高中生物必修2 第四章 基因的表達 (教學(xué)設(shè)計)
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1、第四章 基因的表達 一、教材分析 (一)本章在教材中所處的地位 本章是《基因的本質(zhì)》和《基因突變和其他變異》兩章之間的銜接,是理解生物體外在性狀(蛋白質(zhì))和內(nèi)在遺傳物質(zhì)(DNA)關(guān)系的重要一章。 學(xué)習(xí)本章主要以遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯過程為主線,認識基因?qū)ι镄誀睿ǖ鞍踪|(zhì))的調(diào)控合成的問題,以及了解遺傳密碼的破譯過程。 (二)教學(xué)目標(biāo)要求 1、知識方面 (1) 理解基因控制蛋白質(zhì)合成的過程和原理。 (2) 了解基因控制性狀的原理。 (3) 知道中心法則及其發(fā)展。 (4) 知道遺傳密碼的破譯。 2、情感態(tài)度和價值觀方面 (1) 通過學(xué)習(xí)認識到事物的現(xiàn)象是由本質(zhì)決定等辯證唯
2、物主義觀點。 (2) 培養(yǎng)實事求是的科學(xué)態(tài)度及創(chuàng)新精神,合作精神。 3、能力方面 (1)培養(yǎng)學(xué)生查詢資料獲得信息,處理信息的能力。 (2)通過對新知識的探求過程,培養(yǎng)學(xué)生分析、比較判斷、綜合思維能力。 (3)通過學(xué)生的主動參與活動培養(yǎng)學(xué)生的實踐能力。 二、本章課時安排 授課時數(shù)為5課時。 三、本章每課時的教學(xué)流程 第一節(jié) 基因指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成 1、教學(xué)目標(biāo) (1)了解基因控制蛋白質(zhì)合成的中間物質(zhì)RNA的基本單位,化學(xué)組成和種類,以及它與DNA在組成、結(jié)構(gòu)、功能和分布等方面的異同。 (2)理解基因表達的轉(zhuǎn)錄和翻譯的概念和過程。 (3)比較轉(zhuǎn)錄和翻譯的
3、異同。 (4)認知和區(qū)分相關(guān)概念:遺傳信息、遺傳密碼、反密碼子。 (5)計算問題:基因(DNA)堿基、RNA堿基和氨基酸的對應(yīng)關(guān)系。 2、教學(xué)重難點 (1)理解基因表達的轉(zhuǎn)錄和翻譯的概念和過程 (2)認知和區(qū)分相關(guān)概念:遺傳信息、遺傳密碼、反密碼子。 (3)計算問題:基因(DNA)堿基、RNA堿基和氨基酸的對應(yīng)關(guān)系,以圖解方法解決。 3、教學(xué)建議 結(jié)合教材有關(guān)轉(zhuǎn)錄和翻譯的圖解或模型動畫演示。 4、課時安排:3課時 5、教學(xué)流程: 學(xué)習(xí)階段 教師組織和引導(dǎo) 學(xué)生活動 教學(xué)意圖 導(dǎo)學(xué) 引入課題 學(xué)生自學(xué)
4、 教師指導(dǎo) 學(xué)生自學(xué) 教師講解 思考討論 教師講解 思考討論 與生活聯(lián)系,激發(fā)學(xué)習(xí)和探究知識的興趣。 教師導(dǎo)學(xué) 設(shè)置問題情境 播放2分鐘《侏羅紀公園》電影. 提問:電影中的科學(xué)家是怎么使已滅絕的動物復(fù)活的? (回答:復(fù)活的恐龍是科學(xué)家利用提取恐龍的DNA培育繁殖而來的。) 教師引導(dǎo):基因就象一張藍圖,生物體就是根據(jù)這張藍圖用蛋白質(zhì)構(gòu)建造起機體來的。
5、 思考:基因(DNA)是在細胞核內(nèi),蛋白質(zhì)合成是在細胞質(zhì)的核糖體上,在細胞核的基因如何控制在細胞質(zhì)的蛋白質(zhì)合成呢? 教師指出:在DNA和蛋白質(zhì)之間,有一種中間物質(zhì)――RNA充當(dāng)信使。 復(fù)習(xí)舊知:兩種核酸(DNA和RNA)在化學(xué)元素、基本單位、化學(xué)組成、結(jié)構(gòu)、功能和分布等方面的區(qū)別? (列表,閱讀教材10分種,學(xué)生填寫) 一 細胞中的兩種核酸的比較: DNA RNA 組成元素 C、H、O、N、P 基本單位 脫氧核苷酸(4種) 核糖核苷酸(4種) 化學(xué)組成 一分子磷酸 脫氧核糖 A、T、C、G 一分子磷酸 核糖 A、U、C、G 結(jié)構(gòu) 規(guī)則的雙
6、螺旋結(jié)構(gòu) 一般單鏈結(jié)構(gòu) 功能 編碼復(fù)制遺傳信息, 控制蛋白質(zhì)合成 傳遞遺傳信息并通過蛋白質(zhì)表達出來 分布 細胞核的染色體,線粒體,葉綠體 細胞質(zhì)的核糖體 另外,教師補充:RNA的在細胞中有三種: mRNA(信使RNA),tRNA(專運RNA),rRNA(核糖體RNA)。 設(shè)問:DNA RNA 蛋白質(zhì)之間的關(guān)聯(lián)? 學(xué)生閱讀教材(P62——66)10分鐘,小組內(nèi)討論并由代表發(fā)言。 二 基因控制蛋白質(zhì)合成過程: 轉(zhuǎn)錄 翻譯 DNA RNA 蛋白質(zhì)(性狀) (一)轉(zhuǎn)錄:圖示教材P63圖4-4以DNA為模板轉(zhuǎn)錄RNA的圖解
7、。 利用視頻:顯示轉(zhuǎn)錄過程。 1 定義:轉(zhuǎn)錄是在細胞核內(nèi)進行的,是以DNA雙鏈中的一條為模板,合成mRNA的過程。 2 過程:細胞中游離的核糖核苷酸與供轉(zhuǎn)錄用的DNA的一條鏈上的堿基互補配對,在RNA聚合酶的作用下,依次連接,形成一個mRNA分子。 3 小結(jié):場所:細胞核。模板:DNA解旋,以其中一條有意義鏈為模板。原料:4種核糖核苷酸(A、U、C、G)。 合成產(chǎn)物:單鏈的mRNA(信使RNA)。所需酶:RNA聚合酶。 設(shè)問:DNA的堿基與RNA的堿基如何互補配對? G C A T DNA
