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2019-2020年高中生物 2《微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用》教案（1） 新人教版選修1 教學(xué)目標(biāo)： （一）知識(shí)與技能 了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí)；掌握培養(yǎng)基的制備、高壓蒸汽滅菌和平板劃線法等基本操作技術(shù) （二）過(guò)程與方法 分析實(shí)驗(yàn)思路的確定和形成的原因，分析實(shí)驗(yàn)流程，對(duì)比前面的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，歸納共性，分析差異，增加印象 （三）情感、態(tài)度與價(jià)值觀 形成勇于實(shí)踐、嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的科學(xué)態(tài)度和科學(xué)精神 教學(xué)重點(diǎn)：無(wú)菌技術(shù)的操作 教學(xué)難點(diǎn)： 無(wú)菌技術(shù)的操作 教學(xué)過(guò)程： （一）引入新課 在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用中，都利用了微生物的發(fā)酵作用，其中的微生物來(lái)自于制作過(guò)程中的自然感染。而在工業(yè)化生產(chǎn)中，為了提高發(fā)酵的質(zhì)量，需要獲得優(yōu)良菌種，并保持發(fā)酵菌種的純度。這就要涉及到微生物的培養(yǎng)、分離、鑒別等基本技術(shù)。現(xiàn)在我們開始學(xué)習(xí)微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用專題。 （二）進(jìn)行新課 1．基礎(chǔ)知識(shí) 1．1 培養(yǎng)基的種類包括 固體 培養(yǎng)基和 液體 培養(yǎng)基等。 〖思考1〗瓊脂是從紅藻中提取的 多糖 ，在配制培養(yǎng)基中用作為 凝固劑 。 【補(bǔ)充】培養(yǎng)基的類型及其應(yīng)用： 標(biāo)準(zhǔn) 培養(yǎng)基類型 配制特點(diǎn) 主要應(yīng)用 物理性質(zhì) 固體培養(yǎng)基 加入瓊脂較多 菌種分離,鑒定,計(jì)數(shù) 半固體培養(yǎng)基 加入瓊脂較少 菌種保存 液體培養(yǎng)基 不加入瓊脂 工業(yè)生產(chǎn)，連續(xù)培養(yǎng) 化學(xué)組成 合成培養(yǎng)基 由已知成分配制而成，培養(yǎng)基成分明確 菌種分類、鑒定 天然培養(yǎng)基 由天然成分配制而成，培養(yǎng)基成分不明確 工業(yè)生，產(chǎn)降低成本 目的用途 鑒別培養(yǎng)基 添加某種指示劑或化學(xué)藥劑 菌種的鑒別 選擇培養(yǎng)基 添加（或缺少）某種化學(xué)成分 菌種的分離 1．2 培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括 水 、 無(wú)機(jī)鹽 、 碳源 、 氮源 四類營(yíng)養(yǎng)成分。 〖思考2〗從細(xì)胞的化學(xué)元素組成來(lái)看，培養(yǎng)基中為什么都含有這些營(yíng)養(yǎng)成分？ C、H、O、N、P、S是構(gòu)成細(xì)胞原生質(zhì)的基本元素，約占原生質(zhì)總量的97％以上。 【補(bǔ)充】碳源：如CO2、糖類、脂肪酸等有機(jī)物，構(gòu)成微生物的結(jié)構(gòu)物質(zhì)和分泌物，并提供能量。 氮源：如N2、氨鹽、硝酸鹽、牛肉膏、蛋白胨等，主要用來(lái)合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮代謝物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作為碳源，又可以作為氮源，如氨基酸等。 1．3 培養(yǎng)基除滿足微生物生長(zhǎng)的 pH 、 特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 和 氧氣 等要求。 【補(bǔ)充】生長(zhǎng)因子：某些微生物正常生長(zhǎng)代謝過(guò)程中必須從培養(yǎng)基中吸收的微量有機(jī)小分子，如某些氨基酸、堿基、維生素等。 