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考綱要求 1 微生物的分離和培養(yǎng) 2 果酒 果醋和腐乳的制作 3 酶在洗滌方面的應用 4 制備和應用固定化酵母細胞 5 DNA的粗提取與鑒定 滅菌 尿素 稀釋涂布平板 纖維素 剛果紅染色 化學 結合法 物理和化學性質 二苯胺 1 2014 江蘇單科 24 某同學設計了右圖所示的發(fā)酵裝置 下列有關敘述正確的是 多選 A 該裝置可阻止空氣進入 用于果酒發(fā)酵B 該裝置便于果酒發(fā)酵中產生的氣體排出 考點一微生物的培養(yǎng)與傳統(tǒng)發(fā)酵技術 典例引領 C 去除彎管中的水 該裝置可滿足果醋發(fā)酵時底層發(fā)酵液中大量醋酸菌的呼吸D 去除彎管中的水后 該裝置與巴斯德的鵝頸瓶作用相似解析該裝置中注水的彎曲部分可阻止空氣進入 能用于果酒發(fā)酵 A正確 果酒發(fā)酵產生的CO2可溶解在彎管的水中 進一步通過水排出 B正確 醋酸菌是好氧菌 因沒有通入無菌空氣 去除彎管中的水后也不能滿足底層發(fā)酵液中醋酸菌的呼吸需氧量 C錯誤 去除彎管中的水后 該裝置的彎管部分也能防止空氣中的微生物進入 與巴斯德的鵝頸瓶作用類似 D正確 答案ABD 2 2014 全國課標 39 植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解 回答下列問題 1 分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶 該酶是由3種組分組成的復合酶 其中的葡萄糖苷酶可將 分解成 2 在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅 CR 時 CR可與纖維素形成 色復合物 用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時 培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的 3 為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落 某同學設計了甲 乙兩種培養(yǎng)基 成分見下表 注 表示有 表示無 據(jù)表判斷 培養(yǎng)基甲 填 能 或 不能 用于分離和鑒別纖維素分解菌 原因是 培養(yǎng)基乙 填 能 或 不能 用于分離和鑒別纖維素分解菌 原因是 解析 1 纖維素是一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物 是含量最豐富的多糖類物質 纖維素能被土壤中某些微生物分解利用 如下圖 2 剛果紅與纖維素形成紅色復合物 當纖維素被纖維素酶分解后 紅色復合物無法形成 出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈 我們可以通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌 3 分離和鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基 且需以纖維素為唯一碳源 答案 1 纖維二糖葡萄糖 2 紅透明圈 3 不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能培養(yǎng)基中沒有纖維素 不會形成CR 纖維素紅色復合物 即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌 3 臨床使用抗生素前 有時需要做細菌耐藥實驗 實驗時 首先要從病人身上獲取少量樣本 然后按照一定的實驗步驟操作 以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性 回答下列問題 1 