8、 C G T A (有意義鏈) m RNA G C A U (二)翻譯:圖示教材P64圖4-6蛋白質(zhì)合成示意圖。 1 密碼子和反密碼子的區(qū)分: 密碼子:mRNA上相鄰的三個堿基決定一個氨基酸,每三個這樣相鄰的堿基稱為一個密碼子。 反密碼子:每個tRNA一端的這三個堿基,可以與mRNA上的密碼子互補配對,叫反密碼子。 tRNA一端的三個堿基 攜帶氨基酸的部位 tRNA
9、(轉(zhuǎn)運RNA)的特點: 像三葉草的葉形,一端是3個堿基,另一端是攜帶氨基酸的部位(如上圖)。 思考:mRNA的4種堿基如何決定20種氨基酸? 推理:1種堿基決定1種氨基酸?(不可能) 2個堿基決定1種氨基酸?(16種組合方式也不 能決定20種氨基酸,不行。) 提出:mRNA上每3個相鄰的堿基決定1個氨基酸。 小結(jié):64種密碼:61個編碼控制20種氨基酸合成,另外3個(UAG、UAA、UGA)不編碼任何氨基酸,而是合成蛋白質(zhì)的終止信號又稱終止密碼。反密碼子:61種tRNA。 游戲:請學(xué)生看教材P63圖4—4,想象一下核糖體這個生產(chǎn)車間是如何工作的?能否做一個模型顯示出
10、來? 2、翻譯: 利用視頻:顯示翻譯過程。 (1)定義:游離在細胞質(zhì)中的各種氨基酸,以mRNA為模板合成具有一定氨基酸順序的蛋白質(zhì)的過程。 ?。ǎ玻┻^程:核糖體與mRNA的結(jié)合部位會形成2個tRNA的結(jié)合位點。第一個攜帶氨基酸的tRNA的堿基與mRNA的堿基互補配對,進入位點1。第二個攜帶氨基酸的tRNA的堿基與mRNA的堿基互補配對,進入位點2。兩個氨基酸脫水縮合,第一個氨基酸通過肽鍵轉(zhuǎn)移到位點2的tRNA上。核糖體沿著mRNA移動,位點1的tRNA離開核糖體,位點2的tRNA進入位點1,第三個攜帶氨基酸的tRNA的堿基與mRNA的堿基互補配對,進入位點2,繼續(xù)肽鏈的合成,
11、直到讀取到mRNA的終止密碼為止。一個mRNA分子可以與多個核糖體結(jié)合,同時進行多條肽鏈的合成。 肽鏈合成后,從核糖體與mRNA的復(fù)合物上脫落離,經(jīng)過盤曲和折疊等方式形成具有一定空間結(jié)構(gòu)和功能的蛋白質(zhì)分子。 (3)小結(jié): 翻譯的場所:細胞質(zhì)的核糖體。翻譯的模板:以mRNA為模板。翻譯所需要的原料:20種氨基酸(由tRNA搬運)。翻譯的結(jié)果:合成了有一定氨基酸順序的肽鏈。 設(shè)問:已知mRNA的堿基序列是A U G G A A G C A U G U C C G A G C A A G C C G,這mRNA上有多少個密碼子?寫出相應(yīng)的反密碼子。并根據(jù)密碼子表,列
12、出相應(yīng)的氨基酸序列。 利用視頻演示蛋白質(zhì)合成的全過程(轉(zhuǎn)錄和翻譯過程)。 總結(jié)遺傳信息的傳遞途徑: 轉(zhuǎn)錄 翻譯 DNA RNA 蛋白質(zhì)(性狀) (三)比較復(fù)制,轉(zhuǎn)錄和翻譯三個過程的差異: DNA復(fù)制 轉(zhuǎn)錄 翻譯 場所 細胞核 細胞核 核糖體 模板 DNA雙鏈 DNA一條鏈 mRNA 原料 4種脫氧核苷酸 4種核糖核苷酸 20種氨基酸 合成 DNA分子 mRNA 肽鏈 特點 半保留復(fù)制,邊解旋邊復(fù)制 邊解旋邊轉(zhuǎn)錄 一個mRNA分子可以與多個核糖體結(jié)合 (四)與蛋白質(zhì)合成有關(guān)的計算: 思考:DNA
13、的堿基、m RNA的堿基與氨基酸個數(shù)的關(guān)系? 小結(jié): DNA的堿基數(shù):m RNA的堿基數(shù):蛋白質(zhì)的氨基酸數(shù) = 6 : 3 : 1 反饋練習(xí)(略) 學(xué)生觀看。 學(xué)生討論,回答問題。 學(xué)生思考:有中間物質(zhì)傳遞信息。 學(xué)生閱讀教材,思考問題,并填寫表格。 學(xué)生帶著問題閱讀教材,小組討論。 學(xué)生思考,回答。 學(xué)生思考,回答。 學(xué)生思考 學(xué)生
14、跟隨教師講解,理解翻譯的過程。 學(xué)生思考,回答。 學(xué)生觀看。 學(xué)生思考,小組討論,以小組發(fā)言。 完成練習(xí)。 設(shè)計新情景,引入新內(nèi)容的學(xué)習(xí)。 通過閱讀教材,進一步提高學(xué)生自學(xué)能力。 學(xué)生將教材知識建立起有機的聯(lián)系。 ? 教師導(dǎo)學(xué),進一步掌握知識要點。 并利用教材中的圖解,引導(dǎo)學(xué)生通過觀察、思考、歸納獲得知識。 教師導(dǎo)學(xué),幫助學(xué)生掌握知識要點。 利用圖解,
15、引導(dǎo)學(xué)生通過觀察、思考、歸納獲得知識。 使學(xué)生加深對基因表達過程的理解,為后兩節(jié)學(xué)習(xí)做好鋪墊。 使學(xué)生通過解決問題,靈活運用知識。 知識歸納。 知識延伸。 鞏固知識。 第二節(jié) 基因?qū)π誀畹目刂? 一 、教學(xué)目標(biāo) 1.解釋中心法則 2.舉例說明基因與性狀的關(guān)系 3.舉例說明基因間的相互作用及對生物性狀的精細調(diào)控 二、教學(xué)難點 1.教學(xué)重點 (1)中心法則。 (2)基因、蛋白質(zhì)與性狀的關(guān)系。 2.教學(xué)難點 基因、蛋白質(zhì)與性狀的關(guān)系。 三、教學(xué)方法:教師講述、啟發(fā)與學(xué)生討論
16、探索相結(jié)合。 四、課時安排:1課時。 五、教學(xué)過程 教學(xué)內(nèi)容 教師活動 學(xué)生活動 設(shè)置問題情境 復(fù)習(xí)回顧 一、中心法則及其發(fā)展 二、基因、蛋白質(zhì)與性狀的關(guān)系 (一)基因可以通過控制酶的合成控制生物性狀 實例:白化病、皺豌豆的蔗糖含量 (二)基因通過控制蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)來控制生物性狀 實例:囊性纖維病、鐮刀型細胞貧血癥 (三)關(guān)系:錯綜復(fù)雜、精細調(diào)控 練習(xí)反饋 運用多媒體手段展示一幅美
