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2019-2020年高三生物第一輪總復習 第一編 考點過關練 考點40 微生物的培養(yǎng)和應用 1．[xx上海高考]下圖表示四種微生物培養(yǎng)物(①～④)在添加利福平前后的細胞內RNA含量。由此可以判斷古細菌和酵母菌可能是(　　) A．①②　 B．①④ C．②③　 D．③④ 解析：利福平抑制細菌RNA的合成，使DNA和蛋白質合成停止，只能作用于細菌。而古細菌是一類很特殊的細菌，核糖體對氯霉素不敏感、RNA聚合酶和真核細胞的相似，其復制、轉錄和翻譯接近真核生物；利福平也對酵母菌等真核生物無效，所以加利福平前后，古細菌和酵母菌中的RNA變化不大。 答案：B 2．[xx課標全國卷Ⅱ]為了調查某河流的水質狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}： (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是_____________________； 然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為________。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時，接種環(huán)通過________滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是_______________ ________________________________________________________________________。 (3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果。 (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高________________的利用率。 解析：(1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，微生物學實驗一般會設置空白對照：隨機取若干滅菌后的空平板培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成；利用平板菌落計數(shù)法的計算公式估算水樣中的活菌數(shù)： M(稀釋倍數(shù))＝100＝3.8107/L。 (2)接種時接種環(huán)需要灼燒滅菌；在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線，這樣做的目的是：通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌體的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。 (3)由題圖可知B圖為平板劃線法接種的結果(菌落相對均勻分布)。 (4)振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基的氧氣含量，促進好氧型微生物的生長；另外振蕩培養(yǎng)還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質的利用率。 答案：(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　3.8107 (2)灼燒　將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落 (3)B (4)溶解氧　營養(yǎng)物質 3．[xx課標全國卷Ⅰ]植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解。回答下列問題： (1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復合酶，其中的葡萄糖苷酶可將________分解成________。 (2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時，CR可與纖維素形成________色復合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的________。 (3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學設計了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表)： 酵母膏 無機鹽 淀粉 纖維素粉 瓊脂 CR溶液 水 培養(yǎng)基甲 ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ 培養(yǎng)基乙 ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ 注：“＋”表示有，“－”表示無。 據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是____________________________________；培養(yǎng)基乙________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是_______________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析：(1)纖維素是一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，是含量最豐富的多糖類物質。纖維素能被土壤中某些微生物分解利用，如下圖： (2)剛果紅與纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解后，紅色復合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌。 (3)分離和鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，且需以纖維素為唯一碳源。 