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1、 專題20　生物技術(shù)實踐 　　　　 　 　　　　　　 　　　　　　 　　 微生物的培養(yǎng)和應用 命題 剖析 考向 掃描 1 以選擇題的形式考查培養(yǎng)基的成分、制備方法,考查學生理解和應用知識的能力 2 以簡答題的形式考查微生物的分離、純化和培養(yǎng)過程,側(cè)重對實驗操作、設計和分析的考查,考查學生實驗的操作和綜合分析能力 命題 動向 命題將會結(jié)合社會熱點、科研發(fā)現(xiàn)等考查微生物的培養(yǎng)及實踐應用,題型主要以非選擇題為主 1.(2011年重慶理綜卷)下列有關(guān)細菌培養(yǎng)的敘述,正確的是(　　) A.在瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個菌落含有多種細菌 B.在培養(yǎng)基中加入青霉素

2、可抑制真菌而促進細菌生長 C.向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進破傷風桿菌的生長 D.在半固體培養(yǎng)基中接種細菌培養(yǎng)后可以觀察其運動 解析:本題考查培養(yǎng)基的用途和微生物的代謝知識。瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個菌落是由一個或少數(shù)同種細菌繁殖而成的同種個體的總和,A項錯誤;培養(yǎng)基中加入青霉素可選擇酵母菌、霉菌等真菌而抑制細菌的生長,因為青霉素可抑制細菌細胞壁的合成,B項錯誤;破傷風桿菌的代謝類型為厭氧型,通入氧氣可使培養(yǎng)基中的破傷風桿菌代謝活動受到抑制,C項錯誤;半固體培養(yǎng)基可用于觀察細菌的運動,D項正確。 答案:D。 2.(2012年浙江自選模塊,17,10分)幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎

3、和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后,進行分離培養(yǎng)。實驗基本步驟如下: 配制培養(yǎng)基→滅菌、倒平板→X→培養(yǎng)→觀察 請回答: (1)在配制培養(yǎng)基時,要加入尿素和酚紅指示劑,這是因為Hp含有　　,它能以尿素作為氮源;若有Hp,則菌落周圍會出現(xiàn)　　色環(huán)帶。? (2)下列對尿素溶液進行滅菌的最適方法是　　滅菌。? A.高壓蒸汽 B.紫外燈照射 C.70%酒精浸泡 D.過濾 (3)步驟X表示　　。在無菌條件下操作時,先將菌液稀釋,然后將菌液　　到培養(yǎng)基平面上,菌液稀釋的目的是為了獲得　　菌落。? (4)在培養(yǎng)時,需將培養(yǎng)皿倒置并放在　　　　　　　　　中。若不倒置培養(yǎng)

4、,將導致　　　　　　　　　。? (5)臨床上用14C呼氣試驗檢測人體是否感染Hp,其基本原理是Hp能將14C標記的　　分解為NH3和14CO2。? 解析:本題考查的是微生物的培養(yǎng)及分離等知識。(1)幽門螺桿菌(Hp)中含有脲酶,該酶能催化尿素的分解,若有Hp,則培養(yǎng)基中尿素會被分解pH升高,酚紅指示劑將變紅。(2)由于尿素不耐高熱, 在高溫濕熱滅菌中可能會降解,故一般制作尿素培養(yǎng)基時尿素溶液均用濾菌器來滅菌,稱為過濾滅菌法。(3)培養(yǎng)細菌的過程為配制培養(yǎng)基,滅菌、倒平板,接種細菌,培養(yǎng),最后觀察現(xiàn)象。無菌條件下,首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液,盡量使樣品中的微生物細胞分散開,使成單個細

5、胞存在,再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中,使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。經(jīng)培養(yǎng)后,由單個細胞生長繁殖形成菌落,統(tǒng)計菌落數(shù)目,即可計算出樣品中的含菌數(shù)。 (5)Hp中含有脲酶,該酶能催化尿素和水反應產(chǎn)生氨和二氧化碳。 答案:(1)脲酶　紅 (2)D (3)接種　涂布　單 (4)恒溫培養(yǎng)箱　無法形成單菌落 (5)尿素 3.(2011年新課標全國理綜卷)有些細菌可分解原油,從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株?；卮饐栴}: (1)在篩選過程中,應將土壤樣品稀釋液接種于以　　　　　　　　為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,從功能上講,該