〖思考3〗牛肉膏和蛋白胨主要為微生物提供 糖 、 維生素 和 有機(jī)氮 等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。 〖思考4〗培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要添加 維生素 ，培養(yǎng)霉菌時(shí)需要將培養(yǎng)基pH調(diào)節(jié)為 酸性 ，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需要將pH調(diào)節(jié)為 中性或微堿性 。 活動(dòng)2：閱讀“無(wú)菌技術(shù)”，討論回答下列問題： 1．4 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 防止外來(lái)雜菌的入侵 。 1．5 無(wú)菌技術(shù)包括： （1）對(duì)實(shí)驗(yàn)操作空間、操作者的衣著和手進(jìn)行 清潔和消毒 ； （2）將培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行 滅菌 ； （3）為避免周圍微生物污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在 酒精燈火焰附近 旁進(jìn)行； （4）避免已滅菌處理的材料用具與 周圍物品 相接觸。 1．6 比較消毒和滅菌（填表） 比較項(xiàng) 理化因素的作用強(qiáng)度 消滅微生物的數(shù)量 芽孢和孢子能否被消滅 消毒 較為溫和 部分生活狀態(tài)的微生物 不能 滅菌 強(qiáng)烈 全部微生物 能 〖思考5〗無(wú)菌技術(shù)除了防止培養(yǎng)物被污染外，還具有的目的是 防止感染實(shí)驗(yàn)操作者 。 1．7 消毒方法： （1）日常生活經(jīng)常用到的是 煮沸 消毒法； （2）對(duì)一些不耐高溫的液體，則使用 巴氏 消毒法（作簡(jiǎn)要介紹）； （3）對(duì)接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)首先噴灑 石炭酸或煤酚皂 等溶液以增強(qiáng)消毒效果，然后使用 紫外線 進(jìn)行物理消毒。 （4）實(shí)驗(yàn)操作者的雙手使用 酒精 進(jìn)行消毒； （5）飲水水源用 氯氣 進(jìn)行消毒。 1．8滅菌方法： （1）接種環(huán)、接種針、試管口等使用 灼燒 滅菌法； （2）玻璃器皿、金屬用具等使用 干熱 滅菌法，所用器械是 干熱滅菌箱 ； （3）培養(yǎng)基、無(wú)菌水等使用 高壓蒸汽 滅菌法，所用器械是 高壓蒸汽滅菌鍋 。 （4）表面滅菌和空氣滅菌等使用 紫外線 滅菌法，所用器械是 紫外燈 。 〖思考6〗對(duì)接種環(huán)滅菌時(shí)要用酒精燈的 充分燃燒 層火焰灼燒可能伸入試管或培養(yǎng)皿的部位。 〖思考7〗利用干熱滅菌箱對(duì)玻璃器皿滅菌時(shí)物品不能擺得太擠，目的是避免妨礙熱空氣流通。 〖思考8〗物品裝入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后，要首先打開排氣閥，煮沸并排除鍋內(nèi)冷空氣，其目的是 有利于鍋內(nèi)溫度升高 ；隨后關(guān)閉排氣閥繼續(xù)加熱，氣壓升至 100k Pa，溫度為 121℃ ，并維持 15～30 min；最后切斷熱源，使溫度自然降溫，氣壓務(wù)必降至 零 時(shí)打開鍋蓋，其目的是防止 容器中的液體暴沸 。 【補(bǔ)充】培養(yǎng)基的配制原則： ①目的要明確：根據(jù)培養(yǎng)的微生物種類、培養(yǎng)的目的等確定培養(yǎng)基的類型和配制量。 ②營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào)：培養(yǎng)基中各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例要適宜。例如：碳氮比4∶1時(shí)，谷氨酸棒狀桿菌大量繁殖而產(chǎn)生谷氨酸少；碳氮比為3∶1時(shí)，菌體繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。 ③pH要適宜：細(xì)菌培養(yǎng)基pH中性或偏堿性，霉菌培養(yǎng)基呈酸性。 2．實(shí)驗(yàn)操作 2．1 計(jì)算：根據(jù)配方比例，計(jì)算100mL培養(yǎng)基各成分用量。 2．2 稱量：準(zhǔn)確稱取各成分。