為了從樣本中獲取致病菌單菌落 可用 法或 法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面 經過選擇培養(yǎng) 鑒別等步驟獲得 2 取該單菌落適當稀釋 用 法接種于固體培養(yǎng)基表面 在37 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h 使其均勻生長 布滿平板 3 為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性 將分別含有A B C D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置 培養(yǎng)一段時間后 含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈 說明該致病菌對抗生素A 含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈 說明該致病菌對抗生素B 含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小 說明 含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小 且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落 在排除雜菌污染的情況下 此菌落很可能是抗生素D的 4 根據(jù)上述實驗結果 為達到抗菌目的 最好應選用抗生素 解析本題考查微生物接種和抗生素抗菌能力判斷 1 在微生物的培養(yǎng)過程中 常用來分離微生物的方法是稀釋涂布 平板 法或平板劃線法 2 為了使微生物在培養(yǎng)基上能夠均勻分布 一般用涂布法將微生物接種在培養(yǎng)基上 3 在抗藥性檢驗過程中 如果在菌落周圍出現(xiàn)透明的圓圈 說明此種抗生素可抑制該細菌生長 透明圈的大小表示此種抗生素抗菌能力的強弱 據(jù)此可判斷A B C抗菌能力強弱依次是A C B D的透明圈中出現(xiàn)了一個菌落 說明該菌落對此種抗生素具有耐藥性 4 實驗結果表明抗生素A對該致病菌的抗菌效果最好 答案 1 劃線稀釋涂布 平板 或涂布 2 涂布 3 敏感不敏感該致病菌對C的敏感性比對A的弱耐藥菌 4 A 1 微生物的培養(yǎng)與分離技術 1 微生物培養(yǎng)中的無菌操作技術 常用消毒3種方法 消毒法 巴氏消毒法及化學藥劑消毒法 常用滅菌3種方法滅菌 接種環(huán) 接種針等金屬器具 滅菌 主要針對玻璃器皿等 滅菌 主要針對等 煮沸 灼燒 干熱 高壓蒸汽 培養(yǎng)基 2 培養(yǎng)基制備與微生物純化技術 稱量 滅菌 3 篩選目的微生物的原理 原理 人為提供有利于目的菌株生長的條件 包括營養(yǎng) 溫度 pH等 同時抑制或阻止其他微生物的生長 因此 可以通過配制選擇培養(yǎng)基 控制培養(yǎng)條件等選擇目的微生物 實例 培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源可篩選到尿素細菌 培養(yǎng)基以纖維素為唯一碳源 可篩選到纖維素分解菌 2 傳統(tǒng)發(fā)酵技術的應用 1 制作果酒 果醋 腐乳 菌種的比較 2 傳統(tǒng)發(fā)酵技術必須控制的發(fā)酵條件 發(fā)酵過程都需要器材消毒 滅菌和操作過程無菌操作 加入抑制雜菌繁殖的物質 如酒精 香辛料等 控制發(fā)酵溫度 pH 氧氣濃度和發(fā)酵時間 1 某研究小組從有機廢水中分離微生物用于廢水處理 接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 2013 江蘇卷 T18C 2 用稀釋涂布平板法培養(yǎng)計數(shù) 應選擇有30 300菌落數(shù)的平板 