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2019-2020年高中生物 第一部分 微生物的利用 實驗2 分離以尿素為氮源的微生物自我小測 浙科版選修1 1本實驗中的尿素培養(yǎng)基屬于(　　) A．選擇培養(yǎng)基 B．鑒別培養(yǎng)基 C．半固體培養(yǎng)基 D．無氮培養(yǎng)基 2涂布分離細菌時使用的玻璃刮刀應保存在70%酒精中，取出后又要放在酒精燈火焰上灼燒，這2步分別屬于什么技術(　　) A．滅菌、滅菌 B．消毒、消毒 C．滅菌、消毒 D．消毒、滅菌 3尿素又稱脲，它是什么有機物降解的產物…(　　) A．核酸 B．蛋白質 C．淀粉 D．脂肪 4本實驗的土樣最好取自(　　) A．有大量植物生長的地方取 B．臨水的地方取 C．有哺乳動物排泄物的地方取 D．干燥、空曠的地方取 5分離以尿素為氮源的微生物所采用的分離方法是(　　) A．涂布分離法 B．劃線分離法 C．稀釋分離法 D．選擇分離法 6脲酶的化學本質是(　　) A．脲 B．蛋白質 C．尿素 D．核酸 7下列能選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基是…(　　) A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂糖、水 B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、瓊脂糖、水 C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、尿素、瓊脂糖、水 D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水 8有脲酶的細菌菌落周圍出現(xiàn)著色環(huán)帶的原因是(　　) A．外泌的脲酶將尿素水解成氨，氨為堿性，使酚紅變?yōu)榧t色 B．外泌的脲酶呈堿性使酚紅變?yōu)榧t色 C．外泌的脲酶將酚紅分解成呈紅色的物質 D．酚紅與脲酶反應后生成了呈紅色的物質 9將下列的實驗步驟按正確的順序排列(　　) ①將培養(yǎng)皿倒置于恒溫箱中培養(yǎng)24～48 h?、谕寥廊印、塾^察菌落數(shù)?、軜悠废♂屩苽浼毦鷳乙骸、輰⑾♂屢和坎嫉揭阅蛩貫槲ㄒ坏吹呐囵B(yǎng)基上 A．②④①⑤③ B．②①④⑤③ C．⑤①④②③ D．②④⑤①③ 10分析下面培養(yǎng)基的配方：KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O 、葡萄糖、尿素、瓊脂糖。請完成問題： (1)在該培養(yǎng)基的配方中，為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是________和________。 (2)想一想這種培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用？ 如果具有，又是如何進行選擇的？ 11請將稀釋液的稀釋度在下圖中加以準確標注： 12本題探究如何從土壤中將自生固氮菌分離出來。請據(jù)題完成以下問題。 (1)實驗原理：自生固氮菌是一種能利用空氣中的N2做為氮源的細菌。若用無菌培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，其培養(yǎng)基不需要添加________這類營養(yǎng)要素，而其他細菌則不行。 農田的表層土壤中，自生固氮菌的含量比較多。將用表層土制成的稀泥漿，接種到無菌培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。在這種情況下，只有自生固氮菌才能生長繁殖。用這種方法，可以將自生固氮菌與其他細菌分離開來。 (2)材料用具：農田的表層土壤、無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、盛9 mL無菌水的試管、無菌吸管、無菌涂布器、無菌培養(yǎng)皿、盛90 mL無菌水的錐形瓶、恒溫箱。 (3)方法步驟： ①倒平板：分別將無菌培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒平板，操作過程應在火焰旁。 ②制備土壤稀釋液：取土樣10 g加入盛有90 mL無菌水的錐形瓶中，充分搖勻。用無菌吸管吸取上清液1 mL，轉至9 mL的無菌水的大試管中，依次稀釋到10－7稀釋度。 ③涂布：按照由10－7～10－3稀釋度的順序分別吸取0.1 mL進行平板涂布，每個稀釋度下，無氮培養(yǎng)基應至少涂布________個平板，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布1個平板。 ④培養(yǎng)：放入恒溫箱內，在28～30 ℃下培養(yǎng)3～4天。 ⑤細菌的計數(shù)：當菌落數(shù)目穩(wěn)定時，選取菌落數(shù)在________的平板進行計數(shù)。如果測試的平均值為50，則每克樣品中的菌落數(shù)是________。(稀釋度是10－5) (4)預測結果：相同稀釋度下，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板上的菌落數(shù)應多于無氮培養(yǎng)基上的數(shù)目。請說明原因：______________________________________________________。 