稱取牛肉膏和蛋白胨時(shí)動(dòng)作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空氣中水分。 2．3 溶化：①加水加熱熔化牛肉膏；②加入蛋白胨和氯化鈉繼續(xù)加熱；③加入瓊脂；④用蒸餾水定容到100mL。整個(gè)過(guò)程不斷用玻棒攪拌，目的是防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂。 2．4 調(diào)pH：用1mol/LNaOH溶液調(diào)節(jié)pH至偏堿性。 2．5 滅菌：將配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中，加塞包扎后用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌；所用培養(yǎng)皿用報(bào)紙包扎后用干熱滅菌箱滅菌。 2．6 倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)在酒精燈火焰附近操作進(jìn)行。 其過(guò)程是： ①在火焰旁右手拿錐形瓶，左手拔出棉塞； ②右手拿錐形瓶，使錐形瓶的瓶口迅速通過(guò)火焰； ③左手將培養(yǎng)皿打開一條縫隙，右手將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，立刻蓋上皿蓋。 ④待平板冷卻凝固后，將平板倒過(guò)來(lái)放置。 〖思考1〗錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰的目的是消滅瓶口的雜菌，防止雜菌感染培養(yǎng)基。 〖思考2〗倒平板的目的是防止培養(yǎng)基冷卻過(guò)程中形成的水滴落到培養(yǎng)基表面。 〖思考3〗若皿蓋和皿底之間粘有培養(yǎng)基，則該平板能否培養(yǎng)微生物？為什么？ 不能?？諝庵须s菌會(huì)在這些粘附培養(yǎng)基上繁殖，并污染皿內(nèi)培養(yǎng)基。 〖思考4〗配制斜面培養(yǎng)基中，試管要加塞棉塞的目的是保持通氣并防止雜菌感染。 〖思考5〗試管培養(yǎng)基形成斜面的作用是增大接種面積。 2．7 接種 2．7．1微生物接種的最常用方法是平板劃線法和稀釋涂布法，另外還有穿刺接種和斜面接種等。 2．7．2平板劃線法：通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。其操作步驟是： ①將接種環(huán)在酒精燈火焰上灼燒直至燒紅。 ②在酒精燈火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開大腸桿菌的菌種試管的棉塞。 ③將菌種試管口通過(guò)火焰達(dá)到消滅試管口雜菌的目的。 ④將冷卻的接種環(huán)伸入到菌液中取出一環(huán)菌種。 ⑤將菌種試管口再次通過(guò)火焰后塞上棉塞。 ⑥將皿蓋打開一條縫隙，把接種環(huán)伸入平板內(nèi)劃3～5條平行線，蓋上皿蓋，不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基。 ⑦灼燒接種環(huán)，冷卻后從第一區(qū)劃線末端開始向第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)上述過(guò)程，完成三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將第五區(qū)的劃線與第一區(qū)劃線相連。 ⑧將平板倒置放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 〖思考6〗取菌種前灼燒接種環(huán)的目的是消滅接種環(huán)上的微生物；除第一次劃線外，其余劃線前都要灼燒接種環(huán)的目的是消滅接種環(huán)上殘留菌種；取菌種和劃線前都要求接種環(huán)冷卻后進(jìn)行，其目的是防止高溫殺死菌種；最后灼燒接種環(huán)的目的是防止細(xì)菌污染環(huán)境和操作者。 〖思考7〗在第1次劃線后都從上次劃線末端開始的目的是獲得由單個(gè)細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。 2．7．3　稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋，并將不同稀釋度菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時(shí)，即可獲得單個(gè)細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。 