2015 四川卷 3D 3 純化菌種時 為了得到單菌落 常采用的接種方法有兩種 即平板劃線法和稀釋涂布平板法 2011 新課標全國卷 T39 2 4 在果酒發(fā)酵后期擰開瓶蓋的間隔時間可延長 2012 江蘇 21A 錯混診斷 5 在家庭中用鮮葡萄制作果酒時 讓發(fā)酵裝置接受光照并放在45 處 2010 北京 1AD 6 與果醋 果酒制作相比 腐乳的制作所需要的適宜溫度最高 所用菌種為乳酸菌 2011 江蘇 3AC 7 在腐乳制作過程中必須有能產生蛋白酶的微生物參與 所用豆腐的含水量為70 左右 水分過多腐乳不易成形 江蘇 17AB改編 答案 1 2 3 4 5 6 7 提示 1 培養(yǎng)微生物不必在光照條件下 5 制作葡萄酒不需光照且溫度為18 25 6 腐乳制作所需菌種為毛霉 果醋制作所需溫度最高 題組1微生物的培養(yǎng)與應用 1 2015 江蘇卷 19 做 微生物的分離與培養(yǎng) 實驗時 下列敘述正確的是 A 高壓滅菌加熱結束時 打開放氣閥使壓力表指針回到零后 開啟鍋蓋B 倒平板時 應將打開的皿蓋放到一邊 以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C 為了防止污染 接種環(huán)經火焰滅菌后應趁熱快速挑取菌落D 用記號筆標記培養(yǎng)皿中菌落時 應標記在皿底上 解析A項錯 高壓滅菌加熱結束后 讓其自然冷卻后再慢慢打開排氣閥以排除余氣 然后才能開蓋取物 B項錯 倒平板時左手拿培養(yǎng)皿 右手拿錐形瓶 左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙 倒入培養(yǎng)基后立即蓋上培養(yǎng)皿皿蓋 C項錯 灼燒接種環(huán)之后 要冷卻后才能伸入菌液 以免溫度太高殺死菌種 D項正確 皿底的標記不會因為蓋子混淆而混淆 答案D 2 2014 四川卷 10 有機農藥苯磺隆是一種除草劑 長期使用會污染環(huán)境 研究發(fā)現(xiàn) 苯磺隆能被土壤中某些微生物降解 分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機制的實驗過程如圖甲 乙所示 1 微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質有碳源 水 四類 該實驗所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源 其原因是 2 與微生物培養(yǎng)基相比 植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長素和 這些植物激素一般需要事先單獨配制成 保存?zhèn)溆?3 純化菌株時 通常使用的劃線工具是 劃線的某個平板培養(yǎng)后 第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌 第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落 其他劃線上有菌落 造成劃線無菌落可能的操作失誤有 4 為探究苯磺隆的降解機制 將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心 取上清液做圖乙所示實驗 該實驗的假設是 該實驗設計是否合理 為什么 答案 1 氮源和無機鹽只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長和繁殖 2 細胞分裂素母液 3 接種環(huán) 接種環(huán)灼燒后未冷卻 劃線未從第一區(qū)域末端開始 4 目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質不合理 缺少空白對照 1 分離微生物所用的選擇培養(yǎng)基一定是固體培養(yǎng)基 