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2019-2020年高二生物 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)教學(xué)案 【教學(xué)目標(biāo)】 1.簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程 2.了解動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件 3.知道動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的的應(yīng)用 【重點(diǎn)、難點(diǎn)】 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程 【自主學(xué)習(xí)】 閱讀教材P44-46內(nèi)容----動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng) 1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的概念：從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成______________，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞______ __和_____ ______。 2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：P45圖2—16 3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件： （1）無菌無毒的環(huán)境：對(duì) 和 進(jìn)行無菌處理，還可以在培養(yǎng)液中添加一定量的 。此外，應(yīng)定期 。 （2）營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基中有 、 、 、 、 等，通常需加入 等天然成分。 （3）溫度和PH ：哺乳動(dòng)物適宜溫度為 ，多數(shù)細(xì)胞生存的適宜PH為 。 （4）氣體環(huán)境：主要是 和 。_________________是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是 。 4.舉例說出動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用： ①大規(guī)模生產(chǎn)有重要價(jià)值的生物制品。如： 、 、 等。 ②動(dòng)物細(xì)胞是基因工程技術(shù)中常用的 細(xì)胞，因此， 也離不開動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)。 ③培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞還可以用于 ，判斷某種物質(zhì)的毒性。 ④科學(xué)家培養(yǎng)正?；蚋鞣N病變的細(xì)胞，用于 、 、 等方面的研究。如： 。 【合作探究】 【探究一】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程 1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的選材有什么要求？取出動(dòng)物組織后，怎樣制備細(xì)胞懸液？ 2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)用到什么酶？它的作用什么？ 3.什么是“原代培養(yǎng)”和“傳代培養(yǎng)”？為什么要進(jìn)行“傳代培養(yǎng)” 4.什么是“細(xì)胞貼壁”和“接觸抑制” 5.動(dòng)物細(xì)胞能無限制的傳代下去嗎？ 6.目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為幾代以內(nèi)的細(xì)胞？為什么？ 7.通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能獲得動(dòng)物個(gè)體嗎？為什么？ 歸納總結(jié)：根據(jù)以上的探究并結(jié)合教材44-45頁動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程，構(gòu)建動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)流程圖。 【探究二】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件 1.怎樣保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌無毒的環(huán)境中？ 2.為什么培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)通常要加入動(dòng)物血清？ 3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的氣體主要有哪些？主要作用分別是什么？ 【探究三】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用 如何用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)來檢測(cè)有毒物質(zhì)的毒性？ 【小結(jié)】:植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較 比較項(xiàng)目 植物組織培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 原理 培養(yǎng)基性質(zhì) 培養(yǎng)基特有成分 培養(yǎng)結(jié)果 培養(yǎng)目的 【當(dāng)堂檢測(cè)】 1、（xx浙江）實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)（非克隆培養(yǎng)）的基本過程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是( ) A．甲過程需要對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒 B．乙過程對(duì)皮膚組織可用胰蛋白酶消化 C．丙過程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型 D．丁過程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性 2、(xx年浙江)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是( ) A.培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞 B.克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變 C.二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的 D.惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng) 3、（xx大綱卷）關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是（ ） A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基不同 B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶 C.煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個(gè)體，小鼠雜交瘤細(xì)胞可離體培養(yǎng)增殖 D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì)，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒 4、(xx年浙江理綜)用動(dòng)、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng),下列敘述正確的是(　　) A.都需要用CO2培養(yǎng)箱 B.