2．7．4　系列稀釋操作： ①取盛有9mL水的無(wú)菌試管6支，編號(hào)101、102、103、104、105、106。 ②用灼燒冷卻的移液管吸取1mL菌液注入編號(hào)為101試管中，并吹打3次，使之混勻。 ③從101倍液中吸取1mL菌液注入到編號(hào)為102試管內(nèi)吹打均勻，獲得102倍液。依此類推。 〖思考8〗操作中試管口和移液管應(yīng)在離火焰1～2cm處。整個(gè)操作過(guò)程中使用了1支移液管。 3．結(jié)果分析與評(píng)價(jià) 3．1　培養(yǎng)未接種培養(yǎng)基的作用是對(duì)照，若有菌落形成，說(shuō)明培養(yǎng)基滅菌不徹底。 3．2　在肉湯培養(yǎng)基上，大腸桿菌菌落呈白色，為圓形，光滑有光澤，邊緣整齊。 3．3　培養(yǎng)12h和24h后的菌落大小不同（相同、不同）；菌落分布位置相同（相同、不同）。原因是時(shí)間越長(zhǎng)，菌落中細(xì)菌繁殖越多，菌落體積越大；菌落的位置不動(dòng)，但菌落數(shù)增多。 〖思考9〗在某培養(yǎng)基上出現(xiàn)了3種特征不同的菌落，原因有培養(yǎng)基滅菌不徹底或雜菌感染等。 〖思考10〗頻繁使用的菌種利用臨時(shí)保藏法保存，長(zhǎng)期保存菌種的方法是甘油管藏法。前者利用固體斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)后，保存在4℃冰箱中，每3～6個(gè)月轉(zhuǎn)種培養(yǎng)一次，缺點(diǎn)是保存時(shí)間較短，容易發(fā)生污染和變異；后者將菌種與無(wú)菌體積等量混合后保存在－20℃冷凍箱中。 （三）課堂總結(jié)、點(diǎn)評(píng) 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 培養(yǎng)基 無(wú)菌技術(shù) 純化大腸桿菌 培養(yǎng)基的配制 配制培養(yǎng)基的原則 配制培養(yǎng)基的方法 計(jì)算→稱量→溶化→調(diào)pH→分裝→加棉塞→滅菌→倒平板 平板劃線法 稀釋涂布法 系列稀釋 平板涂布 （四）實(shí)例探究 例1．關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是 A.是碳源的物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的無(wú)機(jī)物只提供無(wú)機(jī)鹽 D.無(wú)機(jī)氮源也能提供能量 解析：不同的微生物，所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有較大差別，要針對(duì)微生物的具體情況分析。對(duì)于A、B選項(xiàng)，它的表達(dá)是不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同時(shí)是氮源，如NH4HCO3；有的碳源同時(shí)是能源，如葡萄糖；有的碳源同時(shí)是氮源，也是能源，如蛋白胨。對(duì)于C選項(xiàng)，除水以外的無(wú)機(jī)物種類繁多，功能也多樣。如二氧化碳，可作為自養(yǎng)型微生物的碳源；NaHC O3，可作為自養(yǎng)型微生物的碳源和無(wú)機(jī)鹽；而NaCl則只能提供無(wú)機(jī)鹽。對(duì)于D選項(xiàng)，無(wú)機(jī)氮源提供能量的情況還是存在的，如NH3可為硝化細(xì)菌提供能量和氮源。 答案：D 例2．下面對(duì)發(fā)酵工程中滅菌的理解不正確的是 A.防止雜菌污染 B.消滅雜菌 C.培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須滅菌 D.滅菌必須在接種前 解析：滅菌是微生物發(fā)酵過(guò)程的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。A說(shuō)的是滅菌的目的，因?yàn)榘l(fā)酵所用的菌種大多是單一的純種，整個(gè)發(fā)酵過(guò)程不能混入其他微生物（雜菌），所以是正確的；B是錯(cuò)誤的，因?yàn)闇缇哪康氖欠乐闺s菌污染，但實(shí)際操作中不可能只消滅雜菌，而是消滅全部微生物。C是正確的，因?yàn)榕c發(fā)酵有關(guān)的所有設(shè)備和物質(zhì)都要滅菌；發(fā)酵所用的微生物是滅菌后專門接種的，滅菌必須在接種前，如果接種后再滅菌就會(huì)把所接菌種也殺死。 