17、麗的罌粟圖片,由于它可以生成嗎啡而給人類帶來無窮的禍害,但目前科學(xué)家利用基因去除的方法可使罌粟不生成嗎啡,轉(zhuǎn)而產(chǎn)生大量的能治療瘧疾的一種化合物。 提問:為什么使用基因技術(shù)能使罌粟不生成嗎啡,轉(zhuǎn)而產(chǎn)生大量的能治療瘧疾的一種化合物?基因是如何控制生物性狀的?引出課題:基因?qū)ι镄誀畹目刂啤? 運用多媒體手段全程復(fù)習(xí)演示基因控制蛋白質(zhì)合成的全過程。然后讓學(xué)生回答出: 從DNA mRNA 蛋白質(zhì) 性狀 在復(fù)習(xí)DNA、RNA和蛋白質(zhì)關(guān)系的基礎(chǔ)上,引出本課的第一個知識點。 引導(dǎo)學(xué)生用圖解闡明遺傳信息流向:
18、 轉(zhuǎn)錄 翻譯 復(fù)制DNA RNA 蛋白質(zhì)(性狀) 引導(dǎo)學(xué)生結(jié)合資料分析閱讀教材P69“中心法則”的發(fā)展: 轉(zhuǎn)錄 翻譯 復(fù)制DNA 復(fù)制RNA 蛋白質(zhì)(性狀) 逆轉(zhuǎn)錄 歸納中心法則:介紹上述RNA自我復(fù)制過程以及逆轉(zhuǎn)錄過程的發(fā)現(xiàn),并說明這是對中心法則的補充和發(fā)展。對中心法則對遺傳信息的傳遞(DNA分子的復(fù)制)和表達(基因控制蛋白質(zhì)的合成)的功能進行小結(jié)。 以孟德爾研究過豌豆的圓粒與皺粒這對相對性狀中皺粒蔗糖含量高引出基因、蛋白質(zhì)
19、與性狀的關(guān)系: 豌豆粒形DNA (含淀粉分支酶基因) 插入外來DNA序列, (正常編碼基因) 改變淀粉分支酶基因 不能合成淀粉分支酶 能合成淀粉分支酶 蔗糖含量升高,不吸水 淀粉含量高,能吸水膨脹 皺粒 圓粒 在生物體內(nèi),基因?qū)π誀畹目刂仆?jīng)過一系列的代謝,而代謝過程中的每一步化學(xué)反應(yīng)都需要酶來催化和激素來調(diào)節(jié)。以白化病為例,講明基因不同→控制酶(蛋白質(zhì))不同→影響代謝過程→間接影響性狀。具體圖解如下: 酪氨酸酶 酪氨酸
20、 黑色素 正常基因 (突變) 基因異常 不能合成酪氨酸酶 不能合成黑色素,表現(xiàn)白化癥狀 引導(dǎo)學(xué)生舉其他例子。指出以前我們學(xué)習(xí)過的生長激素是一種多肽類激素,如果幼年時期缺乏這種激素時,就會患侏儒癥,也屬于這類情況。 生物的一切遺傳性狀都是受基因控制的。以70頁簡單闡明囊性纖維病是因為基因上堿基改變→控制蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)改變→直接造成性狀的不同: CFTR基因缺失3個堿基→第508位缺少苯丙氨酸→蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)異?!δ墚惓#ㄞD(zhuǎn)運Cl-異常)→支氣管內(nèi)黏液增多→囊性纖維病。 又如鐮刀型細胞貧血癥。我們知道人類的血紅蛋白分子是由幾百個氨基酸構(gòu)成的,正是因為這類
21、人的控制血紅蛋白分子結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)基因不正常,因而使這類人體內(nèi)合成了結(jié)構(gòu)異常的血紅蛋白而引起疾病。通過上面的講述,使學(xué)生深入理解基因是遺傳物質(zhì)的功能單位。為了節(jié)省時間,在分析過程中可以運用相應(yīng)的課件輔助,信息量大而且直觀易懂。小結(jié)基因、蛋白質(zhì)與性狀的關(guān)系: 基因 控制酶、激素合成 影響代謝(間接) 性狀 控制蛋白質(zhì)合成 ( 直接) 性狀 再通過“人的身高”這一事例說明自然界中,不僅存在單基因?qū)π誀畹目刂?,而且存在多基因?qū)π誀畹目刂?,以及環(huán)境對性狀的影響等。同時還可結(jié)合教材中“技能訓(xùn)練”“問題探討
22、”轉(zhuǎn)變?yōu)檎n堂練習(xí)的形式(詳見課堂評價部分)加以鞏固所學(xué)知識。 提問:通過以上學(xué)習(xí),我們知道控制蛋白質(zhì)的合成是細胞核DNA,除此之外,細胞中還有哪些結(jié)構(gòu)具有DNA? 細胞質(zhì)DNA與細胞核DNA有什么不同? 指導(dǎo)學(xué)生閱讀教材P70有關(guān)細胞質(zhì)DNA方面的知識 最后引導(dǎo)學(xué)生思考能否通過檢測基因來預(yù)知將患什么病,能否通過修改基因從根本上治療一些遺傳病或不治之癥。鼓勵學(xué)生通過互聯(lián)網(wǎng)等途徑去獲取一些關(guān)于基因治療、芯片技術(shù)等的開發(fā)及其發(fā)展前景方面的資料。 活躍思維,激發(fā)學(xué)習(xí)興趣 學(xué)生通過回憶基因控制蛋白質(zhì)合成的全過程,鞏固上一節(jié)課重點內(nèi)容 學(xué)生自主討論學(xué)習(xí),
23、嘗試從資料中獲取中心法則的發(fā)展和完善過程并明白科學(xué)研究是沒有盡頭的,只要努力發(fā)現(xiàn),積極探索,隨時都可能有新發(fā)現(xiàn)。 引導(dǎo)學(xué)生運用所學(xué)知識來解釋這些癥狀產(chǎn)生的原因。 讓學(xué)生感悟基因?qū)π誀畹目刂品绞绞嵌鄻拥模脠D解可以明確它們是以直接或間接的方式進行調(diào)控的,學(xué)生形成整體認識。 加深學(xué)生對有關(guān)基因?qū)ι镄誀畹目刂圃淼睦斫? 設(shè)置懸念,發(fā)散思維,激發(fā)學(xué)生關(guān)注熱點、關(guān)注社會,與生活實際相聯(lián)系,提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,培養(yǎng)學(xué)生學(xué)會利用已有知識解決問題的能力。 第3節(jié) 遺傳密
24、碼的破譯(選學(xué)) 一、 教學(xué)目標(biāo): 1.使學(xué)生能說出遺傳密碼的閱讀方式。 2.使學(xué)生能說出遺傳密碼的破譯過程。 3.使學(xué)生了解演繹推理在科學(xué)研究中的重要作用。 二、 教學(xué)重點: 遺傳密碼的破譯過程及演繹推理。 三、 教學(xué)難點: 1、格和馬太設(shè)計的蛋白質(zhì)體外合成實驗。 2.學(xué)習(xí)根據(jù)實驗結(jié)果進行演繹推理 四、課時安排: 1課時 五、教學(xué)策略: 1.采用類比的學(xué)習(xí)方法,使抽象的問題具體化。 2.以分析尼倫伯格和馬太的實驗設(shè)計思路為突破口,來幫助學(xué)生理解遺傳密碼的破譯方法。 六、教學(xué)流程: 學(xué)習(xí)階段 教師組織和引導(dǎo) 學(xué)生活動 教
