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是一切肉眼看不見或看不清楚的微小生物的總稱 一 微生物 微生物 病毒細菌放線菌真菌原生動物 原核生物界 原生生物界 真菌界 病毒界 是一切肉眼看不見或看不清楚的微小生物的總稱 一 微生物 1 分類 特點 小簡低 微生物 病毒細菌放線菌真菌原生動物 原核生物界 原生生物界 真菌界 病毒界 是一切肉眼看不見或看不清楚的微小生物的總稱 1 分類 一 微生物 2 病毒 病毒的結(jié)構(gòu) SARS冠狀病毒 禽流感病毒 病毒的增殖 細菌的外形與大小 3 細菌 A 球菌B 桿菌C 弧菌常見的細菌三種典型形態(tài) A B C 細菌的結(jié)構(gòu) 芽孢 細菌形成的橢圓形的休眠體 芽孢的壁很厚 對干旱 低溫 高溫等惡劣的環(huán)境有很強的抵抗力 芽孢又小又輕 可以隨風(fēng)飄散 當環(huán)境適宜 如溫度 水分適宜 的時候 芽孢又可以萌發(fā) 形成一個細菌 異養(yǎng)菌 腐生菌寄生菌大部分病原菌 細菌的營養(yǎng)類型 根據(jù)細菌所利用的能源和碳源的不同 將細菌分為兩大營養(yǎng)類型 自養(yǎng)菌 異養(yǎng)菌 腐生菌寄生菌大部分病原菌 光能自養(yǎng)型 光合細菌 細菌的營養(yǎng)類型 根據(jù)細菌所利用的能源和碳源的不同 將細菌分為兩大營養(yǎng)類型 自養(yǎng)菌 異養(yǎng)菌 腐生菌寄生菌大部分病原菌 光能自養(yǎng)型 光合細菌化能自養(yǎng)型 硝化細菌 鐵細菌 硫細菌 細菌的營養(yǎng)類型 根據(jù)細菌所利用的能源和碳源的不同 將細菌分為兩大營養(yǎng)類型 自養(yǎng)菌 菌落 單個或少數(shù)細菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時 就會形成一個肉眼可見的 具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群體 叫做菌落 菌落是鑒定菌種的重要依據(jù) 細菌的菌落特征因種而異 菌落 4 放線菌 結(jié)構(gòu) 單細胞原核生物分支狀的菌絲 基內(nèi)菌絲 氣生菌絲 2 繁殖 孢子絲 孢子 鏈霉素 土霉素 四環(huán)素 氯霉素 紅霉素 慶大霉素 微生物中發(fā)現(xiàn)了幾千種抗生素 其中2 3是由放線菌產(chǎn)生的 應(yīng)用 5 真菌 酵母菌 酵母菌和霉菌 青霉 生殖 腐生生活 孢子生殖 6 營養(yǎng)及功能 微生物化學(xué)元素組成 6 營養(yǎng)及功能 微生物化學(xué)元素組成 C H O N P S 6 營養(yǎng)及功能 C H O N P S 五大營養(yǎng)物質(zhì) 碳源 氮源 生長因子 水 無機鹽 微生物化學(xué)元素組成 二 培養(yǎng)基 培養(yǎng)基 培養(yǎng)液 是由人工方法配制而成的 專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)液 1 按物理狀態(tài)分 固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基 半固體培養(yǎng)基 2 按功能分 選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基 3 按成分分 天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基 1 培養(yǎng)基的類型 固體培養(yǎng)基 菌落 液體培養(yǎng)基 表面生長 均勻混濁生長 沉淀生長 半固體培養(yǎng)基 2 不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方 2 不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方 3 不管哪種培養(yǎng)基 一般都含有水 碳源 和氮源 無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì) 另外還需要滿足微生物生長對pH 特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求 1000mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成 4 培養(yǎng)基的用途 4 培養(yǎng)基的用途 液體培養(yǎng)基 增菌 工業(yè)生產(chǎn)固體培養(yǎng)基 純化 分離 鑒定 活菌計數(shù) 保藏菌種半固體培養(yǎng)基 動力檢測 三 無菌技術(shù) 三 無菌技術(shù) 1 無菌技術(shù)的概念 無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中 所有防止雜菌污染的方法 1 無菌技術(shù)的概念 無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中 所有防止雜菌污染的方法 成功地培養(yǎng)微生物的關(guān)鍵 三 無菌技術(shù) 1 消毒定義 2 消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別 2 滅菌的定義 微生物實驗室培養(yǎng)的基本操作程序 1 器具的滅菌2 培養(yǎng)基的配制3 培養(yǎng)基的滅菌4 倒平板5 微生物接種6 恒溫箱中培養(yǎng)7 菌種的保存 四 實驗操作 一 制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 用于培養(yǎng)細菌 倒平板操作 1 培養(yǎng)基滅菌后 需要冷卻到50 左右時 才能用來倒平板 你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度 關(guān)于倒平板操作的問題討論 1 培養(yǎng)基滅菌后 需要冷卻到50 左右時 才能用來倒平板 你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度 答 可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶 感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時 就可以進行倒平板了 關(guān)于倒平板操作的問題討論 2 為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰 2 為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰 答 通過灼燒滅菌 防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基 3 平板冷凝后 為什么要將平板倒置 3 平板冷凝后 為什么要將平板倒置 答 平板冷凝后 皿蓋上會凝結(jié)水珠 凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高 將平板倒置 既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā) 又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基 造成污染 4 在倒平板的過程中 如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位 這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎 為什么 4 在倒平板的過程中 如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位 這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎 為什么 答 空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生 因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物 二 純化大腸桿菌 接種方法有 平板劃線法和稀釋涂布平板法 微生物的接種技術(shù) 平板劃線的操作方法 問題討論 1 為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán) 在劃線操作結(jié)束時 仍然需要灼燒接種環(huán)嗎 為什么 答 第一步灼燒是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物 每次劃線前灼燒是為了殺死上次劃線結(jié)束后 接種環(huán)上殘留的菌種 使下一次劃線時 接種環(huán)上的菌種直接來源上次劃線的末端 從而通過劃線次數(shù)的增加 使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少 以便得到菌落 劃線結(jié)束后灼燒 能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種 避免細菌污染環(huán)境和感染操作者 2 在灼燒接種環(huán)之后 為什么要等其冷卻后再進行劃線 2 在灼燒接種環(huán)之后 為什么要等其冷卻后再進行劃線 答 以免接種環(huán)溫度太高 殺死菌種 3 在作第二次以及其后的劃線操作時 為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線 3 在作第二次以及其后的劃線操作時 為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線 答 劃線后 線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少 每次從上一次劃線的末端開始 能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少 最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落 一旦劃破 會造成劃線不均勻 難以達到分離單菌落的目的 二是存留在劃破處的單個細胞無法形成規(guī)矩的菌落 菌落會沿著劃破處生長 會形成一個條狀的菌落 稀釋涂布平板法 注意 移液管需要經(jīng)過滅菌 操作時 試管口和移液管離火焰1 2cm處 涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進行 結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求 想一想 第2步應(yīng)如何進行無菌操作 問題討論 涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進行 結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求 想一想 第2步應(yīng)如何進行無菌操作 應(yīng)從操作的各個細節(jié)保證 無菌 例如 酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適 吸管頭不要接觸任何其他物體 吸管要在酒精燈火焰周圍等等 問題討論 微生物的恒溫培養(yǎng) 微生物的恒溫培養(yǎng) 微生物的恒溫培養(yǎng) 菌種的保存 1 臨時保藏 接種到固體斜面培養(yǎng)基 菌落長成后置于4 冰箱保存 2 長期保存 甘油冷凍管藏法 微生物的實驗室培養(yǎng) DAT 四 實驗操作成果評價 一 培養(yǎng)基的制作是否合格如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1 2d后無菌落生長 說明培養(yǎng)基的制備是成功的 否則需要重新制備 二 接種操作是否符合無菌要求如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色 形狀 大小基本一致 并符合大腸桿菌菌落的特點 則說明接種操作是符合要求的 如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落 則說明接種過程中 無菌操作還未達到要求 需要分析原因 再次練習(xí) 三 是否進行了及時細致的觀察與記錄培養(yǎng)12h與24h后的大腸桿菌菌落的大小會有明顯不同 及時觀察記錄的同學(xué)會發(fā)現(xiàn)這一點 并能觀察到其他一些細微的變化 這一步的要求主要是培養(yǎng)學(xué)生良好的科學(xué)態(tài)度與習(xí)慣