因為菌落只能在固體培養(yǎng)基上形成 2 平板劃線法只適用于微生物的提純 不適合進行計數(shù) 并且在最后一次劃線的末端處的菌種最純 3 倒平板的溫度一般在50 左右適宜 溫度過高會燙手 過低培養(yǎng)基又會凝固 4 平板需倒置 這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā) 又防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基 造成培養(yǎng)基污染 題組2傳統(tǒng)發(fā)酵技術的應用 1 2015 江蘇卷 17 關于 腐乳的制作 實驗 下列敘述錯誤的是 A 將腐乳坯堆積起來會導致堆內溫度升高 影響毛霉生長B 腐乳坯若被細菌污染 則腐乳坯表面會出現(xiàn)黏性物C 勤向腐乳坯表面噴水 有利于毛霉菌絲的生長D 裝壇階段加入料酒 可有效防止雜菌污染 解析A項對 將腐乳坯堆積起來會導致微生物大量繁殖 堆內溫度升高 影響毛霉生長 B項對 正常情況下毛霉等菌種 會使豆腐表面長出一層菌絲 被細菌污染 腐乳坯表面會出現(xiàn)黏性物 C項錯 適于做腐乳的豆腐含水量為70 左右 適于毛霉菌絲生長 再加水不利于腐乳成型 D項對 加入料酒 可抑制雜菌生長 答案C 2 2015 江蘇卷 24 下圖為蘋果酒的發(fā)酵裝置示意圖 下列敘述錯誤的是 多選 A 發(fā)酵過程中酒精的產生速率越來越快B 集氣管中的氣體是酵母菌無氧呼吸產生的CO2C 發(fā)酵過程中酵母種群呈 J 型增長D 若發(fā)酵液表面出現(xiàn)菌膜 最可能原因是發(fā)酵瓶漏氣 解析A項錯 發(fā)酵后期 底物減少 酒精濃度增加等因素 都會造成酒精產生速率減慢 B項錯 發(fā)酵初期 由于發(fā)酵瓶中有氧氣 酵母菌能進行有氧呼吸產生二氧化碳 C項錯 酵母菌種群不呈 J型 增長 D項對 發(fā)酵瓶漏氣 會使醋酸菌大量繁殖而形成表面觀察到的菌膜 答案ABC 3 根據(jù)傳統(tǒng)發(fā)酵技術的相關知識 回答下列問題 1 果酒的制作 制作果酒時 發(fā)酵瓶可用體積分數(shù)為70 的酒精進行 填 消毒 或 滅菌 從微生物培養(yǎng)的角度分析 果汁能夠為制作果酒所用的酵母菌提供水 和無機鹽 2 果醋的制作 制作果醋所用的微生物只有當 充足時 才能進行旺盛的生理活動 在制作果醋的過程中 要將溫度嚴格控制在 3 腐乳的制作 腐乳的制作有多種微生物參與 其中起主要作用的是 在制作腐乳的過程中 加鹽和加酒所發(fā)揮的相同作用是 答案 1 消毒 碳源氮源 2 氧氣 30 35 3 毛霉 抑制微生物的生長 避免豆腐塊腐敗變質 果酒和果醋發(fā)酵裝置的設計思路 酵母菌繁殖需要氧氣 醋酸菌是好氧細菌 則果酒制作前期和果醋制作整個過程都需要氧氣 酵母菌產生酒精時是厭氧的 則在充氣口處應該設置開關 發(fā)酵過程中產生CO2 需要設置排氣口 為了防止空氣中微生物污染 排氣口應該連接一個長而彎曲的膠管 為便于取樣及監(jiān)測發(fā)酵情況 需要設置出料口 1 2014 江蘇高考 18 下列關于加酶洗衣粉的敘述 正確的是 A 高溫易使酶失活 因此冷水洗滌去污效果應該比溫水好B 洗衣粉中表面活性劑對堿性蛋白酶活性有一定的促進作用C 在pH低于7 0的自來水中 堿性蛋白酶依然能起作用D 洗衣粉中酶主要是通過快速分解溶在水里的污漬發(fā)揮作用 考點二酶的應用 典例引領 解析加酶洗衣粉中的酶在水溫45 60 時 能充分發(fā)揮洗滌作用 水溫高于60 時 堿性蛋白酶要失去活力 水溫低于15 時 酶的活性迅速下降 影響洗滌效果 A項錯誤 表面活性劑能影響堿性蛋白酶活性 還會使酶失活 B項錯誤 堿性蛋白酶適合的pH值為6 0 8 5 C項正確 蛋白質是衣物上最普遍存在的污垢 而且是最難被表面活性劑和其他助洗劑所去除的 蛋白酶能把衣物上蛋白質先分解成可溶性的肽 然后再分解成氨基酸 從而很容易被洗去 D項錯誤 答案C 2 