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發(fā)育生物學(xué):13 細(xì)胞的全能性

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1、 第十二章 細(xì)胞的全能性受精卵具有發(fā)育的全能性!體細(xì)胞 全能性? 158年細(xì)胞學(xué)說(shuō) 體細(xì)胞克隆羊證實(shí)細(xì)胞全能性事件:1839年,Schwann提出細(xì)胞學(xué)說(shuō)1855年,Virchow提出“細(xì)胞來(lái)自細(xì)胞”1892年,Driesch證明海膽2細(xì)胞和4細(xì)胞胚胎 的單個(gè)細(xì)胞能分別發(fā)育為完整的胚胎1938年,Spemann提出一個(gè)“奇異”的想法, 如果將一個(gè)分化的細(xì)胞的核導(dǎo)入 去核卵,形成組合細(xì)胞如何發(fā)育?1952年,Briggs和King開發(fā)細(xì)胞核移植技術(shù), 首先用美洲豹蛙的囊胚細(xì)胞進(jìn)行 核移植獲得正常發(fā)育的蝌蚪1958年,F(xiàn)ischberg,Elsdale,Gurdon用 爪蟾囊胚早期細(xì)胞做供體進(jìn)行核

2、 移植,獲得性成熟的爪蟾?jìng)€(gè)體1963年,Haldane首次使用“clone”一詞1977年,Gurdon以1只白化蝌蚪腸上皮細(xì)胞 做核供體,獲得30只白化成體蛙1981年,Illmensec和Hoppe將小鼠囊胚細(xì)胞 核移入去核受精卵,得到了幼鼠, 世界上第一例哺乳類克隆的報(bào)道1997年,Wilmut和同事采用成體母羊的乳腺 細(xì)胞做核供體,獲得了“多莉”,世 界上第一例體細(xì)胞克隆的哺乳動(dòng)物細(xì)胞核是細(xì)胞發(fā)育全能性的基礎(chǔ)!細(xì)胞核具有完整的遺傳信息,在適當(dāng)條件下能夠發(fā)育成一個(gè)完整的個(gè)體。分化細(xì)胞的遺傳物質(zhì)變化了嗎?Roux(1888)實(shí)驗(yàn)Driesch(1892)實(shí)驗(yàn)19011903年,Speman

3、n實(shí)驗(yàn):嬰兒細(xì)發(fā)分離蠑螈2細(xì)胞受精卵Roux的結(jié)論錯(cuò)誤:熱針燙死的細(xì)胞對(duì)正常的細(xì)胞具有抑制作用1933年,Schmidt實(shí)驗(yàn)(重復(fù)Roux實(shí)驗(yàn)):但把燙死的分裂球去掉,存活的分裂球發(fā)育為完整的胚胎早期胚胎分裂球是全能的DNA半保留復(fù)制證實(shí)了細(xì)胞分裂遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生變化!分化細(xì)胞遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生變化!1. DNA含量沒(méi)有變化: 牛,肝 6.4 ng、脾 6.8 ng、胸腺 6.4 ng、 胰 6.6 ng、精子 3.3 ng。2. 染色體數(shù)量沒(méi)有變化: Puck 和 Tjio檢查人體8種組織、1825個(gè) 細(xì)胞的染色體組,都是46條。3. 基因數(shù)目沒(méi)有變化: 果蠅,染色體上5000多個(gè)染色粒,每一

