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2019-2020年高中生物 1.1《微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用》教案（1） 蘇教版選修1 重點知識歸納及講解 （一）微生物需要的營養(yǎng)物質(zhì)及功能 1、微生物需要的營養(yǎng)物質(zhì)：碳源、氮源、生長因子、無機鹽和水五大類。 2、碳源、氮源、生長因子的來源及功能。 （二）培養(yǎng)基的種類及配制原則 （三）無菌技術(shù) 1、無菌技術(shù)的內(nèi)容 　　(1)對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒。 　　(2)將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌。 　　(3)已經(jīng)滅菌處理的材料用具不與周圍的物品接觸。 　　(4)實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行。 2、消毒方法 　　(1)煮沸消毒法：如在100℃煮沸5～6min。 　　(2)化學(xué)藥劑消毒法：如用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源。 3、滅菌方法 　　(1)灼燒滅菌。 　　(2)干熱滅菌。 　　(3)高壓蒸汽滅菌。 （四）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 1、計算 　　根據(jù)配方比例，計算配制一定量的培養(yǎng)基所需各種成分的用量。 2、稱量 3、溶化 4、滅菌 5、倒平板 思考：平板冷凝后，為什么要將平板倒置？ 　　平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。 （五）純化大腸桿菌 1、平板劃線法 　　——通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后，可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體，即菌落。 思考： 　?。?）為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？ 　　操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到單個菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。 　?。?）在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？ 　　劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。 2、稀釋涂布平板法 　　——是將菌液進行一序列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。 課外拓展 細菌的芽孢 　　為數(shù)不多的產(chǎn)芽孢細菌生長到后期，在其菌體內(nèi)形成的厚壁、折光性強、具抗逆性的孢子——芽孢。每個細菌一般只產(chǎn)生一個芽孢，所以芽孢不是細菌的繁殖型，絕大多數(shù)產(chǎn)芽孢細菌為革蘭氏陽性桿菌，其中主要為好氧的芽孢桿菌屬和厭氧的梭菌屬。放線菌中的高溫放線菌屬（Thermoactinomyces）也能產(chǎn)芽孢。 　　芽孢是代謝活性很低，對干燥、熱、化學(xué)藥物（酸類）和輻射等具有高度抗性的休眠體。例如，在很難覓到生物的沙漠中就有大量枯草桿菌和巨大芽孢桿菌的芽孢。 　　芽孢的抗逆性和休眠能力有助于產(chǎn)芽孢細菌渡過困境，故芽孢對產(chǎn)芽孢細菌的生存具有重要意義。 　　了解芽孢還有重要的實踐意義： 　?、傺挎呤羌毦诸愯b定中一項重要的形態(tài)特征； 　?、跉缪挎呤侵朴啘缇鷺?biāo)準(zhǔn)的主要依據(jù)：主要是以殺滅肉毒梭菌、破傷風(fēng)梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌和嗜熱脂肪芽孢桿菌等強致病性病菌或高耐熱性細菌的芽孢為標(biāo)準(zhǔn)的； 　?、墼S多產(chǎn)芽孢細菌是強致病菌：例如，炭疽芽孢桿菌、肉毒梭菌和破傷風(fēng)梭菌等； 　?、苡行┊a(chǎn)芽孢細菌可伴隨產(chǎn)生有用的產(chǎn)物，如抗生素短桿菌肽（gramicidin）、桿菌肽（bacitracin）等。 　　芽孢形成：產(chǎn)芽孢細菌通常在必需的養(yǎng)料（碳源 /或氮源）耗盡而停止生長（即過了對數(shù)期轉(zhuǎn)入穩(wěn)定期）形成芽孢。各種細菌有其形成芽孢的最適條件，包括pH、供氧情況、溫度、營養(yǎng)、培養(yǎng)基中的離子濃度和種類等。