2015 江蘇單科 11 下列關于固定化酶和固定化細胞的敘述 錯誤的是 A 固定化酶的主要目的是實現(xiàn)酶的重復利用B 溶解氧交換受阻是固定化酶應用的重要限制因素C 固定化細胞用于生產能分泌到細胞外的產物D 凝膠與被包埋細胞之間不是通過共價鍵結合解析A項 固定化酶制作的目的是能夠順利從發(fā)酵產物中把酶分離出來 能夠使酶反復使用 B項 溶解氧交換受阻會影響細胞呼吸 是固定化細胞應用的重要限制因素 C項 固定化細胞常用于生產能分泌到細胞外的產物如固定化酵母細胞用于生產酒精 D項 將細胞包埋在多孔載體內部而制成固定化細胞 細胞并不與凝膠通過共價鍵結合 B 3 2013 江蘇單科 6 下列有關固定化酶和固定化細胞的敘述 正確的是 A 可用包埋法制備固定化酵母細胞B 反應產物對固定化酶的活性沒有影響C 葡萄糖異構酶固定前后專一性不同D 固定化細胞可以催化各種反應底物的一系列反應解析本題考查固定化酶和固定化細胞的相關知識 可用包埋法制備固定化酵母細胞 有些反應產物可與相應酶結合 進而影響固定化酶的活性 葡萄糖異構酶固定前后專一性不變 固定化細胞固定的是一系列酶 催化一系列反應 不能催化各種反應底物的一系列反應 A 1 制備固定化酵母細胞固定酵母細胞的方法 包埋法 步驟如下 1 酵母細胞的活化 酵母菌吸水 由休眠狀態(tài)恢復為正常狀態(tài) 2 配制CaCl2溶液 CaCl2溶液用于增強凝膠珠的強度 4 海藻酸鈉溶液與酵母細胞混合 5 固定化酵母細胞 將海藻酸鈉酵母細胞混合液滴加到CaCl2溶液中 2 探尋在酶的實驗探究中應注意的問題 1 實驗設計時要遵循 和 兩大原則 嚴格控制 2 探究不同溫度 或pH 對酶活性的影響時 作為自變量 通常通過設置 來確定最適值 最適值是通過比較相同時間內獲得的 來確定的 3 探究最適溫度時 為無關變量 探究最適pH時 溫度最好為 4 探討加酶洗衣粉的最適溫度要根據(jù)生活中的實際情況 合理設置 5 在使用加酶洗衣粉時不但要考慮最佳洗滌效果條件 還要考慮到酶的 和 的問題 3 果膠酶可以提高果汁的出汁率 還可以提高果汁的澄清度 單一變量 對照 無關變量 溫度 或pH 合理的梯度 產量或效果 pH 最適溫度 溫度梯度 專一性 洗滌成本 1 用果膠酶澄清果汁時 溫度越低澄清速度越快 2015 江蘇卷 7C 2 洗衣時 加少許白醋能增強加酶洗衣粉中酶的活性 2015 江蘇卷 7D 3 下列關于固定化酶和固定化細胞的敘述 判斷正誤 2015 江蘇卷 11 固定化酶的主要目的是實現(xiàn)酶的重復利用 溶解氧交換受阻是固定化酶應用的重要限制因素 錯混診斷 固定化細胞用于生產能分泌到細胞外的產物 凝膠與被包埋細胞之間不是通過共價鍵結合 4 嫩肉粉是以蛋白酶為主要成分的食品添加劑 就酶的作用特點而言 室溫下先與肉片混勻放置一段時間再炒熟的使用方法最佳 廣東文基 72D改編 5 用含蛋白酶的洗衣粉去除油漬 效果比其他類型的加酶洗衣粉好 2010 江蘇 3D 6 棉織物不能使用添加纖維素酶的洗衣粉進行洗滌 2011 江蘇 15C 答案 1 2 3 4 5 6 提示 1 在一定范圍內 溫度越低 酶活性越低 果汁中果膠的分解速度越慢 2 洗衣粉中的堿性蛋白酶在弱堿性條件下活性最強 3 溶解氧交換受阻會影響細胞呼吸 是固定化細胞而不是固定化酶應用的重要限制因素 5 由于酶具專一性 蛋白酶不宜去除油漬 6 洗滌棉織物也可使用添加纖維素酶的洗衣粉 它可使棉織物更柔軟 題組1果膠酶及其在果汁生產中的應用 某生物興趣小組為探究不同濃度果膠酶對澄清蘋果汁出汁率的影響 進行了如下實驗 實驗步驟 制備蘋果汁 將蘋果洗凈 切成小塊 用榨汁機打碎成蘋果汁勻漿 加熱蘋果汁到100 再冷卻至50 左右 配制不同濃度的酶液 取5支10g L的試管 依次編為2 6號 分別加入不同量的質量濃度為10g L果膠酶溶液 再分別加入蘋果酸定容至10g L 獲得質量濃度分別為2g L 4g L 6g L 8g L 10g L的果膠酶溶液備用 降解蘋果汁 如下圖 沉淀 