答案：B 綜合應(yīng)用 例3．右表是某微生物培養(yǎng)基成分，請(qǐng)據(jù)此回答： 編號(hào) 成分 含量 ① 粉狀硫 10g ② （NH4）2SO4 0.4g ③ K2HPO4 4.0g ④ MgSO4 9.25g ⑤ FeSO4 0.5g ⑥ CaCl2 0.5g ⑦ H2O 100ml （1）右表培養(yǎng)基可培養(yǎng)的微生物類型 是 。 （2）若不慎將過(guò)量NaCl加入培養(yǎng)基中。 如不想浪費(fèi)此培養(yǎng)基，可再加入 ， 用于培養(yǎng) 。 （3）若除去成分②，加入（CH2O），該培 養(yǎng)基可用于培養(yǎng) 。 （4）表中營(yíng)養(yǎng)成分共有 類。 （5）不論何種培養(yǎng)基，在各種成分都溶化 后分裝前，要進(jìn)行的是 。 （6）右表中各成分重量確定的原則是 。 （7）若右表培養(yǎng)基用于菌種鑒定，應(yīng)該增加的成分是 。 解析：對(duì)于一個(gè)培養(yǎng)基，它能培養(yǎng)何種微生物，要看它的化學(xué)成分。當(dāng)然這只適用于合成培養(yǎng)基，如果是一個(gè)天然培養(yǎng)基就不能從培養(yǎng)基的成分上區(qū)分它是培養(yǎng)何種微生物的。分析化學(xué)成分要從營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的類型出發(fā)。右表中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有水、無(wú)機(jī)鹽、氮源三類，缺乏碳源和特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。對(duì)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，有的微生物是不需要的，但沒有微生物是不需要碳源的。該培養(yǎng)基中沒有碳源，說(shuō)明培養(yǎng)的微生物是從空氣中獲得碳源的，即可培養(yǎng)的微生物就是自養(yǎng)型微生物了。該培養(yǎng)基中加入了過(guò)量食鹽，就可以成為金黃色葡萄球菌鑒別培養(yǎng)基，但金黃色葡萄球菌是異養(yǎng)型微生物，這個(gè)培養(yǎng)基就還需要加入有機(jī)碳源。該培養(yǎng)基若加入（CH2O），培養(yǎng)基中就有了碳源，但除去成分②，卻使培養(yǎng)基中沒有了氮源，這時(shí)就只能用于培養(yǎng)固氮微生物了。對(duì)于菌種鑒定，往往用的是固體培養(yǎng)基，而表中沒有凝固劑，需要加入常見的凝固劑——瓊脂。 答案：⑴自養(yǎng)型微生物 ⑵含碳有機(jī)物 金黃色葡萄球菌 ⑶固氮微生物 ⑷3 ⑸調(diào)整pH ⑹依微生物的生長(zhǎng)需要確定 ⑺瓊脂（或凝固劑） （五）鞏固練習(xí) 1．不可能作為異養(yǎng)微生物碳源的是 A．牛肉膏 B．含碳有機(jī)物 C．石油 D．含碳無(wú)機(jī)物 2．根瘤菌能利用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的組別是 A．NH3，（CH2O），NaCl B．N2，（CH2O），CaCl2 C．銨鹽，CO2，NaCl D．NO2，CO2，CaCl2 3．配制培養(yǎng)基的敘述中正確的是 A．制作固體培養(yǎng)基必須加入瓊脂 B．加入青霉素可得到放線菌 C．培養(yǎng)自生固氮菌不需氮源 D．發(fā)酵工程一般用半固體培養(yǎng)基 4．自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基的主要差別是 A．碳源 B．氮源 C．無(wú)機(jī)鹽 D．特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 5．下表是有關(guān)4種生物的能源、碳源、氮源和代謝類型的概述。其中正確的是( ) 生 物 硝化細(xì)菌 根瘤菌 酵母菌 谷氨酸棒狀桿菌 能 源 氧化NH3 N2的固定 分解糖類等有機(jī)物 光 能 碳 源 C02 糖類 糖類 糖類 氮 源 NH3 N2 NH4+、NO3- 尿 素 代謝類型 自養(yǎng)需氧型 異養(yǎng)需氧型 異養(yǎng)兼性厭氧型 自養(yǎng)需氧型 A．根瘤菌、谷氨酸棒狀桿菌 B．硝化細(xì)菌、酵母菌 C．酵母菌、谷氨酸棒狀桿菌 D．硝化細(xì)菌、根瘤菌 6．