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歡迎進入生物課堂 植物組織培養(yǎng)技術培育脫病毒苗 概述 植物組織培養(yǎng)作為一門生物技術近30年發(fā)展迅速 廣泛應用于農(nóng)業(yè) 園藝 林業(yè) 醫(yī)藥 農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中進行優(yōu)良植物種類的快速繁殖 脫除病毒和輔助選育種等 并產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟效益 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)必須用生物技術 提升 植物組織培養(yǎng) 就是用生物技術提升農(nóng)業(yè)的重要科學手段 定義介紹具體技術及方法困難及前景預測 一 組織培養(yǎng)的定義 植物組織培養(yǎng) tissueculture 是指通過無菌操作 把植物體的器官 組織或細胞 即外植體 接種于人工配制的培養(yǎng)基上 在人工控制的環(huán)境條件下培養(yǎng) 使之生長 發(fā)育成植株的技術與方法 下面是它的一個簡圖 二 組培苗的定義 利用適宜的植物材料 外植體 通過組織培養(yǎng)的途徑 使之分生出新的植株個體 即為組培苗 這種繁殖方式稱為微繁或快繁 三 微繁有許多優(yōu)勢 繁殖速度快 通常一年內(nèi)可以繁殖數(shù)以萬計的 較為整齊一致的種苗 大大提高繁殖系數(shù) 特別對于難繁殖的園藝植物的名貴品種 稀有種質的繁殖推廣具有重要意義 一個蘭花的莖尖一年內(nèi)可育成400萬個原球莖 一個草莓莖尖一年內(nèi)可育出成苗3000萬株 占用空間小 一間30平方米的培養(yǎng)室可以放置一萬多個瓶子 足以同時繁殖幾萬株種苗 可以培養(yǎng)脫毒種苗 四 無病毒苗木的培育 1 病毒的危害由于大多數(shù)園藝作物采用無性繁殖法 病毒在營養(yǎng)體內(nèi)傳染 并逐代積累 危害相當嚴重 脫毒的效果 首先 通過培育無毒苗木 可以使作物大幅度增產(chǎn) 這在馬鈴薯 甘薯 草莓 香蕉 蘭花 石竹 大麗花等上得到驗證 其次 可以提高作物品質 如除去葡萄卷葉病病毒 會使葡萄果實含糖量和葡萄酒的品質得以提高 培養(yǎng)室 桉樹 大花蕙蘭 羅漢果 香蕉 2 脫毒技術 1 熱處理法熱療 對病毒較有效但須花費時間 處理時 需6 12星期在30 40 2 莖尖培養(yǎng)脫毒原理因為病毒繁殖運輸速度與莖尖細胞生長速度不一致 病毒向上運輸速度慢 而分生組織細胞繁殖快 這樣就使莖尖區(qū)域部分細胞沒有病毒 優(yōu)勢脫毒苗效果好 后代遺傳穩(wěn)定 已在無毒苗培育上得到廣泛應用 莖尖培養(yǎng)脫毒的程序 脫毒材料大小及培養(yǎng)基 莖尖大小與脫毒關系很大 太大則脫毒效果差 過小則難成活 但脫毒效果好 一般以0 1 0 2mm 帶1 2個葉原基的莖尖作為培養(yǎng)材料為宜 脫毒培養(yǎng)的基本培養(yǎng)基多數(shù)為White或MS培養(yǎng)基 MS培養(yǎng)基的配制 配制培養(yǎng)基通常都按配方濃度的若干倍稱量 配制成一系列的母液置于冰箱保存 使用時按比例稀釋 一般要配下列母液 大量元素母液 微量元素母液 鐵鹽母液 植物生長物質母液 有機化合物母液 3 莖尖微體嫁接脫毒 適用范圍莖尖培養(yǎng)難于生根的木本果樹 原理它是以試管中的幼小植株作砧木 將莖尖分生組織嫁接其上的一種脫毒方法 它比莖尖培養(yǎng)的成苗率高 同時生長速度也較快 應用這種方法在桃 柑橘 蘋果等果樹上已獲得無病毒苗 4 超低溫處理脫毒 超低溫處理脫毒是一項新的脫毒新技術 原理是 易感病毒的大細胞內(nèi)因含水量大 在超低溫處理的過程中易受凍害而死亡 而不含病毒的小的莖尖存活下來 分化成芽 成長為脫毒苗 5 利用抗生素這是目前較常用的方法 但是在抗生素加入培養(yǎng)基 其有效濃度常因植物具有半滲透功能 而使?jié)舛葻o法達到有效濃度 并且 在使用時需注意很多問題 此外 還有花藥培養(yǎng) 愈傷組織培養(yǎng) 珠心胚培養(yǎng)等方法 3 病毒檢測技術 外部形態(tài)觀察法 如肉眼觀察煙草花葉病指示植物法 指采用對某些特定病毒非常敏感的植物的鑒定法 蘋果的指示植物 昆諾藜 新葉煙等 抗血清學鑒定法 優(yōu)點 靈敏 快速 準確性高 方法 單克隆抗體法 酶聯(lián)免疫法 電鏡檢測法電鏡下的病毒形態(tài) 煙草花葉病毒 馬鈴薯的莖尖脫毒 馬鈴薯莖尖脫毒的方法是 在無菌操作下 將植株或分枝或塊莖上芽的頂部生長點切下 切取生長點的長度一般為0 2 0 3毫米經(jīng)消毒后 放MS培養(yǎng)基上進行組織培養(yǎng) 要求溫度25 光照1000 3000勒克斯 每日連續(xù)光照16小時的條件 經(jīng)過四個月左右的培養(yǎng) 莖尖即可長成小苗 這些小苗是否脫掉了病毒 還必須進行檢測 經(jīng)過嚴格檢測 淘汰仍帶有病毒的莖尖苗 保留確實無病毒的莖尖苗 前面已提及 目前的困難 目前組培苗污染實驗所遇到的問題為不易建立植株的干凈度 對于菌種的鑒定有很大的困難 因為一般有關植物或是植物病原菌 因為有前人的資料留下 可叫易鑒定 但是對于目前一般在大氣中生存的微生物 其背景資料較少 對于鑒定而言 便較棘手 目前商業(yè)化的testkites一般都是針對人體或是食品方面 對于可應用于植物的testkites太少 且使用檢測試劑或分子診斷 則因專一性太強 一旦有別種的微生物出現(xiàn) 則造成了無法偵測到而逸出 前景預測 1 上流的技術會影響到下流的產(chǎn)量 而污染問題常在整個制造過程中占有一定比例 對于如何控制污染 建立欲警系統(tǒng)和干凈的植株系統(tǒng)成為組培業(yè)所要努力的方向 2 園藝業(yè)的發(fā)展必然為組培植物提供更廣市場 新品垂花惠蘭上市昆明 百合 大花惠蘭 櫻桃木組培快繁技術 竹芋其品種繁多 葉片絢麗多變 或清新淡雅 具有較強的裝飾性 是目前比較流行的觀葉植物之一 玻璃管里的莊稼 沒有比腳更長的路 沒有比人更高的山 謝謝大家 同學們 來學校和回家的路上要注意安全 同學們 來學校和回家的路上要注意安全