6、培養(yǎng)基屬于　　　　培養(yǎng)基。? (2)純化菌種時,為了得到單菌落,常采用的接種方法有兩種,即　　　　　　　　　和　　　　　　　　。? (3)為了篩選出高效菌株,可比較單菌落周圍分解圈的大小,分解圈大說明該菌株的降解能力　　　　。? (4)通常情況下,在微生物培養(yǎng)過程中,實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、　　　　　　　　　和　。? 無菌技術(shù)要求實驗操作應在酒精燈　　　　附近進行,以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。? 解析:(1)篩選目的菌株應使用選擇培養(yǎng)基,可以在這類培養(yǎng)基中加入某種營養(yǎng)物質(zhì),促進所需要的微生物生長,這就是微生物學家常用的“投其所好”的策略。(2)平板劃線法和稀釋涂布平板法都可

7、以將聚集在一起的細菌分散或稀釋成單個細胞,進而得到單菌落。(3)目的菌株可降解原油,從而在培養(yǎng)基上形成以目的菌株為中心的分解圈,分解圈越大表明菌株的降解能力越強。(4)常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌,酒精燈火焰附近是一個無菌區(qū),故實驗操作在此處進行可防周圍環(huán)境中微生物的污染。 答案:(1)原油　選擇 (2)平板劃線法　稀釋涂布平板法 (3)強　(4)干熱滅菌　高壓蒸汽滅菌　火焰 4.(2011年山東理綜卷)研究發(fā)現(xiàn)柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白質(zhì))均有抑菌作用,兩者的提取及應用如圖所示。 (1)柚皮易焦糊,宜采用　　　　法提取柚皮精油,該過程得到的糊狀液體可通過

8、　　　　除去其中的固體雜質(zhì)。? (2)篩選乳酸菌A時可選用平板劃線法或　　　　　　　　　　　　　接種。對新配制的培養(yǎng)基滅菌時所用的設備是　　　　　　　　　　　　　。實驗前需對超凈工作臺進行　　　　處理。? (3)培養(yǎng)基中的尿素可為乳酸菌A生長提供　　　　。電泳法純化乳酸菌素時,若分離帶電荷相同的蛋白質(zhì),則其相對分子質(zhì)量越大,電泳速度　　　　。? (4)抑菌實驗時,在長滿致病菌的平板上,會出現(xiàn)以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈?？赏ㄟ^測定透明圈的　　　　來比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。? 解析:本題考查微生物培養(yǎng)及應用知識。 (1)柚皮的特點決定提取柚皮精油時應用壓榨法。該過程得到糊狀液體再

9、通過過濾除去其中的固體雜質(zhì)。 (2)篩選乳酸菌A時,應使用選擇培養(yǎng)基,接種時可用平板劃線法或稀釋涂布平板法。新配制培養(yǎng)基要先用高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌,超凈工作臺應在實驗前進行消毒處理。 (3)微生物生長都需水、碳源、氮源、無機鹽。培養(yǎng)基中尿素可為乳酸菌A提供氮源。電泳法純化乳酸菌素時,分離帶電荷相同的蛋白質(zhì),其相對分子質(zhì)量越大,電泳速度越慢。 (4)抑菌實驗時,抑菌物質(zhì)周圍不會有致病菌生存,形成一個以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈,可通過測定透明圈直徑(大小)來比較不同抑菌物質(zhì)的抑菌效果。 答案:(1)壓榨　過濾 (2)稀釋涂布平板法(或稀釋混合平板法)　高壓蒸汽滅菌鍋　消毒 (3)氮源　

