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2019-2020年高中生物第一部分微生物的利用實(shí)驗(yàn)1大腸桿菌的培養(yǎng)和分離學(xué)案浙科版 一、大腸桿菌 1．大腸桿菌屬于革蘭氏________性菌，為_(kāi)_______型的腸道桿菌。 2．結(jié)構(gòu)：屬于________生物。 3．用途：是在________技術(shù)中被廣泛采用的工具。 4．與人類的關(guān)系：它生活在人類的________中，一般對(duì)人________(“有”還是“無(wú)”)害。有一些菌株對(duì)人體能產(chǎn)生危害，因?yàn)樗鼈兛梢郧治g________并產(chǎn)生________。任何大腸桿菌如果進(jìn)入人的________系統(tǒng)，都會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生危害。 答案：1.陰　兼性厭氧 2．原核 3．基因工程 4．腸道　無(wú)　腸黏膜　毒素　泌尿 二、細(xì)菌的培養(yǎng)和分離 1．細(xì)菌的培養(yǎng)： (1)細(xì)菌的繁殖：細(xì)菌以________的方式繁殖，分裂速度很快，約________分裂一次。 (2)培養(yǎng)細(xì)菌的方法：培養(yǎng)細(xì)菌，需要將________________________________________________________________________ 轉(zhuǎn)移到________中，一般用________來(lái)轉(zhuǎn)移帶菌的培養(yǎng)物。 (3)用不同培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌的差別： 接種后，培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基類型 接種方法 接種后培養(yǎng)的時(shí)間(單位：小時(shí)) 培養(yǎng)結(jié)果 液體培養(yǎng)基 接種環(huán)直接接種 培養(yǎng)8 h后 每毫升培養(yǎng)基中有________個(gè)細(xì)菌 固體培養(yǎng)基 用接種環(huán)在培養(yǎng)基上用________________________________________________________________________的方式接種(該法還可以用于______) 培養(yǎng)10～20 h后 一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞會(huì)繁殖成許多個(gè)細(xì)菌細(xì)胞，這些細(xì)胞________________________________________________________________________________，形成____________________________________________________________ (1)分離的方法與特點(diǎn)：分離細(xì)菌有________和________2種。前者方法簡(jiǎn)單，后者操作復(fù)雜，但是______________________________________________________________更易分開(kāi)。 (2)本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行大腸桿菌分離，是用________法，就是在________培養(yǎng)基上進(jìn)行細(xì)菌的________。 答案：1.(1)分裂　20 min　(2)已有細(xì)菌的培養(yǎng)物　新的培養(yǎng)基　接種環(huán)　(3)幾億　劃線　分離細(xì)菌　緊緊聚集在一起 菌落 2.(1)劃線分離法　涂布分離法　單菌落　(2)劃線分離 固體平面　劃線培養(yǎng) 三、滅菌操作 1．滅菌操作的原因：為了獲得________的培養(yǎng)物，其關(guān)鍵是防止外來(lái)________的入侵污染。因此，在培養(yǎng)微生物時(shí)必須進(jìn)行________操作。 2．無(wú)菌操作的條件： (1)首要條件是________必須是無(wú)菌的； (2)________必須是無(wú)菌的； (3)________的過(guò)程必須是無(wú)菌的等。 答案：1.純凈　雜菌　無(wú)菌 2．(1)各種器皿　(2)各種培養(yǎng)基　(3)菌轉(zhuǎn)移操作 四、大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實(shí)驗(yàn) 1．實(shí)驗(yàn)?zāi)康模? (1)進(jìn)行大腸桿菌的________，利用________培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)的操作； (2)進(jìn)行大腸桿菌的________，用________培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌的________培養(yǎng)； (3)說(shuō)明大腸桿菌培養(yǎng)的條件和操作要求的原理。 2．實(shí)驗(yàn)步驟 (1)滅菌：用________在________壓力下對(duì)LB液體培養(yǎng)基、LB固體培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌________min。 (2)自________向________中轉(zhuǎn)移并分裝固體培養(yǎng)基： 待冷卻至______左右，將三角錐形瓶中的______培養(yǎng)基，在______上分裝至幾個(gè)______中，制成______培養(yǎng)基。 (3)將大腸桿菌自________轉(zhuǎn)移到________中的________培養(yǎng)基中培養(yǎng)： 將大腸桿菌用________在無(wú)菌操作下接種至三角錐形瓶中的________培養(yǎng)基中，在________搖床振蕩培養(yǎng)________，完成大腸桿菌的培養(yǎng)。 (4)將菌液在________培養(yǎng)基上進(jìn)行________分離： 從前一步培養(yǎng)得到的菌液中獲取菌種，用________以__________法接種至第二步所制得的__________培養(yǎng)基中，在________℃恒溫箱中培養(yǎng)________h后觀察菌落。 (5)菌種保存： 在無(wú)菌操作下將________用________取出，再用________法接種在________上，________培養(yǎng)________后，________冰箱保存。 3．分離實(shí)驗(yàn)的結(jié)果及相應(yīng)結(jié)論： 觀察中若看到在________的末端出現(xiàn)________，則表明菌已被分離了。 4．大腸桿菌分離的用途：________的通用方法，也是用于________的最簡(jiǎn)便方法之一。 答案：1.(1)擴(kuò)增　液體　(2)分離　固體平面　劃線 2．(1)高壓鍋　1 kg　15　(2)三角瓶　培養(yǎng)皿　60 ℃ 固體　超凈臺(tái)　培養(yǎng)皿　固體平面　(3)斜面　三角瓶　液體 接種環(huán)　液體　37 ℃　12 h　(4)固體平面　劃線　接種環(huán) 劃線　固體平面　37　12～24　(5)單菌落　接種環(huán)　劃線　斜面　37 ℃　24 h　4 ℃ 3．劃線　不連續(xù)的單個(gè)菌落 4．消除污染雜菌　篩選高表達(dá)量菌株