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1、腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較生理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)人：尚潔 王俊俊婁吉祥 羅明偉 趙銳豪 指導(dǎo)老師：* 2012年05月05日 腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管的比較腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管的作用，比較和分析其作用機(jī)制腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較實(shí)驗(yàn)原理激素激素部位部位綜合受體綜合受體產(chǎn)生作用產(chǎn)生作用腎上腺素心臟1三正效應(yīng)血管皮膚，胃，腎 皮膚， 腸，血管平滑肌血管收縮骨骼肌，肝大劑量血管收縮小劑量 2血管舒張去甲腎上腺素心臟1三正效應(yīng)（弱）血管全身血管血

2、管收縮腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較實(shí)驗(yàn)材料與試劑實(shí)驗(yàn)1實(shí)驗(yàn)對(duì)象 家兔 試劑20%氨基甲酸乙脂，0.5%的肝素， 生理鹽水， 5:100000腎上腺素， 1: 10000去甲腎上腺素實(shí)驗(yàn)2實(shí)驗(yàn)對(duì)象：蟾蜍試劑：任氏液， 5:100000腎上腺素， 1:10000去甲腎上腺素腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備 實(shí)驗(yàn)1哺乳動(dòng)物手術(shù)器械一套 生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)張力換能器 兔手術(shù)臺(tái) 動(dòng)脈夾 動(dòng)脈導(dǎo)管 鐵支架 絲線 注射器實(shí)驗(yàn)2蛙類手術(shù)器械一套 生物信號(hào)采集處理系統(tǒng) 鐵支架張力換能器 雙凹夾 試管夾 蛙心插管 滴管 絲線腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較實(shí)

3、驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)1動(dòng)物的分組與處理：取8只身體狀況基本相同的家兔，隨機(jī)等分為兩組，一組為在體實(shí)驗(yàn)組，另一組為在體對(duì)照組指標(biāo)的觀察： 以動(dòng)脈血壓為指標(biāo)，分析腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)血管活動(dòng)的調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)2 取8只身體狀況基本相同的蟾蜍，隨機(jī)等分為兩組，一組為在體實(shí)驗(yàn)組，另一組為在體對(duì)照組腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較實(shí)驗(yàn)2取8只身體狀況基本相同的蟾蜍，隨機(jī)等分為兩組，一組為在體實(shí)驗(yàn)組，另一組為在體對(duì)照組指標(biāo)的觀察： 以心率，心肌收縮力為指標(biāo)，分析腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟活動(dòng)的調(diào)節(jié)腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線1，麻醉： 家兔稱重后，耳緣靜脈緩慢注射20氨基甲酸

4、乙酯（ 戊巴比妥鈉（ 乙酯（5 mlkg-1）進(jìn)行麻醉。當(dāng)動(dòng)物 四肢松軟，呼吸變深變慢，角膜反射遲鈍時(shí)，表明動(dòng)物已被麻醉， 即可停止注射。2：動(dòng)物的固定：將麻醉的家兔仰臥位固定于兔手術(shù)臺(tái)上。腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線3,手術(shù)操作剪去頸前部兔毛，沿正中線切開皮膚5-7cm，用止血鉗縱向分離皮下組織于正中線分開頸部肌肉，暴露氣管。在氣管下方穿一根線備用，在甲狀軟骨下約1cm處剪一倒“T”型切口，插入氣管插管，用備用線結(jié)扎并固定。在氣管兩側(cè)找到并辨認(rèn)迷走神經(jīng)，交感神經(jīng)，減壓神經(jīng)（即家兔的主動(dòng)脈神經(jīng)）以及頸總神經(jīng)。用玻璃分針先仔細(xì)分離右側(cè)減壓神經(jīng)，然后分離右側(cè)迷走神經(jīng)，交

