 異 。方 法 學(xué) 評 價 (埃 利 希 )酸 性 條 件 【 操 作 】 （ 詳 見 實 驗 課 本 P99 ） 1.加 入 氯 化 鋇 除 去 膽 紅

7、素 : 尿 液 與 Bacl2比 例 為 4:12.加 尿 液 :加 尿 液 shang qing ye 2ml3.加 試 劑 :加 Ehrlich試 劑 0.2ml,室 溫 下 靜 置 10min4.觀 察 結(jié) 果 :在 白 色 襯 紙 下 ,從 管 口 向 管 底 觀 察 顏 色 變 化5.稀 釋 陽 性 標(biāo) 本 并 重 復(fù) 操 作 ( P99 ) 不 變 色 ,加 溫 后 無 反 應(yīng) 陰 性 -10min后 呈 微 紅 色 弱 陽 性 +10min后 呈 櫻 紅 色 陽 性 +立 即 呈 深 紅 色 強 陽 性 +【 結(jié) 果 判 斷 】 干 擾 因 素 評 價標(biāo) 本 因 素標(biāo) 本 久 置

8、 ， 尿 膽 原 氧 化 為 尿 膽 素 -假 陰 性尿膽原含量 與飲水量、排尿時間、尿液PH有關(guān)藥 物 因 素假 陽 性 ： 吩 噻 嗪 類 、 氯 丙 嗪 類 、 磺 胺 類 、 普 魯卡 因假 陰 性 ： 大 量 VitC、 長 期 服 用 廣 譜 抗 生 素 。內(nèi) 源 性 物質(zhì) 假 陽 性 ： 卟 膽 原 、 吲 哚 、 膽 紅 素 紅 色 。 【 干 擾 因 素 】 Ehrlich醛 反 應(yīng) 【 注 意 事 項 】1 尿 液 標(biāo) 本 避 光 收 集2. 尿 膽 原 與 飲 水 量 ,排 尿 時 間 ,pH的 關(guān) 系3. 控 制 試 劑 與 標(biāo) 本 比 例4. 注 意 實 驗 溫 度5

9、. 尿 液 標(biāo) 本 中 含 有 影 響 結(jié) 果 的 物 質(zhì)6. 稀 釋 陽 性 標(biāo) 本 時 不 高 于 1:1607. Ehrlich試 劑 與 尿 液 的 比 例 應(yīng) 控 制 在 10:1 實 驗 四 尿 血 紅 蛋 白 鄰 聯(lián) 甲 苯 胺 法 定 性 檢 查 尿 液 中 Hb來 源 ： 血 管 內(nèi) 溶 血 尿 路 出 血 正 常 人 血 漿 中 游 離 Hb微 量 (50mg/L),與 結(jié) 合 珠蛋 白 形 成 Hb-Hp復(fù) 合 物 ， 在 單 核 -巨 噬 細(xì) 胞 系 統(tǒng)代 謝 ， 故 尿 中 Hb極 微 。 定 性 ： 陰 性 驗 證 尿 液 潛 在 出 血 的 試 驗 : 隱 血 試

10、 驗 (occult blood test) 【 原 理 】H2O2 亞 鐵 血 紅 素 O(氧 化 ) （ 色 素 原 ） 【 操 作 】 （ 詳 見 實 驗 課 本 P101 ） 1.滴 加 尿 液 ： 先 滴 1滴 在 濾 紙 上2.烘 干 濾 紙 ： 烘 干 后 痕 跡 處 繼 續(xù) 滴 1滴 尿 液 ,反 復(fù) 34次3.加 試 劑 :鄰 聯(lián) 甲 苯 胺 冰 醋 酸 溶 液 23滴 ,再 滴 3%過 氧 化 氫 23滴4.觀 察 結(jié) 果 :立 即 觀 察 顏 色 變 化 加 入 試 劑 后 立 即 出 現(xiàn) 黑 褐 色 +加 入 試 劑 后 立 即 出 現(xiàn) 藍 褐 色 +加 入 試 劑 后

