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2019-2020年高中生物 專題5 課題3 血紅蛋白的提取與分離練習 新人教版選修1 一、選擇題 1．凝膠色譜法是根據(jù)(　　)分離蛋白質的有效方法。(　　) A．分子的大小　　　　　 B．相對分子質量的大小 C．帶電荷的多少 D．溶解度 [答案]　B [解析]　凝膠色譜法分離蛋白質依據(jù)的是蛋白質相對分子質量的大小。 2．緩沖液的作用是：在一定范圍內，抵制外界的影響來維持(　　)基本不變(　　) A．溫度 B．pH C．滲透壓 D．氧氣濃度 [答案]　B [解析]　緩沖液可維持溶液在一定范圍內的pH穩(wěn)定。 3．電泳是指帶電粒子在電場的作用下向著與其所帶電荷(　　)的電極移動(　　) A．相同 B．相反 C．相對 D．相向 [答案]　B [解析]　電泳時，離子移動的方向應與其所帶電荷相反。 4．在蛋白質的提取和分離中，關于對樣品處理過程中，分析無誤的是(　　) A．洗滌紅細胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無機鹽 B．洗滌時離心速度過低，時間過短，白細胞等會沉淀，達不到分離的效果 C．洗滌過程選用0.1%的生理鹽水 D．透析的目的是去除樣品中相對分子質量較小的雜質 [答案]　D [解析]　在蛋白質的提取和分離中，透析的目的是去除樣品中相對分子質量較小的雜質。 5．下列操作正確的是(　　) A．分離紅細胞時采用低速長時間離心 B．紅細胞釋放出血紅蛋白只需要加入蒸餾水即可 C．加樣之前不需要調整緩沖液的液面 D．透析時要用20mmol/L的磷酸緩沖液，透析12h [答案]　D 二、非選擇題 6．紅細胞含有大量血紅蛋白，紅細胞的機能主要是由血紅蛋白完成的，血紅蛋白的主要功能是攜帶O2或CO2，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行實驗，來提取和分離血紅蛋白，請回答下列有關問題： (1)血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步：________、________、________和________。 (2)實驗前取新鮮的血液，切記要在采血容器中預先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進行離心，收集血紅蛋白溶液。 ①加入檸檬酸鈉的目的是___________________________________________________ ________________________________________________________________________。 ②以上所述的過程即是樣品處理，它包括________、________、收集血紅蛋白溶液。 ③收集的血紅蛋白溶液在透析袋中可以經過透析，這就是樣品的粗分離。 ①透析的目的是____________________________________________________ ________________________________________________________________________。 ②透析的原理是____________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)純度鑒定時最常用的方法是SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳。 ①樣品純化的目的是______________________________________________________ ________________________________________________________________________。 ②血紅蛋白有什么特點____________________________。這一特點對進行蛋白質的分離有什么意義？___________________________________________________ ________________________________________________________________________。 [答案]　(1)樣品處理　粗分離　純化　純度鑒定 (2)①防止血液的凝固　②紅細胞的洗滌　血紅蛋白的釋放 (3)①除去相對分子質量較小的雜質?、谕肝龃苁剐》肿游镔|自由進出，而大分子物質被保留在袋內 (4)①通過凝膠色譜法將相對分子質量大的雜質蛋白除去　②血紅蛋白呈現(xiàn)紅色　在用凝膠色譜法分離時可以通過觀察顏色來判斷什么時期應該收集洗脫液；同時通過觀察顏色使血紅蛋白的分離過程非常直觀，大大簡化了實驗操作 [解析]　本題主要考查蛋白質提取和分離的相關知識，具體分析如下： 一、選擇題 1．為防止血液凝固，在采血容器中要預先加入下列哪一種抗凝血劑(　　) A．NaCl B．甲苯 C．蒸餾水 D．檸檬酸鈉 [答案]　D [解析]　檸檬酸鈉是血液常用的凝固劑。 2．將攪拌好的混合液轉移到離心管中，離心后，可以明顯看到試管中的溶液分為4層，其中第3層是(　　) A．無色透明的甲苯層 B．脂溶性物質的沉淀層 C．血紅蛋白的水溶液 D．其他雜質的暗紅色沉淀物 [答案]　C [解析]　混合液離心后的第3層為血紅蛋白的水溶液。 3．紅細胞的洗滌過程錯誤的是(　　) A．低速短時間離心，如500r/min離心2min B．離心后用膠頭吸管吸出上層透明的黃色血漿 C．將下層暗紅色的紅細胞液體倒入燒杯，再加入五倍體積的蒸餾水 D．直至上清液中沒有黃色，表明紅細胞已洗滌干凈 [答案]　C 4．在裝填凝膠柱時，不得有氣泡存在的原因是(　　) A．氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，降低分離效果 B．氣泡阻礙蛋白質的運動 C．氣泡能與蛋白質發(fā)生化學反應 D．氣泡會在裝填凝膠的時候，使凝膠不緊密 [答案]　A [解析]　裝填凝膠柱時，若有氣泡存在，則氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，降低分離效果。 二、非選擇題 5．如圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實驗裝置，請據(jù)圖回答下列問題。 (1)血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細胞的主要組成成分，它在紅細胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質具有________功能。 (2)甲裝置中，B是血紅蛋白溶液，則A是________；乙裝置中，C溶液的作用是________________________________________________________________________。 (3)甲裝置用于________，目的是____________________________________________。用乙裝置分離蛋白質的方法叫________。 (4)用乙裝置分離血紅蛋白時，待________時，用試管收集流出液，每5mL收集一管，連續(xù)收集。 [答案]　(1)運輸 (2)磷酸緩沖溶液　洗脫血紅蛋白 (3)透析(粗分離)　去除樣品中相對分子質量較小的雜質　凝膠色譜法 (4)紅色的蛋白質接近色譜柱的底端 [解析]　用透析法(如圖甲)對血紅蛋白進行粗分離，將血紅蛋白溶液裝入透析袋中，可以除去樣品中分子較小的雜質。血紅蛋白的純化采用凝膠色譜法(如圖乙)，血紅蛋白相對分子質量較大，無法進入凝膠內部的通道，只能在凝膠外部移動，路徑較短，移動速度較快，可以收集到紅色的蛋白質。