向上述6只燒杯中添加明膠 活性炭等物質攪拌處理 充分混勻后靜置 分別過濾 記錄并處理結果 用量筒測量澄清濾液 即蘋果汁 的體積記入表格 并計算出汁率 請回答下列問題 1 果膠酶能提高蘋果的出汁率并使果汁澄清的原因是 2 步驟 中 蘋果汁先加熱到100 的目的是 3 步驟 中 在2 6號試管中加入10g L果膠酶溶液的量分別是 步驟 中 在1號燒杯中加入1mL 4 根據(jù)預期結果 請繪制出澄清蘋果汁出汁率與果膠酶濃度之間大致的關系曲線 并在坐標軸上標出澄清蘋果汁最高出汁率所需的果膠酶最佳濃度 解析 1 果膠酶能分解果膠 瓦解細胞壁 從而提高出汁率并使果汁澄清 2 將蘋果汁加熱到100 可使蘋果中原有酶失活 防止對實驗結果產生干擾 3 欲獲得xg L的濃度 應加入xmL果膠酶量 在1號燒杯中加入1mL蘋果酸作為對照 4 出汁率曲線起點于縱軸某點 在一定范圍內隨果膠酶濃度升高 出汁率上升 達飽和點后穩(wěn)定 答案 1 果膠酶能分解果膠 瓦解細胞壁 2 使蘋果中的酶失活 防止對實驗結果產生干擾 3 2mL 4mL 6mL 8mL 10mL蘋果酸 4 如圖 注意坐標軸的含義 曲線變化趨勢 起點 最佳濃度 在混合蘋果泥和果膠酶之前 要將蘋果泥和果膠酶分裝在不同的試管中 每組進行同溫 或同pH 處理 其目的是保證底物和酶在混合時的溫度 或pH 相同 避免蘋果泥或果膠酶混合時影響混合物的溫度 或pH 從而影響果膠酶的活性 題組2探究加酶洗衣粉的洗滌效果 1 2012 江蘇單科 16 下列關于 探究加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗滌效果 的敘述 合理的是 A 先用熱水溶解洗衣粉 再將水溫調節(jié)到最適溫度B 實驗的觀察指標可以是相同洗滌時間內污漬的殘留程度C 相同pH時加酶洗衣粉洗滌效果好于普通洗衣粉D 衣物質地和洗衣粉用量不會影響實驗結果 解析本實驗的自變量是洗衣粉的種類 因變量是洗滌效果 無關變量有溫度 pH 衣物質地 因為酶具有專一性 洗衣粉的用量等 探究實驗中除自變量外應給予相同且適宜的其他條件 才能排除無關變量對實驗結果的干擾 根據(jù)上述分析 符合題意的是B 答案B 2 加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉 請回答下列問題 1 由圖推知 該實驗的目的是 50 時加酶洗衣粉中堿性蛋白酶的最適含量是 2 下表是添加脂肪酶的加酶洗衣粉和普通洗衣粉洗滌效果的實驗記錄 請據(jù)表回答 該實驗設計體現(xiàn)了 原則 若實驗組1號洗凈所需時間接近7min 最可能的原因是 3 下列衣料不適宜用添加蛋白酶的加酶洗衣粉洗滌的有 棉織品 毛織品 腈綸織品 蠶絲織品 4 根據(jù)以上實驗結果 寫出兩項提高加酶洗衣粉效果的措施 答案 1 探究溫度 堿性蛋白酶含量對去污力的影響0 6 2 對照 單一變量 酶失活 3 4 用溫水浸泡 延長浸泡時間 增加洗衣粉的用量等 寫出兩項合理答案方可 1 一般說來 絲綢類的衣物不可以使用加酶洗衣粉洗滌 是因為蛋白酶會水解蛋白質類的絲綢 2 酶的催化作用需要適宜的溫度 用溫水浸泡衣物可以縮短衣物的浸泡時間 加快洗滌 3 人體皮膚細胞有蛋白質 使用加酶洗衣粉后如不徹底清洗雙手 就會使手的皮膚受到腐蝕 而使人患過敏性皮炎 濕疹等 4 加酶洗衣粉的酶制劑不含肽酶 因為肽本身易溶于水 題組3固定化酶及其應用 1 2015 江蘇卷 20 下圖為制備人工種子部分流程示意圖 下列敘述正確的是 A 胚狀體是外植體在培養(yǎng)基上脫分化形成的一團愈傷組織B 該過程以海藻酸鈉作為營養(yǎng)成分 以CaCl2溶液作為凝固劑C 可在海藻酸鈉溶液中添加蔗糖 為胚狀體提供碳源D 包埋胚狀體的凝膠珠能夠隔絕空氣 有利于人工種子的儲藏 解析本題主要考查人工種子的制備 難度適中 A項錯誤 胚狀體是愈傷組織再分化得到的 B項錯誤 海藻酸鈉是凝固劑 C項正確 在海藻酸鈉溶液中添加蔗糖 不僅為胚狀體提供能量 