2018-2019學年高中生物 專題2 微生物的培養(yǎng)與應用 課題1 微生物的實驗室培養(yǎng)練習 新人教版選修1 .doc
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課題1 微生物的實驗室培養(yǎng) 1.下列有關(guān)培養(yǎng)基敘述正確的是( ) A.培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分都有碳源、氮源、水、無機鹽 B.除水以外的無機物都屬于無機鹽 C.用培養(yǎng)基培養(yǎng)甲型H1N1流感病毒作為科學研究 D.培養(yǎng)基配制過程中應調(diào)pH,適應各微生物的生長 解析:固氮微生物培養(yǎng)基可無氮源,有的無機物如NH4NO3可作氮源,H1N1流感病毒必須寄生在細胞內(nèi),不能用培養(yǎng)基培養(yǎng)。 答案:D 2.下列關(guān)于微生物的培養(yǎng)和分離的敘述中,不正確的是( ) A.細菌能在液體培養(yǎng)基中以二分裂方式迅速擴增 B.噬菌體或大腸桿菌可在蛋白胨培養(yǎng)基中增殖 C.滅菌的目的是消滅與培養(yǎng)菌競爭的雜菌 D.稀釋涂布法分散細菌得到單菌落的效果更好 解析:細菌繁殖方式是二分裂方式,噬菌體是沒有細胞結(jié)構(gòu)的病毒,需要在活細胞中才能存活,在蛋白胨培養(yǎng)基中不能增殖;滅菌目的是防止雜菌和培養(yǎng)菌發(fā)生競爭。 答案:B 3.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是( ) A.計算、稱量、倒平板、溶化、滅菌 B.計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌 C.計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板 D.計算、稱量、滅菌、溶化、倒平板 解析:制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基,應先根據(jù)需要計算各成分用量,然后稱量、溶化、滅菌、倒平板。 答案:C 4.平板冷凝后,要將平板倒置,其原因是( ) A.接種時再拿起來方便 B.在皿底上標記日期等方便 C.正著放置容易破碎 D.防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染 解析:平板倒置主要是防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。 答案:D 5.下表是從土壤中分離純化土壤細菌的培養(yǎng)基配方。請回答下面的問題。 試劑 用量 試劑 用量 牛肉膏 5 g 瓊脂 20 g 胨 10 g 水 1 000 mL NaCl 5 g — — (1)培養(yǎng)基的類型很多,但培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、________和無機鹽。上述培養(yǎng)基配方中能充當碳源的成分是__________________。培養(yǎng)基配制完成以后,一般還要調(diào)節(jié)pH并對培養(yǎng)基進行________處理。 (2)分離純化微生物最常使用的接種方法是______________和____________。 (3)假設培養(yǎng)結(jié)束后,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上菌落連成一片,可能的原因是什么?(列舉兩項) _______________________________________________________ _______________________________________________________ 解析:(1)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中一般含有水、無機鹽、碳源、氮源和生長因子。牛肉膏、蛋白胨既是碳源又是氮源;培養(yǎng)基在接種前必須滅菌處理。 (2)微生物的接種方法包括平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種。 (3)多種因素都會導致接種的菌種密度較大,沒有形成單一的菌落。 答案:(1)氮源 牛肉膏和蛋白胨 滅菌 (2)平板劃線法 稀釋涂布平板法 (3)稀釋倍數(shù)不夠,菌液的濃度太高;劃線時,劃完第一次沒有滅菌又接著劃第二次;培養(yǎng)過程滅菌不嚴格,受到微生物的污染 A級 基礎鞏固 1.下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述正確的是( ) A.培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì) B.培養(yǎng)基只有兩類:液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基 C.固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基 D.微生物在固體培養(yǎng)基上生長時,可以形成肉眼可見的單個細菌 解析:培養(yǎng)基除固體、液體培養(yǎng)基外,還有半固體培養(yǎng)基,B錯誤;固體培養(yǎng)基中加入了凝固劑,加入少量水仍為固體培養(yǎng)基,C錯誤;微生物在固體培養(yǎng)基上生長時,可以形成肉眼可見的菌落,但不一定是單個菌落,D錯誤。 答案:A 2.下面對微生物培養(yǎng)中滅菌的理解不正確的是( ) A.防止雜菌污染 B.滅菌就是殺死培養(yǎng)基中的雜菌 C.培養(yǎng)基和培養(yǎng)設備都必須進行滅菌 D.滅菌必須在接種前 解析:滅菌的目的是防止雜菌污染,但實際操作中不可能只消滅雜菌,而是消滅全部微生物。 答案:B 3.用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設置的對照是( ) A.未接種的選擇培養(yǎng)基 B.未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 C.接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 D.接種了的選擇培養(yǎng)基 解析:將菌液稀釋相同的倍數(shù),在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目,因此,用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照。