答案：(1)纖維二糖　葡萄糖 (2)紅　透明圈 (3)不能　液體培養(yǎng)基不能分離單菌落　不能　乙培養(yǎng)基中沒有纖維素，不會形成CR－纖維素紅色復合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌 4．[xx四川高考]有機農藥苯磺隆是一種除草劑，長期使用會污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機制的實驗過程如圖甲、乙所示。 (1)微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質有碳源、水、________四類，該實驗所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是__________________________________。 (2)與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長素和________，這些植物激素一般需要事先單獨配制成________保存?zhèn)溆谩? (3)純化菌株時，通常使用的劃線工具是________。劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落，其它劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有______________________ ________________________________________________________________________。 (4)為探究苯磺隆的降解機制，將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心，取上清液做圖乙所示實驗。該實驗的假設是________________________________________，該實驗設計是否合理？為什么？________________________________________________________________________。 解析：(1)微生物生長所需要的主要營養(yǎng)物質包括：碳源、氮源、水和無機鹽。使用選擇培養(yǎng)基是因為他只允許特定的微生物生長，同時又能抑制或阻止其他微生物的生長的培養(yǎng)基。 (2)植物組織培養(yǎng)常需要添加的植物激素有生長素和細胞分裂素。MS培養(yǎng)基的成分一般先分別配制成母液備用。 (3)平板劃線法接種時常使用接種環(huán)劃線。第二區(qū)域只有第一條線無菌落，而其他的劃線卻有菌落，很可能是因為接種環(huán)在灼燒后未冷卻，第一次劃線時將菌種燙死，而后接種環(huán)冷卻，能正常劃線，也可能是第一次劃線時劃線未從第一區(qū)域末端開始，使接種環(huán)上無菌種。 (4)題中實驗為取得菌種培養(yǎng)液過濾后離心上清液，加入蛋白酶處理后，測得其對苯磺隆的降解率。意為假設菌種能產生降解苯磺隆的蛋白質類酶，若用蛋白酶處理后，可使該酶分解，苯磺隆降解率下降，則假設成立。但由于缺乏空白對照，不能比較蛋白酶的處理是否能降低苯磺隆降解率，該實驗不能得出相應結論。 答案：(1)氮源和無機鹽　只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長和繁殖 (2)細胞分裂素　母液 (3)接種環(huán)?、俳臃N環(huán)灼燒后未冷卻；②劃線未從第一區(qū)域末端開始 (4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質　不合理，缺少空白對照 1．[xx廣東珠海一模]下列有關培養(yǎng)基和菌種鑒定的敘述不正確的是(　　) A．植物組織培養(yǎng)常用的是固體培養(yǎng)基 B．可利用固體培養(yǎng)基上菌落的特征來判斷和鑒別細菌的類型 C．利用剛果紅培養(yǎng)基上是否形成透明圈來篩選纖維素分解菌 D．在無氮培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌 解析：在只以尿素作為氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌。 答案：D 2．[xx浙江金華模擬]下列對滅菌和消毒的理解不正確的是(　　) A．滅菌是指殺滅環(huán)境中的一切微生物的細胞、芽孢和孢子 B．消毒和滅菌實質上是完全相同的 C．接種環(huán)用灼燒法滅菌 D．常用滅菌方法有灼燒滅菌法、干熱滅菌法、高壓蒸汽滅菌法 解析：消毒是使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)，滅菌則是使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 答案：B 3．[xx安徽淮南期末]用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(　　) ①可以用相同的培養(yǎng)基?、诙夹枰褂媒臃N針進行接種 ③都需要在火焰旁進行接種?、芏伎梢杂脕碛嫈?shù)活菌 A．①②　　 B．③④ C．①③　　 D．②④ 解析：平板劃線法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基，故①正確；平板劃線法采用接種環(huán)進行操作，而稀釋涂布平板法采用涂布器進行操作，故②錯誤；純化時，要進行無菌操作，需要在火焰旁接種，避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基，故③正確；平板劃線法一般用于分離而不是計數(shù)，故④項錯誤。 答案：C 4．[xx北京市東城區(qū)聯(lián)考]細菌需要從外界吸收營養(yǎng)物質并通過代謝來維持正常的生長和繁殖。下列與此有關的說法正確的是(　　) A．乳酸菌與硝化細菌所利用的碳源是相同的 B．氮源不可能作為細菌的能源物質 C．瓊脂是細菌生長和繁殖中不可缺少的一種物質 D．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上長出的不都是尿素分解菌 解析：乳酸菌是異養(yǎng)型微生物，硝化細菌是自養(yǎng)型微生物，所利用的碳源是不同的，A錯誤。