而且是培養(yǎng)物滲透壓的主要調節(jié)者 D項錯誤 凝膠珠具有空間網狀結構 不隔絕空氣 答案C 2 2012 江蘇單科 17 下列關于酶和固定化酵母細胞的研究與應用的敘述 錯誤的是 A 從酶的固定方式看 吸附法比化學結合法對酶活性影響小B 作為消化酶使用時 蛋白酶制劑以口服方式給藥C 尿糖試紙含有固定化的葡萄糖酶和過氧化氫酶 可以反復使用D 將海藻酸鈉凝膠珠用無菌水沖洗 目的是洗去CaCl2和雜菌 解析酶的固定方式有包埋法 化學結合法和物理吸附法 物理吸附法是利用吸附劑本身的表面張力對附近的分子產生吸附 與化學結合法相比 不會使被吸附物質的性質發(fā)生改變 所以吸附法對酶活性影響較小 A項說法正確 消化酶在人體消化道內發(fā)揮作用 蛋白酶制劑一般在最外面加上糖衣后通過口服方式給藥 B項說法正確 尿糖試紙是一種將葡萄糖氧化酶 過氧化氫酶和某種無色的化合物固定于濾紙上制成的酶試紙 不能反復利用 C項說法錯誤 制作固定化酵母細胞時 將海藻酸鈉凝膠珠用無菌水沖洗的目的是洗去CaCl2和雜菌 防止凝膠珠硬度過大和雜菌污染 D項說法正確 答案C 1 酶的三種固定方法 化學交聯(lián)法 物理吸附法 包埋法 2 適用對象一般來講 酶更適合用化學結合和物理吸附法固定化 而細胞多采用包埋法固定化 這是因為個大的細胞難以被吸附或結合 而個小的酶則易從包埋材料中漏出 1 2015 江蘇卷 25 圖1 2分別為 DNA的粗提取與鑒定 實驗中部分操作步驟示意圖 下列敘述正確的是 多選 考點三DNA的粗提取與鑒定 典例引領 A 圖1 2中加入蒸餾水稀釋的目的相同B 圖1中完成過濾之后保留濾液C 圖2中完成過濾之后棄去濾液D 在圖1雞血細胞液中加入少許嫩肉粉有助于去除雜質 解析本題主要考查 DNA的粗提取與鑒定 實驗 意在考查考生理解能力和實驗能力 難度較小 A項錯誤 圖1 2中加入蒸餾水稀釋的目的分別是破碎細胞獲取含DNA的濾液 稀釋NaCl溶液 析出DNA B項正確 圖1過濾之后保留濾液 因濾液含DNA C項正確 圖2過濾之后棄去濾液 因DNA已析出 D項正確 嫩肉粉中的蛋白酶可對蛋白質進行水解 答案BCD 2 2014 江蘇卷 16 下列關于 DNA的粗提取與鑒定 實驗敘述 錯誤的是 A 酵母和菜花均可作為提取DNA的材料B DNA既溶于2mol LNaCl溶液也溶于蒸餾水C 向雞血細胞液中加蒸餾水攪拌 可見玻棒上有白色絮狀物D DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱 冷卻后變藍 解析理論上只要含DNA的生物材料都行 只是從操作難易程度上分 最好選擇容易操作的 所以酵母和菜花可作為提取DNA的材料 A正確 DNA在2mol LNaCl溶液和蒸餾水中都能溶解 只不過溶解度不同 B正確 向雞血細胞液中加蒸餾水攪拌 雞血細胞會破裂 DNA在蒸餾水中溶解度較大 不會析出 C錯誤 DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱 冷卻后變藍 D正確 答案C 3 2013 江蘇單科 4 某同學用洋蔥進行DNA粗提取和鑒定實驗 操作錯誤的是 A 加入洗滌劑后用力進行快速 充分的研磨B 用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNAC 加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌D 加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱解析破碎植物細胞時 加入洗滌劑后 動作要輕緩 柔和 否則容易產生大量的泡沫 不利于后續(xù)步驟的操作 A錯誤 答案A 1 DNA粗提取和鑒定的原理 1 DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同 即2mol LNaCl可溶解DNA 0 14mol