10、越慢 (4)直徑(或大小) 5.(2010年重慶理綜卷)炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病。炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列,菌落呈卷發(fā)狀。對炭疽病疑似患者,可根據(jù)噬菌體的宿主專一性,通過實驗確診。 (1)細菌培養(yǎng):采集疑似患者的樣本,分離培養(yǎng),獲得可疑菌落。 (2)細菌鑒定:實驗流程如圖所示。 ①對配制的液體培養(yǎng)基等需采取　　　　方法滅菌;實驗所用液體培養(yǎng)基的碳源為　　　　(填“無機碳”或“有機碳”)。? ②挑選可疑菌落制片后,用　　　　觀察,可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。? ③接種可疑菌后,35 ℃培養(yǎng)24小時,液體培養(yǎng)基變渾濁,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　

11、。對照組試管中應加入　　　　　　　　　,與實驗組同時培養(yǎng)6小時后,若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組　　　　(填“高”或“低”),則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染;反之則排除。? ④對排除的疑似患者及易感人群,可接種炭疽桿菌疫苗,刺激機體產(chǎn)生相應抗體。與產(chǎn)生抗體相關(guān)的細胞除T細胞、B細胞外,還有　。? 解析:(2)①培養(yǎng)基的滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌法,炭疽桿菌為異養(yǎng)型,因此培養(yǎng)基的碳源應為有機碳。②觀察細菌,應使用顯微鏡。③若液體培養(yǎng)基變渾濁,是由于細菌大量繁殖造成的。由于實驗組是生理鹽水配制的澄清噬菌體液,因此,對照組應用等量的生理鹽水作為對照。若患者被炭疽桿菌感染,實驗組中的炭疽桿菌由于

12、噬菌體侵染而大量裂解死亡,渾濁度會明顯低于對照組。④抗體是在體液免疫過程中產(chǎn)生的,該過程中,吞噬細胞與抗原識別、呈遞有關(guān),效應B細胞合成、分泌抗體。 答案:(2)①高壓蒸汽　有機碳 ②顯微鏡 ③細菌大量繁殖　等量生理鹽水　低 ④吞噬細胞、效應B細胞 本題通過實驗流程圖考查炭疽桿菌的培養(yǎng)和鑒定,正確解答本題必須明確:(1)炭疽桿菌的代謝類型;(2)對照實驗的設計原則;(3)人體體液免疫的過程。 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應用 命題 剖析 考向 掃描 1 以選擇題的形式考查果酒、腐乳、果醋制作所需微生物的代謝特點,考查學生的理解能力 2 通過傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的操作過程,考查技術(shù)的操

13、作和分析,考查學生綜合分析和知識應用的能力,多以非選擇題形式出現(xiàn) 命題 動向 命題多注重對實驗基本操作方法的考查,集中在從實驗的角度剖析每項技術(shù),試題多從實驗細節(jié)入手進行考查,多以非選擇題形式出現(xiàn) 1.(2012年北京理綜卷,5,6分)高中生物學實驗中,在接種時不進行嚴格無菌操作對實驗結(jié)果影響最大的一項是(　　) A.將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中 B.將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上 C.將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無菌培養(yǎng)基上 D.將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上 解析:本題考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)、植物組織培養(yǎng)以及無菌技術(shù)。植物組織培養(yǎng)過程中,污染培養(yǎng)基的某些微生物,其分

14、裂快,生長迅速,不僅會和外植體爭奪培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì),還會產(chǎn)生代謝廢物毒害培養(yǎng)材料,導致實驗操作失敗,因此植物組織培養(yǎng)過程需要嚴格無菌操作。而葡萄酒的釀制,腐乳的制作,在選擇培養(yǎng)基上篩選菌種對無菌操作的要求相對較小。 答案:C。 2.(多選題)(2012年江蘇生物,21,3分)下列關(guān)于制作果酒、果醋和腐乳的敘述,合理的是(　　) A.在果酒發(fā)酵后期擰開瓶蓋的間隔時間可延長 B.條件適宜時醋酸菌可將葡萄汁中的糖分解成醋酸 C.果酒發(fā)酵過程中發(fā)酵液密度會逐漸減小 D.將長滿毛霉的豆腐裝瓶腌制時,底層和近瓶口處需加大用鹽量 解析:本題考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應用。在豆腐裝瓶腌制時,要逐層加鹽