硝化細菌的能源來自NH3氧化釋放的能量，B錯誤。瓊脂不是細菌生長和繁殖中必需的物質，C錯誤。 答案：D 5．[xx武昌調研]高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產中是極為重要的酶制劑。研究者從熱泉中篩選出了能高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌。其篩選過程如下圖所示。 據(jù)圖中信息并結合課本知識回答： (1)進行①過程的目的是__________________；②過程所使用的接種方法是__________________。 (2)從用途上來說，Ⅰ號培養(yǎng)基應屬于______________培養(yǎng)基；從物理狀態(tài)上來說，Ⅱ號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時應加入________________作為凝固劑。 (3)Ⅰ、Ⅱ號培養(yǎng)基配制和滅菌時，滅菌與調節(jié)pH的先后順序是________________；一般對配制的培養(yǎng)基應采用______________進行滅菌。 (4)部分嗜熱菌在Ⅰ號培養(yǎng)基上生長時可釋放________分解培養(yǎng)基中的淀粉，在不同菌落周圍形成大小不同的透明圈，應挑出________的菌落，接種到Ⅱ號培養(yǎng)基。 解析：本題主要考查微生物培養(yǎng)等有關知識，意在考查考生識記和理解應用能力。(1)過程①稱為稀釋，目的是稀釋嗜熱菌培養(yǎng)液；過程②將嗜熱菌接種到Ⅰ號培養(yǎng)基中，所用的接種方法是稀釋涂布平板法。(2)從用途上來說，Ⅰ號培養(yǎng)基應屬于選擇培養(yǎng)基；從物理狀態(tài)上來說，Ⅱ號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時應加入瓊脂作為凝固劑，培養(yǎng)基呈固態(tài)。(3)Ⅰ、Ⅱ號培養(yǎng)基在配制和滅菌時，先調節(jié)pH，后滅菌；一般對配制的培養(yǎng)基應采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。(4)部分嗜熱菌可釋放淀粉酶分解培養(yǎng)基中的淀粉，透明圈大的菌落，說明嗜熱菌的降解淀粉能力強，可挑選出來接種到Ⅱ號培養(yǎng)基。 答案：(1)稀釋(嗜熱菌培養(yǎng)液)　稀釋涂布平板法 (2)選擇　瓊脂 (3)先調節(jié)pH，后滅菌　高壓蒸汽滅菌法 (4)淀粉酶　透明圈大 6．[xx江蘇南通期末]烹飪產生的油煙冷卻后形成液態(tài)的油脂，傾入下水道后會對環(huán)境造成污染。科研人員通過實驗篩選出了能高效分解油脂的微生物。請分析回答： 實驗材料：烹飪油煙冷凝液、菌液a、b、c、人工配制的營養(yǎng)液等。 (1)據(jù)下圖曲線分析可知________菌液最適合在實際工程中應用，原因是______________________。 (2)用下列固體培養(yǎng)基：葡萄糖、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO47H2O、KCl、H2O，來篩選分解尿素的細菌，還應加入的物質是________________。 (3)下圖接種微生物的方法是__________________，目的是______________________________________。 (4)四位同學用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中細菌數(shù)量。在對應稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結果，正確可信的是________。 A．一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是23 B．兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是22和26，取平均值24 C．三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、5和52，取平均值26 D．四個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、30、24和25，取平均值25 (5)用這種方法測定密度，實際活菌數(shù)量往往比測得的數(shù)量________，因為________________________________________________________________________。 (6)一同學在稀釋倍數(shù)為104的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為23.4，則每毫升樣品中的菌落數(shù)是(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2 mL)________。 解析：本題主要考查微生物培養(yǎng)等有關知識，意在考查考生識記和理解應用能力。(1)分析圖中的三條曲線，隨培育時間的延長，油的濃度均在下降，但菌液c在3天內下降的最快，且油污的濃度也是最低的。 (2)要篩選出能分解尿素的細菌，其培養(yǎng)基中要加入一定量的尿素，配制成選擇培養(yǎng)基。 (3)圖示中的操作者將接種環(huán)在酒精燈灼燒后進行接種，同時在培養(yǎng)皿中劃出規(guī)則的圖形，培養(yǎng)一段時間后。在培養(yǎng)基表面生長出的后代就是單個細胞(純培養(yǎng)物——菌落)。 (4)統(tǒng)計某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)時，要至少涂布3個平板作重復組，增強實驗結果的說服力與準確性。 (5)用稀釋涂布平板法測定菌落的密度，實際活菌數(shù)量往往比測得的數(shù)量多，是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察的是一個菌落。 (6)若涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2 mL，則在稀釋倍數(shù)為104的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為23.4，則每毫升樣品中的菌落數(shù)是(23.4/0.2)104＝1.17106。 答案：(1)c　油濃度在3天內迅速下降 (2)尿素 (3)平板劃線　分離(純化)單個細胞形成的菌落 (4)D (5)多　當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察的是一個菌落 (6)1.17106 7．[xx湖北荊門調研]從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測定。富集培養(yǎng)指創(chuàng)設僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件，使其群落的數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。 (1)接種前要對培養(yǎng)基進行____________處理。在整個微生物的分離和培養(yǎng)過程中，一定要注意在____________條件下進行。 (2)不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化。如培養(yǎng)纖維素分解菌的菌樣應從____________環(huán)境中采集。 (3)從土壤中篩選纖維素分解菌需要配制____________培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中需要加入纖維素粉作為唯一的____________。 (4)經過梯度稀釋后，要將樣品均勻涂布在用于鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上，在該培養(yǎng)基中需要加入的特殊染料是____________，當形成菌落以后可以根據(jù)菌落周圍是否產生____________來篩選纖維素分解菌。某同學在純化土壤中的細菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是_________________________________________。 解析：本題主要考查微生物培養(yǎng)等有關知識，意在考查考生識記和理解應用能力。(1)微生物的培養(yǎng)方法：接種前要對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌處理。在整個微生物的分離和培養(yǎng)過程中，一定要注意在無菌條件下進行。 (2)不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化。如培養(yǎng)纖維素分解菌的菌樣應從富含纖維素環(huán)境中采集。 (3)從土壤中篩選纖維素分解菌需要配制選擇培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中需要加入纖維素粉作為唯一的碳源。 (4)經過梯度稀釋后，要將樣品均勻涂布在用于鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上，在該培養(yǎng)基中需要加入的特殊染料是剛果紅，當形成菌落以后可以根據(jù)菌落周圍是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌。某同學在純化土壤中的細菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高。 答案：(1)高壓蒸汽滅菌　無菌 (2)富含纖維素 (3)選擇　碳源 (4)剛果紅　透明圈　菌液濃度過高(土壤溶液稀釋不夠) 8．[xx河南開封質檢]一種廣泛使用的除草劑(含氮有機物)在土壤中不易被降解，長期使用可污染土壤。為修復被該除草劑污染的土壤，可按下面程序選育能降解該除草劑的細菌(已知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明)。 (1)制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行稀釋處理?，F(xiàn)有一升土壤浸出液，用無菌吸管吸取1 mL液樣至盛有9 mL無菌水的試管中，依次稀釋到103倍稀釋度。各取0.1 mL已稀釋103倍的水樣分別接種到三種培養(yǎng)基上培養(yǎng)，記錄的菌落數(shù)分別為55、56、57，則每升原土壤浸出液樣中菌體數(shù)為________。 (2)要從長期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，從用途方面來看，上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基的特點是__________________________。 (3)接種技術的核心是______________________________。在劃線接種時，連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步________________，培養(yǎng)時，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細菌在此培養(yǎng)基上不能生長的主要原因是__________________或有氧條件抑制了這些細菌的生長。 (4)在培養(yǎng)基上形成的菌落中，無透明帶菌落利用的氮源主要是____________，有透明帶菌落利用的氮源主要是____________，據(jù)此可篩選出目的菌。實驗結果如下圖顯示的A～E五種菌株中，____________是最理想菌株。 (5)科研人員用放射線處理該細菌獲得兩個突變株A和B，然后對突變株A和B進行實驗，結果如下表所示： 接種的菌種 一般培養(yǎng)基 實驗處理及結果 A 不生長 添加營養(yǎng)物質甲，能生長 B 不生長 添加營養(yǎng)物質乙，能生長 A＋B 能生長 不添加營養(yǎng)物質甲、乙就能生長 突變株A不能在一般培養(yǎng)基上生長的原因是__________________________。