25、學(xué)意圖 復(fù)習(xí)舊知,導(dǎo)出課題 點題 講解 引導(dǎo) 問題 評價 問題 問題 知識補充 引導(dǎo) 問題 鞏固練習(xí) 通過上一節(jié)內(nèi)容學(xué)習(xí)我們已經(jīng)知道,基因控制蛋白質(zhì)的合成是通過mRNA上的三聯(lián)體密碼與氨基酸的對應(yīng)關(guān)系來確定肽鏈中的氨基酸排列順序的。那么科學(xué)家是如何知道m(xù)RNA上幾個堿基構(gòu)成一個密碼?密碼的閱讀是不是重疊?哪個氨基酸對應(yīng)哪個密碼?這就是我們今天要講的遺傳密碼的破譯。 第三節(jié) 遺傳密碼的破譯 遺傳密碼的破譯:就是一個解開MRNA上的堿基與蛋白質(zhì)上氨基酸之間對應(yīng)關(guān)系的過程。
26、要解決的問題主要有三個:1、密碼子的組成。2、遺傳密碼的閱讀方式。3、密碼子和氨基酸之間對應(yīng)關(guān)系。 下面我們就來看看科學(xué)家是怎么探索這個問題的 請大家先來看看“問題請境”然后用左邊的摩日斯密碼表把右邊的這段摩日斯密碼翻譯出來 大家通過翻譯就能知道這段密碼的含義,是因為有了這張密碼表,那么要知道MRNA上的堿基排列順序的含義是不是也需要一張密碼表,這張表應(yīng)該叫什么?叫-----遺傳密碼表。 要破譯遺傳密碼首先解決的問題是什么? 問題一、每個遺傳密碼是由幾個堿基組成? 這個問題伽莫夫用數(shù)學(xué)上的排列組合方法進行了分析推理 大家想一想:四種堿基要對應(yīng)20種氨基酸,幾個堿基組成一個密碼才夠
27、?列出41 =4 42 =16 43=64 結(jié)論是3 很好!你們和伽莫夫推論是一樣的。 問題二、那么MRNA上的遺傳密碼是怎樣閱讀的呢? 教師借74頁的圖講解使學(xué)生明確:不同的閱讀方式 解讀出來的含義會完全不同。 問題三、遺傳密碼真的是以三個堿基為一組嗎?到底是哪種閱讀方式呢?這是需要證據(jù)的。1961年克里克找到了證據(jù)。 對于蛋白質(zhì)分子來說肽鏈中的非關(guān)鍵部位一個或幾個氨基酸的改變對其功能一般不會造成大的影響,但如果有很多氨基酸發(fā)生了改變,則蛋白質(zhì)分子會完全不同。 引導(dǎo)學(xué)生閱讀克里克的實驗 用由三個字母組成的英語單詞串掛圖進行類比說明:
28、插入或刪除1~2個核苷酸會使插入或刪除點后的所有密碼子發(fā)生改變,而插入或刪除3個核苷酸只會引起一個密碼子發(fā)生改變。 其實最難做的工作應(yīng)該是什么? 問題四、64個密碼各對應(yīng)什么氨基酸? 為了解決這個問題尼倫伯格和馬太想到了一個很好的方法-------用同種單位組成的多聚核苷酸在體外指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成技術(shù),展示蛋白質(zhì)體外合成實驗示意圖加以說明。 指出最后在多位科學(xué)家共同努力下,破譯出了全部密碼,并編制出了遺傳密碼表(見教材第65頁)。 學(xué)生循著老師的問題走 學(xué)生聽 。 思考想象 引導(dǎo)學(xué)生思考討論
29、 學(xué)生討論計算并回答 學(xué)生閱讀教材73-74頁相關(guān)內(nèi)容 了解 閱讀、思考、討論 閱讀教材75頁最后兩段、感悟尼倫伯格和馬太思路和方法的巧妙。 當(dāng)堂練習(xí) 誘發(fā)學(xué)生思考產(chǎn)生矛盾 讓學(xué)生明確學(xué)習(xí)的內(nèi)容 讓陌生而抽象的科學(xué)問題具體化,幫助學(xué)生理解。 讓學(xué)生參與到這個推理過程當(dāng)中來 激發(fā)學(xué)生的思維,使學(xué)生有成就感? 使學(xué)生明確閱讀方式的重要 幫助學(xué)生理解克里克的實驗推論。 讓學(xué)生感悟演繹推理在科學(xué)研究中的重要作用。 了解情況反饋 四
30、 課堂教學(xué)效果評價檢測: 第一節(jié) 基因指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成 1、已知某tRNA一端的3個堿基順序是GAU,它所轉(zhuǎn)運的是亮氨酸(亮氨酸的密碼是:UUA UUG CUU CUA CUC CUG),那么決定此氨基酸的密碼子是由下列哪個堿基序列轉(zhuǎn)錄而來( ) A.GAT B.GAU C.CUA D.CTA 【解析】 正確解答這道題,就要正確理解轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程,理解模板鏈、密碼子和反密碼子之間的關(guān)系。題中已知的一個轉(zhuǎn)運RNA的3個堿基是GAU,所運載的氨基酸是亮氮酸,則與此對應(yīng)的密碼子是CUA,則轉(zhuǎn)錄該密碼子的DNA 模板鏈上的3個堿基應(yīng)是GAT。所以答案是A。
31、 2、下圖表示基因控制蛋白質(zhì)合成過程的某階段。據(jù)圖作答: U A G U C A U U U A C C G C U G G A A A A U C 核糖體 A G U 遺傳密碼 A C G U 3 1 2 (1)圖示基因控制蛋白質(zhì)合成的_ 翻譯___階段。 (2)圖中1是以_DNA的一條鏈___為模板合成的。 (3)圖中2為_tRNA___,3是__反密碼子__。 (4)氨基酸排列順序是由1上的__ 堿基__排列順序決定的。
32、 【解析】正確理解轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程:信使RNA是以DNA的一條鏈為模板轉(zhuǎn)錄合成的。理解模板鏈、密碼子和反密碼子之間的關(guān)系:密碼子的位置是在信使RNA上,是信使RNA上決定氨基酸的3個相鄰的堿基。反密碼子是轉(zhuǎn)運RNA一端的3個與密碼子配對的3個堿基。 3、假設(shè)有一段mRNA上有60個堿基,其中A有15個,G有25個,那么轉(zhuǎn)錄該mRNA的DNA分子區(qū)段中,C和T的個數(shù)共有( ) A.15個 B.25個 C.40個 D.60個 解析 mRNA上有60個堿基,則轉(zhuǎn)錄成該mRNA的DNA中應(yīng)有120個堿基。DNA是雙螺旋結(jié)構(gòu),分子中有兩條鏈。按照