15、,隨著豆腐塊層數(shù)的加高而增加鹽量,接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些,而底層用鹽最少,故D說法錯誤。 答案:ABC。 3.(2010年北京理綜卷)在家庭中用鮮葡萄制作果酒時,正確的操作是(　　) 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 A.讓發(fā)酵裝置接受光照 B.給發(fā)酵裝置適時排氣 C.向發(fā)酵裝置通入空氣 D.將發(fā)酵裝置放在45 ℃處 解析:用鮮葡萄釀造果酒的原理是酵母菌在無氧條件下,分解葡萄糖為酒精和CO2,其最適溫度應為18 ℃~25 ℃,該過程與光照無關(guān),由于發(fā)酵過程中產(chǎn)生CO2,為了防止發(fā)酵裝置爆裂,應適時排氣。 答案:B。 4.(2011年浙江自選模塊)楊梅是浙江省的特色水果

16、之一,為對其進行深加工,某廠進行了楊梅酒和楊梅醋的研制,基本工藝流程如下: 請回答: (1)在制備楊梅酒過程中,為了提高楊梅的出汁率,在壓榨前可加入一定濃度的纖維素酶和　　　　酶。甲罐頂上彎管中加水的主要目的是　　　　　　　　　　。發(fā)酵一定時間后,觀察到發(fā)酵罐內(nèi)液面不再有　　　　,說明發(fā)酵基本完畢。? (2)在制備楊梅醋過程中,乙罐內(nèi)先填充經(jīng)　　　　處理的木材刨花,然后加入含　　　　菌的培養(yǎng)液,使該菌　　　　在刨花上,再讓甲罐中發(fā)酵完畢的楊梅酒流入乙罐進行楊梅醋發(fā)酵,楊梅醋的pH可通過控制楊梅酒的　　　　來調(diào)節(jié)。? (3)若甲罐中的楊梅酒全部流經(jīng)乙罐制成楊梅醋,則乙罐中CO2的產(chǎn)生

17、量是　　　　。? A.甲罐的兩倍 B.與甲罐的相等 C.甲罐的一半 D.幾乎為零 (4)在楊梅酒和楊梅醋發(fā)酵的整個過程中,某物質(zhì)濃度隨時間變化的示意圖如下,該物質(zhì)是　　　　。? 解析:本題考查果酒和果醋的制作。(1)用纖維素酶和果膠酶水解細胞壁可提高出汁率。甲罐頂上彎管中加水可使甲罐內(nèi)物質(zhì)與外界隔絕,防止空氣及空氣中的雜菌進入罐內(nèi),不利于酒精發(fā)酵。發(fā)酵罐內(nèi)不再有氣泡(CO2)冒出,說明原料耗盡,發(fā)酵完畢。(2)木材刨花先經(jīng)滅菌防止雜菌污染,然后加入醋酸菌,使該菌附著在木材刨花上。楊梅醋的pH可通過控制楊梅酒(原料)的供應速率加以調(diào)控。(3)乙罐中醋酸菌利用酒精產(chǎn)生乙酸的反應式為:C

18、2H5OH+O2CH3COOH+H2O,該反應無CO2生成。(4)甲罐中先經(jīng)酒精發(fā)酵產(chǎn)生酒精,酒精的含量不斷上升。隨后酒精進入乙罐作為原料生成醋酸,因而酒精含量又下降。 答案:(1)果膠　防止空氣進入　氣泡冒出 (2)滅菌　醋酸　附著　流速 (3)D (4)酒精 從生物材料中提取某些特定的成分 命題 剖析 考向 掃描 1 以選擇題的形式考查實驗的操作方法,如蒸餾、壓榨和萃取,考查學生理解和應用知識的能力 2 通過實驗流程圖考查實驗操作、設計過程和分析,考查學生獲取及處理信息的能力和綜合分析的能力,多以非選擇題形式出現(xiàn) 命題 動向 命題將會結(jié)合新的背景材料考查

