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稀釋涂布法純化大腸桿菌,稀釋涂布平板法,1、概念,將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)。當稀釋倍數足夠高時，即可獲得單個細菌形成的標準菌落。,,系列稀釋操作,,,,,,,涂布平板操作,,系列稀釋操作,1.將分別盛有9mL水的6支試管滅菌，并按101~106的順序編號。,2.用移液管吸取1mL培養(yǎng)的菌液，注入第二支試管中。用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，使菌液與水充分混勻。,系列稀釋操作,菌液,系列稀釋操作,3.從101倍稀釋的試管中吸取1mL稀釋液，注入102倍稀釋的試管中，重復第2步的操作。依次類推，直到完成最后一支試管的稀釋。,系列稀釋操作,注意： 移液管需要經過滅菌。操作時，試管口和移液管離火焰1~2cm處.,涂布平板操作,注意： ①酒精濃度為70%。,涂布平板操作,3.將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8~10s,涂布平板操作,4.用涂布器將菌液均勻地涂布 在培養(yǎng)基表面。涂布時可以轉 動培養(yǎng)皿，使菌液分布均勻。,涂布平板操作,,結果與評價,1：培養(yǎng)未接種培養(yǎng)基的作用是什么？若有菌落形成，說明什么？,對照,培養(yǎng)基滅菌不徹底,2：在肉湯培養(yǎng)基上，大腸桿菌菌落顏色？形態(tài)？,呈白色，為圓形，光滑有光澤，邊緣整齊,3：培養(yǎng)12h和24h后的菌落大??？菌落分布位置？原因？,大小不同，位置相同,時間越長，菌落中細菌繁殖越多，菌落體積越大；菌落的位置不動，但菌落數增多。,