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高中生物 第二部分 酶的應(yīng)用 實驗6 α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測學(xué)案 浙科版選修1

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1、 第二部分 酶的應(yīng)用 實驗6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測 一、酶與固定化酶 1.酶:活細(xì)胞產(chǎn)生的具有催化作用的一類有機(jī)物,它是生物體內(nèi)各種化學(xué)反應(yīng)的催化劑。 2.固定化酶:將________的酶用________或________方法________,使之成為________而又有________。 3.將酶改造成固定化酶的原因是: 由于酶________,且不利于________,所以要將酶改造成固定化酶。 4.酶固定化的方法有: ________法、________法、________法和________法等。本實驗用的是________法。 5.固定化酶作用

2、的機(jī)理: 將固定化酶________,當(dāng)________時,在________的作用下________。 答案:2.水溶性 物理 化學(xué) 固定在某種介質(zhì)上 不溶于水 酶活性的制劑 3.在水溶液中很不穩(wěn)定 工業(yè)化使用 4.吸附 共價偶聯(lián) 交聯(lián) 包埋 吸附 5.裝柱 底物經(jīng)過該柱 酶 轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物 二、淀粉水解的過程及其在淀粉指示劑下的顏色反應(yīng): 答案:糊精 藍(lán) 紅 不顯 三、α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用檢測的實驗 1.實驗?zāi)康模? (1)制備________。 (2)進(jìn)行________的測試。 2.實驗原理: 將________酶固定在________上,一定

3、濃度的淀粉溶液經(jīng)過________后,可使淀粉水解成________。用________測試,若流出物呈________色,表明有________生成。 3.本實驗使用的酶及特性: 本實驗使用的酶是________酶,其作用的最適宜pH為________,最適宜溫度為________。 4.實驗設(shè)備及用品: 5 mL塑料注射器、50 mL燒杯、滴管、自行車用氣門芯及夾子、注射器架、試管或微量離心管3支。 5.實驗材料及其制備: (1)材料:固定化的α淀粉酶、可溶性淀粉酶、5 mol/L KI—I2溶液。 (2)部分材料的制備: ▲α淀粉酶的固定化: 在燒杯中將5 mg____

4、____溶于4 mL蒸餾水中 (由于________,可能有些不溶物) ↓ 再加入5g________,不時攪拌30 min ↓ 30 min后將上述溶液裝入1支注射器中 (該注射器的下端接有________并用________封住) 石英砂體積約4 mL ↓ 用________倍體積的蒸餾水________此注射器以 除去__________________,流速為1 mL/min ▲可溶性淀粉溶液:取________mg可溶性淀粉溶于100 mL________中,攪拌均勻。 ▲可溶性淀粉溶液:稱取0.127 g________和0.83 g________。加蒸餾

5、水100 mL,完全溶解后裝入滴瓶中。 6.實驗步驟: (1)淀粉溶液流經(jīng)固定化酶柱 將灌注了________的注射器放在注射器架上,用滴管加________溶液,使該溶液以________mL/min的流速過柱。 (2)接取流出物 待從固定化酶柱中流出________mL的溶液后,接收________mL流出液。 (3)流出物鑒定 在流出物中加入________溶液,觀察顏色。用水稀釋________倍后再觀察顏色。 (4)洗滌、保存固定化酶柱。 實驗后,用________倍柱體積的蒸餾水洗滌此柱。放置在________℃冰箱中保存。 (5)幾天后取出冰箱中該固定化酶柱,

6、重復(fù)實驗,觀察結(jié)果。 7.實驗結(jié)果的比較: 答案:1.(1)固定化α淀粉酶 (2)淀粉水解 2.α淀粉 石英砂 固定化酶柱 糊精 淀粉指示劑 紅 糊精 3.枯草桿菌的α淀粉 5.5~7.5 50~75 ℃ 5.實驗材料及其制備: (2)α淀粉酶 酶不純 石英砂 氣門芯 夾子 10 洗滌 未吸附的游離淀粉酶 50 熱水 碘 碘化鉀 6.(1)固定化酶 淀粉 0.3 (2) 5 0.5 (3)KII2 1 (4)10 4 7.藍(lán) 紅 紅 6EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F375

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