19、實驗操作方法和注意事項等,形式多以文字描述、圖示等出現(xiàn),題型主要以非選擇題為主 1.(2011年海南卷)許多植物含有天然香料,如薄荷葉中含有薄荷油?，F(xiàn)用薄荷葉提取薄荷油。 回答問題: (1)薄荷油是揮發(fā)性物質(zhì),提取薄荷油時應選用　　　　(鮮、干)薄荷葉作原料。其原因是　。? (2)用萃取法提取薄荷油時,采用的溶劑是　　　　,原理是? 　。? (3)用水蒸氣蒸餾法提取薄荷油時,在油水混合物中加入氯化鈉的作用是　　　　　　　　。常用于分離油層和水層的器皿是　　　　。分離出的油層中加入無水硫酸鈉的作用是　　　　,除去固體硫酸鈉的常用方法是　。? 解析:本題考查有關(guān)薄荷油提取知識。(

20、1)因為薄荷油是揮發(fā)性物質(zhì),所以應選擇鮮薄荷葉作為提取用材料。(2)因薄荷油易溶于有機溶劑,用萃取法提取薄荷油時,應選用有機溶劑。(3)用水蒸氣蒸餾法提取薄荷油時,在油水混合物中加入氯化鈉的作用是增加鹽濃度,促進油水分層,常用于分離油層和水層的器皿是分液漏斗。分離出的油層中加入無水硫酸鈉吸掉水分,后再用過濾方法除去固體硫酸鈉。 答案:(1)鮮　薄荷油易揮發(fā),鮮薄荷葉中薄荷油含量高　(2)有機溶劑　薄荷油易溶于有機溶劑　(3)增加鹽濃度,促進油水分層　分液漏斗　吸水　過濾 2.(2010年新課標全國理綜卷)下列是與芳香油提取相關(guān)的問題,請回答: (1)玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取,其理由

21、是玫瑰精油具有　　　　　　　　　　的性質(zhì)。蒸餾時收集的蒸餾液　　　　(是、不是)純的玫瑰精油,原因是　? 　。? (2)當蒸餾瓶中的水和原料量一定時,蒸餾過程中,影響精油提取量的主要因素有蒸餾時間和　。? 當原料量等其他條件一定時,提取量隨蒸餾時間的變化趨勢是　。? (3)如果蒸餾過程中不進行冷卻,則精油提取量會　　　　,原因是　。? (4)密封不嚴的瓶裝玫瑰精油保存時最好存放在溫度　　　　的地方,目的是　。? (5)某植物花中精油的相對含量隨花的不同生長發(fā)育時期的變化趨勢如圖所示。提取精油時采摘花的最合適時間為　　　　天左右。? (6)從薄荷葉中提取薄荷油時　　　　(能、不

22、能)采用從玫瑰花中提取玫瑰精油的方法,理由是　。? 解析:本題主要考查芳香油的提取。(1)根據(jù)玫瑰精油的化學性質(zhì)確定提取的方法;蒸餾時,玫瑰精油會隨水分一起蒸餾出來,因此蒸餾得到的是油水混合物。(2)影響玫瑰精油提取的因素很多,如蒸餾的時間、溫度等。(3)蒸餾過程中如果不進行冷卻,部分玫瑰精油會隨水蒸氣揮發(fā)而流失,導致精油提取量下降。(4)由于玫瑰精油具有易揮發(fā)的特點,因此,如果瓶裝的玫瑰精油密封不嚴,最好放在溫度較低的環(huán)境中,以減少揮發(fā)。(5)分析題圖可以看出,a天時花中精油的相對含量最高,是提取精油的最佳時期。(6)由于薄荷油與玫瑰精油的物理化學性質(zhì)相似,因此,可以采用提取玫瑰精油的方法

23、提取薄荷油。 答案:(1)易揮發(fā)、難溶于水、化學性質(zhì)穩(wěn)定　不是　玫瑰精油隨水蒸氣一起蒸餾出來,所得到的是油水混合物 (2)蒸餾溫度　在一定時間內(nèi)提取量隨蒸餾時間的延長而增加,一定時間后提取量不再增加 (3)下降　部分精油會隨水蒸氣揮發(fā)而流失 (4)較低　減少揮發(fā)　(5)a (6)能　薄荷油與玫瑰精油的物理化學性質(zhì)相似 植物的組織培養(yǎng) 命題 剖析 考向 掃描 多以非選擇題形式考查植物組織培養(yǎng)、花藥離體培養(yǎng)的過程及二者的區(qū)別,考查知識的理解和應用能力 命題 動向 命題將結(jié)合生產(chǎn)實際考查植物組織培養(yǎng)的操作過程和注意事項等,形式多以圖示出現(xiàn),題型主要以非選擇題為主