33、堿基互補配對原則,A=T,G=C,則在雙鏈 DNA分子中,A+C= C+T。所以C+T=60。這道題有一個陷附,即mRNA的60個堿基中,有15個A,25個G,如果把注意力集中在這兩個數(shù)據(jù)上,將無法得到一個確定的答案。答案是D。 第二節(jié) 基因?qū)π誀畹目刂? 1.遺傳學(xué)家曾做過這樣的實驗:長翅果蠅幼蟲正常培養(yǎng)溫度為250C,將孵化后4~7d的長翅果蠅幼蟲,在35~370C處理6~24h后,得到了某些殘翅果蠅。這些殘翅果蠅在正常環(huán)境溫度下產(chǎn)生的后代仍然是長翅果蠅。此實驗不能說明( ) A. 環(huán)境條件的改變可以引起生物性狀的改變 B. 控制長翅果蠅的基因的表達受溫度影響 C.翅
34、的發(fā)育過程經(jīng)過酶的催化作用 D.基因控制生物體性狀時受環(huán)境影響 解析:本題考查的是在生物體內(nèi),基因?qū)π誀畹目刂频拇x過程中的每一步化學(xué)反應(yīng)都需要酶來催化和激素來調(diào)節(jié)。而酶又受溫度、pH值等影響。所以答案是C。 2.同一株水毛茛,裸露在空氣中的葉和浸在水中的葉,表現(xiàn)出了兩種不同的形態(tài)。下列各項中,對此說法正確的是( ) A.水上部分只含有控制形成寬形葉的基因 B.水下部分只含有控制形成窄形葉的基因 C.水上部分既含有形成寬形葉的基因,也含有形成窄形葉的基因 D.基因相同則性狀相同,基因不同則性狀不同 解析:本題考查的是環(huán)境對性狀的影響,水毛茛裸露在空氣中的葉和浸在水中的葉含
35、有相同的基因。所以答案是C。 3.已知甲、乙、丙三種類型的病毒,它們的遺傳信息的傳遞方式分別用下圖表示,請對圖仔細分析后回答下列問題: 甲 乙 丙 DNA RNA RNA ⑦ ① ③ ④ ⑥ DNA
36、 ⑧ ⑩ RNA ② ⑤ ⑨ 蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì) (1)根據(jù)所學(xué)內(nèi)容,這三種病毒是遺傳物質(zhì)分別是: 甲 DNA 。乙 RNA 。丙 RNA 。 (2)圖中哪個標(biāo)號所示的過程是對“中心法則”的補充? ⑥ ⑦
37、 (3)圖中 ①⑧表示遺傳信息的 轉(zhuǎn)錄 過程,②⑤⑨表示遺傳信息的 翻譯 過程。 (4)圖中⑩表示遺傳物質(zhì)的 復(fù)制 過程。 解析:從圖中可看出病毒甲是DNA、乙為RNA、丙為RNA,并且甲中的DNA能自我復(fù)制,還能控制蛋白質(zhì)的合成。乙中的RNA能自我復(fù)制,且能控制蛋白質(zhì)的合成。丙中的RNA能通過逆轉(zhuǎn)錄決定DNA的結(jié)構(gòu),且能控制蛋白質(zhì)的合成。RNA的自我復(fù)制和逆轉(zhuǎn)錄的發(fā)現(xiàn)是對“中心法則”的補充。 4.在A,B,C,D四支試管中加入一定量的水和直接能源物質(zhì),都加入若干種酶,另外,在A試管DNA和脫氧核苷酸,在B試管加入RNA和脫氧核苷酸,在C試
38、管加入DNA和核糖核苷酸,在D試管加入RNA和核糖核苷酸。請回答: (1)據(jù)分析,A,B試管內(nèi)的產(chǎn)物相同,都是 DNA ,但A試管內(nèi)是 DNA復(fù)制 過程,B試管內(nèi)是 逆轉(zhuǎn)錄 過程。 (2)據(jù)分析,C,D試管內(nèi)的產(chǎn)物相同,都是 RNA ,但C試管內(nèi)是 轉(zhuǎn)錄 過程,D試管內(nèi)是 RNA復(fù)制 過程。 (3)加入C管內(nèi)DNA有60對堿基,那么C管內(nèi)產(chǎn)物中最多有 60 個堿基,相當(dāng)于有遺傳密碼 20 個。 (4)B與A相比,必須有 逆轉(zhuǎn)錄 酶。 解析:本題考查的是DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄和RNA復(fù)制的不同點。在A試管中加入DNA作為模板
39、,加入脫氧核苷酸作為原料合成DNA,屬于DNA的復(fù)制過程。在B試管中加入RNA作為模板,加入脫氧核苷酸作為原料合成DNA的過程屬于逆轉(zhuǎn)錄過程,需要逆轉(zhuǎn)錄酶催化。在C試管中加入DNA作為模板,加入核糖核苷酸作為原料合成RNA,屬于轉(zhuǎn)錄過程,需要轉(zhuǎn)錄酶催化。D試管中加入RNA作為模板,加入核糖核苷酸作為原料合成RNA,屬于RNA的復(fù)制。轉(zhuǎn)錄過程是以DNA的一條鏈為模板,所以RNA分子上的堿基數(shù)目只有模板DNA的一半,mRNA上的三個連續(xù)堿基叫一個密碼子。 第3節(jié) 遺傳密碼的破譯(選學(xué)) 1、 伽莫夫 用 數(shù)學(xué) 方法推算,首先提出一個遺傳密碼子至少應(yīng)該由 三 個堿基組成。 解析:根據(jù)排
40、列組合4種堿基如果是一個堿基就是一個密碼子最多只能對應(yīng)4種氨基酸,二個二個排列最多只能排列出16種組合,只能對應(yīng)16種氨基酸而氨基酸有20種。故密碼子致少得由三個堿基組成。 2、 克里克 通過增減基因中堿基,對其所編碼的蛋白質(zhì)的影響實驗。發(fā)現(xiàn)在相關(guān)堿基序列中增加或刪除 一 個或 二 兩個堿基都無法產(chǎn)生正常功能的蛋白質(zhì)。但是當(dāng)增加或刪除 三 個堿基時卻合成了具有正常功能的蛋白質(zhì)。從而證實了遺傳密碼是由 三 個堿基組成。是以 非重疊 的方式閱讀,編碼之間沒有 分隔符 。 解析:如果不是三個堿基組成一個密碼子,則增減三個堿基與增減一