11、 由 淺 藍 褐 色 逐 漸 變 為 明 顯 的 藍 褐 色 +加 入 試 劑 后 10s由 淺 藍 色 逐 漸 變 為 藍 色 + 加 入 試 劑 2min后 仍 不 顯 色 -【 結(jié) 果 判 斷 】 【 注 意 事 項 】1.器 材 合 格 : 濾 紙 質(zhì) 量 優(yōu) 良 ,試 驗 用 具 無 血 跡 或 膿 液2 .標(biāo) 本 新 鮮 : 可 先 煮 沸 ,以 破 壞 白 細(xì) 胞 中 的 過 氧 化 氫 酶 及 其 他易 熱 性 觸 酶3 . 烘 干 濾 紙 : 應(yīng) 少 量 多 次 并 保 證 標(biāo) 本 量 足 夠4 .保 證 試 劑 有 效5 .控 制 試 劑 劑 量 實 驗 五 尿 肌 紅 蛋

12、 白 鄰 聯(lián) 甲 苯 胺 法 定 性 檢 查 【 原 理 】肌 紅 蛋 白 和 血 紅 蛋 白 一 樣 ， 分 子 中 含 血 紅 素 基 因 ，具 有 類 過 氧 化 物 酶 活 性 能 用 聯(lián) 苯 胺 和 鄰 聯(lián) 甲 苯 胺 與過 氧 化 氫 反 應(yīng) 檢 出 肌 紅 蛋 白 能 溶 于 80%飽 和 度 的 硫 酸 銨 溶 液 中 而 血 紅蛋 白 則 不 能 ， 因 而 可 鑒 別 【 操 作 】 （ 詳 見 實 驗 課 本 P102 ） 1. 以 磺 基 水 楊 酸 定 性 尿 蛋 白2. 以 鄰 聯(lián) 甲 苯 胺 法 定 性 血 紅 蛋 白3. 加 尿 液 ,加 入 硫 酸 銨 沉 淀

13、 血 紅 蛋 白4. 再 次 定 性 血 紅 蛋 白5. 判 斷 結(jié) 果 血 紅 蛋 白 沉 淀 為 藍 色 , 上 清 液 正 常肌 紅 蛋 白 上 清 液 為 藍 色 , 無 藍 色 沉 淀 血 紅 蛋 白 +肌 紅 蛋 白 上 清 液 出 現(xiàn) 藍 色 , 沉 淀 亦 出 現(xiàn) 藍 色 【 注 意 事 項 】1. 標(biāo) 本 新 鮮2 . 加 入 硫 酸 銨 應(yīng) 緩 慢 ,防 局 部 溫 度 過 高 ,將 肌 紅 蛋 白一 并 沉 淀3 . 可 用 NaOH調(diào) 節(jié) pH至 7 .0 7 .5 實 驗 六 乳 糜 尿 定 性 檢 查【 原 理 】乳 糜 由 脂 肪 微 粒 組 成 ,可 溶 于 乙

14、 醚 ,較 大 脂 粒 可 通 過脂 溶 性 染 料 蘇 丹 3著 色 識 別 ,而 脂 肪 被 萃 取 而 使 尿 液由 乳 濁 變 澄 清 .為 乳 糜 定 性 試 驗 陽 性 【 操 作 】 （ 詳 見 實 驗 課 本 P104 ） 1. 溶 解 脂 肪2. 靜 置 離 心3. 隔 水 蒸 干4. 制 片 染 色5. 觀 察 結(jié) 果 【 注 意 事 項 】1. 加 熱 加 酸 可 除 去 非 晶 形 磷 酸 鹽 /尿 酸 鹽2 . 膿 尿 可 用 顯 微 鏡 鑒 別3 . 加 入 NaOH有 助 于 溶 解 脂 肪4 . 蒸 干 時 只 能 吸 取 乙 醚 層5 . 乳 糜 尿 陽 性 標(biāo) 本 應(yīng) 進 一 步 查 找 微 絲 蚴