24、 1.(2012年廣東理綜卷,2,4分)培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是(　　) A.組織培養(yǎng) B.細胞雜交 C.顯微注射 D.核移植 解析:培育脫毒幼苗的原理是利用植物細胞的全能性,將不含病毒的植物細胞或者組織(如莖尖等)通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得幼苗,故選A。 答案:A。 2.(2011年江蘇卷)下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述,正確的是(　　) A.愈傷組織是一團有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細胞 B.二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株 C.用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子 D.植物耐鹽突變體可通過添加適量NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得 解析:愈

25、傷組織是一團無定形狀態(tài)的薄壁細胞。二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化處理后會得到單倍體植株,然后再經(jīng)秋水仙素處理,得到穩(wěn)定遺傳的二倍體植株。胚狀體外包上人工薄膜,可制成人工種子。 答案:D。 3.(2012年山東理綜卷,34,8分)辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領域。辣椒素的獲得途徑如圖。 (1)圖中①和②分別表示辣椒組織培養(yǎng)中細胞的　　　　　和　　　　過程。? (2)圖中培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基中常用的凝固劑是　　　　。培養(yǎng)基中的生長素和細胞分裂素用量的比值　　　　(填“高”或“低”)時,有利于芽的分化。對培養(yǎng)基徹底滅菌時,應采取的滅菌方法是　　　　。? (3)圖中外

26、植體的消毒所需酒精的體積分數(shù)是　　　　。用酶解法將愈傷組織分離成單細胞時,常用的酶是　　　　和纖維素酶。? (4)提取辣椒素過程中,萃取加熱時需安裝冷凝回流裝置,其目的是　　　　。? 解析:本題考查選修一第3專題“植物的組織培養(yǎng)技術(shù)”的相關(guān)知識,同時考查學生的理解能力。難度較小。(1)考查課本上的基礎知識,植物組織培養(yǎng)的兩個基本過程是脫分化和再分化。(2)考查培養(yǎng)基的配方。凝固劑是瓊脂,芽的分化需要細胞分裂素多生長素少,滅菌的方法是高壓蒸汽滅菌。(3)考查外植體的消毒和細胞分離的方法,消毒用的酒精的體積分數(shù)為70%,分離植物細胞用纖維素酶和果膠酶。(4)考查提取物質(zhì)需要的裝置,與第6專題“

27、植物有效成分的提取”相聯(lián)系,冷凝回流裝置安裝的目的是防止有機溶劑的揮發(fā)。 答案:(1)脫分化(或去分化)　 再分化 (2)瓊脂　低　高壓蒸汽滅菌 (3)70%　果膠酶 (4)防止有機溶劑的揮發(fā) 生長素和細胞分裂素的比值對于分化有影響,生長素多利于根的分化,細胞分裂素多利于芽的分化,兩者比值適中時得到愈傷組織。 4.(2012年課標全國卷,39,15分)為了探究6BA和IAA對某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響,某研究小組在MS培養(yǎng)基中加入6BA和IAA,配制成四種培養(yǎng)基(見下表),滅菌后分別接種數(shù)量相同、生長狀態(tài)一致、消毒后的莖尖外植體,在適宜條件下培養(yǎng)一段時間后,統(tǒng)計再生叢芽外植

28、體的比率(m),以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n),結(jié)果如下表。 培養(yǎng)基 編號 濃度/mg·L-1 m/% n/個 6BA IAA 1 0.5 0 76.7 3.1 2 0.1 77.4 6.1 3 0.2 66.7 5.3 4 0.5 60.0 5.0 回答下列問題: (1)按照植物的需求量,培養(yǎng)基中無機鹽的元素可分為　　　　和　　　　兩類。上述培養(yǎng)基中,6BA屬于　　　　類生長調(diào)節(jié)劑。? (2)在該實驗中,自變量是　　　　。因變量是　　　　,自變量的取值范圍是　　　　。? (3)從實驗結(jié)果可知,誘導叢芽總數(shù)最少的培養(yǎng)基是　　　