5、感神經(jīng)和頸總神經(jīng)。分別在各神經(jīng)、血管下穿一根不同顏色的絲線備用。腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較動(dòng)脈插管分離左側(cè)頸總動(dòng)脈2-3cm(盡可能向頭端游離)，遠(yuǎn)心端穿線并結(jié)扎，近心端用動(dòng)脈夾夾閉，在血管下穿線備用。在耳緣靜脈注射0.5肝素生理鹽水2ml，并在動(dòng)脈導(dǎo)管尖端注入0.5%肝素生理鹽水0.1ml。用眼科剪在結(jié)扎線的近端動(dòng)脈上剪一斜切口，向心臟方向插入已準(zhǔn)備好的動(dòng)脈導(dǎo)管（注意管內(nèi)不應(yīng)有氣泡），結(jié)扎固定。壓力換能器與動(dòng)物心臟應(yīng)保持在同一水平。腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較觀察項(xiàng)目1，記錄正常血壓放開動(dòng)脈夾，記錄靜息狀態(tài)下家兔動(dòng)脈血壓曲線，觀察正常血壓波動(dòng)曲線。2，靜脈注

6、射小劑量腎上腺素耳緣靜脈注射小劑量腎上腺素溶液，觀察血壓變化3，靜脈注射大劑量腎上腺素待動(dòng)脈血壓曲線恢復(fù)正常后，耳緣靜脈注射大劑量的腎上腺素溶液觀察血壓的變化4，靜脈注射去甲腎上腺素耳緣靜脈注射去甲腎上腺素溶液0.20.3ml,觀察血壓變化腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較實(shí)驗(yàn)儀器連接與調(diào)試及裝置1，儀器裝置將動(dòng)脈導(dǎo)管與壓力換能器相連，通過(guò)三通開關(guān)用生理鹽水沖灌壓力換能器和動(dòng)脈導(dǎo)管。排盡壓力換能器與動(dòng)脈導(dǎo)管中的氣泡。然后關(guān)閉三通開關(guān)備用，若壓力換能器沒有定標(biāo)，要對(duì)壓力換能器定標(biāo)。2儀器連接將壓力換能器與生物信號(hào)采集系統(tǒng)相連，將刺激電極輸入端與刺激輸出端相連，將刺激電極輸出端與保護(hù)電極

7、相連3調(diào)零，壓力定標(biāo)和制壓實(shí)驗(yàn)前，一般已調(diào)整好測(cè)量系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，勿輕易改動(dòng)。腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較實(shí)驗(yàn)21，備用線將前后腔靜脈和左右肺靜脈一起結(jié)扎(注意勿結(jié)扎住靜脈竇).將心臟回復(fù)指原位1，取蟾蜍一只，用探針搗毀腦和脊髓，將其仰臥固定在蛙板上。用鑷子夾起皮膚，然后將胸部劍突軟骨下方的皮膚剪出一個(gè)“V”字形切口，暴露出劍突。用鑷子夾住劍突下端，在肌肉層上剪出“V”形切口。再用粗剪刀沿正中線剪開胸骨，并把左右兩側(cè)胸骨完全剪掉，眼科剪仔細(xì)剪開心包膜，暴露心臟。2，仔細(xì)識(shí)別心房、心室、動(dòng)脈圓錐、主動(dòng)脈、靜脈竇、前后腔靜脈等。3，結(jié)扎血管：在右主動(dòng)脈下穿一根線并結(jié)扎，再在左右主

8、動(dòng)脈下穿一根線備用。用玻璃分針將心尖向上翻至背面，以備用線將前后腔靜脈和左右肺靜脈一起結(jié)扎(注意勿結(jié)扎住靜脈竇).將心臟回復(fù)指原位。腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較蛙心插管在左主動(dòng)脈下穿兩根線。用一根線結(jié)扎左主動(dòng)脈遠(yuǎn)心端，另一線備用。提起左主動(dòng)脈遠(yuǎn)端縛線，用眼科剪在左主動(dòng)脈上靠近動(dòng)脈圓錐處剪一“V”形切口，將盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入主動(dòng)脈，插至動(dòng)脈圓錐時(shí)，略向后退，在心室收縮時(shí)，沿心室后壁方向下插，經(jīng)主動(dòng)脈瓣插入心室腔內(nèi)（不可插入過(guò)深，以免心室壁堵住插管下口）。若插管成功進(jìn)入心室，管內(nèi)液體會(huì)隨著心室搏動(dòng)而上下移動(dòng)。用左主動(dòng)脈近心端的備用線結(jié)扎插管，并將結(jié)扎線固定于插管側(cè)面