41、或二個堿基一樣不會合成出具有正常功能的蛋白質(zhì)。如果是重疊閱讀則增減的堿基數(shù)越少對蛋白質(zhì)的影響就越小。如果有分隔符則改變一個、二個或三個堿基的效果應(yīng)該是一樣的。 3、 尼倫伯格 和 馬太 用蛋白質(zhì)的 體外合成 技術(shù)破譯了第一個遺傳密碼。 4.以m RNA(CUCUCUCUCUCUCUCUCU)為模板合成了多聚絲氨酸肽鏈,去掉左邊第一個堿基C得到的還是多聚絲氨酸肽鏈,可是如果去掉右邊第一個堿基U得到的卻是多聚亮氨酸肽鏈,則可推知絲氨酸和亮氨酸的密碼子分別是( ) A、 CUC UCU B、CUC CUC C、 UC
42、U UCU D、UCU CUC 解析:該m RNA的密碼子從右邊讀起。所以答案是D。 五 本章知識線索圖: 有遺傳效應(yīng)的片段 基因 DNA(遺傳信息) 轉(zhuǎn) 逆 錄 轉(zhuǎn) 控 錄 ?。恚遥危? 制 ?。恚遥危粒ㄟz傳密碼) RNA ?。颍遥危? 蛋 翻 ?。簦遥危粒ǚ疵艽a子) 白 譯
43、 伽莫夫?qū)γ艽a子組成及閱讀方式的分析 質(zhì) 遺傳密碼的破譯 克里克對密碼子組成及閱讀方式的證明 的 多肽 尼倫伯格和馬太對密碼子和氨基酸關(guān)系的破譯 合 成 (調(diào)節(jié))間接控制 激素和酶等 細胞代謝 蛋白質(zhì) (結(jié)構(gòu))直接控制 性狀 結(jié)構(gòu)蛋白 細胞結(jié)構(gòu)
44、 六 本章教學(xué)資源鏈接: 1 RNA分子的種類: RNA分子是許許多多核糖核苷酸分子連接而成的鏈狀結(jié)構(gòu)。RNA分子都是單鏈的。根據(jù)RNA分子功能的不同,分為3種類型:信使RNA(mRN A)、轉(zhuǎn)運RNA(tRNA)和核糖體RNA(rRNA)。 mRNA的功能將基因中的遺傳信息傳遞到蛋白質(zhì)上。tRNA的功能是識別遺傳密碼和運載特定的氨基酸。rRNA是核糖體中的RNA,在蛋白質(zhì)合成的過程中起重要的作用(具體不作要求)。 mRNA的空間結(jié)構(gòu)是鏈狀的。tRNA的空間結(jié)構(gòu)是呈三葉草形,tRNA一端大環(huán)上的3個堿基能夠與mRNA的密碼子配對,識別密碼子,所以這3個稱為反
45、密碼子。mRNA具有特定的空間結(jié)構(gòu),是核糖體的核心部位。RNA都是從DNA上轉(zhuǎn)錄下來的。轉(zhuǎn)錄的場所是在細胞核,其中合成rRNA是在細胞核中的核仁部位完成的,核仁是形成核糖體的場所。mRNA和tRNA是在細胞核中核仁以外的部位轉(zhuǎn)錄的。(轉(zhuǎn)錄是以DNA分子中(基因中)的一條鏈為模板,按照堿基互補配對原則合成RNA的過程。) 2 轉(zhuǎn)錄過程的拓展與補充: 轉(zhuǎn)錄的過程:轉(zhuǎn)錄是指以DNA的一條鏈為摸板,在RNA聚合酶的作用下,按照堿基互補配對原則,合成RNA的過程。轉(zhuǎn)錄是在細胞核內(nèi)進行的。RNA沒有堿基T(胸腺嘧啶),而有堿基U(尿嘧啶)。因此,在以DNA為模板合成RNA時,需要以U代替T與A配對
46、,由于RNA也有堿基結(jié)構(gòu),也與DNA所含的堿基互補配對,使RNA也具有與DNA一樣的遺傳信息。DNA轉(zhuǎn)錄不是整條,只是片段被轉(zhuǎn)錄,稱轉(zhuǎn)錄單位,一條DNA可包括許多轉(zhuǎn)錄單位,每個轉(zhuǎn)錄單位只有一條鏈被轉(zhuǎn)錄,這條鏈稱有意義鏈,另一條稱反意義鏈。轉(zhuǎn)錄不需要引物。DNA轉(zhuǎn)錄的最初產(chǎn)物是與有意義鏈差不多等長的RNA鏈,稱為前體RNA。它要經(jīng)過剪接、加工修飾過程才能轉(zhuǎn)變成有功能的RNA。在剪接過程中,一種SnRNA分子具有催化作用。有功能的mRNA、tRNA、rRNA通常要短得多,特別是mRNA中不再含基因中的內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。 具體RNA轉(zhuǎn)錄過程如下圖所示,具體步驟為起始位點的識別、起始、延伸、終止。以大
47、腸桿菌的研究為例作如下介紹。 (1) 起始位點的識別 RNA的合成不需要引物。體外試驗表明,不含σ亞基的核心酶會隨機地在一個基因的兩條鏈上啟動。當(dāng)有σ亞基時就會選擇正確的起點。RNA聚合酶先與DNA模板上的特殊啟動子部位結(jié)合,σ因子起著識別DNA分子上的起始信號的作用。DNA分子上的起始信號,即“啟動序列”稱為啟動子。為方便起見,在DNA上使RNA分子開始合成的第一個核苷酸標(biāo)為+1,它的5′上游標(biāo)為(-),3′下游標(biāo)為(+)。通過比較原核生物的啟動子的結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)在轉(zhuǎn)錄起點上游大約-10處有6個堿基的TATATA保守序列,稱為Pribnow框,約在-35處有TTGACA保守序列。啟動子的
48、結(jié)構(gòu)至少由三部分組成:-35序列提供了RNA聚合酶全酶識別的信號。-10序列是酶的緊密結(jié)合位點。第三部分是RNA合成的起始點。雖然單獨的核心酶能與DNA結(jié)合,但主要是由于堿性蛋白質(zhì)與酸性核酸之間的非特異性靜電引力造成的,DNA仍保持雙螺旋形式,而σ亞基能改變RNA聚合酶與DNA之間的親和力,大大地增加酶與啟動子的結(jié)合常數(shù)和停留時間。因此開始時核心酶在σ亞基參與下與DNA分子接觸,形成非專一性復(fù)合物,這樣的復(fù)合物是很不穩(wěn)定的,酶分子可在DNA鏈上滑動。在σ亞基作用下幫助全酶迅速找到啟動子,并與之結(jié)合生成較松弛的封閉型啟動子復(fù)合物。這時酶與DNA外部結(jié)合,識別部位大約在啟動子的-35位點處。接著是
49、DNA構(gòu)象改變活化,得到開放型的啟動子復(fù)合物,此時酶與啟動子緊密結(jié)合,在-10位點處解開DNA雙鏈,識別其中的模板鏈。由于該部位富含A-T堿基對,故有利于DNA解鏈。開放型復(fù)合物一旦形成,DNA就繼續(xù)解鏈,酶移動到起始位點。 (2) 起始 停留在起始位點的全酶結(jié)合第一個核苷三磷酸。加入的第一個核苷三磷酸常是GTP或ATP。所形成的啟動子、全酶和核苷三磷酸復(fù)合物稱為三元起始復(fù)合物,第一個核苷酸摻入的位置稱為轉(zhuǎn)錄起始點。這時σ亞基被釋放脫離核心酶。 (3) 延伸 從起始到延伸的轉(zhuǎn)變過程,包括σ因子由締合向解離的轉(zhuǎn)變。DNA分子和酶分子發(fā)生構(gòu)象的變化,核心酶與DNA的結(jié)合松弛,核心酶可沿