13(xx上海高考，39)氯苯化合物是重要的有機化工原料，因其不易降解，會污染環(huán)境。某研究小組依照下列實驗方案(圖1)篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培養(yǎng)基配方如表1。 圖1 表1　培養(yǎng)基的組成 液體培養(yǎng)基 蛋白胨 牛肉膏 氯苯 氯化鈉 硝酸銨 無機鹽(無碳) 蒸餾水 Ⅰ號 10 g 5 g 5 mg 5 g — — 1 L Ⅱ號 — — 50 mg 5 g 3 g 適量 1 L Ⅲ號 — — 20～80 mg 5 g 3 g 適量 1 L (1)配制Ⅱ號固體培養(yǎng)基時，除添加Ⅱ號液體培養(yǎng)基成分外，還應添加1%的________。 (2)培養(yǎng)基配制時，滅菌與調pH的先后順序是________。 (3)從用途上來說，Ⅰ號培養(yǎng)基和Ⅱ號培養(yǎng)基分別屬于________培養(yǎng)基和________培養(yǎng)基。在Ⅱ號培養(yǎng)基中，為SP1菌提供氮源的成分是________。 (4)在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時，SP1的菌體會變成一個圓形的休眠體，這種休眠體被稱為________。 (5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的Ⅲ號培養(yǎng)液中培養(yǎng)，得到生長曲線(如圖2)。從圖2可知，SP1菌在________培養(yǎng)條件下最早停止生長，其原因是________________________________________________________________________________。 圖2 參考答案 1答案：A　解析：尿素培養(yǎng)基可以將能利用尿素的微生物從別的微生物中選擇出來，所以A正確。 2答案：D　解析：消毒和滅菌是不同的。往往消毒比較溫和，僅僅消滅危害健康的致病菌；而滅菌就比較強烈，如高壓鍋、灼燒等，它是去除一切菌。本題前者屬消毒，后者屬滅菌。 3答案：B　解析：蛋白質可降解為尿素(主要是脫氨基)，即脲。所以選B。 4答案：C　解析：由于人和其他哺乳動物如家畜的尿中都含有尿素，因此含有哺乳動物排泄物的土壤中就可能存在以尿素為氮源的微生物。 5答案：A　解析：微生物的分離方法多種多樣，本實驗使用了涂布分離法。 6答案：B　解析：酶既有蛋白質，又有RNA，但脲酶屬于蛋白質。 7答案：A　解析：能分解尿素的微生物不需要再添加除尿素外的其他氮源，因此A是正確的。B選項缺少氮源，C中缺少了葡萄糖——碳源；D中是一個任何微生物都能存活的培養(yǎng)基，無法達到分離出能分解尿素的微生物的目的。 8答案：A　解析：本題考查到了顯色反應的原理，這也是鑒別的原理。具體是有脲酶的細菌將脲酶分泌到細菌外，隨后脲酶將培養(yǎng)基中的尿素水解成氨，氨為堿性，遇酚紅變紅色。 9答案：D　解析：本實驗的實驗步驟，具體順序為②④⑤①③，故選D。 10解析：碳源是提供碳元素的物質，氮源是提供氮元素的物質。所以碳源是葡萄糖，氮源是尿素。絕大多數(shù)生物都能利用葡萄糖，但是， 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，所以這種培養(yǎng)基對微生物有選擇作用。選擇的對象是能夠利用尿素的微生物。 答案：(1)葡萄糖　尿素 (2)有選擇作用。因為此配方中尿素是唯一氮源，因此，只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長。 11解析：由課本稀釋過程引申而來，1 mL菌液＋9 mL無菌水＝10 mL溶液。＝10－1，所以A：10－1，以此類推B、C。 答案：A：10－1　B：10－2　C：10－3 12解析：統(tǒng)計菌落數(shù)目的原則是：選出菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)。根據(jù)計算方法“每克樣品中的菌落數(shù)＝(CV)M”，則(500.1)105＝5107。無氮培養(yǎng)基里沒有氮源，只允許固氮菌生存，屬于選擇培養(yǎng)基，可分離出土壤中的固氮菌。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基營養(yǎng)全面，幾乎允許土壤中所有菌類生存。 答案：(1)氮源 (3)③3?、?0～300　5107 (4)無氮培養(yǎng)基上能生存繁殖的僅是土壤中的固氮菌，而牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上幾乎允許土壤中所有菌類生存。 13解析：(1)固體培養(yǎng)基是在制作培養(yǎng)基時加入瓊脂制成的。(2)在培養(yǎng)基的配制過程中，調pH時可能會使培養(yǎng)基污染，所以應在調pH之后進行滅菌。(3)Ⅰ號培養(yǎng)基中加入了大多數(shù)異養(yǎng)微生物可以利用的牛肉膏和蛋白胨，屬于通用培養(yǎng)基；而Ⅱ號培養(yǎng)基中沒有這兩種成分而且氯苯的量增至50 mg，為選擇培養(yǎng)基；硝酸銨是為微生物提供無機氮源的一種無機鹽。(4)在惡劣環(huán)境中細菌內形成的休眠體為芽孢。(5)氯苯是Ⅲ號培養(yǎng)基中的唯一碳源，在添加較少氯苯時，細菌生長所需碳源不足，較早停止生長。 答案：(1)瓊脂　(2)先調pH，后滅菌　(3)通用　選擇　硝酸銨　(4)芽孢　(5)20 mg/L氯苯　碳源最早耗盡 實驗3　觀察土壤中能水解