9、的小突起上。腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較游離心臟提起插管，在接線遠(yuǎn)端分別剪斷主動(dòng)脈左右分支；剪短左右肺動(dòng)脈和前后腔靜脈，將心臟離體。用滴管吸進(jìn)插管內(nèi)的余血加入新鮮任氏液反復(fù)沖洗數(shù)次，直至液體完全澄清。保持灌流液面高度恒定（1-2cm），即可進(jìn)行試驗(yàn)。腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較儀器連接用試管夾將制備好的離體蛙心固定于支架上，在心臟舒張期用蛙心夾夾住心尖部，并連接到張力換能器上（勿將心臟受到過(guò)度牽拉）。將張力換能器的輸出線與生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)相連。腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較觀察項(xiàng)目1，描記正常蛙心收縮曲線幅度：代表心臟波動(dòng)的強(qiáng)弱。疏密：代表心率

10、。規(guī)律性：代表心臟波動(dòng)的節(jié)律性。頂點(diǎn)水平：代表心臟收縮的程度。基線：代表心臟舒張的程度。2，腎上腺素的影響 在任氏液中滴加1-2滴5:100000去甲腎上腺素溶液，觀察曲線的變化。出現(xiàn)效應(yīng)后，用新鮮任氏液換洗，直至心跳曲線恢復(fù)正常。3，去甲腎上腺素的影響 在任氏液中滴加1-2滴1:10000去甲腎上腺素溶液，觀察曲線的變化。腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較實(shí)驗(yàn)預(yù)期結(jié)果實(shí)驗(yàn)1器官器官加入試劑加入試劑預(yù)期現(xiàn)象預(yù)期現(xiàn)象心臟腎上腺素溶液0.5mi心臟活動(dòng)加強(qiáng)，心率加快去甲腎上腺素溶液0.5mi心臟活動(dòng)加強(qiáng)，心率加快腸系膜動(dòng)脈小劑量腎上腺素溶液0.1mi血管收縮去甲腎上腺素溶液0.1mi血管

11、收縮大劑量腎上腺素溶液0.5mi血管收縮去甲腎上腺素溶液0.5mi血管收縮肝動(dòng)脈小劑量腎上腺素溶液0.1mi血管收縮去甲腎上腺素溶液0.1mi血管收縮大劑量腎上腺素溶液0.5mi血管舒張去甲腎上腺素溶液0.5mi血管收縮腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較實(shí)驗(yàn)21，滴加腎上腺素溶液后，心率加快，心肌收縮力增強(qiáng)2，滴加去甲腎上腺素溶液后，心率變慢腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較實(shí)驗(yàn)分析1，靜脈注射氨基甲酸乙酯溶液時(shí)，剛開始小兔子異常興奮，為使兔子快速鎮(zhèn)靜下來(lái)，注射前3ml時(shí)應(yīng)迅速，但不可過(guò)速防止兔子死亡，若兔子在注射時(shí)出現(xiàn)異常情況，應(yīng)停止注射觀察5分鐘后再做決定。2，靜脈注射

12、時(shí)針不易扎入血管，靜脈注射時(shí)應(yīng)該從耳緣靜脈遠(yuǎn)心端開始進(jìn)針，先進(jìn)入靜脈下端然后在任氏液中滴加1-2滴1:10000去甲腎上腺素溶液，觀察曲線的變化。3，插蛙心插管時(shí)，稍有不慎，蛙心可能停止跳動(dòng)而使實(shí)驗(yàn)失敗，所以插蛙心插管要小心，先使蛙心插管進(jìn)入動(dòng)脈圓錐，在向下進(jìn)入左心室，實(shí)驗(yàn)中保持心臟處于任氏液環(huán)境中，還有如果蛙心插管稍插入左心室，蛙心搏動(dòng)就發(fā)生很大變化，那么將蛙心稍插入左心室即可，但不過(guò)實(shí)驗(yàn)過(guò)程會(huì)變慢。4，為什么用蟾蜍做腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟作用的影響的比較？答：最主要的原因是因?yàn)轶蛤苁莾蓷珓?dòng)物，體外條件下易維持其正常的生理環(huán)境，從而使實(shí)驗(yàn)難度大大降低，更易獲得成功。腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管作用的比較