甲、乙、丙是三種微生物，下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用來(lái)培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在Ⅲ種正常生長(zhǎng)繁殖；甲能在Ⅰ中正常生長(zhǎng)繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生長(zhǎng)繁殖，甲、丙都不能。下列說(shuō)法正確的是 （ ） 粉狀硫 10g K2HPO4 4g FeSO4 0.5g 蔗糖 10g （NH4）2SO4 0.4g H2O 100ml MgSO4 9.25g CaCl2 0.5g Ⅰ + + + + - + + + Ⅱ + + + - + + + + Ⅲ + + + + + + + + A、甲、乙、丙都是異養(yǎng)微生物 B、甲、乙、丙都是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物 C、甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物 D、甲是異養(yǎng)微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)微生物 7．微生物（除病毒外）需要從外界吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并通過(guò)代謝來(lái)維持正常的生長(zhǎng)和繁殖。下列有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)的說(shuō)法正確的是 A．乳酸菌與硝化細(xì)菌所利用的碳源物質(zhì)是相同的 B．微生物生長(zhǎng)中不可缺少的一些微量的無(wú)機(jī)物稱為生長(zhǎng)因子 C．培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度越高對(duì)微生物的增殖越有利 D．生長(zhǎng)因子一般是酶或核酸的組成成分，微生物本身合成這些生長(zhǎng)因子的能力往往不足。 8．某一種細(xì)菌株要從環(huán)境中提取現(xiàn)成的亮氨酸（20種氨基酸中的一種）才能生長(zhǎng)，此菌株對(duì)鏈霉素敏感。實(shí)驗(yàn)者用誘變劑處理此菌株，想篩選出表中細(xì)菌菌株類型。根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)昴康?，選用的培養(yǎng)基類型是（　?。? 　注：Ｌ—亮氨酸　?。印溍顾亍　　埃薄尤搿　　啊薄患尤? 　如：Ｌ—：不加亮氨酸　?。樱杭尤腈溍顾? 選項(xiàng) 篩選出不需要亮氨酸的菌株 篩選出抗鏈霉素的菌株 篩選出不需要亮氨酸的抗鏈霉素的菌株 Ａ Ｌ＋　　Ｓ＋ Ｌ—　　Ｓ— Ｌ＋　?。樱? Ｂ Ｌ－　?。印? Ｌ＋　　Ｓ＋ Ｌ—　?。樱? Ｃ Ｌ—　?。樱? Ｌ＋　?。樱? Ｌ—　?。印? Ｄ Ｌ＋　　Ｓ— ｌ—　?。印? Ｌ＋　?。樱? 9．要將從土壤中提取的自生固氮菌與其他的細(xì)菌分離出來(lái)，應(yīng)將它們接種在 A．加入氮源和殺菌劑的培養(yǎng)基上 B．不加入氮源和不加殺菌劑的培養(yǎng)基上 C．加入氮源，不加殺菌劑的培養(yǎng)基上 D．不含氮源和殺菌劑的培養(yǎng)基上 10．酵母菌培養(yǎng)液中常含有一定濃度的葡萄糖，但當(dāng)葡萄糖濃度過(guò)高時(shí)，反而抑制微生物的生長(zhǎng)，原因是 A．碳源供應(yīng)太充足 B．細(xì)胞會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離 C．改變了酵母菌的pH值 D．葡萄糖不是酵母菌的原料 課后探究 １、收集生活中與微生物有關(guān)的實(shí)例，并通過(guò)所學(xué)知識(shí)對(duì)其進(jìn)行解釋 ２、我們打針輸液時(shí)，首先要用酒精擦拭針刺處，為什么？ ★教后小記 本節(jié)課可以通過(guò)生產(chǎn)實(shí)例導(dǎo)入，使學(xué)生認(rèn)識(shí)在微生物的培養(yǎng)過(guò)程中，保持培養(yǎng)物純凈的重要性。在課堂上可以跳出教材，充分發(fā)揮學(xué)生的主動(dòng)性，讓學(xué)生收集列舉更多的生產(chǎn)生活中的實(shí)例，從中體會(huì)培養(yǎng)物純凈的重要性。當(dāng)時(shí)由于微生物的微觀性和危害性，一定要教育學(xué)生培養(yǎng)良好的衛(wèi)生習(xí)慣。