50、模板移動,并按模板序列選擇下一個核苷酸,將核苷三磷酸加到生長的RNA鏈的3′-OH端,催化形成磷酸二酯鍵。轉(zhuǎn)錄延伸方向是沿DNA模板鏈的3′→5′方向按堿基配對原則生成5′→3′的RNA產(chǎn)物。RNA鏈延伸時,RNA聚合酶繼續(xù)解開一段DNA雙鏈,長度約17個堿基對,使模板鏈暴露出來。新合成的RNA鏈與模板形成RNA-DNA的雜交區(qū),當(dāng)新生的RNA鏈離開模板DNA后,兩條DNA鏈則重新形成雙股螺旋結(jié)構(gòu)。 (4) 終止 在DNA分子上(基因末端)有終止轉(zhuǎn)錄的特殊堿基順序稱為終止子(terminators),它具有使RNA聚合酶停止合成RNA和釋放RNA鏈的作用。這些終止信號有的能被RNA聚合酶
51、自身識別,而有的則需要有ρ因子的幫助。ρ因子是一個分子量為200kDa的四聚體蛋白質(zhì),它能與RNA聚合酶結(jié)合但不是酶的組分。它的作用是阻止RNA聚合酶向前移動,于是轉(zhuǎn)錄終止,并釋放出已轉(zhuǎn)錄完成的RNA鏈。對于不依賴于ρ因子的終止子序列的分析,發(fā)現(xiàn)有兩個明顯的特征:即在DNA上有一個15~20個核苷酸的二重對稱區(qū),位于RNA鏈結(jié)束之前,形成富含G-C的發(fā)夾結(jié)構(gòu)。接著有一串大約6個A的堿基序列,它們轉(zhuǎn)錄的RNA鏈的末端為一連串的U。寡聚U可能提供信號使RNA聚合酶脫離模板。由rU-dA組成的RNA-DNA雜交分子的堿基配對結(jié)合力很弱,利于RNA鏈釋放。在真核細胞內(nèi),RNA的合成要比原核細胞中的復(fù)雜
52、得多。 轉(zhuǎn)錄后要進行加工,轉(zhuǎn)錄后的加工包括: (1)剪接:一個基因的外顯子和內(nèi)含子都轉(zhuǎn)錄在一條原始轉(zhuǎn)錄物RNA分子中,稱為前mRNA(pre-mRNA),又稱核內(nèi)異質(zhì)RNA(heterogenuous nuclear RNA,huRNA)。因此前mRNA分子既有外顯子順序又有內(nèi)含子順序,另外還包括編碼區(qū)前面及后面非翻譯順序。這些內(nèi)含子順序必須除支而把外顯子順序連接起來,才能產(chǎn)生成熟的有功能的mRNA分子,這個過程稱為RNA剪接(RNAsplicing)。剪切發(fā)生在外顯子的3’末端的GT和內(nèi)含子3’末端與下一個外顯子交界的AG處。 (2)加帽:幾乎全部的真核 mRNA端都具“帽子”結(jié)構(gòu)。雖
53、然真核生物的mRNA的轉(zhuǎn)錄以嘌呤核苷酸三磷酸(pppAG或pppG)領(lǐng)頭,但在5’端的一個核苷酸總是7-甲基鳥核苷三磷酸(m7GpppAGpNp)。mNRA5’端的這種結(jié)構(gòu)稱為帽子(cap)。不同真核生物的mRNA具有不同的帽子。mRNA的帽結(jié)構(gòu)功能:①能被核糖體小亞基識別,促使mRNA和核糖體的結(jié)合。②m7Gppp結(jié)構(gòu)能有效地封閉RNA 5’末端,以保護mRNA免疫5’核酸外切酶的降解,增強mRNA的穩(wěn)定。 (3)加尾:大多數(shù)真核生物的mRNA 3’末端都有由100~200個A組成的Poly(A)尾巴。Poly(A)尾不是由DNA編碼的,而是轉(zhuǎn)錄后的前mRNA以ATP為前體,由RNA末端腺
54、苷酸轉(zhuǎn)移酶,即Ploy(A)聚合酶催化聚合到3’末端。加尾并非加在轉(zhuǎn)錄終止的3’末端,而是在轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的3’末端,由一個特異性酶識別切點上游方向13~20堿基的加尾識別信號AAUAAA以及切點下游的保守順序GUGUGUG,把切點下游的一段切除,然后再由Poly(A)聚合酶催化,加上Poly(A)尾巴,如果這一識別信號發(fā)生突變,則切除作用和多聚腺苷酸化作用均顯著降低 3.逆轉(zhuǎn)錄酶的發(fā)現(xiàn)——對中心法則補充: 1970年美國的特敏和水谷聰證實在勞氏肉瘤病毒體內(nèi)的顆粒(病毒粒子)中有一種逆轉(zhuǎn)錄酶能以RNA模板合成DNA。這是對“中心法則”的一個重要補充。 現(xiàn)在已經(jīng)證明,一個基因并不只存在一個相
55、應(yīng)的蛋白質(zhì),可能會有幾個,甚至幾十個。什么情況下會有什么樣的蛋白,這不僅決定于基因,還與機體所處的周圍環(huán)境以及機體本身的生理狀態(tài)有關(guān)。并且,基因也不能直接決定一個功能蛋白。實際上,往往是通過基因的轉(zhuǎn)錄、表達產(chǎn)生一個蛋白質(zhì)前體,在此基礎(chǔ)上再進行加工、修飾,才成為一個具生物活性的蛋白質(zhì)。這樣的蛋白質(zhì)還通過一系列的運輸過程,到組織細胞內(nèi)適當(dāng)?shù)奈恢貌拍馨l(fā)揮正常的生理作用。基因不能完全決定這樣的蛋白質(zhì)后期加工、修飾以及轉(zhuǎn)運定位的全過程。而且,這些過程中的任何一個步驟發(fā)生微細的差錯即可導(dǎo)致機體的疾病。紐約Rockefeller大學(xué)的細胞和分子生物學(xué)家Günter Blobel博士就是因其“蛋白質(zhì)內(nèi)在的信號
56、分子活性,調(diào)節(jié)自身的細胞內(nèi)轉(zhuǎn)運和定位”研究上的卓越成就,獲得了1999年諾貝爾醫(yī)學(xué)獎和生理學(xué)獎。近些年來人們又發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)間亦存在類似于mRNA分子內(nèi)的剪切、拼接,具有自身特有的活動規(guī)律。這種自主性不能從其基因編碼序列中預(yù)測,而只能通過對其最終的功能蛋白進行分析。因此說,基因雖是遺傳信息的源頭,而功能性蛋白是基因功能的執(zhí)行體?;蚪M計劃的實現(xiàn)固然為生物有機體全體基因序列的確定、為未來生命科學(xué)研究奠定了堅實的基礎(chǔ),但是它并不能提供認識各種生命活動直接的分子基礎(chǔ),其間必須研究生命活動的執(zhí)行體-蛋白質(zhì)這一重要環(huán)節(jié)。蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)研究即旨在解決這一問題。 蛋白質(zhì)組(proteome