都需要用液體培養(yǎng)基 C.都要在無菌條件下進(jìn)行 D.都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性 5.右圖是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請(qǐng)據(jù)此回答： （1）容器A中放置的是動(dòng)物器官或組織。它一般取自 。原因是 ___ ___。 （2）容器A的動(dòng)物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是 ，然后用 酶處理，這是為了使細(xì)胞分散開。這樣做的目的是 。 （3）培養(yǎng)首先在B瓶中進(jìn)行。瓶中的培養(yǎng)基成分有 等。在此瓶中培養(yǎng)一段時(shí)間， 這時(shí)的培養(yǎng)稱為 。 （4）為了把B瓶中的細(xì)胞分裝到C瓶中，用 處理，然后配置成 ， 再分裝，繼續(xù)培養(yǎng)，稱為 。 【課后鞏固】 1.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中，正確的是（ ） A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的就是為獲得細(xì)胞分泌蛋白 B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶處理使細(xì)胞分散開 C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)通常不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象 D.可以通過細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得完整的動(dòng)物個(gè)體 2.一般來說，動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件（　?。? ①無毒的環(huán)境　②無菌的環(huán)境?、酆铣膳囵B(yǎng)基需加血漿?、軠囟扰c動(dòng)物體溫相近?、菪枰狾2，不需要CO2?、轈O2能調(diào)培養(yǎng)液pH A.①②③④⑤⑥ B.①②③④ C.①③④⑤⑥ D.①②③④⑥ 3.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的說法錯(cuò)誤的是（ ） A.正常細(xì)胞體外條件下不能無限傳代 B.細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中進(jìn)行有絲分裂，一般不分化 C.細(xì)胞遺傳物質(zhì)穩(wěn)定，不會(huì)發(fā)生變異現(xiàn)象 D.細(xì)胞培養(yǎng)常用于分泌性蛋白的生產(chǎn) 4.（xx年寧夏理綜）回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問題： （1）在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面 時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的 。此時(shí)，瓶壁上形成細(xì)胞層數(shù)是 。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是 。 （2）隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn) 現(xiàn)象，但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成 細(xì)胞，該細(xì)胞黏著性 ，細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)（糖蛋白）的量 。 （3）檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目，最好選用細(xì)胞分裂到 期的細(xì)胞用顯微鏡進(jìn)行觀察。 （5）在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，通常在冷凍（如液氮）條件下保存細(xì)胞，因?yàn)樵谶@種條件下，細(xì)胞中 的活性降低，細(xì)胞的 速率降低。 （6）給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作 進(jìn)行攻擊。 5.某研究小組進(jìn)行藥物試驗(yàn)時(shí)，以動(dòng)物肝細(xì)胞為材料，測(cè)定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性。供培養(yǎng)的細(xì)胞有甲、乙兩種，甲細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞，乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。請(qǐng)回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問題： （1）將數(shù)量相等的甲細(xì)胞和乙細(xì)胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其它培養(yǎng)條件均相同。一段時(shí)間后，觀察到甲細(xì)胞數(shù)量比乙細(xì)胞數(shù)量 。 （2）在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清，其原因是 。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5% CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是 。 （3）在兩種細(xì)胞生長(zhǎng)過程中，當(dāng)乙細(xì)胞鋪滿瓶壁時(shí)，其生長(zhǎng) 。藥物試驗(yàn)需要大量細(xì)胞，兩種細(xì)胞頻繁傳代，甲細(xì)胞比乙細(xì)胞可以傳代的次數(shù)更 。若用動(dòng)物的肝臟組織塊制備肝細(xì)胞懸液，需用 消化處理。 （4）為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的 。 （5）已知癌基因X過量表達(dá)與肝腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，要試驗(yàn)一種抗腫瘤藥物Y對(duì)甲細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，可將甲細(xì)胞分為A、B兩組，A組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入 ，B組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入無菌生理鹽水，經(jīng)培養(yǎng)后，從A、B兩組收集等量細(xì)胞，通過分別檢測(cè)X基因在A、B兩組細(xì)胞中的 或 合成水平的差異，確定Y的藥效。 答案：(1)動(dòng)物胚胎或幼年動(dòng)物的器官組織 因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，有絲分裂旺盛 (2)剪碎 胰蛋白 使每個(gè)細(xì)胞能與培養(yǎng)液接觸 (3)葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清 原代培養(yǎng) (4)胰蛋白酶 細(xì)胞懸浮液 傳代培養(yǎng) 答案：（1）相互接觸 接觸抑制 單層（或一層） 胰蛋白酶 （2）衰老甚至死亡 不死性 降低 減少 （3）由于活細(xì)胞的膜具有選擇透過性，大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)，故活細(xì)胞不能著色（或由于死細(xì)胞的膜喪失了選擇透過性，大分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而著色） （4）中 （5）冷凍（或超低溫、液氮） 酶 新陳代謝 （6）抗原 答案：(1)多 (2)血清可以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì) 　維持培養(yǎng)液的pH (3)停止　多　胰蛋白酶　(4)抗生素 （5）Y mRNA 蛋白質(zhì)