對照實驗遵循的原則之一是單一變量,所以與選擇培養(yǎng)基一樣接種、培養(yǎng)。 答案:C 4.自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基的主要差別在于( ) A.碳源 B.氮源 C.無機鹽 D.生長因子 解析:自養(yǎng)型微生物主要包括進行光合作用或進行化能合成作用的微生物,他們能夠利用CO2來合成自身所需的有機物;而異養(yǎng)型微生物主要是直接利用外界的有機物來合成自身所需的有機物,所以他們培養(yǎng)基的主要差別就在于自養(yǎng)型微生物主要是利用無機物中的碳,而異養(yǎng)型微生物主要是利用有機物中的碳。 答案:A 5.下列制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述,錯誤的是( ) A.操作順序為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌 B.將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯 C.將培養(yǎng)基冷卻至50 ℃左右時進行倒平板 D.將平板冷卻凝固約5~10 min后將平板倒過來放置 解析:制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板,順序不能顛倒。牛肉膏容易吸潮,所以當牛肉膏融化并與稱量紙分離后,用玻璃棒取出稱量紙。將培養(yǎng)基冷卻至50 ℃,用手觸摸錐形瓶感覺剛剛不燙手時倒平板,平板冷卻后還需倒置。 答案:A 6.平板冷卻凝固后要將平板倒置,其意義是( ) A.利于大腸桿菌的接種 B.有利于大腸桿菌培養(yǎng) C.利于培養(yǎng)基的冷卻 D.防止皿蓋冷卻水倒流入培養(yǎng)基,防止雜菌污染 解析:平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā),又可以防止皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。 答案:D B級 能力訓練 7.將牛奶加熱至約70 ℃然后晾至室熱,加入酸奶攪拌均勻,蓋緊蓋子,在42 ℃環(huán)境下放置4~6 h,凝固后即制成了酸奶。請回答: (1) 制作酸奶的原理是:常利用________(填“乳酸鏈球菌”或“乳酸桿菌”)在適宜的溫度下進行發(fā)酵產(chǎn)生乳酸,即為乳酸菌________的過程,該過程發(fā)生在乳酸菌細胞的____________中。 (2) 酸奶制作過程中,“牛奶加熱至約70 ℃”的目的是_________,“蓋緊蓋子”的目的是________________。 (3) 酸奶制作過程中影響發(fā)酵時間的因素有溫度、奶的品質(zhì)、乳酸菌活性、________________等。 (4) 從開始制作到成品這段時間內(nèi),牛奶逐漸變酸,這段時間內(nèi)牛奶中乳酸菌和其他雜菌的消長規(guī)律是____________________,原因是____________________。 解析:(1) 酸奶的制作是利用乳酸桿菌無氧呼吸產(chǎn)生乳酸的過程,乳酸菌無氧呼吸的場所是細胞質(zhì)基質(zhì)。(2) “牛奶加熱至約70 ℃”的目的是通過高溫加熱殺滅雜菌,乳酸桿菌是厭氧菌,“蓋緊蓋子”是造成無氧的環(huán)境,有利于乳酸桿菌發(fā)酵。(3) 酸奶制作過程中影響發(fā)酵時間的因素有溫度、奶的品質(zhì)、乳酸菌活性、菌種接種數(shù)量等。(4) 酸奶制作過程中,由于乳酸菌進行無氧呼吸產(chǎn)生乳酸,牛奶逐漸變酸,隨乳酸菌的數(shù)量增加,牛奶的酸性增強,不耐酸的雜菌數(shù)量逐漸減少。 答案:(1) 乳酸桿菌 無氧呼吸 細胞質(zhì)(基質(zhì)) (2) 殺滅雜菌 提供無氧條件 (3) 菌種接種數(shù)量 (4) 乳酸菌數(shù)量增多,雜菌數(shù)量減少 乳酸菌比雜菌更為耐酸 8.為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量,并進行了細菌分離等工作?;卮鹣铝袉栴}: (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細菌含量。在涂布接種前,隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間,這樣做的目的是________;然后,將1 mL水樣稀釋100倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液;經(jīng)適當培養(yǎng)后,3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37,據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為________。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌,操作時,接種環(huán)通過________滅菌,在第二次及以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線,這樣做的目的是________。 (3)示意圖A和B中,________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。 (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進行靜置培養(yǎng),另一部分進行振蕩培養(yǎng),結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快,分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量,同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高________的利用率。 答案:(1)檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格 3.8107 (2)灼燒 將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個菌落 (3)B (4)溶解氧 營養(yǎng)物質(zhì) 9.為了獲得純度高的大腸桿菌,需要對大腸桿菌進行培養(yǎng)和分離。培養(yǎng)大腸桿菌一般用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基。 (1)培養(yǎng)大腸桿菌,配制固體培養(yǎng)基的基本步驟:計算→稱量→__________→__________→倒平板。 (2)稱量時,由于牛肉膏比較黏稠,可以用______挑取,放在______上稱量。由于牛肉膏和蛋白胨________,稱量時動作要迅速,稱量后要及時蓋上瓶蓋。 (3)在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基上的大腸桿菌能生長,說明培養(yǎng)基含有________________________________________________ 等大腸桿菌生長所需的營養(yǎng)要素。 (4)微生物純化培養(yǎng)可以通過多種接種方法如________和________等,使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個________,從而獲得純菌株。 解析:配制牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基的基本步驟:計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。稱量時,可用玻璃棒挑取,放在稱量紙上稱量,稱量時動作要迅速。牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基中含有大腸桿菌所需要的碳源、氮源、無機鹽、水等營養(yǎng)要素,所以常用來培養(yǎng)大腸桿菌。微生物純化培養(yǎng)的接種方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法,可使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個菌落,從而獲得純菌株。 答案:(1)溶化 滅菌 (2)玻璃棒 稱量紙 容易吸潮 (3)碳源、氮源、無機鹽、水 (4)平板劃線法 稀釋涂布平板法 菌落 10.下圖所示為平板劃線法分離純化細菌示意圖。根據(jù)所學生物學知識,完成下列問題。 (1)對接種環(huán)或涂布器滅菌時用________________法。 (2)平板劃線時,為保證每次劃線都從上次劃線末端的微生物濃度開始,所以每次劃線前都要____________________,平板劃線結(jié)束后,最后一次劃的線不能與第一次劃的線________。 (3)脲酶可以將尿素分解為NH3,從而使尿素溶液pH升高,這可用________________來檢驗。用纖維素作唯一碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物,得到的纖維素分解菌中可能還混雜有____________(生物)。 (4)抗生素可以抑制肽聚糖合成,從而可以抑制多數(shù)原核生物繁殖。實驗室現(xiàn)有酵母菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌三種微生物混雜生長的固體培養(yǎng)基。已知大腸桿菌菌落遇伊紅—美藍試劑變?yōu)樽仙?,并帶有金屬光澤;金黃色葡萄球菌耐高濃度食鹽水,菌落為金黃色;酵母菌細胞壁成分主要為幾丁質(zhì),在營養(yǎng)條件好、氧氣充足的條件下,顯微鏡下可見典型的出芽生殖。現(xiàn)在請你設計一個合理的實驗方案,從一個培養(yǎng)基中將三種微生物依次分離開來。(所需試劑可自選) 實驗方案:____________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ 解析:(1)對接種環(huán)和涂布器滅菌常采用灼燒滅菌法。(2)考查平板劃線法的操作方法,如果劃線相重合則不能分離出純種,所以平板劃線時,為保證每次劃線都從上次劃線末端的微生物濃度開始,在每次劃線前都要對接種環(huán)進行灼燒滅菌。(3)酚紅指示劑可檢驗堿性溶液。用纖維素作唯一碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物,得到纖維素分解菌,但自養(yǎng)菌利用空氣中的CO2,也能生存,需要進一步分離。(4)根據(jù)條件可以將不同微生物分離開來,即根據(jù)菌落顏色,首先分離出金黃色葡萄球菌,然后向培養(yǎng)基中加入伊紅—美藍試劑,將變?yōu)樽仙?、帶有金屬光澤的菌落分離出來,得到大腸桿菌,然后加入抗生素如青霉素,將培養(yǎng)基中的大腸桿菌和金黃色葡萄球菌殺死,得到酵母菌。 答案:(1)灼燒滅菌 (2)對接種環(huán)灼燒滅菌 相交(相接、相連、交叉等) (3)酚紅指示劑 自養(yǎng)微生物(硝化細菌) (4)根據(jù)菌落顏色,首先分離出金黃色葡萄球菌,然后向培養(yǎng)基中加入伊紅—美藍試劑,將變?yōu)樽仙в薪饘俟鉂傻木浞蛛x出來,得到大腸桿菌,然后加入抗生素如青霉素,將培養(yǎng)基中的大腸桿菌和金黃色葡萄球菌殺死,得到酵母菌(分離順序不唯一,答案合理即可) 11.(2016全國Ⅰ卷)空氣中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物,以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實驗步驟如下: ①配置培養(yǎng)基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O); ②制作無菌平板; ③設置空白對照組和若干實驗組,進行相關(guān)操作; ④將各組平板置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時間,統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù)。 回答下列問題: (1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于________。若要完成步驟②,該培養(yǎng)基中的成分X通常是________。 (2)步驟③中,實驗組的操作是__________________________。 (3)若在某次調(diào)查中,某一實驗組平板上菌落平均數(shù)為36個/平板,而空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落,這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了________現(xiàn)象。 答案:(1)牛肉膏、蛋白胨 瓊脂 (2)將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上,開蓋暴露一段時間 (3)污染- 配套講稿:
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