29、　號培養(yǎng)基。? (4)為了誘導該菊花試管苗生根,培養(yǎng)基中一般不加入　　　　(填“6BA”或“IAA”)。? 解析:(1)據(jù)植物的需求量,元素分為大量元素和微量元素,6BA屬于細胞分裂素類的生長調(diào)節(jié)劑。 (2)據(jù)實驗目的和實驗中的數(shù)據(jù),分析得出IAA的濃度是自變量,菊花再生叢芽外植體的比率和外植體上的叢芽平均數(shù)均是因變量;由表中數(shù)據(jù)可以看出IAA的濃度范圍是0~0.5 mg·L-1。 (3)再生叢芽的外植體數(shù)乘以外植體上叢芽平均數(shù)即為叢芽總數(shù),故最少的是1號培養(yǎng)基。 (4)因為誘導試管苗生根需要生長素用量和細胞分裂素用量的比值比較高,故培養(yǎng)基中不需要加6BA。 答案:(1)大量元素　

30、微量元素　細胞分裂素 (2)IAA濃度　再生叢芽外植體的比率(m)和再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)　0~0.5 mg·L-1 (3)1　(4)6BA 5.(2010年安徽理綜卷)草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁殖方式易將所感染的病毒傳播給后代,導致產(chǎn)量降低、品質(zhì)變差。運用微型繁殖技術(shù)可以培育出無病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本過程如下: 外植體愈傷組織芽、根植株 請回答 (1)微型繁殖培育無病毒草莓苗時,一般選取　　　　作為外植體,其依據(jù)是　。? (2)在過程①中,常用的MS培養(yǎng)基主要成分包括大量元素、微量元素和　　　　,在配制好的培養(yǎng)基中,常常需要添加　　　　,有利于外植體啟動細胞分裂形成愈

31、傷組織。接種后2~5 d,若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染,原因可能是　　　　　　　　。? (3)在過程②中,愈傷組織在誘導生根的培養(yǎng)基中未形成根,但分化出了芽,其原因可能是? 　。? 解析:(1)微型繁殖技術(shù)一般選取植物的莖尖或根尖,因為此處的分生組織剛剛形成,被病毒感染的機會很少或無病毒。(2)MS培養(yǎng)基的主要成分除了大量元素,微量元素,還應含有有機物,如糖類;培養(yǎng)基中添加植物激素能促進細胞的分裂或分化,培養(yǎng)過程應對外植體徹底消毒。(3)由愈傷組織誘導生根的培養(yǎng)基中,生長素類物質(zhì)的用量與細胞分裂素類物質(zhì)的用量的比值高;反之誘導芽的生長則比值低。 答案:(1)莖尖(或根尖)　莖尖(或根尖)病

32、毒極少,甚至無病毒 (2)有機物　植物激素　外植體消毒不徹底 (3)培養(yǎng)基中生長素類物質(zhì)用量與細胞分裂素類物質(zhì)用量的比值偏低 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) 命題 剖析 考向 掃描 以選擇題形式考查DNA和蛋白質(zhì)的分離過程,考查學生理解和應用知識的能力 命題 動向 命題將會結(jié)合新的背景材料考查DNA和蛋白質(zhì)提取的原理、方法,多以信息材料給予、圖示等形式出現(xiàn),題型主要以選擇題為主 1.(2012年江蘇生物,18,2分)下列關(guān)于“DNA粗提取與鑒定實驗”的敘述,正確的是(　　) A.洗滌劑能瓦解細胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度 B.將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸

33、水浴后冷卻變藍 C.常溫下菜花勻漿中有些酶類會影響DNA的提取 D.用玻棒緩慢攪拌濾液會導致DNA獲得量減少 解析:本題考查DNA粗提取與鑒定實驗。洗滌劑只起溶解細胞膜的作用,不影響DNA在NaCl溶液中的溶解度,故A錯。DNA溶液與二苯胺試劑在沸水浴條件下顯藍色,這里的DNA不是絲狀的DNA,故B錯。用玻棒緩慢攪拌濾液,會減少對DNA分子的破壞,使DNA獲得量增加,故D錯。 答案:C。 2.(2011年廣東理綜卷)以下關(guān)于豬血紅蛋白提純的描述,不正確的是(　　) A.洗滌紅細胞時,使用生理鹽水可防止紅細胞破裂 B.豬成熟紅細胞中缺少細胞器和細胞核,提純時雜蛋白較少 C.血紅蛋

34、白的顏色可用于凝膠色譜法分離過程的監(jiān)測 D.在凝膠色譜法分離過程中,血紅蛋白比相對分子質(zhì)量較小的雜蛋白移動慢 解析:本題考查血紅蛋白的提取和分離技術(shù)。生理鹽水與細胞內(nèi)液的濃度相等,可防止紅細胞因過量吸水而破裂,A項正確。在凝膠色譜法分離血紅蛋白的過程中,可根據(jù)其顏色監(jiān)測血紅蛋白的洗脫情況,故C項正確。蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量越大,在凝膠色譜法分離過程中的移動速度越快,故D項錯。 答案:D。 3.(2010年江蘇卷)某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動,具體步驟如下: 材料處理:稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份,每份10 g。剪碎后分成兩組,一組置于20 ℃、另一組置于-20 ℃條件

35、下保存24 h。 DNA粗提取: 第一步:將上述材料分別放入研缽中,各加入15 mL研磨液,充分研磨。用兩層紗布過濾,取濾液備用。 第二步:先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液,再加入20 mL體積分數(shù)為95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌,使絮狀物纏繞在玻璃棒上。 第三步:取6支試管,分別加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮狀物。 DNA檢測:在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑,混合均勻后,置于沸水中加熱5 min,待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結(jié)果如下表。 材料保存溫度 花菜 辣椒 蒜黃 20 ℃ ++ + +++ -20 ℃

36、 +++ ++ ++++ (注:“+”越多表示藍色越深) 分析上述實驗過程,回答下列問題: (1)該探究性實驗課題名稱是? 　。? (2)第二步中“緩緩地”攪拌,這是為了減少　。? (3)根據(jù)實驗結(jié)果,得出結(jié)論并分析。 ①結(jié)論1:與20 ℃相比,相同實驗材料在-20 ℃條件下保存,DNA的提取量較多。 結(jié)論2:　。? ②針對結(jié)論1,請?zhí)岢龊侠淼慕忉?? ? 　。? (4)氯仿密度大于水,能使蛋白質(zhì)變性沉淀,與水和DNA均不相溶,且對DNA影響極小。為了進一步提高DNA純度,依據(jù)氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基礎上繼續(xù)操作的步驟是:　,? 然后用體積分數(shù)為9

37、5%的冷酒精溶液使DNA析出。 解析:(1)由材料處理中,將不同的材料分別置于20 ℃和-20 ℃條件下保存,可知該實驗課題是:探究不同實驗材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響。(2)在DNA粗提取過程中“緩緩地”攪拌是防止DNA斷裂影響實驗效果。(3)根據(jù)結(jié)果可知:①相同的等量的材料在不同溫度下,低溫提取的DNA多,原因是低溫影響相關(guān)酶活性,使DNA的降解速度降低。②相同的溫度條件、等量的不同材料,蒜黃提取的DNA量最多。(4)據(jù)氯仿的特性,可將第三步獲得的溶液與等量的氯仿混合,一段時間后,蛋白質(zhì)變性沉淀,吸取上清液后,再加體積分數(shù)為95%的冷酒精溶液會獲得純度更高的DNA。 答案:(1)探究不同實驗材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響　(2)DNA斷裂　(3)①等量的不同實驗材料,在相同的保存溫度下,從蒜黃提取的DNA量最多 ②低溫抑制了相關(guān)酶的活性,DNA降解速度慢 (4)將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合,靜置一段時間,吸取上清液 本題通過DNA的提取實驗考查了對照性實驗的設計方法,一要注意設計對照實驗的單變量原則,二要注意DNA提取過程中不同試劑的作用及各環(huán)節(jié)操作的目的。