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走向高考 生物,路漫漫其修遠(yuǎn)兮 吾將上下而求索,高考二輪總復(fù)習(xí),第一部分,微專題強化練,專題十一 現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)專題,第一部分,(一)基因工程,考 向 分 析,考 題 引 路,強 化 訓(xùn) 練,2,3,1,多以最新基因工程研究成果為載體考查基因工程的工具與操作程序及應(yīng)用。,例題 (2014山東，36)人組織纖溶酶原激活物(htPA)是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：,,(1)htPA基因與載體用________切割后，通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體。檢測目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用________技術(shù)。 (2)為獲取更多的卵(母)細(xì)胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其________。采集的精子需要經(jīng)過________，才具備受精能力。,(3)將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是________。為了獲得母羊，移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行________。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個轉(zhuǎn)基因個體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的________。 (4)若在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測到________，說明目的基因成功表達(dá)。 [立意與點撥] 知識：考查基因工程的基本操作程序、細(xì)胞工程、動物細(xì)胞培養(yǎng)等知識。能力：考查考生對基礎(chǔ)知識的理解與應(yīng)用能力。 點撥：正確理解基因工程、胚胎工程及細(xì)胞移植技術(shù)的基礎(chǔ)知識。,[解析] (1)用同種限制酶切割質(zhì)粒和含有htPA基因的DNA片段可產(chǎn)生相同的黏性末端，便于構(gòu)建基因表達(dá)載體；通常采用DNA分子雜交技術(shù)來檢測目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA。 (2)為獲得更多的卵母細(xì)胞，通常對供體母羊注射促性腺激素使其進(jìn)行超數(shù)排卵；采集的精子需要經(jīng)過獲能處理才具備受精能力。,(3)通常用顯微注射法將重組表達(dá)載體導(dǎo)入動物的受精卵；為了獲得母羊，移植前需要對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行性別鑒定；早期胚胎細(xì)胞具有全能性，可利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)獲得多個轉(zhuǎn)基因個體。 (4)htPA基因的表達(dá)產(chǎn)物為人組織纖溶酶原激活物，若在轉(zhuǎn)基因母羊的羊乳中檢測到人組織纖溶酶原激活物，說明目的基因成功表達(dá)。,[答案] (1)同種限制性核酸內(nèi)切酶(或同種限制酶) DNA分子雜交(或核酸探針) (2)超數(shù)排卵 獲能(處理) (3)顯微注射法 性別鑒定 全能性 (4)htPA(或人組織纖溶酶原激活物),易錯點：基因工程的應(yīng)用掌握不夠牢 (2015天津質(zhì)檢)北極比目魚中有抗凍基因，下圖是培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖，有關(guān)敘述正確的是( ) A．過程①和過程②所用的酶相同 B．轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的獲得是定向變異的結(jié)果 C．應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá) D．過程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選,,[易錯分析] 過程①包括逆轉(zhuǎn)錄形成DNA單鏈和以DNA單鏈為模板合成與模板互補的另一條單鏈，因此，這一過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶和DNA聚合酶，而過程②是使用限制酶和DNA連接酶形成重組質(zhì)粒，不知道上述知識會導(dǎo)致誤選A項。不知道將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，是導(dǎo)致誤選D項的原因。 [答案] B,[解析] 過程①中用到逆轉(zhuǎn)錄酶和DNA聚合酶，過程②中用到限制酶和DNA連接酶；應(yīng)用DNA探針技術(shù)只能檢測受體細(xì)胞中是否有目的基因，不能檢測目的基因是否表達(dá)；將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌的目的是利用農(nóng)桿菌將目的基因轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞。,[誤區(qū)警示] 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法 ①植物細(xì)胞：常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(雙子葉植物和裸子植物常用)、基因槍法(單子葉植物常用，成功率高，成本高)、花粉管通道法(我國科學(xué)家獨創(chuàng)，簡便經(jīng)濟)。 ②動物細(xì)胞：常用顯微注射技術(shù)。 ③微生物細(xì)胞：Ca2＋處理法。,