4、 染色粒10個(gè)基因,不同細(xì)胞中染 色粒的數(shù)量和排列順序都一樣。4. 基因全部相同: 1964年,McCarthy和Hoyer利用分子雜交 證明了小鼠分化細(xì)胞的細(xì)胞核都含有相同基因。全能性: 體細(xì)胞、胚胎細(xì)胞或細(xì)胞核具有 與合子相同的發(fā)育潛能。全能性的基礎(chǔ):細(xì)胞核包含一個(gè)物種的全套 染色體組,具有發(fā)育完整個(gè) 體所需的全部遺傳物質(zhì)。高度分化的動(dòng)物細(xì)胞,細(xì)胞逐漸失去全能性,但細(xì)胞核具有全能性。體細(xì)胞克?。?核移植 體細(xì)胞 去核卵、受精卵 (卵細(xì)胞質(zhì)作用)細(xì)胞分化:人類由200多種細(xì)胞組成。全能性、多能性、單能性、終末分化細(xì)胞高等動(dòng)物受精卵、2細(xì)胞裂球、胚胎干細(xì)胞成熟組織干細(xì)胞,補(bǔ)充衰老和死亡細(xì)胞(造

5、血干細(xì)胞,多能性)失能性:紅細(xì)胞、角化細(xì)胞、羽毛、毛發(fā)細(xì)胞分化實(shí)質(zhì):不同類型細(xì)胞合成不同種類的蛋白質(zhì)。僅有特定部分基因被激活!5% 10%基因2大類:管家基因:在所有細(xì)胞中都表達(dá)。奢侈基因:在特定細(xì)胞中專一表達(dá)。去分化:又回到未分化狀態(tài)!肝臟再生成人的肝臟一般重1500g左右,肝臟確具有極強(qiáng)的再生和恢復(fù)的能力。若將肝臟切掉一半,或者當(dāng)受到嚴(yán)重的創(chuàng)傷,殘留的正常肝細(xì)胞仍然能夠從事正常的工作。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已定實(shí),把老鼠的肝臟切掉一半后,老鼠照常進(jìn)食并且仍活潑健康地活著,檢查肝功能指標(biāo)往往仍正常。在人類,若肝臟內(nèi)長(zhǎng)了大小不等的多個(gè)瘤塊,或癌腫已使肝臟變形,但只要這些占位性病變不壓迫匯管區(qū),只要尚存在30

6、0g以上健康的肝組織,患者在消化道方面仍會(huì)無(wú)明顯癥狀,肝功能也會(huì)無(wú)太大的異常。一般講,經(jīng)手術(shù)切除肝臟75%的老鼠可于3周后迅速修復(fù)到原來(lái)的重量;同樣的情況狗需8周,而人類則需4個(gè)月左右。由此可見,肝臟具有其他器官無(wú)法比擬的旺盛的再生和恢復(fù)的能力。正由于上述理由,經(jīng)手術(shù)切除肝癌的患者至今生存10年以上者不乏其人。肝臟移植后存活5年以上的患者,在國(guó)外已有不少報(bào)道。核移植目的: 卵細(xì)胞質(zhì)作用分化細(xì)胞的細(xì)胞核 去分化細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)的開始1938, Spemann1938年,Spemann”Embryonic development and induction”“細(xì)胞核移植”1952年,美國(guó)Briggs和King,美洲豹蛙 囊胚細(xì)胞核 受精卵英國(guó)牛津大學(xué)Elsdale和Gurdon,非洲爪蟾達(dá)到了性成熟!囊胚細(xì)胞核,30%孵化期蝌蚪細(xì)胞核,6%游泳期蝌蚪細(xì)胞核,3%哺乳動(dòng)物的核移植研究1942年,大鼠2細(xì)胞胚胎裂球能發(fā)育成幼鼠1968年,兔8細(xì)胞1981年,Illmense和Hoppe,小鼠棕毛鼠胚泡核 黑毛鼠去核受精卵白毛鼠子宮3只小鼠,棕毛1983年,McGrath和Solt創(chuàng)造了全新的核移植方法病毒誘導(dǎo)融合,避免傳統(tǒng)針刺綿羊、牛、大鼠、兔、豬(胚胎細(xì)胞)體細(xì)胞核全能性的證實(shí)克隆羊“多莉”綿羊、牛、小鼠、山羊、豬(體細(xì)胞)成功率低 1% 2%畸形、體重、其他缺陷克隆人!

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