突變株A和B混合在一起接種于一般培養(yǎng)基中能生長的最可能原因是_______________________。 解析：(1)0.1 mL已稀釋103倍的水樣分別接種到三種培養(yǎng)基上培養(yǎng)，記錄的菌落數(shù)分別為55、56、57，則菌落數(shù)的平均值是56，所以每升原土壤浸出液樣中菌體數(shù)＝560.1103103＝5.6108。 (2)因為該除草劑含氮，所用的培養(yǎng)基用除草劑為唯一氮源有利于篩選目的菌。 (3)接種過程中要防止其他雜菌的污染，以保證培養(yǎng)的目的菌的純度，劃線接種時，連續(xù)劃線的目的是使單個細菌分離，以獲得單個菌落，由于該培養(yǎng)基是選擇用除草劑作氮源的細菌，所以大多數(shù)細菌在此培養(yǎng)基上不能繁殖或是厭氧菌受氧的抑制。 (4)培養(yǎng)基上形成的菌落有的有透明帶，有的無透明帶，有透明帶的是因為細菌利用了培養(yǎng)基中的成分即除草劑，無透明帶的細菌則利用的是大氣中的氮氣為氮源。圖中E透明帶最大，說明該菌落分解除草劑的能力最強。 (5)實驗說明突變株A、B在一般培養(yǎng)基上不能生長，最主要的原因可能是分別缺乏合成物質甲、乙的酶，兩者混合培養(yǎng)都能生長說明突變株A、B生長所需要的物質甲、乙正好可以分別由B、A產生。 答案：(1)5.6108 (2)在無氮培養(yǎng)基中添加了該除草劑 (3)防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度　稀釋獲得單個菌落　培養(yǎng)基中缺少這些細菌可利用的氮源 (4)氮氣　該除草劑　E (5)突變株A缺乏合成營養(yǎng)物質甲所需要的酶　突變株A生長需要營養(yǎng)物質甲，突變株B可以提供；突變株B生長需要營養(yǎng)物質乙，突變株A可以提供。 1．生活飲用水已經過沉淀、過濾、加氯消毒等處理，含微生物很少，但當其水源水不潔或處理達不到要求時，仍然會含相當量的微生物甚至含有致病性微生物。供水管道破損及二次供水等環(huán)節(jié)也可能導致生活飲用水的污染。因此生活飲用水的微生物安全性日常檢測是很重要的。我國生活飲用水水質標準(GB5749 — 85)中規(guī)定生活飲用水中細菌總數(shù)不得大于100個/mL，總大腸菌群不得大于3個/L。 (1)檢驗大腸桿菌的含量時，通常將水樣進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱為______________。 (2)用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時是否需要設置對照組？為什么？________________________________。 (3)如分別取0.1 mL已稀釋102倍的水樣分別涂布到四個瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為11、155、158、170，則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為__________________。 (4)純化大腸桿菌時使用的培養(yǎng)基一般用____________法滅菌，________(可/不可)用加入抗生素的方法防止雜菌感染。 (5)如果要測定水中的病毒種類，可以用________技術使其遺傳物質擴增，然后用________技術進行鑒定。 解析：(1)題述方法中有系列稀釋、涂布平板等操作，是稀釋涂布平板法。(2)由于種種原因，培養(yǎng)基在配制過程中可能受到污染，要判斷培養(yǎng)基是否受到污染，需要設置空白對照組。(3)計數(shù)時，選用菌落數(shù)在30～300的平板，平均菌落數(shù)為161，所以1升原水樣中大腸桿菌活菌數(shù)為1.61108。(4)培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌，細菌對抗生素敏感，不可用加入抗生素的方法防止雜菌感染。(6)PCR技術可用于DNA體外擴增，DNA分子雜交可用于核酸類型的鑒定。 答案：(1)稀釋涂布平板法 (2)需要，因為需要判斷培養(yǎng)基是否被污染 (3)1.61108 (4)高壓蒸汽滅菌　不可 (5)PCR　DNA分子雜交 2．為了應對石油危機并減緩環(huán)境污染，研究和使用糧食秸稈生產燃料乙醇作為替代燃料已成為當前的一個熱點。已知秸桿的主要成分是纖維素，請回答下列問題： (1)人們首先利用纖維素分解菌分解纖維素，纖維素分解菌應取自________的土壤中。纖維素分解菌所含的纖維素酶是一種復合物，一般包括三種成分，C1酶、Cx酶和________酶，后者能將纖維二糖分解成葡萄糖。 (2)從土壤中篩選的纖維素分解菌需要配制________培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中需要加入________作為唯一碳源。為了觀察和統(tǒng)計菌落，應在培養(yǎng)基中加入________，從物理性質看，這屬于________培養(yǎng)基。 (3)經過梯度稀釋后，要將樣品均勻涂布于鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上，在該培養(yǎng)中需要加入的特殊染料是________，當形成菌落以后可以根據(jù)菌落周圍是否產生________來篩選纖維素分解菌。 (4)產生葡萄糖后需要利用酵母菌發(fā)酵產生酒精，可使用________檢測產物是否為酒精，該試劑在酸性條件下可遇酒精反應，溶液成________色。 解析：(1)富含纖維素的土壤中，含有更多的纖維素分解菌，纖維素酶中的葡萄糖苷酶能將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)篩選纖維素分解菌需要用選擇培養(yǎng)基，限制纖維素作為唯一碳源，只有加入纖維素分解菌能在該培養(yǎng)基上生長。觀察統(tǒng)計菌落需要加入了瓊脂的固體培養(yǎng)基。(3)鑒別纖維素分解菌需要加入剛果紅溶液，選擇周圍透明圈大的菌落。(4)利用重鉻酸鉀來鑒別酒精，酸性條件下它與酒精反應呈灰綠色。 答案：(1)富含纖維素　葡萄糖苷 (2)選擇　纖維素　瓊脂　固體 (3)剛果紅　透明圈 (4)重鉻酸鉀　灰綠