57、)一詞,源于蛋白質(zhì)(protein)與 基因組(genome)兩個詞的雜合,意指“一種基因組所表達的全套蛋白質(zhì)”,即包括一種細胞乃至一種生物所表達的全部蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組的研究不僅能為生命活動規(guī)律提供物質(zhì)基礎(chǔ),也能為眾多種疾病機理的闡明及攻克提供理論根據(jù)和解決途徑。通過對正常個體及病理個體間的蛋白質(zhì)組比較分析,我們可以找到某些“疾病特異性的蛋白質(zhì)分子”,它們可成為新藥物設(shè)計的分子靶點,或者也會為疾病的早期診斷提供分子標(biāo)志。 與基因重組、表達、序列分析的快速、自動化程度相比,到最近為止,機體組織細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的序列分析只是實驗室小規(guī)模研究項目。隨著對生物學(xué)、物理、化學(xué)及信息學(xué)的各種尖端技術(shù)的綜合應(yīng)
58、用,蛋白質(zhì)組研究也正逐步變成高產(chǎn)量、高精確度的分析過程?,F(xiàn)今,蛋白質(zhì)組研究中主要應(yīng)用的技術(shù)包括:雙相電泳(2-DE)、新型質(zhì)譜(MS)技術(shù)、數(shù)據(jù)庫設(shè)置與檢索系統(tǒng)等。為了保證分析過程的精確性和重復(fù)性,大規(guī)模樣品處理機器人也被應(yīng)用。整個研究過程包括:樣品處理、蛋白質(zhì)的分離、蛋白質(zhì)豐度分析、蛋白質(zhì)鑒定等步驟。當(dāng)前,蛋白質(zhì)組分析雖然以雙相電泳和質(zhì)譜分析為其技術(shù)基礎(chǔ),但離不開各種先進的數(shù)據(jù)分析和圖象分析軟件及網(wǎng)絡(luò)技術(shù)的支持。 4尼倫伯格和馬太等對密碼子和氨基酸之間對應(yīng)關(guān)系的破譯 要判斷哪個密碼子決定哪種氨基酸,首先需要一種人工合成RNA的方法和一個能夠在體外合成蛋白質(zhì)的實驗系統(tǒng),這樣,在試管中加
59、入已知序列的RNA,再通過分析新合成的蛋白質(zhì)產(chǎn)物的氨基酸序列就可以推斷密碼子和氨基酸之間對應(yīng)關(guān)系。 1955年,科學(xué)家發(fā)現(xiàn)一種被稱為多聚核苷酸磷酸化酶的生物大分子,它能在試管中催化合成RNA,而不需要DNA模板。1961年,尼倫伯格和馬太利用大腸桿菌的破碎細胞液,建立了一種利用人工合成的RNA,在試管里合成多肽鏈的實驗系統(tǒng),其中含有核糖體等合成蛋白質(zhì)所需的各種成分。當(dāng)尼倫伯格把人工合成的全部由尿嘧啶組成的RNA加入后,得到的蛋白質(zhì)只含有苯丙氨酸。這說明UUU是編碼苯丙氨酸的密碼子。這是第一個被破譯的遺傳密碼。 1966年又有科學(xué)家發(fā)明了一種新的RNA合成方法,合成的RNA可以是以2個、3個
60、、4個堿基為單位的重復(fù)序列,如AGUAGUAGUAGUAGUAGUAGU等,用它們作模板合成的蛋白質(zhì)的氨基酸序列同樣是有規(guī)律的重復(fù)的。如果用UGUGUGUGUGUGUG 作模板,得到的蛋白質(zhì)是由半胱氨酸和纈氨酸交替連接而成,則可以推知UGU是半胱氨酸的密碼子而GUG是纈氨酸的密碼子。三個終止碼就是用這種方法破譯的。 1964年,尼倫伯格等找到了另外一種高效破譯遺傳密碼的方法他們首先在體外合成全部64種三核苷酸分子即長度為3個堿基的密碼子,同時制備20種氨基酸混合液,每種混合液中分別含有一種14C標(biāo)記的氨基酸和其他19種氨基酸。然后向混合液中添加tRNA分子,以形成各種
61、氨酰t RNA,如賴氨酸—t RNA等。實驗時,取某一種三核苷酸分子如CGU和核糖體混合,再向其中加入上述氨基酸混合液,如果CGU是某種氨基酸的密碼子它便會和帶有這種氨基酸的氨酰tRNA以及核糖體結(jié)合形成體積稍大的復(fù)合體,當(dāng)使用硝酸纖維膜過濾時,只有這種可以留在膜上,而其他的氨酰tRNA分子將被沖洗掉。這樣只要檢測出硝酸纖維膜是那種氨基酸,便可知道CGU所對應(yīng)的氨基酸種類了。在多位科學(xué)家共同努力下,到1966年64個密碼子終于被全部破譯出來。 5.遺傳密碼的特點 (1)不間斷性 m RNA的三聯(lián)體密碼是連續(xù)排列的,相鄰密碼之間無核苷酸間隔。所以,若在某基因編碼區(qū)的DNA序列或其m RNA
62、中間插入或刪除1~2個核苷酸,則其后的三聯(lián)體組合方式都會改變,不能合成正常的蛋白質(zhì),這樣的突變體亦稱移碼突變,對微生物常有致死作用。 (2)不重疊性 對于特定的三聯(lián)體密碼而言,其中的每個核苷酸都具有不重疊性。例如,如果RNA分子UCAGACUGC的密碼解讀順序為:UCA、GAC、UGC,則它不可以同時解讀為UCA、CAG、AGA、GAC等。不重疊性使密碼解讀簡單而準確無誤。并且,當(dāng)一個核苷酸被異常核苷酸取代時,不會在肽鏈中影響到多個氨基酸。不過,在大腸桿菌菌體基因組中,確有部分遺傳密碼是重疊的,這可以看做一種例外現(xiàn)象。 (3)簡并性 絕大多數(shù)氨基酸具有2個以上的不同密碼子,這一現(xiàn)象稱做簡并性,編碼相同氨基酸的密碼子稱同義密碼子。由于簡并性,某些DNA堿基變化不會引起相應(yīng)蛋白質(zhì)的氨基酸序列改變,這對維持物種的穩(wěn)定性有重要意義。 (4)通用性 除線粒體的個別密碼外,生物界通用一套遺傳密碼,細菌、動物和植物等不同物種之間,蛋白質(zhì)合成機制及其mRNA都是可以互換的。例如,真核生物的基因可以在原核生物中表達,反之亦然。 (5)有起始碼和終止碼 UAG、UAA、UGA為終止碼,它們不為任何氨基酸編碼,而代表蛋白質(zhì)翻譯的終止。AUG是甲硫氨酸的密碼,同時又是起始密碼。
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