LNaCl可析出DNA 2 DNA不被蛋白酶水解 加入嫩肉粉 可將蛋白質水解 得到DNA 3 DNA不溶于酒精 加入冷卻的體積分數(shù)95 的酒精可析出DNA 除去雜質 4 DNA可被二苯胺染成藍色 以此鑒定DNA 需沸水浴加熱 2 DNA的粗提取和鑒定方法 1 材料的選取 選用DNA含量相對較高的生物組織 2 破碎細胞 動物的紅細胞 吸水破裂 植物細胞 加入洗滌劑 食鹽后研磨 3 除去雜質的方法方法一 利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度的不同 通過調節(jié) 除去溶于和不溶于NaCl溶液中的雜質 方法二 利用DNA對酶的耐受性 直接在濾液中加入嫩肉粉 反應10 15min 嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解 而不會破壞 NaCl溶液的濃度 DNA 蛋白質 方法三 利用DNA對高溫的耐受性 將濾液放在60 75 的恒溫水浴箱中保溫10 15min 使 變性沉淀而 分子還未變性 4 DNA的析出 向處理后的濾液中加入與濾液體積相等的 冷卻的酒精溶液 體積分數(shù)為95 靜置2 3min 溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物 用玻璃棒沿一個方向攪拌 卷起絲狀物 5 DNA的鑒定 在沸水浴的條件下 DNA遇二苯胺會被染成 蛋白質 DNA 藍色 1 關于DNA的實驗 請判斷正誤 2015 廣東卷 3 用兔的成熟紅細胞可提取DNA DNA溶液與二苯胺試劑混合 沸水浴后生成藍色產物 用甲基綠對人的口腔上皮細胞染色 細胞核呈綠色 細胞質呈紅色 2 提取細胞中的DNA和蛋白質都需用蒸餾水漲破細胞 江蘇 23A 3 用不同濃度NaCl溶液反復溶解與析出DNA可去除蛋白質 江蘇 23B 錯混診斷 答案 1 2 3 提示 1 兔的成熟紅細胞無細胞核及各種細胞器 用甲基綠對人的口腔上皮細胞染色只能使細胞核呈綠色 不能使細胞質呈紅色 2 提取植物細胞中的DNA不能用漲破法 題組DNA的粗提取與鑒定 1 2012 江蘇卷 18 下列關于 DNA粗提取與鑒定實驗 的敘述 正確的是 A 洗滌劑能瓦解細胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度B 將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍C 常溫下菜花勻漿中有些酶類會影響DNA的提取D 用玻棒緩慢攪拌濾液會導致DNA獲得量減少 解析洗滌劑能夠瓦解細胞膜 但不能增加DNA的溶解度 A錯誤 將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴中變藍 不需要冷卻 B錯誤 常溫下菜花勻漿中有些酶可破壞DNA 影響DNA的提取 C正確 用玻棒緩慢攪拌濾液并不影響DNA的含量 而在粗提取時 緩慢攪拌有利于DNA附著 D錯誤 答案C 2 請回答下列關于DNA粗提取和鑒定的問題 1 DNA提取過程可以使用雞血或者菜花 使用雞血時 需在雞血中加入 目的是 在 中加入蒸餾水 目的是 2 使用菜花提取DNA時 需先研磨 研磨時可加入一定的洗滌劑和食鹽 其作用分別是 和 3 本實驗中可用到嫩肉粉 起作用的是其中的 4 使用體積分數(shù)為 的 酒精可使DNA析出 最后 使用 對DNA進行鑒定 水浴加熱冷卻后溶液呈藍色 答案 1 檸檬酸鈉防止血液凝固雞血細胞液使雞血細胞破裂 2 使細胞膜破裂溶解DNA 3 蛋白酶 4 95 冷二苯胺試劑 DNA的粗提取與鑒定 實驗和 血紅蛋白的提取與分離 實驗中都常常用到紅細胞 但前者往往采用雞血細胞 后者一般采用哺乳動物的血紅細胞 原因是雞血細胞核的DNA含量豐富 材料易得 且極易吸水漲破 哺乳動物成熟的血紅細胞中不含有細胞核和多種細胞器 其中的血紅蛋白含量豐富 適宜用于血紅蛋白的提取與分離實驗